体外培养海马神经干细胞的分化及超微结构观察

目的：研究胎鼠海马神经干细胞（NPCs）体外培养方法、了解其分化及超微结构特点．方法：分离胎鼠海马NPCs,应用机械分离法将海马组织制成单细胞悬液,用含有bFGF和EGF的无血清培养基培养,传代后用含血清培养基促分化,免疫细胞化学方法对NPCs及其分化后的子代神经细胞进行鉴定,并在电镜下观察分化后细胞的形态结构特征．结果：海马NPCs在无血清培养基中悬浮成球,贴壁后,细胞逐渐从细胞球向周围迁移分化．体外培养胎鼠海马NPCs表达巢蛋白（nestin）,在体外可诱导分化产生分别表达Tuj-1和GFAP的神经细胞．电镜观察到分化后的神经细胞及突起相互间排列、具有各种细胞器结构,可见细胞间紧密连接,完整的突触结构．结论：采用无血清培养基中加入特定生长因子的培养技术,可培养出在体外稳定增殖并有多向分化潜能的大鼠胚胎NPCs．     

神经干细胞的分离培养及超微结构研究

目的研究神经干细胞分离培养及其超微结构特征。方法从胚胎大鼠的大脑皮质、室管膜下区等神经组织分离神经干细胞，用无血清培养技术在体外进行培养、扩增和传代。采用免疫荧光技术，鉴定神经干细胞和分化的神经细胞，同时进行电镜结构观察。结果从胚胎大鼠的大脑皮质、室管膜下区等组织获得了大量神经干细胞，可自我增殖并多向分化。神经球表面呈微绒毛结构，内层细胞结合较为松散．可见凋亡小体。部分细胞分化为具有突起和轴突样结构的细胞。结论分离培养的神经干细胞具有自我增殖和多向分化潜能，并具有与功能相对应的超微形态结构。     

大鼠骨髓间充质干细胞移植后大鼠脑梗死区超微结构变化的研究

目的　观察接受MSCs局部注射移植的大鼠脑梗死区超微结构的变化 ,以了解MSCs移植对梗死区超微结构的影响。方法　制作大鼠大脑中动脉栓塞模型 ,将体外分离培养的大鼠MSCs注射至大鼠脑梗死区 ,于移植后第 4周电镜下观察梗死区超微结构变化。结果　接受移植的梗死区可见外形幼稚的细胞存活 ,并围绕在神经元周围 ,梗死区神经元胞浆中出现了丰富的游离核糖体 ,而对照组大鼠梗死区神经元胞核固缩 ,并有嗜神经细胞现象。结论　大鼠MSCs移植对缺血性脑损伤具有一定修复作用     

透射电子显微镜原位细胞或组织简便快速包埋法

为了满足临床病理诊断及科研的需要，克服电镜原位细胞或组织包埋法之不足，作者研究出一种改良的透射电子显微镜细胞或组织原位简便快速包埋法。其特点是：①操作简便，全部包埋步骤（固定、脱水、浸泡及包埋）均在同一载体（培养瓶或显微镜观察的组织切片）上进行，能保存原位组织或细胞的超微结构；②快速，从固定到制备成超薄切片全过程仅需５小时；③易从载体上将包埋片分离下来，分离下来的包埋片完整，超微结构清晰。该方法不仅可用于单层培养细胞的超微结构研究，也可用于超微结构病理诊断，电镜免疫组织化学等方面的研究。文内还对该方法的操作要点进行了讨论。     

肠管直肠脱垂肠壁神经丛神经元形态结构的改变

用光镜和电镜观察乙状结肠直肠全层脱垂肠段肠壁内神经丛神经元的形态结构改变。结果表明，脱垂肠管的肌间神经丛和粘膜下神经丛的神经细胞发生尼氏体溶解或浓缩呈团块状，细胞核偏位和浓缩变小，细胞肿大或萎缩，神经节内细胞减少，胶质细胞增生；电镜下可见神经细胞粗面内质网肿胀、脱颗粒，线粒体肿大、嵴消失或呈空泡，高尔基复合体扩张等超微结构的改变。认为肠管直肠脱垂时肠壁内神经丛的损害在此病发生发展过程中，可能起着重要作用。     

培养细胞的超薄切片技术探讨

目的：探讨培养细胞的电镜良好制样和超薄切片方法。方法：乳腺癌细胞系MB-231培养后分成3组：消化离心组、刮除离心组和原位包埋组，比较培养细胞的超微结构特征。结果：原位包埋方法的超薄切片可以清楚地显现细胞为多角形梭形，细胞连接保持良好。其余两组细胞呈圆形、椭圆形，大部分细胞细胞间连接被破坏，分散分布。结论：原位包埋和单层细胞超薄切片方法是电镜下观察培养细胞的最值得推荐的方法。     

兔视网膜色素上皮细胞的体外培养及超微结构研究

目的：将兔视网膜色素上皮（ＲＰＥ）细胞进行体外培养,观察其超微结构。方法：用胰酶消化法培养兔ＲＰＥ细胞并传代。扫描电镜和透射电镜观察其超微结构。结果：原代培养的ＲＰＥ细胞含大量色素呈多角形,传代的细胞透明呈梭形。电镜显示它们具有细胞极性,含黑色素颗粒、各种细胞器、细胞间连接复合体,与体内一致。结论：培养的大量细胞可用于ＲＰＥ的体外实验研究。     

βAmyloid蛋白在恒河猴脑组织中的形态学特点

目的观察βamyloid蛋白在不同年龄的恒河猴脑中的表达及其组织学和细胞超微结构水平的分布特点。方法分别取脑组织额叶、海马、颞叶和顶叶做免疫组化,观察βamyloid蛋白在组织学上的分布特点及与年龄的关系;选用23岁恒河猴一只,灌注后取上述部位做免疫电镜,观察βamyloid蛋白在细胞超微结构水平的分布特点。结果免疫组化染色可观察到年轻猴的神经细胞和胶质细胞中有少量的Aβ40颗粒,以额叶和海马居多。在老年猴脑中Aβ40常聚集成团状斑块。年轻猴脑细胞内未见明显的颗粒状Aβ42,而老年猴的额叶有多量的Aβ42细胞外散在斑块,神经细胞和胶质细胞内也见有Aβ42颗粒状沉积。免疫电镜可观察到Aβ40的胶体金颗粒大部分存在于老年猴神经细胞细胞质中,在细胞间质和小胶质细胞中也可见少量的胶体金颗粒,多见于额叶;标记Aβ42的胶体金颗粒也是多见于神经细胞中,在小胶质细胞中少量存在,同时在颞叶的神经纤维束中也可见Aβ42标记的胶体金颗粒。结论Aβ42是恒河猴老年斑的主要成分,并在其形成过程中起到重要作用。     

电针对神经症大鼠中缝背核5-HT及神经细胞超微结构的影响

目的:通过观察针刺对神经症大鼠中枢内5-HT表达水平的影响和对神经细胞超微结构的影响寻找针刺治疗神经症的证据.方法:通过手术造模的方法,建立神经症大鼠模型.采用旷场实验法进行行为测试、免疫组化法检测5-HT和电镜的方法观察神经症大鼠神经细胞的超微结构.结果:行为测试证实模型建立成功.手术造模导致其中枢内5-HT水平提升而针刺方法能够调整5-HT水平.电镜显示电针对神经细胞正常结构的恢复有一定的作用.     

急性高原低氧对大鼠海马神经细胞形态结构的影响

目的观察急性高原低氧大鼠海马神经细胞的超微结构变化,为探讨高原低氧对大鼠海马神经细胞形态和功能的影响提供形态学依据。方法将平原SD大鼠运至高原(4000m),在第7天取大鼠海马,常规电镜方法染色,观察海马神经细胞形态结构。结果电镜下急性高原组大鼠海马区神经细胞的形态和胞浆内的细胞器与平原组相比存在不同。结论急性高原低氧环境对大鼠海马神经细胞形态结构存在一定影响。     

山莨菪碱对家兔脑损伤早期脑电图和脑组织水含量的影响

选用山莨菪碱,观察其对家兔脑损伤早期脑电图和脑组织水含量的影响,以及神经细胞超微结构改变。结果表明:脑损伤早期脑细胞生物电活动严重受抑制,脑组织水含量显著增加,电镜观察神经细胞超微结构损害,髓鞘疏松。山莨菪碱能有效地保护脑功能,改善脑细胞生物电活动,使神经细胞超微结构的损害明显减轻,有利于脑水肿的防治。     

低氧对体外培养小鼠星形胶质细胞超微结构的影响

目的 探讨低氧后体外培养星形胶质细胞超微结构的变化。方法 通过胶原酶消化、尼龙网过筛、差速粘附等技术对新生小鼠星形胶质细胞进行体外培养，待细胞铺满瓶底时，在培养液表面覆以液体石蜡形成低氧环境，常规培养作为对照，电镜下观察细胞超微结构的变化。结果 正常星形胶质细胞线粒体丰富，可见少量高尔基复合体和粗面内质网。低氧星形胶质细胞表面伸出许多微绒毛样突起，线粒体肿胀，大量溶酶体形成。结论 低氧时星形胶质细胞损伤和修复并存。     

兔颈脊髓慢性受压对神经细胞影响的实验研究

[目的]观察兔颈脊髓慢性压迫后神经细胞超微结构变化、压迫程度与神经细胞损害的关系。[方法]建立兔颈脊髓慢性受压动物模型，分轻度压迫组、重度压迫组、空白组，分别进行颈脊髓光镜、电镜观察、神经细胞凋亡检测。[结果]兔颈脊髓慢性受压后出现神经元萎缩、脱失，神经元截面积减少，压迫后有神经元、神经细胞凋亡现象。[结论]颈脊髓慢性受压后神经细胞的死亡方式有坏死和凋亡，压迫越重神经细胞损害越重。     

主动脉平滑肌细胞的三维培养研究

目的：研究主动脉平滑肌细胞（aortic smooth muscle cell,ASMC)在三维培养中是否仍能产生弹性蛋白。方法：取一周龄SD大鼠胸主动脉，经原代、传代培养后，和胶原、血清及培养 液混合形成ASMC胶原凝胶，进行三维培养；培养2周后用Gomori醛复红弹性纤维染色和弹性蛋白免疫组织化学染色，检测细胞胶原凝胶中所产生的弹性纤维，并进行电镜观察。结果：传代细胞经α肌动蛋白免疫组织化学染色鉴定，98％以上为ASMC。培养2周的ASMC胶原凝胶切片用二种染色方法均可显示有弹性纤维存在，电镜观察细胞超微结构呈典型的合成表型。结论：ASMC在三难培养中能够产生弹性蛋白，并形成弹性纤维。     

氨对体外培养胚胎大鼠大脑皮质神经元凋亡的影响

目的通过观察体外培养的胚胎大鼠大脑皮质神经细胞在氨作用下的形态学、超微结构的变化,探讨氨与细胞凋亡及肝性脑病的关系.方法不同浓度的氨作用于体外培养的18d胎龄胚胎大鼠大脑皮质神经细胞24h后,采用光镜、透射电镜观察细胞形态及超微结构;利用流式细胞仪进行凋亡细胞定量观察.结果对照组与实验组在光镜下形态不同,两组在透射电镜下可见到典型的"凋亡小体”,流式细胞仪定量显示出两组凋亡细胞数量具有显著性差异(P＜0.01),且不同浓度的氨引起的神经细胞凋亡数量也存在显著性差异(P＜0.01).结论氨可诱导体外培养神经细胞产生过量的细胞凋亡.     

M 期细胞选择性电镜取材法与观察

从细胞形态学的角度观察整个细胞的增殖周期,唯有分裂期(M 期)细胞变化显著,是细胞形态学研究中极受重视的观察目标。为了能对 M 期细胞进行有选择地电镜观察,作者在“选择性 M 期细胞同步培养法”的启发下,加以改进、简化,建立了单层培养细胞选择性 M 期细胞的电镜取材新方法,收效良好,基本达到了电镜下大量观察 M 期细胞超微结构的目的,现将具体方法介绍如下。     

γ—干扰素诱导大肠癌CCL229细胞表达LEA抗原的电镜观察

目的：探讨γ－干扰素对人大肠癌细胞系肿瘤相关抗原ＬＥＡ表达的诱导作用。方法：将γ－干扰素与人大肠癌ＣＣＬ２２９细胞共育培养通过免疫铁蛋白电镜观察γ－干扰素对人大肠癌细胞系ＣＣＬ２２９诱导作用的超微结构变化。结果：电镜观察发现,γ－干扰素诱导后,ＣＣＬ２２９细胞表面褶增多,形成大量不规则突起,并且ＣＣＬ２２９细胞针状伪足萎缩,缩绒毛大多呈球状分布于胞体四周。结论：电镜超微结构的变化与γ－干扰素诱导后     

横纹肌肉瘤和梭形细胞肉瘤的超微结构研究

观察了经电镜和免疫组化证实的１３例横纹肌肉瘤。在电镜下可见４种肿瘤细胞：原始间叶细胞、低分化肌母细胞、中分化肌母细胞和高分化肌母细胞，另外，观察了２８例梭形细胞肉瘤的超微结构，提出了横纹肌肉瘤的超微结构诊断标准。     

TNF与化疗药物联合应用对卵巢癌细胞株超微结构的影响

目的：探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和化疗药物联合应用的作用机制。方法：用３ＡＯ卵巢癌细胞株作为靶细胞，体外培养，分单独用药及联合用药组，于用药后不同时间收获细胞，制成电镜标本，在透视电镜下观察单独应用ＴＮＦ及ＴＮＦ与化疗药物（阿霉素、更生霉素）联合用药对卵巢癌细胞超微结构的改变。结果：电镜显示，单独应用ＴＮＦ，卵巢癌细胞无明显改变性多见，而细胞膜变化不明显。结论：ＴＮＦ与化疗药物有协同抗卵巢癌细胞的     

国内医学新闻

电解治疗后肿瘤细胞的超微结构电镜观察 浙江中医学院(310009)楼锦新报道 浙江省医学科学院电镜室为阐述肿瘤电解(电化学)治疗的作用机理,对电解治疗后瘤细胞的超微结构进行了观察。 研究人员将腹水型肝癌细胞接种于26只雄性ICR小鼠皮下,一周后形成直径约10mm的实体瘤。电解治疗1～7天后处死小鼠,取瘤体作电镜观察。