基于UPLC-Q-TOF/MSE技术的银花泌炎灵片提取液全成分分析

目的 全面了解银花泌炎灵片的化学成分.方法 采用超高效液相色谱与四极杆-飞行时间串联质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS E)和UNIFI天然产物分析平台,对银花泌炎灵片提取液开展化学成分的快速、全面分析与鉴定.结果 结合各成分二级质谱分析和有关化合物的文献,总共鉴定了61个化学成分.结论 运用UPLC-Q-TOF...     

超声辅助酶解与串联质谱联用检测阿胶中马皮成分

目的?超声辅助快速酶解与串联质谱联用实现准确、高效检测阿胶中的马皮成分,为阿胶质量标准研究提供实验依据。方法?采用超声辅助胰蛋白酶酶解的方法,快速制备阿胶酶解液样品,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱（UPLC-QQQ-MS）对阿胶酶解液进行检测,在电喷雾离子化的正离子模式下,多反应监测模式（MRM）,以驴专属肽m/z 691.0→809.4、马专属肽m/z 698.3→809.4为离子对,检测阿胶样品中的马专属肽,以及驴专属肽与马专属肽的相对峰面积比例。结果?采用的方法可在20?min内准确判别阿胶中是否掺有马皮成分,及掺入的马皮成分的比例,马皮成分的检出限为1%。结论?超声辅助快速酶解与串联质谱联用的方法准确可靠、专属性强、检测效率高,可用于阿胶中马皮成分的快速检测。      

LC-MS/MS联用在线检测中成药中不同种类激素类成分的研究

目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对中成药中掺加激素类成分进行检测,以方便监控,并保障用药安全。方法采用C18色谱柱(2.1×100 mm,3.5μm),流动相为乙腈:水(50:50),流速0.2 mL/min。样品在三重四级杆串联质谱中经ESI源离子化后以Full Scan,Daughter等方式进行测定。结果 LC-MS/MS在线同时检测法可以同时检测出样品中普通液相色谱检测法不能确定的激素类成分。结论本研究建立了一种简单易行的中成药中十种常见激素成分的定性检测方法 ,为中成药质量控制提供了一种稳定性好、精密度高、结果准确可靠的监控方法 。     

超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱快速分析复方守宫散化学成分及血中移行成分

目的 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（ultra-performance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight-tandem mass spectrometry, UPLC-Q-TOF/MS）对复方守宫散中化学成分及其血中移行成分进行定性分析,为该制剂的体内有效物质研究提供参考。方法 采用沃特世超高效液相色谱仪（ACQUITY UPLC）和沃特世高分辨质谱仪（Waters Synapt G2-Si QTOF）获得复方守宫散原药样品溶液、混合对照品溶液、空白血浆和含药血浆的液相色谱-质谱信息,再通过比对UNIFI（沃特世科学信息平台）质谱数据库中化合物信息以及部分对照品的提取离子流色谱图、质谱碎片裂解信息,鉴定出目标化合物。结果 共识别出复方守宫散中77个化学成分（主要有皂苷类25个、黄酮类13个、醌类12个）,采用对照品对其中6个成分进行了验证;通过比对空白血浆和含药血浆,发现复方守宫散中绿原酸、槲皮素、虎杖苷、人参皂苷Re等27个成分为入血成分。结论 具有高分辨率、高灵敏度的UPLC-QTOF/MS能够快速分析复方守宫散化学成分及其血中移行成分。     

RRLC-MS/MS法测定栝楼桂枝颗粒中γ-氨基丁酸和瓜氨酸含量

目的采用快速液相色谱-串联质谱法（RRLC-MS/MS）测定栝楼桂枝颗粒中γ-氨基丁酸和瓜氨酸含量。方法采用RRLC-MS/MS法,以极性AQ-C18柱为色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水（5∶95）为流动相。质谱采用电子喷雾离子源（ESI）进行离子化,正离子模式下采集,选择以多反应监测（MRM）对这2种氨基酸的母离子及子离子进行检测,三重四级杆质谱进行定量分析。结果γ-氨基丁酸与瓜氨酸在0.265 010.60μg/m L和0.019 69.800μg/m L范围内与峰面积呈良好线性关系,平均样品加样回收率分别为99.4%和102.4%,RSD%分别为2.24%和1.85%。结论 RRLC-MS/MS法测定栝楼桂枝颗粒中γ-氨基丁酸和瓜氨酸的含量,方法简便、准确、稳定,重复性好。     

UPLC-Q-TOF-MS/MS方法鉴定血必净注射液中20种化学成分

[目的]利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对血必净注射液中的化学成分进行快速鉴定。[方法]采用ACQUITY UPLC~BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,在负离子模式下进行数据采集,通过与对照品对比保留时间、相对分子量、二级质谱碎片离子的方法确定化学成分。[结果]在负离子模式下,45 min内鉴定出血必净注射液中20种化学成分。[结论]建立了一种简单、准确的UPLC-Q-TOF-MS/MS方法对血必净注射液中的化学成分进行鉴定。     

固相萃取-快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱联用分析荷叶中的生物碱

目的 建立固相萃取-快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱（SPE-RRLC-Q-TOF）联用技术分析荷叶中的生物碱类化合物的方法。方法 样品采用1%盐酸超声提取,经固相萃取（SPE）小柱净化,再用氨水-甲醇进行洗脱,洗脱液浓缩后用甲醇定容。选用Welch Materials C₁₈柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,在正离子模式下,经快速分离液相-飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF）分析。结果 分离并检测了9种生物碱。结论 快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱结合阳离子交换固相萃取柱前处理技术,可以快速准确鉴定荷叶中的生物碱成分。     

利用邻近生物素标记技术结合质谱分析鉴定核仁相关蛋白

目的：在小鼠胚胎干细胞（mouse embryonic stem cell,mESC）中,基于抗坏血酸过氧化物酶（engineered ascorbate peroxidase,APEX2）的邻近标记技术和质谱鉴定核仁相关蛋白。方法：构建稳定过表达APEX2?FBL细胞系,通过APEX2邻近标记技术获得生物素标记蛋白,用链酶亲和素包裹的磁珠对生物素标记的蛋白进行富集,随后运用液相色谱?串联质谱（liquid chromatography?tandem mass spectrometry,LC?MS/MS）鉴定,并对数据进行生物信息学分析,筛选差异蛋白。结果：成功构建稳定高表达APEX2?FBL细胞系;Western blot结果显示,通过APEX2邻近标记技术获得大量生物素标记蛋白;质谱鉴定出837个差异蛋白,且生物学过程多与核仁相关。结论：利用邻近生物素标记技术结合质谱分析是一种可行的鉴定核仁相关蛋白的方法。     

中药复方制剂八宝丹中化学成分的UHPLC-Q-TOF/MS分析

目的 采用超高效液相色谱-电喷雾串联四级杆飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)分析技术对中药复方制剂八宝丹中的化学成分进行快速分析鉴别.方法 采用安捷伦“Formula-Database Generator”软件自建包括547个化合物的八宝丹化学成分数据库,运用UHPLC-QTOF/MS技术采集八宝丹提取物的总离子流色谱图,根据各化学成分的精确质荷比,通过自动比对的方法进行分析鉴别;进一步调节四级杆飞行时间质谱(Q-TOF/MS)的二级碎片电压,根据二级裂解碎片离子对八宝丹中的化学成分进一步确证.色谱分离采用Waters XBridge BEH C18(2.1 mm× 100 mm,2.5 μm)液相色谱柱;流动相为乙腈(A)和0.5％甲酸水(B),梯度洗脱:0～5 min,5％ A;5～25 min,5％～95％ A;25～30 min,95％A.柱温25℃,流速0.8 mL/min,柱后分流比为2∶1.质谱分析采用四级杆串联高分辨飞行时间质谱,电喷雾离子源正、负离子模式下扫描(范围均为m/z 100～1 500),其毛细管电压分别为3 500V和4 000V,二级质谱碰撞能量为10～40 eV.结果 在正、负离子模式下,共鉴别出八宝丹中的化学成分78个,包括皂苷、胆汁酸、氨基酸等.结论 建立了基于UHPLC-Q-TOF/MS的分析方法,可对中药复方制剂八宝丹中的化学成分快速鉴别,阐明了八宝丹的化学物质基础,为八宝丹的质量控制及药理机制研究奠定了基础.     

不同产地黄芩茎叶UPLC指纹图谱与化学模式识别研究

目的 采用超高效液相色谱法（UPLC）建立不同产地黄芩茎叶指纹图谱,超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法（UPLC-QTOF/MS）快速鉴定共有峰,并结合化学模式识别研究,为黄芩地上茎叶资源循环利用与质量控制提供参考。方法 采用UPLC,色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈（100mm×2.1mm,1.7μm）色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,流速0.4mL/min,检测波长254nm,柱温35℃。质谱检测采用负离子模式,电压3.0kV,离子源温度120℃,雾化温度400℃,雾化气800L/h。通过相似度评价结合聚类分析和主成分分析进行分析评价,并通过UPLC-QTOF/MS对黄芩茎叶共有峰进行鉴定。结果 确定了不同产地黄芩茎叶药材的19个共有峰,建立了UPLC指纹图谱。10个产地11批黄芩茎叶样品的指纹图谱相似度均>0.9,各产地黄芩茎叶药材的相似度较高,聚类分析、主成分分析结果与相似度分析结果一致。结论 本方法快速、准确、可靠、重复性好,黄芩茎叶UPLC指纹图谱的构建和化学模式的识别可更好的评价其质量,为黄芩地上部分资源价值的利用与质量的控制提供参考。      

金银花炮制机理的初步探讨

目的:研究炮制对金银花化学成分的影响,为更深入研究该药炮制机理提供实验依据。方法:制备金银花炒黄品、烘制品,采用HPLC-DAD方法以绿原酸为指标性成分,通过指纹图谱对比对生品和炮制品成分进行分析比较。结果:金银花生品炒黄后,大部分成分溶出率增加;而金银花生品经烘制品后,大部分化学成分含量降低,少数化合物含量升高。结论:炮制对金银花的化学成分影响较大,可为找到抗菌活性最强的成分提供实验线索。     

高效液相色谱串联质谱法鉴定山银花水提取液的化学成分

目的建立快速、准确分析山银花水提取液的化学成分的高效液相色谱串联质谱方法。方法采用水为溶剂加热回流提取法提取山银花药材,提取液采用高效液相色谱串联质谱法对其主要的化学成分进行分离和鉴定。结果在负离子模式下,21个主要的化学成分得到了较好的分离,其中16个通过串联质谱进行了结构鉴定,10个通过对照品得到了确证。结论高效液相色谱串联质谱法可有效用于山银花药材的化学成分的分析鉴定。     

微粉化技术对金银花溶出度的影响

目的：考察微粉化技术对中药材金银花溶出度的影响。方法：以绿原酸含量为指标,采用薄层色谱法对中药材金银花进行定性鉴别,用紫外分光光度法测定金银花中绿原酸的含量。结果：随着粉碎粒度的变细,金银花有效成分绿原酸的提出量明显提高,超微粉（10μm）〉160目筛细粉〉120目筛细粉〉80目筛细粉〉60目筛细粉,超微粉有效成分含量比60目筛细粉提高14.4%。结论：微粉化技术对金银花溶出度影响明显。     

HPLC法同时测定中药金银花中咖啡酸和木犀草苷的含量

目的建立高效液相色谱（HPLC）方法同时测定中药金银花中咖啡酸及木犀草苷的含量。方法采用Agilent C18色谱柱（250mm×4.6mm,5.0μm）,流动相采用甲醇：0.1%的磷酸水溶液,按照梯度洗脱方式,流速为1.0ml/min,进样量为15μl,检测波长为338nm,柱温为25℃。结果咖啡酸与木犀草苷分别在8.1-82.0μg/ml、2.1-42.0μg/ml范围内线性关系良好,线性回归方程分别为Y=37.71X-265.77（R=0.9997）,Y=15.56X＋3.98（R=0.9995）。结论采用HPLC方法测定金银花中的有效成分咖啡酸、木犀草苷,方法简单、分离效果好,重复性好,是一种较好的检测金银花药材质量的方式。     

川产灰毡毛忍冬金银花气相色谱指纹图谱研究

目的：建立川产灰毡毛忍冬金银花药材的气相色谱（GC）指纹图谱。方法：采用GC检测川产金银花药材中所含挥发性化学成分，以芳樟醇为参照物，按“中药指纹图谱研究的技术要求”计算相对保留时间及峰面积比值，标定共有指纹峰。结果：在全面方法学研究的基础上，先后对10批金银花药材供试品进行检测分析，从而建立了该药材的GC指纹图谱。结论：GC指纹图谱中共有18个共有峰，其相对保留时间及峰面积比值可作为川产灰毡毛忍冬金银花的质量控制之一。     

高效液相色谱法同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量*

[目的]采用梯度洗脱方法建立金银花中绿原酸和木犀草苷含量测定的高效液相色谱(HPLC)法。[方法]色谱柱:Xterra@RP185;检测器:Waters2998二级管阵列检测器(DAD);工作站:Waters Empower;流动相:0.5%冰乙酸-乙腈;线性梯度洗脱0:～15 min(90∶10-80∶20),15～30 min(80∶20-75∶25),30～40 min(75∶25-65∶35),40～45 min(65∶35-90∶10);流速:1 mL/min;检测波长:350 nm。[结果]在此色谱条件下两种成分分离完全。[结论]该方法简便,准确,快速易行,可同时检测金银花中两种成分的含量。     

石墨炉原子吸收分光光度法测定金银花中铅的不确定度分析

目的对石墨炉原子吸收分光光度法测定金银花中铅含量的不确定度进行分析,以期找出影响不确定度的因素,为评价检测报告提供科学依据。方法用石墨炉原子吸收分光光度法测定金银花中铅含量,并根据《测量不确定度评定与表示》（JJF1059-1999）有关规定分析不确定度的来源,利用回归方程进行不确定度的评定。结果本实验中金银花中铅的含量为2.45 mg.kg-1,扩展不确定度为0.25 mg.kg-1（包含因子k=2）。结论本实验的不确定度主要由重复测量所引入。     

测定金银花中6种有机酸类化合物含量的一种新方法

目的:为解决金银花药材分析中部分对照品价格高、不易获得的问题,建立了一测多评的分析方法.方法:通过测定绿原酸(CA)、咖啡酸(CfA)的含量,以及与其它有机酸的相对校正因子(RCF),计算出其它几种有机酸的含量.结果:在一定线性范围内,CA与新绿原酸(NCA)、3,4-二咖啡酸酰奎尼酸(3,4-DCA)、3,5-二咖啡酸酰奎尼酸(3,5-DCA)、4,5-二咖啡酸酰奎尼酸(4,5-DCA)的RCF分别为5.462、5.689、2.313、2.382,CfA与NCA、3,4-DCA、3,5-DCA、4,5-DCA的RCF分别为3.941、4.103、1.669、1.718.该方法在不同实验室、不同型号的高效液相色谱仪以及不同色谱柱上进行验证,重现性满意;与外标法相比,所得结果经方差分析均无显著性差异(P＞0.05),准确度较高.结论:该方法可采用较易获得的对照品测定金银花药材中多种有机酸的含量,有助于对金银花药材进行更为全面的质量控制.     

金银花脂溶性成分的气相-质谱联用分析

目的:探讨金银花脂溶性成分的组成及其研究意义。方法:采用索氏提取法提取脂溶性成分,用气相毛细管柱进行分析,归一化法测定其相对含量,并用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法鉴定其化学成分。结果:检出37个色谱峰,鉴定出25个化合物,占总组分的98.87%。脂溶性成分主要为脂肪酸和烃类,其中10种脂肪酸占总脂溶性成分的46.18%,9种烃类化合物占总脂溶性成分的33.88%;酯类成分和植物甾醇为次要成分,分别占总脂溶性成分的9.21%和8.39%。结论:金银花中的脂溶性成分种类丰富并具有一些药理活性,气相-质谱联用技术能够有效地分析金银花中脂溶性成分。     

湖南产不同种质、采收期、加工方法的山银花质量对比研究

目的 比较湖南产不同种质、采收期和加工方法的山银花中主要有效成分含量的差异.方法 采用WatersSymmetry C18（150 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,流动相为0.4%冰醋酸-乙腈（梯度洗脱）,流速为1.0 mL/min;高效液相色谱（HPLC）-紫外检测（UV） 法测定山银花中绿原酸的含量, 检测波长为330 nm;HPLC-蒸发光散射检测器（ELSD） 法测定此药材中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量.结果 不同山银花样品中绿原酸含量为3.73%～8.23%,灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的总含量为4.16%～8.53%.其中,绿原酸含量和灰毡毛忍冬皂苷乙及川续断皂苷乙之和含量最高的是采自三青期的野生山银花,为8.23%、8.53%,微波干燥加工后的山银花中上述成分含量分别为7.05%、7.08%,其他加工方法含量均有不同程度降低.结论 野生山银花的质量优于栽培山银花,三青期采摘及微波干燥得到的山银花的质量最优,本试验结果可为山银花人工培育和采收加工提供实验依据.