大鼠胚胎发育后期胰腺中Mesothelin的表达

目的: 探讨大鼠胰腺胚胎发育后期胰岛形成及β细胞功能完善相关的基因表达调控. 方法:采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)对孕15.5(E15.5)和E18.5胰腺进行基因转录水平分析并用RT-PCR验证基因在大鼠胰腺E12.5,E15.5,E18.5,初生和成年这五个不同发育时期的表达情况. 结果:在差异或特异表达的基因中与胰腺细胞分化相关的转录因子和信号分子表达均下调,而与胰岛结构形成及β细胞代谢功能完善相关的基因表达上调,其中细胞黏附分子Mesothelin是在E18.5特异表达的基因,RT-PCR亦显示Mesothelin在大鼠胰腺胚胎发育后期特异性高表达. 结论: Mesothelin可能对胰岛结构的形成和功能的完善及维持有重要作用.     

MicroRNA调控干细胞成骨分化的研究进展

干细胞成骨分化是骨骼发育过程中的重要环节,对于骨的发育尤为关键,而干细胞在机体的疾病、衰老和发育过程中起到重要作用,成骨方向的分化在病理状态损伤和修复起到重要价值,故临床对干细胞成骨分化的问题尤为重视,并加强对成骨分化的研究与探讨。干细胞的成骨分化不仅要受到表观遗传学和遗传学的调控,但在相关资料的研究中显示,干细胞成骨分化还容易受micro RNA的影响,micro RNA在干细胞成骨分化中起到调控作用,该物质属于非编码的内源性RNA,可以跟靶m RNA特异性并将其抑制和降解,在基因转录和调控中起到重要价值。本文通过对Micro RNA调控干细胞成骨分化的相关问题进行分析,并就存在的问题提出针对性建议。     

远距离调控元件与遗传性疾病

组织和发育表达特异性基因通常具有高度复杂的表达调控模式.除启动子外,该类基因的正常表达尚需要其它调控元件参与.这些调控元件主要包括增强子和沉默子等,它们可位于距离转录基因很远的DNA序列中,甚至存在于与转录基因功能上不相关的邻近基因内.含有组织特异性转录因子结合位点的调控元件,通过参与调控相关基因的表达,促进组织器官的分化与发育.这种精确的调控机制一旦破坏,将导致疾病的发生.而且,某些调控元件的异常能导致临床表型与相应基因编码区突变截然不同的疾病.     

胰岛新生和胰岛新生相关蛋白研究进展

胰岛 β 细胞过度凋亡 ,胰岛细胞增生与胰腺导管上皮细胞分化障碍,导致胰岛素绝对缺乏 ,在1型糖尿病发病中起关键作用。2型糖尿病患者可能在胚胎时期就存在某些调控基因的缺陷 ,导致成年后机体胰岛细胞增生分化障碍。研究胰岛新生及其调控因素不仅可以探讨糖尿病发病机制 ,而且可能为糖尿病治疗提供新途径。笔者就胰岛新生及其调节因素中胰岛新生相关蛋白 (isletneogenesis-associatedprotein ,INGAP)的研究进展作一综述。1胰岛新生及调控因素胰岛新生是指在胰腺的发生发育过程中 ,胰腺导管上皮细胞增生分化成为新的胰岛内分泌细胞。不少…     

大鼠胰腺发育不同阶段肝细胞生长因子受体编码基因的表达

目的研究肝细胞生长因子受体编码基因c-met在大鼠胰腺发育不同阶段的表达。方法采用高密度寡核苷酸芯片对孕12.5 d（E12.5）、孕15.5 d和孕18.5 d、新生、成年胰腺进行基因转录水平分析,并用RT-PCR技术验证基因在大鼠胰腺不同发育时期的表达。结果c-met基因在E15.5、E18.5较成年特异性高表达。经RT-PCR验证,c-met基因表达趋势与芯片结果相符;与芯片c-met探针所用引物不同RT-PCR,结果却在各发育阶段呈现与芯片不同的表达趋势。结论提示c-met可能在胰腺发育过程中起到调控作用,参与胚胎胰腺发育中晚期细胞功能完善的信号传导过程。并且c-met在胰腺发育中发挥作用有可能存在不同转录本。     

胚胎早期胰腺发育中相关因子表达的变化

目的 探讨人胚胎胰腺发育过程中相关因子表达的变化，为胚胎胰腺移植治疗糖尿病提供基础性研究。方法 对7～12周胎龄段的胰腺采用免疫组化S-ABC法分析胰腺发育中相关因子的表达变化、胰岛的分化和形成。结果 胰岛素、胰升糖素、生长激素抑制因子及细胞角蛋白在胚胎胰腺发育中7周开始表达，与胰岛的分化和形成一致，随着胎龄的增加表达增强；IGF-Ⅰ及Ⅶ因子在胚胎12周时出现在胰腺间质内。结论 胰岛素、胰升糖素、细胞角蛋白和IGF-Ⅰ在人胚胎胰腺的发育中起着重要的调控作用，与胰腺内外分泌腺的分化和形成有关；12周后的胚胎胰腺可以作为胚胎胰腺移植的供体。     

PDX1在糖尿病中的研究进展

胰-十二指肠同源盒1基因(PDX1)是胰腺发育和胰岛素调控的关键基因。PDX1缺陷会抑制胰腺发育，导致高血糖。本文就PDX1的结构及其在胰岛β细胞分化、胰岛素合成与分泌调控中的作用与机制进行探讨，并就其与新生儿糖尿病、成人发病型糖尿病和2型糖尿病之间的关联进行阐述，以便为糖尿病的治疗提供新思路。     

miRNA失调控与肿瘤的发生发展

microRNA(miRNA)为长度约19～25个核苷酸的非编码RNA,miRNAs能够识别特定的目标mR-NA并在转录后水平通过促进靶mRNA的降解和/或抑制翻译过程而发挥负调控基因表达的作用[1]。计算机预测表明,每个miRNA有能力调控约200个靶基因,说明人类大约1/3的基因表达受miRNAs的精细调节。它们主要通过调节信号分子(细胞因子、生长因子、转录因子和促凋亡或抗凋亡基因等)的表达参与动植物的生长、发育、分化和代谢[2]。近几年来的研究发现,一些miRNA的特异性调节和     

锌指蛋白ZBTB20是调控肝脏甲胎蛋白基因转录的关键抑制因子

甲胎蛋白(AFP)在胎肝中高表达,出生后不久就快速下调至很低水平.有关肝脏AFP基因出生后的转录抑制机制一直是未解之谜.AFP基因的增强子、抑制区域和启动子等顺式调控元件可能参与其转录抑制的调节,但有关的关键性转录抑制因子尚不明确.我们发现了一种新型锌指蛋白ZBTB20,为研究其体内的生理功能,我们利用条件打靶技术,建立了ZBTB20的组织特异性基因敲除小鼠模型,发现肝细胞特异性ZBTB20基因敲除小鼠出生后的肝脏AFP基因一直维持近乎胎肝的高水平表达,而其肝细胞处于正常的静息状态.生化分析显示,ZBTB20具有转录抑制活性,体外可有效抑制AFP启动子的转录活性;染色质免疫沉淀和EMSA实验结果显示ZBTB20 体内和体外能直接结合AFP启动子.在小鼠肝脏的发育过程中,ZBTB20基因被渐进激活,与AFP基因的表达水平呈负相关,提示激活的ZBTB20参与了AFP基因的转录抑制.上述结果表明ZBTB20是调控AFP基因表达的关键转录因子,由此我们认为肝脏ZBTB20基因出生后的表达上调及其发挥的转录抑制作用是导致AFP基因出生后快速下调的主要原因.     

GATA-4在心肌损伤修复中的作用机制研究进展

GATA-4是调控心脏基因表达的重要转录因子,参与了心脏正常发育、功能基因表达和心肌肥大的病理过程。GATA-4在心脏发育的早期起重要作用,抑制胚胎干细胞中GATA-4的表达可阻断胚胎干细胞向心肌细胞分化,增强GATA-4的表达则增加胚胎干细胞向心肌细胞分化。并且GATA-4还具有抗细胞凋亡的作用,GATA-4在心肌肥大期间成体心肌细胞的凋亡过程中具有重要的作用。通过增加促存活基因的表达,可改善细胞的存活。其在心肌损伤修复、缺血性心脏病治疗等方面成为目前研究的热点。     

长链非编码RNA 对基因表达的调控

哺乳动物基因组中的大部分DNA序列在动物生长的不同阶段被转录成长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)。它们对基因表达的调控作用已成为生命科学研究的热点。目前已发现lncRNA有多种基因调控方式： 在细胞核中顺式或反式地调控基因转录,作为蛋白诱饵进行间接调控;在细胞质中作用于mRNA影响其稳定性及翻译 过程,作为竞争性内源RNA参与microRNA调控,与转录因子结合影响其功能发挥等。LncRNAs在转录水平及转录后 水平对基因表达的调控作用对于机体的发育过程和疾病的发生发展都有重大意义。     

神经分化因子-1/B细胞E盒转录激活因子2基因与糖尿病

神经分化因子1(NeuroD-1)又名B细胞E盒转录激活因子2(BETA-2),以往也称为NeuroD,属B类碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子家族,作为转录因子,其能高亲和力地与胰岛素基因的E盒结合,在胰岛B细胞中激活胰岛素基因的转录,对胰腺B细胞的发育及生理功能具有重要的作用;也可与其他转录因子相互作用,协同调节胰岛素基因的最终活性状态,故被认为是糖尿病的候选基因之一.现将NeuroD-1的特点及其与糖尿病的关系综述如下.     

PDX-1与胰岛B细胞功能

胰岛B细胞分泌胰岛素,而胰岛素是体内惟一的降血糖激素,对于维持机体血糖的动态平衡起着决定性的作用。胰岛B细胞分泌的调节机制十分复杂,至今仍未完全阐明。胰十二指肠同源盒1(PDX-1)参与胰腺早期发育和较晚期B细胞的分化,在成年机体内通过调节一系列基因的表达来维持B细胞的形态和正常功能,尤其是通过调控胰岛素及胰岛素相关基因如葡萄糖激酶、葡萄糖转运蛋白2等基因的表达,促进胰岛素分泌和维持胰岛B细胞的正常功能,其在胚胎期胰岛细胞发育、增殖、分化和成熟以及胰岛B细胞分泌功能的调节中扮演着重要角色。PDX-1还可以诱导非胰岛素分泌细胞如肝细胞等转化为胰岛素分泌细胞,在糖尿病的治疗方面也表现出了巨大的潜力。     

肝脏卵圆细胞诱导分化为胰岛β细胞的研究进展

肝脏卵圆细胞是具有多向分化潜能的干细胞, 在一定的条件下可诱导分化为胰岛β细胞,葡萄糖、细胞外基质、细胞因子和胰岛转录因子等诸多因素均参与分化过程的调控。文章就肝脏卵圆细胞向胰岛β细胞分化的影响因素进行综述。     

微RNA在炎症相关疾病中的研究进展

微RNA(miRNA)是一类非编码单链小分子RNA,在转录后水平通过对靶基因信使RNA的降解或翻译抑制进而调节基因表达。miRNA在细胞增殖、分化、凋亡、炎症等生物学过程中发挥重要作用。研究发现,miRNA在炎症及相关疾病中表达异常,并通过调节多种基因表达及信号通路参与炎症及疾病的发生、发展过程。该文对miRNA与炎症及其相关疾病(如炎症性肠病、消化性溃疡、病毒性肝炎等)关系的研究进展予以综述。     

PRC复合物及其亚基EZH2在肿瘤中的研究进展

表观遗传学通路的失调经常在癌症中发生,深入理解这些表观遗传学因子的机制作用有助于开发新的肿瘤治疗方法。多梳组蛋白(PRC)是在肿瘤细胞中充当表观遗传学调控因子功能的典范。这些蛋白形成的多亚基复合物参与了基因转录抑制。PRC1和PRC2是这些复合物中研究最清楚的复合物。并且EZH2是PRC2复合中起着重要作用的亚基。本文将对PRC2及其亚基EZH2进行相关阐述。     

肝脏卵圆细胞诱导分化为胰岛β细胞的研究进展

肝脏卵圆细胞是具有多向分化潜能的干细胞, 在一定的条件下可诱导分化为胰岛β细胞,葡萄糖、细胞外基质、细胞因子和胰岛转录因子等诸多因素均参与分化过程的调控。文章就肝脏卵圆细胞向胰岛β细胞分化的影响因素进行综述。     

MicroRNAs 与胰岛β细胞及2型糖尿病的研究进展

MicroRNAs(又称 miRNA 或微小 RNA)是在真核细胞中广泛存在的非编码蛋白 RNA,主要通过与靶基因 mRNA3′非翻译区结合,引起靶基因的蛋白翻译受抑或促使靶基因 mRNA 的降解而发挥其调控基因表达。研究表明,其过表达或表达抑制与多种疾病的发生、发展密切相关,如细胞的增殖与凋亡、分化与发育、胰岛素的分泌、病毒感染、癌症、心血管疾病、免疫系统疾病等[1]。本文主要阐述 microRNAs 与胰岛β细胞的关系及其对2型糖尿病发生、发展的影响,探讨其成为糖尿病新的生物学标志和治疗靶点的理论依据。     

抑制EZH2基因表达的shRNA载体的构建及其作用

目的 构建zeste基因增强子同源物2(EZH2)靶向的小发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探讨抑制EZH2基因表达后其在结直肠癌细胞中的作用。方法 根据EZH2cDNA序列设计具有短发夹结构的两条DNA序列,与载体pGFP-V-RS构建重组表达载体,鉴定后转染至SW480细胞。将其随机分为阴性对照组和基因沉默组,RT-PCR和蛋白质印迹法检测抑制效果,MTT法检测细胞增殖情况。结果 成功构建了抑制EZH2基因表达的干扰质粒。阴性对照组EZH2 mRNA 的表达是基因沉默组的5.8倍(P<0.01),基因沉默组EZH2的蛋白明显低于阴性对照组(P<0.05)。与阴性对照组相比,基因沉默组细胞生长受到明显抑制(P<0.05)。结论 EZH2靶向shRNA 重组表达载体构建成功,并能显著抑制EZH2基因的表达,为进一步研究EZH2基因在肿瘤中的作用机制提供了基础。     

microRNA在神经元发育和可塑性中的作用

microRNA对于神经元的发育、分化、功能和可塑性方面有重要意义.一方面,成熟microRNA可与靶mRNA分子配对抑制其转录后的翻译或直接降解mRNA,以调节相关靶基因的转录和表达,进而调控神经元的发育、分化.