肾母细胞瘤组织中DNA倍体、SPF、增殖细胞指数的测定

目的：探讨肾母细胞瘤组织中DNA倍体、SPF、增殖细胞指数(PI)与临床分期及病理分级间的关系。方法：应用流式细胞仪(FCM)测定35例肾母细胞瘤标本的DNA倍体、SPF、PI值,并与正常肾组织比较。结果：与正常肾组织相比,I～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期肿瘤的异倍体率、SPF、PI值均升高,但肿瘤各临床分期I～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期之间,及病理FH型与UH型之间差异无统计学意义。结论：测定肾母细胞瘤的DNA倍体、SPF、PI值能了解其某些分子生物学特性,从分子水平上了解其增殖活性,对肿瘤的诊断及评估预后有一定的意义。     

VEGF和MVD肾母细胞瘤组织中的表达及意义

目的:检测肾母细胞瘤(nephrohlastoma,wilms tumor,WT) 组织中血管内皮生长因子(VEGF) 和微血管密度(MVD) 的表达,并探讨二者与WT 病理分型的关系.方法:手术切取50 例WT 患儿的肿瘤组织,其中为组织结构良好型(FH 型)40 例,组织结构不良型(UH 型)10 例.采用免疫组织化学SABC 染色法检测其MVD 及VEGF 表达.结果:MVD 值FH 型为(50.57±13.01),UH 型为(85.92±14.36),两型相比,差异有统计学意义(t=7.535,P<0.05).VEGF 表达率在FH 型为65.00%,UH 型中为60.00%,两型相比,差异无统计学意义(χ2=0.087,P>0.05).VEGF 阳性者MVD 值为(65.70±16.88),VEGF 阴性者为(48.18±18.13),两型相比,差异有统计学意义(t=3.534,P<0.05).结论:WT 组织中MMP-7 和VEGF 的表达与肿瘤侵袭转移和发展有关,可被认为是肾母细胞侵袭性标志,对WT 的临床分期和病理分级及其预后有一定的意义.     

肾母细胞瘤组织中组织蛋白酶D、尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体的表达

目的:探讨肾母细胞瘤组织中Cath D、uPA、uPAR的表达。方法:用免疫组化SABC法检测30例肾母细胞瘤及15例非肿瘤肾组织中Cath D、uPA、uPAR的表达。结果:肾母细胞瘤组织中Cath D、uPA、uPAR的阳性表达率分别为50％,53.3％和56.7％。而在非肿瘤肾组织中不表达,差异有统计学意义(P<0.05),3者的阳性表达率与组织学类型密切相关,FH型均低于UH型(P<0.05)..结论:Cath D、uPA、uPAR在肿瘤的浸润和转移中起重要作用,可作为预后的指标。     

成人肾母细胞瘤的诊治和预后

目的探讨成人肾母细胞瘤的病理特点、诊疗方法和预后。方法回顾性分析13例成人肾母细胞瘤患者的临床资料。结果12例患者行肾肿瘤根治性切除术,1例行姑息手术,其中预后良好组织型(FH)4例,预后不良组织型(UH)9例,术后均进行化疗及放疗。3例预后良好组织型患者无瘤生存。结论青年人出现血尿及腰腹部生长迅速的巨大包块,应警惕本病可能。病理检查是诊断成人肾母细胞瘤的金标准。肿瘤血管具有特征性的波浪状血管造影表现。对于成人肾母细胞瘤均应采取手术、化疗、放疗相结合的综合治疗。     

肾母细胞瘤组织中E-cadherin的表达

目的：探讨肿瘤抑制基因E-cadherin在肾母细胞瘤中的表达及其临床意义。方法：35例肾母细胞瘤（病例组）应用免疫组化SP法检测，其中临床I－Ⅱ期21例，Ⅲ-Ⅳ期14例；或病理分型：有利组织类型（favorable histology,FH)30例，不利组织类型（unfavorable histology,UH)5例。以10例儿童正常肾组织作为对照组。结果：这肾组织E－cadherin的阳性表达率为100％（10／10），而肿瘤组织的阳性率为40％（14／35），2者之间差异有统计学意义。各临床分期及各分型之间E-cadherin阳性表达率差异无统计学意义。结论：E-cadherin作为肿瘤抑制基因在肿瘤发的发生、发展中可能起重要作用。     

肾母细胞瘤中PTEN、MMP-7的检测

目的:检测肾母细胞瘤(nephrohlastoma,wilms tumor,WT)组织中PTEN和MMP_7中的表达。方法:用免疫组化方法检测12例瘤旁正常肾组织和42例WT组织中PTEN、MMP_7的表达。结果:PTEN在WT组织中的表达明显低于正常瘤旁肾组织(P<0.05)。PTEN的表达与性别、年龄和病理学分型无关(P>0.05),而与临床分期明显相关(P<0.05)。12例对照组织标本中MMP_7未见表达,42例WT组织标本中MMP_7在胞浆表达率54.21%。MMP_7在预后良好(favorable histological types,FH)组中的阳性表达率明显低于在预后不良(unfavorable histological types,UH)组中的阳性表达率(P<0.05);PTEN和MMP_7呈负相关。结论:联合检测WT组织中PTEN和MMP_7的表达,能更好评估WT的侵袭和转移等生物学行为,两者可作为判断WT侵袭性的标志物。     

Wilms瘤基因WT1 mRNA的FQ-RT-PCR定量分析研究

[目的]探讨WT1mRNA在Wilms瘤表达的临床意义及其与Wilms瘤生物学性状的关系.[方法]对22例Wilms瘤、瘤旁肾组织及血液标本行WT1 mRNA FQ-RT-PCR定量检测.用SPSS软件进行统计学检验,分析.[结果]肿瘤组织中WT1mRNA表达显著高于肾组织和血液,与年龄、性别、BWT或UWT无关.UH型高于FH型,而肾组织表达又较血液高,BWT血中WT1mRNA表达高于正常对照组及UWT组,而UWT与正常表达无差别.[结论]Wilms瘤基因WT1mRNA表达与Wilms瘤发生发展存在关联,且与肿瘤的病理及预后相关,表达越高病理类型及预后越差,但与WT患儿的年龄、性别、BWT或UWT无关.血WT1mRNA表达水平可能作为BWT的诊断或高危筛选指标.     

肾母细胞瘤中cyclinD1和P16蛋白的表达研究

目的:探讨cyclinD1和P16蛋白在肾母细胞瘤发生发展中的作用及其与临床病理特征的关系.方法:应用免疫组化法测定36例肾母细胞瘤和8例正常肾脏组织中cyclinD1和P16蛋白的表达.结果:(1) 肾母细胞瘤中cyclinD1及P16蛋白的表达阳性率分别为55.56%(20/36)、61.11%(22/36);肾母细胞瘤组cyclinD1蛋白表达与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.05),瘤组织P16蛋白表达与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05).(2) 肾母细胞瘤的组织分型、临床分期和有无淋巴结转移对cyclinD1和P16蛋白表达的影响无显著性差异(P>0.05).(3) cyclinD1蛋白与P16蛋白的表达无明显相关性(P>0.05).结论:(1) cyclinD1蛋白的高表达与肾母细胞瘤的发生密切相关.(2) cyclinD1和P16蛋白的浆型表达与该肿瘤的发生密切相关.     

核仁组成区嗜银蛋白和增殖指数在肾母细胞瘤研究中的应用

目的 :研究肾母细胞瘤的组织学分型、临床分期与 DNA增殖指数及核仁组成区相关嗜银蛋白 ( Ag NOR)间的关系。方法 :通过流式细胞仪测定增殖指数 ( proliferating index,PI) ;用组织化学法检测 Ag NOR。结果 :正常肾脏与肾母细胞瘤组织间的 Ag NOR颗粒计数、颗粒直径及形状因子均有明显差异 ;间变型的 Ag NOR颗粒计数 ( 4 .2 )显著高于无间变型 ( 3.2 8) ;Ag NOR颗粒计数随分期增高而增高 ;高 Ag NOR计数组的 PI值 ( 4 4.35 )显著高于低 Ag NOR计数组 ( 32 .5 5 )。结论 :PI值及 Ag NOR计数可作为判断肾母细胞瘤增殖活性及预后的指标     

肾母细胞瘤组织中β-连环素和MMP-7的表达

目的:探讨肾母细胞瘤组织中β-连环素(β-catenin)和基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)的表达及与分化、浸润和转移的关系。方法:应用免疫组化SP法检测30例肾母细胞瘤组织中β-连环素和MMP-7的表达,并与对照组(6例瘤旁正常组织,9例非肿瘤切除的肾组织)相比较。结果:对照组中无β-连环素异常表达,MMP-7不表达,β-连环素和MMP-7在肾母细胞瘤组织中的阳性表达率分别为(41.22±17.06)％和(54.21±10.92)％,在不同组织学分型中差异均有统计学意义,直线相关分析显示2者存在正相关关系(P<0.05,r=0.409)。结论:β-连环素和MMP-7的表达与肾母细胞瘤的浸润和转移密切相关,可作为判断患者预后的重要临床指标。     

关节软骨的细胞凋亡

目的 观察正常及关节炎时关节软骨是否发生细胞凋亡及其可能的意义。方法 采用光镜、电镜观察软骨细胞形态,以琼脂糖凝胶电泳检测软骨细胞特异ＤＮＡ的梯形带,以激光共聚焦显微镜观察细胞内「Ｃａ＾２＋」ｉ动脉变化。结果 骨性关节炎及风湿性关节炎患者的关节软骨细胞经体外培养３ｄ后,光镜及电镜下均可见处于正常分化期的软骨细胞,而未经培养直接分离的部分软骨细胞可见细胞凋亡早期形态学改变。此外,体外培养的牛正常软骨     

生长抑素对大鼠不同肠段粘膜机械屏障损伤的保护作用

目的比较重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）大鼠末段回肠及右半结肠起始段粘膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白表达的差异和生长抑素对肠粘膜机械屏障的保护作用。方法Spraque-Daw-ley大鼠90只，随机分为3组，对照组、SAP组、治疗组。术后6、12、24h分批处死大鼠，取末段回肠及右半结肠起始段，用原位末端标记技术、免疫组化技术，检测肠粘膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白的表达。结果（1）SAP组与对照组比较，肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达上调，细胞凋亡增加；治疗组和SAP组比较，肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达下调，细胞凋亡减弱；差异均有显著性。（2）SAP组中各时相点，结肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达及细胞凋亡较回肠更强，差异有显著性。（3）各组各时相点bcl-2蛋白表达受抑制。结论SAP大鼠结肠粘膜机械屏障损伤较回肠更大；肠粘膜上皮细胞bax蛋白表达的上调是其细胞凋亡增加的重要原因；早期用生长抑素能有效保护SAP大鼠肠粘膜机械屏障。     

上皮性卵巢癌组织中COX-2表达及塞来昔布对卵巢癌细胞株生长抑制作用的研究

目的：探讨环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在上皮性卵巢癌中的表达及其选择性抑制剂塞来昔布对卵巢癌细胞株生长的影响.方法：应用免疫组化的方法检测正常卵巢、卵巢良性肿瘤、上皮性卵巢癌组织及卵巢癌细胞株0VCAR3、SKOV3中COX-2的表达,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）快速比色法、吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色结合荧光显微镜等技术,研究塞来昔布对0VCAR3细胞增殖和凋亡的影响.结果：COX-2在上皮性卵巢癌组织中高表达,阳性率为71.1%,而在正常卵巢和良性卵巢肿瘤中未见表达.COX-2在上皮性卵巢癌组织中的表达与临床分期、组织学类型、组织学分级无关（P＞0.05）,而与淋巴结转移有关（P＜0.05）.塞来昔布可抑制OVCAR3、SKOV3细胞生长,呈浓度和时间依赖性,S-N-K分析及最小显著差（LSD）检验组间两两比较,P均＜0.05.荧光显微镜下见典型的凋亡形态学改变,凋亡比例呈剂量和时间依赖,S-N-K分析组间两两比较,P均＜0.05.结论：上皮性卵巢癌组织及细胞株0VCAR3、SKOV3中存在COX-2表达,塞来昔布可抑制卵巢癌细胞增殖,并诱导细胞凋亡,塞来昔布可能成为卵巢癌化疗的有效药物.     

奥沙利铂诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡及其机制探讨

目的 :研究奥沙利铂对人肝癌细胞株HepG2生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其诱导凋亡的作用机制。方法 :应用MTT法检测奥沙利铂对HepG2细胞生长的抑制作用 ;电镜观察细胞的形态改变 ;流式细胞仪分析细胞周期的分布和凋亡的情况 ;免疫组织化学法检测突变型p5 3,Bcl- 2 ,Bax ,Fas等凋亡相关基因蛋白的表达。结果 :奥沙利铂对HepG2有明显的抑制作用 ,细胞阻滞于S期和G2 /M期 ,G0 /G1期细胞减少 ,作用 72h出现凋亡峰 ,电镜可以找到凋亡小体 ,免疫组织化学表明Bax表达增强 ,突变型 p5 3、Bcl- 2表达减弱 ,Fas表达无差异。 结论 :奥沙利铂具有抑制肝癌细胞株HepG2增殖及诱导凋亡作用 ,其机制与促凋亡相关基因表达增强和抗凋亡相关基因表达减弱有关。     

Smac在TRAIL诱导人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡中的作用

目的:初步研究Smac在TNF相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡中的作用.方法:观察细胞形态变化和以琼脂糖凝胶电泳分析TRAIL作用的Saos-2细胞DNA片段,利用流式细胞术及细胞计数法比较Smac或Bcl-2表达不同的细胞的凋亡程度,同时以Western 印迹半定量检测细胞胞质内Smac表达水平.结果:Saos-2细胞在TRAIL的作用下出现典型的凋亡样改变.在TRAIL作用Saos-2细胞时,Smac在胞质中的含量明显增加.在TRAIL作用24 h后,Smac在Saos-2细胞中过表达,细胞凋亡率由12.7%增加到31.4%.TRAIL作用Saos-2细胞48 h后,转染Bcl-2的细胞与转染空载体的Saos-2细胞相比,凋亡率显著降低(由24%降至15%),且胞质中Smac的表达水平也明显降低.结论:在TRAIL诱导的凋亡中Smac起促进作用,Bcl-2可以通过阻止Smac从线粒体释放到胞质中来抑制细胞凋亡.     

益气养阴活血化瘀法治疗微小残留白血病凋亡机制

[目的]探讨益气养阴活血化瘀法诱导微小残留白血病细胞凋亡的发生机制。[方法]建立微小残留白血病大鼠型，通过FCS法观察细胞凋亡率和脾细胞周长。[结果]治疗组凋亡率明显高于模型组，而模型组中G2 M期细胞率明显高于中药治疗组。[结论]益气养阴活血化瘀法可以诱导白血病细胞凋亡，有效治疗微小残留白血病。     

苦参碱诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡作用

目的:研究不同浓度的苦参碱(Mat)对宫颈癌Hela细胞株的体外增殖抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,以不同浓度的Mat作用于宫颈癌Hela细胞,相同条件下培养24h、48h、72h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定Mat对Hela细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:不同浓度Mat在体外均能不同程度抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并且作用呈现时间-剂量依赖性;苦参碱诱导Hela细胞凋亡率增加。结论:Mat有抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡作用。     

平哮合剂对哮喘豚鼠气道T淋巴细胞凋亡的影响

目的 :通过动物实验观察平哮合剂的疗效并探讨其作用的分子机制。方法 :采用卵蛋白诱导的豚鼠哮喘模型以平哮合剂治疗 ,治疗 1周后 ,观察其对哮喘潜伏期的影响 ,并与氨茶碱治疗组进行比较。采用流式细胞仪分析豚鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中T淋巴细胞的凋亡率。结果 :平哮合剂能显著延长哮喘豚鼠的诱喘潜伏期 ,作用与氨茶碱相当 (P >0 0 5 )。哮喘豚鼠BALF中T淋巴细胞的凋亡率与正常组比较有显著性差异 (P <0 0 1 ) ,平哮合剂可显著提高哮喘豚鼠BALF中T淋巴细胞凋亡率。结论 :平哮合剂有明确的平喘作用 ,其途径之一可能是通过促进气道粘膜中淋巴细胞的凋亡而实现的。     

鼻息肉上皮细胞中Fas、FasL和Bcl-2的表达及其意义

其其发病学意义。方法:用免疫组化染色法检测鼻息肉组(29例)和下鼻甲组(11例)上皮细胞Fas、FasL、Bcl-2基因蛋白的表达。结果:鼻息肉组上皮细胞Fas、FasL和Bcl-2阳性细胞指数(PIFas、PIFasL、PIBcl-2)均大于下鼻甲组(P<0.01),PIBcl-2/PIFas也大于下鼻甲组(P<0.01),但鼻息肉组PIFasL/PIFas与下鼻甲组比无统计学意义;鼻息肉组PIFasL/PIFas和PIBcl-2/PIFas均大于1(理论值,P<0.05)。结论:Bcl-2介导的抑制细胞凋亡机制和FasL介导的细胞免疫逃逸机制可能对Fas/FasL系统介导的细胞凋亡产生部分抑制作用,有可能是鼻息肉上皮细胞增殖和细胞凋亡平衡失调的根本原因。     

凋亡相关因子Livin、Smac及二者关系的研究进展

Livin是凋亡抑制蛋白(IAPs)家族的新成员,含有一个BIR结构和一个RING结构,BIR结构为Livin抑制细胞凋亡所必需,而RING结构具有E3泛素连接酶活性,Livin具有凋亡抑制作用已经在很多实验观察和临床研究中得到证实,但也有研究发现在效应caspase-3/-7作用下也能生成具有促凋亡作用的tLivin;Smac是一种内源性线粒体促凋亡蛋白,Smac不诱导正常细胞的凋亡,在细胞受凋亡信号刺激后释放到胞质,特异的结合并抑制IAPs对凋亡下游效应caspases的抑制,从而促进细胞凋亡。二者在细胞内相互调控、相互制约。