中药女贞子中环烯醚萜总苷提取纯化的工艺研究

目的:优化女贞子中环烯醚萜总苷的提取工艺.方法:经正交试验方法考察比较,采用乙醇冷浸提取、大孔吸附树脂分离纯化女贞子中环烯醚萜总苷.结果:提取物中环烯醚萜总苷的含量可达66.67％.结论:用该优化的提取工艺可从女贞子中得到具有较高含量的环烯醚萜总苷提取物,为工业化生产和女贞子资源的综合利用提供了科学依据.     

独一味与糙苏中环烯醚萜苷类成分的比较

目的 比较独一味与糙苏中的环烯醚萜苷类成分.方法 采用TLC法鉴别独一味与糙苏药材中的环烯醚萜苷类成分,建立HPLC法测定其中的8一乙酰氧基山栀子苷甲酯的含量.结果 糙苏及独一味均含有大量的环烯醚萜苷类成分,两者根部具有十分相似的薄层色谱图、地上部分及根部中8-乙酰氧基山栀子苷甲酯的含量分别为17.41、0.5、6.81、8.50 mg·g-1.结论 独一味根与糙苏根中含有相近的环烯醚萜苷类成分.     

响应面法优化生地黄中4种环烯醚萜苷提取工艺及热稳定性考察

目的优选生地黄中环烯醚萜苷类成分的提取工艺条件,并考察温度对其成分含量变化的影响。方法以4种环烯醚萜苷类成分(梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷D、地黄苷A)含量为评价指标,通过单因素试验考察不同提取方法、提取时间、溶媒种类、温度、溶媒量对生地黄提取量的影响,并结合响应面法和Box-Behnken优化生地黄提取工艺参数;通过测定4种成分在不同温度下含量的变化,考察其热稳定性。结果生地黄环烯醚萜苷类成分提取最适条件为:加10倍量20%乙醇,浸渍36 h,浸渍温度35℃。验证试验结果显示该条件下提取的4种环烯醚萜苷类成分总量均值为7.520 mg·g~(-1),与预测值7.707 mg·g~(-1)相比,RSD<5%。热稳定性考察结果表明温度对生地黄环烯醚萜苷类成分含量影响较大,4种环烯醚萜苷类成分在加热8 h内均发生了不同程度的降解。结论优选的环烯醚萜苷类成分提取工艺条件稳定可行,在提取液浓缩干燥过程中,为防止生地黄中环烯醚萜苷类成分的降解,应采用低温方法,避免长时间高温受热。     

10批栀子中环烯醚萜苷类成分含量测定

目的 测定不同产地的10批栀子药材中栀子苷、京尼平龙胆二糖苷及总环烯醚萜苷含量。方法 采用HPLC测定栀子苷、京尼平龙胆二糖苷含量;采用紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷含量。结果 江西产栀子中环烯醚萜苷类成分含量高。结论 不同产地栀子药材中环烯醚萜苷类成分含量有所差别。     

HPLC法测定鸡矢藤药材中环烯醚萜苷含量

目的:采用高效液相色谱和二极管阵列检测器法(HPLC-DAD)同时测定鸡矢藤药材中3种主要环烯醚萜苷类成分的含量,研究不同产地鸡矢藤药材中环烯醚萜苷的含量.方法:色谱分析采用Shim-pack VP-ODS C18分析柱,0.1%的甲酸(A)和乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,检测波长:240nm.结果:3个环烯醚萜苷[鸡矢藤苷酸(1)、鸡矢藤苷(2)、鸡矢藤苷酸甲酯(3)]在标准曲线内均有较好的线性(r2>0.9999),且该方法具有良好的精密度,灵敏度,重复性和准确度;应用所建立的方法同时测定了8批鸡矢藤药材中三个环烯醚萜苷的含量.结论:本文首次报道建立HPLC-DAD方法同时测定鸡矢藤中主要环烯醚萜苷类成分含量,该方法简单、快速、可靠,适用于鸡矢藤药材及其制剂的质量控制.     

生地黄中环烯醚萜苷类的纯化分离工艺

目的:寻找有效纯化分离生地黄中环烯醚萜苷类的方法.方法:生地黄水提物用高效液相色谱法,以梓醇为其环烯醚萜苷类的测定指标,比较101 果汁澄清剂和科阳1＋1天然澄清剂的纯化效果,以及乙醇和非极性大孔吸附树脂的分离效果.结果:生地黄水提物以科阳1＋1天然澄清剂纯化,用非极性大孔吸附树脂分离,可使其中的环烯醚萜苷类有效分离出来.结论:在工业生产中可用科阳1＋1天然澄清剂与非极性大孔吸附树脂联合应用来纯化分离生地黄中的环烯醚萜苷类.     

新疆假龙胆的保肝活性部位环烯醚萜苷提取纯化工艺研究

目的利用响应面法优化新疆假龙胆中保肝活性部位环烯醚萜苷的提取工艺,并优选大孔吸附树脂分离纯化新疆假龙胆中环烯醚萜苷的工艺条件。方法以新疆假龙胆中主要的3种环烯醚萜苷的提取率为考察指标,采用单因素实验结合Box-Behnken中心组合设计方法优化提取工艺,再通过考察静态和动态吸附、洗脱效果,筛选大孔吸附树脂分离纯化环烯醚萜苷的最佳工艺条件。结果新疆假龙胆环烯醚萜苷提取的最优条件为:乙醇体积分数为55%,提取时间为3.0 h,提取温度为50℃,料液比为1∶30,所得提取物环烯醚萜苷含量为52.67%(其中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量分别为32.47%,17.41%和2.79%)。选用NKA-9型大孔吸附树脂,树脂柱径高比为1∶5进行洗脱,上样液pH值为2,质量浓度为0.5 g·mL~(-1),上样量为10 mL,吸附2 h后的树脂柱先用5 BV蒸馏水洗脱,再分别用10 BV体积分数为10%和30%的乙醇以5 BV·h~(-1)的流速洗脱。结论该方法具有较好的分离纯化效果,环烯醚萜苷类成分含量可达到59.9%。该优选工艺操作简单、稳定可行,可显著提高新疆假龙胆中环烯醚萜苷的提取率。     

玄参中苯丙素苷和环烯醚萜苷类成分的药理研究。

研究玄参提取液和玄参中4种单体成分的抗炎和抗氧活性。方法：应用①角叉菜胶及眼镜蛇毒致大鼠脚趾肿胀实验;②Fe²⁺／半胱氨酸诱导肝微粒体脂质过氧化;③AAPH诱导红细胞氧化性溶血实验观察玄参提取液以及玄参中环烯醚萜苷类成分哈帕酯苷(harpagoside)、哈帕苷(harpagide)和苯丙素苷类成分安格洛苷C(angoroside C)、阿格托苷(acteoside)的作用。结果：玄参提取液具有较好的抗肿胀作用。在相应剂量,其苯丙素苷类成分具有较强的抗氧活性,环烯醚萜苷类成分作用较弱。结论：玄参的抗炎,抗氧化作用可能主要与其苯丙素苷类成分有关。     

独一味总环烯醚萜苷分离纯化工艺的优化

目的 优化独一味总环烯醚萜苷的制备工艺,获取纯度相对较高的总环烯醚萜苷。方法 以甲醇-水为流动相,梯度洗脱方式建立分离分析独一味总环烯醚萜苷的高效液相色谱方法,实现各组分的最佳分离,统计、记录其三维吸收图谱,并结合紫外全波长扫描,对前期制备的独一味总环烯醚萜苷中影响纯度的杂质特征进行分析,根据杂质特性优化大孔树脂结合聚酰胺柱制备过程,紫外实时监测,剔除杂质,产品溶液经冷冻干燥获得冻干粉,并以HPLC对比前后制备工艺产品成分差异。结果 工艺优化前产品中环烯醚萜苷含量为69.06%,优化后含量为90.60%,含量提升21.54%;本次制备总产率为16.70%（以水提取物的质量为参照）,总环烯醚萜苷转移率为74.72%（相对于水提取物中总环烯醚萜苷的质量）。结论 优化过程简单,操作步骤可控,易于实现,纯化效果显著。     

尖叶假龙胆全草中环烯醚萜苷类成分的分离与鉴定

目的对尖叶假龙胆全草中环烯醚萜苷类化学成分进行分离与鉴定,为开发利用该植物资源提供理论依据。方法应用大孔吸附树脂、硅胶、Sephadex LH-20、ODS等柱色谱及制备型高效液相色谱法对尖叶假龙胆全草中环烯醚萜苷类成分进行分离,并通过理化性质与核磁共振波谱数据对分离出的化合物进行结构鉴定。结果从尖叶假龙胆体积分数70%乙醇溶液提取物中分离并鉴定了6个单体成分,分别为马钱子酸(loganic acid,1)、7-ketologanin(2)、裂环马钱素(secologanin,3)、獐牙菜苷(sweroside,4)、2'-间羟基苯甲酰獐牙菜苷(deacetylcentapicrin,5)和decentapicrin A(6)。结论在对尖叶假龙胆化学成分进行研究的过程中,分离鉴定了6个环烯醚萜苷类化合物。其中,化合物2、3、5为首次从假龙胆属中分离得到,化合物1、4、6为首次从尖叶假龙胆植物中分离得到。     

糙叶败酱药材中异白花败酱醇的定性定量分析

目的:建立糙叶败酱药材中异白花败酱醇的定性和定量分析方法。方法:采用薄层色谱(TLC)法定性鉴别糙叶败酱药材中的异白花败酱醇;采用反相高效液相色谱法测定其含量,色谱柱为Agilent Eclipse plus C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸水溶液(pH2.5)=7:93,流速为1.0mL.min-1,检测波长为210nm,柱温为30℃。结果:糙叶败酱药材中异白花败酱醇的TLC鉴别特征明显,专属性好;异白花败酱醇的进样浓度在0.2～1.2mg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997),平均加样回收率为98.8%,RSD=2.84%(n=9)。结论:所建分析方法准确、可靠,可用于糙叶败酱的质量控制。     

黄花败酱总皂苷提取物抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察黄花败酱总皂苷提取物体内抗肿瘤活性.方法:用MTT法观察黄花败酱总皂苷对荷艾腹水癌小鼠的生命延长率.结果:黄花败酱总皂苷对荷艾腹水癌的小鼠存活时间有一定的延长作用.结论:黄花败酱总皂苷有效成分有一定的体内抗肿瘤活性,其作用机制还有待进一步研究.     

Transduction of the gene coding for a human G-protein coupled receptor FPRL1 in mouse tumor cells increases host anti-tumor immunity

Low antigenicity or development of tolerance is believed to be a major contributor to the escape of malignant tumors from immune surveillance of the host. However, anti-tumor responses can be elicited by concomitant immunization of poorly antigenic tumor cells with homologous xenogeneic proteins as 'altered self' proteins. In our study, anti-tumor, but not anti-xenogeneic antigen, immune responses were generated after transduction of the gene coding for a G-protein coupled human formyl peptide receptor like-1 (FPRL1) into a mouse C26 colon cancer cell line. C26 cells transfected with FPRL1 gene exhibited markedly reduced tumorigenicity in syngeneic mice, in association with the appearance of high levels of antibody activity reacting with both FPRL1 containing and wild type C26 cells. The anti-tumor responses required the participation of CD4+ T lymphocytes, since no tumor rejection was observed in nude mice or in syngeneic mice depleted of CD4+ T cells. Furthermore, mice primed with FPRL1 transfected C26 cells were resistant to subsequent challenge by wild type C26 cells. These results indicate that the presence of human FPRL1 is capable of triggering specific anti-tumor host immune responses against poorly antigenic mouse tumor cells.     

Intraperitoneal photodynamic therapy mediated by a fullerene in a mouse model of abdominal dissemination of colon adenocarcinoma

Functionalized fullerenes represent a new class of photosensitizer (PS) that is being investigated for photodynamic therapy (PDT) of various diseases, including cancer. We tested the hypothesis that fullerenes could be used to mediate PDT of intraperitoneal (IP) carcinomatosis in a mouse model. In humans this form of cancer responds poorly to standard treatment and manifests as a thin covering of tumor nodules on intestines and on other abdominal organs. We used a colon adenocarcinoma cell line (CT26) stably expressing luciferase to allow monitoring of IP tumor burden in BALB/c mice by noninvasive real-time optical imaging using a sensitive low-light camera. IP injection of a preparation of N-methylpyrrolidinium-fullerene formulated in Cremophor-EL micelles, followed by white-light illumination delivered through the peritoneal wall (after creation of a skin flap), produced a statistically significant reduction in bioluminescence and a survival advantage in mice. FROM THE CLINICAL EDITOR: This team of investigators report on functionalized fullerenes, to be used as photosensitizer for photodynamic therapy and demonstrate the efficacy of this method in an intraperitoneal carcinomatosis mouse model.     

金丝马尾连碱甲等成分的抗肿瘤作用

从金丝马尾连提取的总生物碱及其主要成分碱甲(hernandezine)对P388白血病小鼠、腹水型S180及C26结肠癌小鼠有一定的治疗作用。在体外,碱甲明显地抑制小鼠白血病L1210细胞及人口腔癌KB细胞的生长,对小鼠正常造血祖细胞(CFU-GM)的抑制作用较弱。初步结果表明,碱甲可阻断G₁细胞向S期过渡,其杀细胞作用似为细胞周期特异性。金丝马尾连的其它两个成分碱乙(thalidezine)及碱丙(isothalidezine)也有类似的抑制癌细胞作用。     

应用图象分析方法对药物抗肿瘤肝转移作用的评价

目的：建立LEICA Q500IW图象分析方法对小鼠结肠癌肝转移进行定量分析，并评价博安霉素对小鼠结肠癌肝转移的疗效，方法：建立小鼠结肠癌26例脾内移植肝转移模型，利用LEICA Q500IW图象分析系统对肝转移组织切片进行定量分析，获得转移病变面积的百分率，通过计算机处理数据，并评价博安霉素对小鼠结肠癌肝转移的疗效。结果：博安霉10mg.kg^-1,7.5mg.kg^-1,5mg.kg^-1对于肝切片中的转移病变总面积的抑制率为100％，98．2％和63．3％，对于表浅肝转移面积的抑制率为100％，100％和61．7％，对于深部肝转移的抑制率为100％，94．7％和39．3％，结论：应用LEICA Q500IW图象分析系统来定量分析肝转移组织切片中的转移病变，对判断肝转移更为准确，评价药物的疗效，特别是对深层病变的疗效。     

Roxatidine- and cimetidine-induced angiogenesis inhibition suppresses growth of colon cancer implants in syngeneic mice

Cimetidine is known to suppress the growth of several tumors, including gastrointestinal cancer, in humans and animals. Nonetheless, whether other histamine H(2)-receptor antagonists exert such tumor suppressive effects remains unclear. The effect of roxatidine acetate hydrochloride (roxatidine), an H(2)-receptor antagonist, on the growth of colon cancer implanted in mice was examined and compared with that of cimetidine. Drugs were orally delivered for 26 - 29 days beginning before or after implantation of syngeneic colon cancer (Colon 38) in C57BL/6 mice. Tumor volume was determined throughout and histochemical analysis was also performed. Tumor tissue and serum vascular endothelial growth factor (VEGF) levels were measured. In vitro cell growth was assessed by the MTT assay. Both roxatidine and cimetidine significantly suppressed the growth of Colon 38 tumor implants. Histologic analysis revealed that such antagonists markedly increased necrotic areas and decreased the density of microvessels in tumor tissue. Both H(2)-receptor antagonists suppressed VEGF levels in tumor tissue and significantly decreased serum VEGF levels in Colon 38-bearing mice. Such drugs, however, failed to suppress in vitro growth of the cell line. In conclusion, both roxatidine and cimetidine were found to exert suppressive effects on the growth of colon cancer implants in mice by inhibiting angiogenesis via reducing VEGF expression.     

中药败酱草的形态组织学研究 Ⅰ.败酱科植物

本文对败酱科败酱属的八种植物进行了生药形态组织的比较研究和描述,讨论了几种败酱根茎中周皮的发生部位以及木质部中薄壁组织环带的发生与发展,并指出北京延庆县采到的双蕊败酱与从其模式标本产地辽宁老铁山采得的标本虽然形态上相同,但组织构造上有显著差异。     

mB7.1-GPI膜表面修饰的结肠癌细胞疫苗的抗肿瘤作用研究

目的制备mB7.1-GPI膜表面修饰的结肠癌细胞疫苗,并探讨其抗肿瘤作用。方法将mB7.1-GPI融合蛋白锚定于小鼠结肠癌细胞膜上,制备结肠癌细胞疫苗,并采用流式细胞术检测该蛋白的细胞膜锚定效果;建立C57BL/6小鼠结肠癌模型,检测mB7.1-GPI融合蛋白肿瘤疫苗对荷瘤小鼠的免疫治疗作用。结果 mB7.1-GPI融合蛋白可锚定在小鼠结肠癌细胞膜上,并有效刺激小鼠脾细胞增殖和分泌IL-2和IFN-γ,mB7.1-GPI膜表面修饰的结肠癌细胞疫苗能够显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,并延长其生存期。结论 mB7.1-GPI融合蛋白制备的结肠癌细胞疫苗具有较强的抗肿瘤作用,可能成为一种有效的、用于结肠癌的治疗和预防的新型疫苗。     

姜黄素体内外逆转结肠癌的5-氟尿嘧啶耐药研究及机制探讨

摘要：目的 探究姜黄素在体内外对结肠癌5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药的逆转作用及其相关机制。 方法 以SW480结肠癌细胞为亲代细胞,构建5-FU耐药细胞株SW480R,采用MTT法检测SW480R细胞的耐药指数以及不同浓度的姜黄素对SW480R细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测姜黄素对SW480R细胞周期和凋亡的影响;Western blot检测姜黄素对SW480R细胞上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）相关蛋白以及Wnt信号通路相关蛋白的影响;采用裸鼠移植瘤模型检测肿瘤体积变化情况,计算姜黄素的体内抑瘤率,Western blot检测肿瘤组织中相关蛋白变化。结果 SW480R的耐药指数为12.16,姜黄素能够剂量依赖性地抑制SW480R细胞的增殖,阻滞SW480R细胞周期于G0/G1期,以及诱导SW480R细胞凋亡;Western blot结果表明姜黄素能够在体内外抑制EMT和Wnt信号通路的活性;体内实验表明姜黄素能够有效抑制裸鼠移植瘤的生长。结论 姜黄素能够在体内外逆转结肠癌的5-FU耐药,其机制可能是通过调控Wnt信号通路从而抑制EMT的发生。