暂时性肝门阻断时门体分流对大鼠肝脏能量代谢的影响

目的 比较暂时性肝门阻断时,门静脉分流和阻断对大鼠缺血再灌注后肝脏能量代谢的影响,为临床上减轻肝缺血再灌注损伤选取手术方式提供参考.方法 将大鼠分为假手术组、实验组和对照组3组,制作门颈静脉转流下大鼠肝脏缺血再灌注模型,观察大鼠术后1h、6h、24h、3d及7d肝脏能量代谢变化.结果 ①术后各时相点对照组RCR值和P/O均显著低于实验组,恢复正常时间对照组也晚于实验组;②实验组于术后各相应时相点肝细胞ATP含量均高于对照组,并且恢复正常也比对照组较早.结论 暂时性肝门阻断时门体分流处理能够改善能量代谢,提高缺血再灌注后肝脏的抗损伤能力.     

大鼠自体肝移植中暂时性门体分流对肝功能和能量代谢的影响

目的 比较暂时性门体分流和阻断对大鼠肝脏冷缺血再灌注后肝功能和能量代谢的影响,为临床上减轻移植肝冷缺血再灌注损伤选取手术方式提供参考.方法 将大鼠分为正常组、分流组和阻断组3组,制作门颈静脉转流下大鼠肝脏冷缺血再灌注模型,观察大鼠的一般情况及术后1 、6 、24 h,3 及7 d肝功能和能量代谢变化.结果 (1)术后1 、6 、24 h,3 及7 d各时点,阻断组大鼠血清ALT(除术后第7 天)及AST值均明显高于分流组(P<0.05).(2)术后除第7天外的其他时相点阻断组线粒体呼吸控制率(RCR)和磷氧化(P/O)均显著低于分流组,恢复正常时间阻断组也晚于分流组.(3)分流组于术后各相应时相点肝细胞ATP含量均高于阻断组,并且恢复正常也比阻断组较早.结论 无肝期门体分流处理能够改善能量代谢,提高缺血再灌注后肝脏的抗损伤能力.     

大鼠自体肝移植中暂时性门体分流对肝功和能量代谢的影响

目的 比较暂时性门体分流对大鼠肝脏冷缺血再灌注后肝功和能量代谢影响影响,为临床上减轻移植肝冷缺血再灌注损伤选取手术方式提供参考。方法 将大鼠分为正常组、分流组和阻断组3组,制作门颈静脉转流下大鼠肝脏冷缺血再灌注模型,观察大鼠的一般情况及术后1 、6 、24h,3 及7 d肝功和能量代谢变化。结果 (1)术后1 、6 、24h,3 及7 d各时点,阻断组大鼠血清ALT（除术后第7 天）及AST值均明显高于分流组(P<0.05)。(2)术后各时相点阻断组RCR值和P/O均显著低于分流组,恢复正常时间阻断组也晚于分流组。(3)分流组于术后各相应时相点肝细胞ATP含量均高于阻断组,并且恢复正常也比阻断组较早。结论 无肝期门体分流处理能够改善能量代谢,提高缺血再灌注后肝脏的抗损伤能力。     

入肝血流阻断对肝硬变大鼠肝脏能量代谢的影响

目的　探讨选择性入肝血流阻断对肝硬变大鼠肝脏能量代谢的影响。方法　观察门静脉转流与非门静脉转流条件下阻断入肝血流不同时程后肝脏能量代谢的变化 ,检测指标包括肝细胞线粒体呼吸控制率 (repiratorycontroara tio ,RCR)、肝组织三磷酸腺苷 (adenosinetirphosphate ,ATP)含量、动脉血酮体比值 (arterialbloodketonebodyratio ,AKBR) ,并与假手术组对照。结果　缺血后肝组织ATP、RCR及AKBR均明显下降 (P <0 0 5 )。再灌注后上述指标逐惭恢复 ,但随缺血时间延长 ,升高幅度明显降低 ,甚至难以恢复。结论　选择性入肝血流阻断对肝硬变大鼠肝脏能量代谢的改变与恢复过程有积极作用。     

缺血预处理对肝线粒体的保护作用

建立大鼠肝脏缺血再灌注模型。将24只健康雄性SD大鼠随机分为假手术、缺血再灌注、10min缺血预处理、20min缺血预处理4组，后两组分别以缺血前短暂缺血再灌注各10min和20min作预处理。采用DiOC6染色后流式细胞仪测线粒体膜电位，化学法测抗超氧阴离子自由基、ATP酶活力。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测肝细胞凋亡状态，透射电镜观察肝组织超微结构的病理形态学变化。此法用来探讨在急性肝脏缺血再灌注损伤中缺血预处理对肝细胞线粒体的保护作用及有效的缺血预处理时间。结果与缺血再灌注组相比，10min缺血预处理组线粒体膜电位明显增高，抗超氧阴离子自由基能力明显增强，ATP酶亦明显减少，而肝细胞凋亡指数则明显下降，线粒体形态表明其肿胀损伤程度亦明显减轻；20min缺血预处理组则变化不明显。提示10min缺血预处理可通过上调线粒体跨膜电位。降低线粒体膜通透性；上调抗超氧阴离子自由基活力以增强肝线粒体抗氧自由基能力，减少氧自由基的合成，从而保护肝线粒体超微结构；下调ATP酶活性使ATP含量升高，电子传递功能恢复正常，从而改善肝功能。减轻肝缺血再灌注损伤；抑制肝脏缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的发生来保护肝线粒体。而20min缺血预处理则不能起到保护作用。     

肝门阻断同时门静脉分流对大鼠肝脏功能影响的研究

目的采用大鼠暂时性肝门阻断模型,分别监测门静脉分流和阻断后大鼠缺血再灌注后肝脏功能的变化,为临床上选取手术方式以减轻肝缺血再灌注损伤提供参考。方法将大鼠分为假手术组、实验组和对照组3组,制作门静脉转流下大鼠肝脏缺血再灌注模型,观察大鼠的一般情况及术后1、6、24h及3、7d肝脏的形态功能变化。结果①实验组术中大鼠胃肠及脾脏无淤血,术后大鼠恢复时间较短,而对照组大鼠可见脾脏明显淤血,术后大鼠精神差,恢复时间延长。②术后1、6、24h及3、7d,实验组大鼠血清ALT及AST值均明显低于对照组(P<0.05)。③实验组在各时相点肝组织损伤均较对照组轻。结论肝门阻断时门体分流处理能够改善肝功能,提高缺血再灌注后肝脏的抗损伤能力。     

川芎嗪预处理在预防大鼠移植肝缺血再灌注损伤中的作用探讨

目的:探讨川芎嗪预处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的作用及可能的机制.方法:将125只雄性SD大鼠随机分成3组:假手术组、对照组(生理盐水作为肝脏灌注液)、实验组(川芎嗪预处理,生理盐水作为肝脏灌注液).假手术组仅结扎肝动脉,对照组和实验组行大鼠原位肝移植,分别于术后1、6、24、72h剖杀各组大鼠各5只,检测各组大鼠血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量以及血清内毒素水平;检测肝脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的含量,观察大鼠肝脏组织病理学和Kuffer' s细胞超微结构改变.结果:实验组大鼠的ALT、AST、TNF-α、IL-1β的表达明显低于对照组,但高于假手术组(P<0.05);实验组炎症反应及Kuffer's细胞活跃程度明显轻于对照组.结论:川芎嗪预处理能抑制kuffer's细胞吞噬活性,减轻大鼠移植肝缺血再灌注损伤.     

门静脉转流对肝硬化大鼠耐受入肝血流阻断时限的影响

目的：探讨门静脉转流对肝硬化大鼠耐受人肝血流阻断时限的影响。方法：观测门静脉转流与非门静脉转流条件下阻断入肝血流不同时程后动物存活率及肝脏能量代谢的变化，包括肝细胞线粒体呼吸控制率（RCR）、肝组织三磷酸腺苷（ATP）含量、动脉血酮体比值（AKBR）。结果：①术后两周存活率：肝硬化大鼠门静脉转流下入肝血流阻断（PBB）-30min组和PBB-45min组为100%，单纯入肝血流阻断（PTC）-30min组、PBB-60min组分别为65%和75％。②肝脏能量代谢：缺血后肝组织ATP、RCR及AKBR均明显下降。再灌注后上述指标逐渐恢复，但随缺血时间延长，升高幅度明显降低，甚至难以恢复。结论：门静脉转流能显著提高肝硬化大鼠常温下耐受入肝血流阻断的时限。     

PEP-1-SOD对缺血再灌注损伤大鼠脑组织线粒体能量代谢及ATP酶活性的影响

目的:研究PEP-1-SOD对缺血再灌注损伤(IRI)大鼠脑组织线粒体能量代谢及ATP酶活性的影响,探讨其脑损伤的保护机制。方法:27只SD大鼠制作缺血再灌注损伤模型,随机分为缺血再灌注(IRI)组、PEP-1-SOD组和SOD组,测定大鼠脑海马组织ATP、ADP、AMP含量及Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性。结果:PEP-1-SOD组ATP、ADP、AMP含量显著高于IRI组及SOD组(分别为P<0.01和P<0.05);SOD组ATP酶活性较IRI组明显升高(P<0.01),PEP-1-SOD组ATP酶活性显著高于SOD组(P<0.05)。结论:PEP-1-SOD可穿透血脑屏障,增加缺血再灌注损伤大鼠脑组织线粒体ATP含量及ATP酶活性,从而保护脑组织。     

缺血预处理对肝缺血再灌注损伤肝实质细胞的影响

目的 通过观察缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤肝实质细胞凋亡影响,探讨肝缺血再灌注损伤机制及肝缺血预处理对肝细胞的保护作用.方法 35只Wistar大鼠,随机分为假手术 (SO)组5只;缺血再灌注3、6、24 h组(IR3 h、IR6 h、IR24 h)各5只;缺血预处理3、6、24 h组(IP3 h、IP6 h、IP24 h)各5只.IR组半肝缺血60 min,再灌注3、6、24 h;IP组为缺血前先行5 min缺血、5 min复流,并重复2次,然后行半肝缺血60 min,再灌注3、6、24 h.分别取材检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、肝组织匀浆丙二醛(MDA).结果IR各组血清ALT、肝组织匀浆MDA均较SO组有显著性升高(P<0.05);经缺血预处理后,ALT、MDA显著下降(P<0.05).结论肝脏缺血再灌注各时间点都有肝细胞损伤,且24 h内随着再灌注时间增加,;缺血预处理能够抑制肝细胞凋亡,减轻肝细胞再灌注损伤.     

丹参及缺血预处理对肝热缺血再灌注损伤的保护作用

目的 应用Wistar大鼠实验，研究丹参，缺血预处理对肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法 以无创血管夹夹闭肝门静脉，肝动脉30min，随后开放血管夹60min，造成肝缺血30min，再灌注60min的模型。然后测定ALT、AST、LDH，丙二醛和过氧化物歧化酶活性并进行病理组织学检查。结果 丹参组及缺血预处理组的实验指标均明显好于肝热缺血再灌注对照组。结论 丹参及缺血预处理对肝热缺血再灌注损伤具有保护作用。     

胃饲乙醇预处理对缺血再灌注大鼠肝脏HSP70表达和缺血再灌注损伤的影响

目的 观察喂饲乙醇预处理对缺血再灌注大鼠肝脏HSP70表达和缺血再灌注损伤的影响.方法 制备缺血再灌注模型大鼠60只随机分为实验组（胃饲乙醇）、实验对照组（胃饲生理盐水）、正常组各60只,对比相关指标.结果 实验组、实验对照组各时间段HSP70、ALT高于正常组,实验组与实验对照组ALT波动变化、HSP70呈不断上升,实验组指标优于实验对照组.结论 胃饲乙醇预处理应用于肝缺血再灌注大鼠,可有效抑制肝损伤.     

Protective effects of ischaemic postconditioning on warm/cold ischaemic reperfusion injury in rat liver: a comparative study with ischaemic preconditioning

Background Ischaemic reperfusion injury （IRI） is inevitable during major liver surgery. Ischaemic preconditioning （IPC） has been proven an effective intervention against hepatic IRI. Recently, it was demonstrated that ischaemic postconditioning （IPO） provided effective cardioprotection on IRI. We evaluated the protective effects of IPO on warm/cold IRI in rat liver by a comparison with IPC and assessed the role of apoptosis in the process.
Methods Warm IRI model （clamping hepatic pedicle for 30 minutes） and cold IRI model （orthotopic liver transplantation with 2 hours cold storage） were established. Each model consisted of 3 groups： （1） control group, normal warm/cold IRI; （2） IPC group, 5 minutes of ischaemia followed by 5 minutes of reperfusion twice prior to warm/cold IRI; （3） IPO group, 30 seconds of reperfusion followed by 30 seconds of reocclusion for three times after warm/cold ischaemia. The levels of serum transaminase, glucose, and γ glutamyltransferase （GGT） in bile, histopathological examination, apoptotic activity of hepatocyte, and apoptosis related protein Fas, at 3 hours after operation were compared. Survival rates one week after intervention were also compared.
Results IPO and IPC protected the functions of hepatocytes and biliary epithelial cells, inhibited the hepatocellular apoptosis by preventing expression of Fas gene, and elevated the one week survival rate compared with control group in both models （P 〈0.05）. IPO and IPC groups were comparable in levels of serum transaminase levels, glucose, and GGT in bile, Fas positive expression index, and one week survival. In cold ischaemic models, IPO had lower apoptotic index than IPC （P 〈0.05）.
Conclusion Compared with ischaemic preconditioning, ischaemic postconditioning is associated with comparable protections of rat liver from warm or cold ischaemic reperfusion injury.     

缺血再灌注损伤对载脂蛋白M表达的影响

目的 探讨肝缺血再灌注损伤时肝内载脂蛋白M(apoM)mRNA及血浆apoM的表达。方法 将40只健康雄性SD大鼠随机分成5组(每组8只)。假手术组(对照组)进腹后仅分离十二指肠韧带，不阻断血流；IR1组灌注0．5h；1R2组缺血60mln后再灌注1．0h；lR3组缺血60min后再灌注2．0h、IR缺血60min后再灌注3．0h。在各时间点活杀大鼠，检测血浆谷丙转氨酶(ALT)水平、肝组织病理变化、血浆apoM蛋白及肝组织apoMmRNA。结果 血浆ALT的水平随着灌注时间的延长而升高，肝组织损伤随着灌注时间的延长而逐渐加重。肝组织apoM mRNA的表达则先有一过性下降(IR1组)，此后随着灌注时间的延长其表达明显增强。血浆apoM蛋白有相同的变化趋势，但其表达的上升有相应的滞后(IR2组)。结论 在肝缺血再灌注损伤过程中，肝脏apoM mRNA的表达和血浆蛋白水平有迅速、明显的变化，提示apoM可能具有急性时相反应蛋白的特性。     

Effects of isoflurane on ICAM-1 expression and neutrophils infiltration in rats with liver ischemia and reperfusion injury

Objective： To establish a rat model of warm partial hepatic ischemia-reperfusion （IR）, and investigate the protective and anti-inflammatory effects of isoflurane on warm hepatic ischemia-reperfusion injury （IRI） in rats. Methods： Thirty-two female Sprague-Dawley rats were divided equally into 4 groups （n-8）： PB-Sham group in which the rats were anesthetized by intraperitoneal injection of pentobarbital sodium （1.0%, 40 mg/kg, PB） and received a sham operation without occlusion of liver blood flow; PB-IR group whose rats underwent partial hepatic IR after anesthesia; Iso-Sham group in which inhalation of 1.0 MAC isoflurane and sham operation was performed; Iso-IR group in which 1.0 MAC isoflurane was inhaled for 4 h and IR was performed. Rat model of warm partial hepatic IR was established by clamping the hepatic arteries and hilar vessels distributing to the left and median lobes to induce partial hepatic ischemia （70%） for 60 rain followed by reperfusion for 3 h. The rats were killed 3 h after declamping, and specimens of liver tissue and blood were obtained. The serum ALT and AST were detected as liver damage markers. Viability of myeloperoxidase （MPO） in liver was measured. The protein level of ICAM-1 in the liver was detected by immunohistochemistry and Western blotting. Results： Rats treated with 1.0 MAC isoflurane during warm partial （70%） hepatic ischemia 60 rain and 3 h reperfusion had significantly lower serum ALT and AST compared with rats anesthetized with pentobarbital sodium subjected to hepatic IRI. The expression of ICAM-1 in hepatic tissue was significantly increased by hepatic IRI after pentobarbital sodium anesthesia. Isoflurane significantly inhibited protein expression of ICAM-1 in hepatic IR injury compared with pentobarbital sodium anesthesia. Viability of liver MPO was significantly increased by hepatic IRI after pentobarbital sodium anesthesia; Isoflurane can significantly inhibit MPO alteration in rat liver ischemia-reperfusion injury compared with rats anesthetized with pentobarbital sodium. Conclusion： Isoflurane anesthesia can attenuate liver IR injury in rats that maybe by inhibiting ICAM-I expression and reducing the infiltration of neutrophils.     

延迟相肢体缺血预处理抑制MAPKs磷酸化减轻兔肝缺血再灌注损伤

目的:研究肢体缺血预处理延迟相对缺血再灌注损伤肝丝裂原活化蛋白激酶家族P38MAPK,P44/P42MAPK和JNK磷酸化水平的影响。方法:健康成年雄性新西兰大白兔36只,随机分为假手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、肢体缺血预处理组(L组),每组12只。C组行假手术;IR组阻断肝十二指肠韧带25 min,再灌注3 h;L组先分离双后肢股动静脉,阻断5 min后开放10 min,重复3次,24 h后阻断肝十二指肠韧带25 min,再灌注3 h。检测血浆ALT水平,观察肝组织与细胞的结构变化。于再灌注30 min时每组随机取5只兔的左肝外叶肝组织,Western印迹检测肝组织P38,P44/P42和JNK蛋白激酶磷酸化水平变化。结果:与C组比较,再灌注后IR组、L组兔血浆ALT显著升高(P<0.01),但L组升高程度小于IR组(P<0.01)。光镜与电镜结果显示再灌注3 h,IR组肝细胞大小不一,变性坏死,肝血窦扩张,大量红细胞淤滞,明显可见炎性细胞浸润,肝小叶结构破坏;L组肝细胞水肿,有少量变性坏死,炎性细胞散在浸润,但肝小叶结构存在。缺血再灌注30 min兔肝组织磷酸化P38MAPK,P44/P42 MAPK和JNK较C组明显升高(P<0.01),但L组JNK,P38MAPK磷酸化水平明显低于IR组(P<0.05)。结论:肢体缺血预处理对肝缺血再灌注有延迟性保护作用,其机制与抑制缺血再灌注肝组织JNK,P38蛋白激酶的磷酸化有关。     

Chemerin在大鼠肝缺血再灌注损伤时库普弗细胞中的表达和意义

目的:探讨大鼠肝缺血再灌注损伤中库普弗细胞(KCs)中Chemerin的表达及意义。方法:48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Control group),缺血再灌注组(IRI group)0h组、1h组、6h组、12h组、24h组。建立大鼠常温下部分肝缺血再灌注损伤模型,于再灌注后0、1、6、12、24h分离库普弗细胞(KCs),用免疫组化和RT-PCR测定KCs中Chemerin蛋白与mRNA的表达。结果:假手术组、0h组KCs中无或少量Chemerin,肝缺血再灌注损伤后1h KCs中Chemerin蛋白和mRNA表达较假手术组明显升高(P<0.05),12h达到最高峰,至24h仍有高表达。结论:KCs可能是大鼠肝脏HIRI局部产生Chemerin的主要来源之一,其可能在大鼠肝缺血再灌注损伤中起重要作用。     

热休克蛋白70对大鼠心脏停搏供体肝移植的保护作用

目的：采用心脏停搏供体大鼠原位肝移植模型,观察热休克蛋白70（HSP70）对心脏停搏后不同时间的供肝缺血再灌注损伤的影响。 方法：以缺血预处理方法诱导大鼠肝脏组织产生HSP70,以预处理(IP)与否及供体心脏停搏45 min或60 min的不同,将供体大鼠分为4组(IP-45,IP-60,C-45和C-60)。于肝移植术后1 h采血检测肝功能,术后1 h及7 d切取肝脏,观察肝脏病理学改变,并观察各组大鼠术后存活时间。结果：缺血预处理后24~48 h,肝组织HSP70表达明显增强;肝移植术后1 h,血清ALT和AST水平IP组明显低于对照(C)组（P<0.05）;术后7 d,IP组移植肝光学显微镜下肝小叶结构完好,汇管区有少量淋巴细胞浸润,C组移植肝则出现了较多的肝细胞坏死和气球样变。C-45和C-60组1周存活率分别为12.5%和0;而IP-45和IP-60组1周存活率分别为62.5%和37.5%。 结论：HSP70明显改善术后肝脏功能和减轻肝脏病理学改变,显著提高心脏停搏供体肝移植的存活率,HSP70对心脏停搏供体肝移植缺血再灌注损伤具有明显保护作用。