TGF-β1R在通脉大生片作用下的大鼠卵巢颗粒细胞中的表达

目的 探索TGF-β1R在通脉大生片作用下的离体大鼠卵巢颗粒细胞中的表达.方法 将培养的原代大鼠卵巢颗粒细胞,随机分为自然生长对照组、通脉大生片高剂量组、通脉大生片中剂量组、通脉大生片低剂量组、FSH组,分别在细胞生长对数期给药,取给药后的细胞培养上清液,用酶联免疫法检测上清液中TGF-β1R的表达量.结果 自然生长组各时间点的TGF-β1R的表达量无明显变化,通高组、通中组、通低组于给药12 h时TGF-β1R的表达量达高峰,48 h降到最低,FSH组于给药2h后TGF-β1R的表达量达高峰,48 h降到最低.结论 通脉大生片可增加TGF-β1R的表达量,进而揭示通脉大生片通过可能通过TGF-β/smad信号通路来调节卵泡的发育和排卵.     

通脉大生片对大鼠卵巢颗粒细胞TGF-β1表达的影响

目的:探索通脉大生片对大鼠卵巢颗粒细胞TGF-β1的影响。方法:取原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞,随机分为自然生长对照组、通脉大生片高剂量组(通高组)、通脉大生片中剂量组(通中组)、通脉大生片低剂量组(通低组)、FSH组,分别于细胞生长对数期给药,取给药后1h、2h、6h、12h、24h、48h的细胞培养上清液,用酶联免疫法检测上清液中TGF-β1的表达量。结果:自然生长对照组各时间点的TGF-β1的表达量无明显变化,通高组、通中组、通低组于给药12h时TGF-β1的表达量达高峰,随后开始下降,48h降到最低,FSH组于给药2h后TGF-β1的表达量达高峰,随后开始下降,48h降到最低。结论:通脉大生片可能是通过增加TGF-β1的表达量来促进卵泡发育,以达到治疗排卵障碍性不孕的目的。     

通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢TGF-β1及Smad7表达的影响

目的:观察通脉大生片对大鼠卵巢TGF-β1、Smad7在TGF-β/smads通路中的表达变化及意义。方法:建立大鼠肾虚排卵障碍不孕(ASR)模型,通过阴道涂片筛选造模成功大鼠后分组用药,采用酶联免疫法(Elisa)法检测TGF-β1的表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠卵巢中Smad7蛋白的表达量。结果:①模型组大鼠卵巢TGF-β1的表达量最低,与正常组、通高组、来曲唑组、右归丸组相比,有统计学差异(P<0.05,P<0.01);通脉大生片组中以通高组最优;②通脉大生片高、中组来曲唑组及右归丸组Smad7表达均低于模型组(P<0.05,P<0.01),以通高组效果最好。结论:通脉大生片可用于治疗肾虚排卵功能障碍型不孕,而其促排卵作用可能部分是通过调节TGF-β/smads信号通路中TGF-β1及Smad7的表达,进而促进排卵障碍型不孕大鼠卵巢颗粒细胞TGF-β/smads信号通路的激活来实现的。     

通脉大生片对排卵障碍型不孕大鼠FSH、LH、TGF-β1的影响研究

目的研究通脉大生片对排卵障碍型不孕大鼠的促卵泡激素(FSH),促黄体生成素(LH),转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,以探讨通脉大生片治疗排卵障碍不孕症的作用机理。方法建立雄激素致排卵障碍型大鼠模型,随机分为空白对照组,模型组,通脉大生片高剂量组,通脉大生片中剂量组,通脉大生片低剂量组,氯米芬片组。第80日龄开始给药,5周后股动脉取血,用酶联免疫法检测血清中FSH、LH和TGF-β1的含量。取出新鲜的卵巢组织,病理切片HE染色后观察卵巢组织的形态学。结果通脉大生片高剂量组FSH水平高于模型组P0.05,差异有显著性。通脉大生片高、中、低剂量组LH水平均高于模型组,P0.01,差异有显著性。通脉大生片高剂量组TGF-β1水平高于模型组,P0.01,差异有显著性。结论通脉大生片可能通过提高垂体的内分泌功能提高FSH、LH水平;通脉大生片可以升高大鼠血清内TGF-β1水平,其导致该效应的机理,尚需进一步探讨。     

通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢P-Smad3表达水平影响研究

目的在前期研究的基础上,探讨以"补肾调冲法"立法的通脉大生片对大鼠卵巢TGF-β/Smads信号转导通路的调控作用,探索中医补肾调冲法促卵泡发育的机制,从而为补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕提供科学依据。方法选取9日龄SD大鼠,通过给予颈背部皮下注射丙酸睾酮,建立肾虚排卵障碍型不孕大鼠(ASR)模型,根据大鼠阴道脱落细胞涂片的表现,筛选出造模成功的大鼠,随机分为6个组,分别为模型组、通脉大生片高剂量组(简称通高组)、通脉大生片中剂量组(简称通中组)、通脉大生片低剂量组(简称通低组)、来曲唑组(LE)、右归丸组,另设正常组,于大鼠第80日龄,分别给予相应药物进行干预,连续干预5周后股动脉取血并处死动物,迅速剥离大鼠卵巢,每组选取三只大鼠的卵巢组织,立即置于Eppendorf管中,储存于液氮中以备检测。采用免疫印迹法,检测各组大鼠卵巢P-Smad3的表达水平。结果与模型组相比,正常组、通高组、来曲唑组、右归丸组大鼠卵巢P-Smad3的表达水平较高,差异有显著意义(P0.01),通低组、通中组的P-Smad3水平亦有所升高,差异有统计学意义(P0.05);通脉大生片各剂量组中,通高组升高P-Smad3水平的效果明显高于通中组、通低组。结论通脉大生片可以提高肾虚排卵障碍性不孕大鼠P-smad3的表达水平,进而改善卵巢局部的微环境,以促进卵泡的生长、发育和促进成熟卵泡破裂及卵子的排出,从而达到治疗肾虚排卵障碍性不孕的作用。     

通脉大生片对肾虚排卵障碍不孕大鼠子宫组织形态学的影响

目的观察以"通补法"立法的通脉大生片对肾虚排卵障碍不孕大鼠子宫组织形态学的变化,探讨通补法治疗肾虚排卵障碍不孕的机制。方法建立肾虚排卵障碍不孕大鼠模型,根据大鼠阴道涂片的结果,筛选造模成功大鼠,随机分为6组,分别为模型组,通脉大生片高剂量组(简称通高组),通脉大生片中剂量组(简称通中组),通脉大生片低剂量组(简称通低组),右归丸组,来曲唑组,另设正常组,于大鼠第80日龄,对各组大鼠分别进行相应药物干预,灌胃5周后处死动物,取子宫组织制成病理切片,在光镜和电镜下观察。结果光镜和电镜下,通脉大生片各组大鼠与模型组大鼠比较,子宫有不同程度的恢复(P0.05),通高组效果最好,与正常组比较,结果无差异(P0.05)。结论通脉大生片对促进肾虚排卵障碍不孕大鼠子宫的发育作用是肯定的,其组织形态学变化为通脉大生片治疗肾虚排卵障碍不孕症提供了客观基础和理论支持。     

通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢颗粒细胞超微结构的影响

目的在前期实验的基础上探讨通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠(ASR)卵巢颗粒细胞超微结构的影响。方法选取9日龄SD大鼠,通过颈背部皮下注射丙酸睾酮,建立肾虚排卵障碍型不孕大鼠(ASR)模型,根据大鼠阴道脱落细胞涂片表现,筛选出造模成功的大鼠并进行分组。于大鼠第80日龄,分别给予相应药物干预,连续5周后股动脉取血处死动物,迅速剥离大鼠两侧卵巢,制成电镜标本,应用透射电镜观察卵巢颗粒细胞的超微结构。结果 (1)正常组卵巢颗粒细胞超微结构表现为:多层卵巢颗粒细胞分布,核圆形,线粒体丰富,可见大量粗面内质网;(2)模型组与正常组、给药各组大鼠卵巢颗粒细胞超微结构有明显差异,表现为细胞核团块状,核糖体丢失,可见凋亡小体,线粒体肿胀,且嵴肿胀。(3)通脉大生片各剂量组中,通高组、通中组与正常组大鼠卵巢颗粒细胞结构较相近,主要表现为成熟卵泡颗粒细胞丰富,多层分布,细胞核呈圆形,核内染色质分布均匀,胞浆内可见丰富的线粒体、粗面内质网,且结构正常,可见丰富的脂滴,细胞膜表面有微绒毛突起;通低组可见卵巢颗粒细胞结构尚可,胞浆内线粒体轻度肿胀,可见少量粗面内质网及少量脂滴。(4)左归丸及来曲唑组卵巢颗粒细胞超微结构表现相似且与正常组结构相近,可见卵巢颗粒细胞,核染色质均匀,胞浆内可见大量线粒体、高尔基复合体,结构良好。结论 (1)通脉大生片能恢复肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢颗粒细胞的超微结构。(2)通脉大生片可通过对卵巢颗粒细胞细胞器结构及数目的影响,从而影响卵泡的发育和成熟,发挥促排卵作用。(3)中医补肾调冲法治疗肾虚排卵障碍型不孕有其现实意义。     

通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢指数和FSHR mRNA表达的影响

目的：探讨以＂补肾调冲法＂立法的通脉大生片对排卵障碍型不孕（ASR）大鼠卵巢FSHR mRNA表达的调节作用。方法：选取9日龄SD大鼠,给予颈背部皮下注射丙酸睾酮,建立肾虚ASR大鼠模型,根据大鼠阴道涂片结果筛选造模成功大鼠,随机分组。灌胃5周后处死,取卵巢,计算卵巢指数。荧光定量RT-PCR检测计算各组大鼠卵巢FSHR mRNA表达量。结果：与正常组FSHR mRNA表达量比较,模型组降低且差异有统计学意义（P〈0.05）;与模型组FSHR mRNA表达量比较,通高组、右归丸组上调,差异有统计学意义（P〈0.05）,通中组、来曲唑组均上调,差异有显著统计学意义（P〈0.01）,通低组升高,差异无明显统计学意义（P〉0.05）;通高、中组FSHR mRNA表达量上调幅度明显高于通低组,尤以通中组最显著。结论：通脉大生片可治疗肾虚排卵障碍型不孕,其机制与调节FSHR mRNA的表达水平,提高卵巢反应性有关。     

补肾活血方含药血清对卵巢颗粒细胞ActA/Smads信号通路的影响

目的探讨补肾活血方含药血清对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞增殖分化及ActA/Smads信号传导通路的影响。方法采用机械分离法建立SD大鼠卵巢颗粒细胞体外培养体系。大鼠随机分为中药组,FSH组,胎牛血清组,无血清组。中药组再分为1%、5%、10%、15%、20%不同浓度含药血清培养液组,FSH组含FSH 25ng/ml,胎牛血清组含15%胎牛血清。ELISA检测E_2、P的分泌量。另设体外培养的颗粒细胞含药血清高、中、低剂量组,生理盐水组、FSH组、无血清组,空白组,分别于1h、2h、6h、12h、24h、48h后ELISA法测定ActA分泌量及免疫组化SP法测定ActRⅡA、Smad2、Smad3表达量。结果免疫组化FSHR阳性率大于95%。15%BSHX含药血清E_2分泌量最高,各组差异有统计学意义,P0.05;各组P分泌量无显著差异,P0.05。BSHX含药血清组ActA分泌量与时间存在一定的依赖性,12h后出现峰值,最佳剂量为中剂量组;各BSHX含药血清组中ActRⅡA、Smad2、Smad3免疫染色主要位于细胞核,且均与时间存在一定的依赖性,12h后出现峰值。结论 BSHX含药血清能促进体外培养的卵巢颗粒细胞增殖和分化,促进其E_2、P的分泌。通过促进ActA的分泌量和上调ActRⅡA、Smad2、Smad3表达来影响ActA/Smads信号通路的传导。     

通脉大生片对肾虚排卵障碍型不孕大鼠卵巢Smad4表达的影响

目的观察通脉大生片对大鼠卵巢形态学改变及信号蛋白Smad4在TGF-β/smads通路中的表达变化及意义。方法建立大鼠肾虚排卵障碍不孕(ASR)模型,通过阴道涂片筛选造模成功大鼠后分组用药5周后,处死大鼠,HE染色观察形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测大鼠卵巢中Smad4蛋白的表达量。结果 1各用药组从卵巢形态学上明显恢复的趋势,镜下可见成熟卵泡和黄体。2与模型组相比,通脉大生片高、中、低剂量组及阳性对照组大鼠卵巢Smad4的表达水平升高(P0.05),以高剂量组及来曲唑组最明显。结论通脉大生片可用于治疗肾虚排卵障碍型不孕,而其促排卵作用可能部分是通过调节Smad4的表达,进而调控卵巢TGF-β/smads信号通路的激活来实现的。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

往来寒热证58例辨证论治探讨

收集我院门诊自2000年10月至2003年9月接诊的往来寒热证患者58例,实验室检查排除疟疾(血涂片均未找见疟原虫),分别从少阳辨证论治33例,从膜原辨证论治25例,疗效满意。     

咳嗽六经辨治初探

六经皆有咳嗽,寒热皆可致咳,治疗上不可拘于一理一方,当穷究其机,辨证施治,方能事半功倍。以六经辨证为纲,分析《伤寒杂病论》对咳嗽的有关论述,以期提高咳嗽的临床疗效。     

中医“治未病”理论的研究

治未病是中医学重要的防治思想,即预防疾病的发生和发展,防惠于未然的预防学思想,即未病之前,防止疾病的发生;已病之后,防止疾病的传变,强调以“预防为主”。本文从治未病的渊源;治未病思想的实质内容;“治未病”理论的应用;“治未病”临床研究进展等几方面解释治未病。     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

老年股骨颈骨折术后的护理

股骨颈骨折是发生于老年人的常见骨科病，以女性多见。因老年人骨质疏松，有机质少，应变力差，所以只需较小扭转暴力就能引起骨折。骨折后，由于骨折部位血供差，骨折不愈合的可能性大，加之患者年老体弱、长期卧床，易发生危及生命的并发症，因此恰当的护理非常重要，现将护理体会介绍如下。