中隔子宫患者子宫内膜血管内皮生长因子受体KDR和Flt-1的表达

目的 探讨中隔子宫患者中隔表面、子宫外壁内膜及正常非不孕不育女性子宫内膜中KDR或Flt-1mRNA量的差异.方法 用RT-PCR检测38例子宫中隔患者外侧壁与中隔内膜组织及20例正常对照组宫腔内膜KDR和Flt-1 mRNA量.结果 外侧壁子宫内膜组织KDR及Flt-1 mRNA相对表达强度分别为2.51±1.12和1.22±0.51;中隔内膜组织相对表达强度分别为1.23±0.67和0.71±0.31.而正常对照组子宫内膜组织KDR及Flt-1 mRNA相对表达强度分别为2.61±1.20和1.31±0.48.比较发现,中隔子宫外侧壁内膜组织中KDR和Flt-1 mRNA相对表达强度与正常对照组差异无统计学意义,而覆盖于中隔上的子宫内膜组织中两者的相对表达强度明显低于正常对照组(P<0.05);中隔子宫覆盖于中隔上的子宫内膜组织中KDR和Flt-1 mRNA相对表达强度明显低于外侧壁(P<0.05).结论 子宫中隔患者覆盖于中隔的内膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)受体KDR和Flt-1在mRNA水平上有一定程度的缺陷,当胚胎种植于中隔子宫的中隔上时并不影响胚胎着床,可产生不良的生殖结局.     

细胞色素P450 1A1在子宫腺肌病组织中的表达

[摘要] 目的 探讨细胞色素P450 1A1(CYP1A1)mRNA在子宫腺肌病组织中的表达及意义。方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应法检测42例子宫腺肌病(研究组)异位内膜及在位子宫内膜以及40例非子宫腺肌病患者（对照组）子宫内膜组织中CYP1A1 mRNA的表达。结果 子宫腺肌病异位子宫内膜、在位子宫内膜及对照组子宫内膜CYP1A1 mRNA相对表达强度分别为0.62±0.15、0.42±0.12、0.40±0.14，子宫腺肌病异位子宫内膜CYP1A1 mRNA相对表达强度明显高于在位子宫内膜及对照组子宫内膜（P均＜0.01）。子宫腺肌病在位子宫内膜与对照组子宫内膜之间CYP1A1 mRNA相对表达强度比较无显著性差异（P＞0.05）。子宫内膜CYP1A1 mRNA相对表达强度增殖期与分泌期比较两组均无显著性差异（P＞0.05）。结论 异位子宫内膜组织中CYP1A1 mRNA表达明显增加可能与子宫腺肌病的发生和发展相关。     

血管内皮细胞生长因子受体在子宫内膜异位症中表达的研究

目的探索血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体(Flt1,KDR)在子宫内膜异位症(简称内异症)患者的异位及在位子宫内膜组织中的定位及表达情况。方法分别采用免疫组化、Western印迹法和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测内异症患者37份在位子宫内膜组织、34份卵巢子宫内膜异位囊肿组织、15份腹膜红色病变组织、4份腹壁子宫内膜异位灶组织,以33例非内异症患者的在位子宫内膜组织作为对照,比较不同组织中Flt1、KDRmRNA及蛋白的阳性表达率和表达强度的差异。结果Flt1、KDR蛋白质除在血管内皮细胞中表达外,还在子宫内膜的腺细胞和间质细胞中表达。Flt1、KDR在内异症患者子宫内膜的阳性表达率分别为94.3%,91.4%,高于卵巢巧克力囊肿(分别为74.3%,77.1%)两者比较P<0.05,与同期非内异症患者在位子宫内膜组织(93.8%,90.6%,P>0.05)的表达率相仿。Flt1、KDR在内异症患者在位子宫内膜组织的核酸水平[吸光度(A)比值]分别为2.4±1.2,3.0±1.4;蛋白质水平灰度值分别为31±17,36±24;同期卵巢巧克力囊肿组织中的核酸水平(A)比值分别为1.5±0.9,1.8±1.0;蛋白质水平灰度值分别为17±6,20±11(P<0.05);对照组子宫内膜组织的核酸水平(A)比值分别为1.9±0.8,2.3±1.3;蛋白水平灰度值为24±18,25±16(P>0.05)。结论VEGF可能通过子宫内膜细胞上的相应受体而发挥一定的生物学作用。内异症患者的异位子宫内膜中Flt1、KDR的表达可能与血管形成相关。     

CD44基因内含子9mRNA在子宫内膜癌中的表达及意义

目的:探讨子宫内膜癌组织中CD44基因内含子9mRNA的表达情况及临床意义。方法:采用RT-PCR法检测31例子宫内膜癌组织,10例子宫内膜不典型增生组织,10例正常子宫内膜组织中CD44基因内含子9mRNA的表达情况。结果:正常子宫内膜组织中无CD44内含子9mRNA的表达,子宫内膜癌与子宫内膜不典型增生组织中有CD44内含子9mRNA表达;二者表达率分别为83.87％和70.00％,差异无显著性(P>0.05),相对含量分别为85.26±5.40和79.74±4.23,差异有显著性(P<0.05);在子宫内膜癌中CD44内含子9mRNA的表达情况与其临床病理特征无关(P>0.05)。结论:CD44基因内含子9表达与子宫内膜癌的早期发生有关。     

子宫异位内膜组织中MMP-7的表达

目的:研究基质金属蛋白酶7(MMP-7)在子宫内膜异位症(内异症)中异位内膜组织中的表达,探讨MMP-7基因在子宫内膜异位症发生中的作用。方法:分别选取内异症异位内膜组织(研究组)27例、正常子宫内膜(对照组)20例为研究对象,应用半定量逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测MMP-7 mRNA的表达。结果:①子宫内膜异位症中异位内膜中MMP-7基因的mRNA相对表达量为(0.6981±0.2351),明显高于正常子宫内膜组织(0.5250±0.1931),差异有显著统计学意义(P<0.05)。②内异症异位内膜组织中MMP-7基因mRNA的表达强度有随美国生育学会修订的内异症分期法(r-AFS)的临床分期升高而增加的趋势,但差异没有显著性(P>0.05)。结论:MMP-7在异位内膜组织中呈高表达,认为MMP-7在子宫内膜异位的发生发展中可能发挥一定的作用。     

雌激素对子宫内膜上皮细胞ERα mRNA表达的影响及其机制探讨

目的探讨雌激素对子宫内膜上皮细胞雌激素受体α(ERα)mRNA表达的影响及其可能的作用机制。方法采用RT-PCR方法检测分别经雌激素和他莫昔芬处理后的原代培养正常子宫内膜细胞ERα和DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)mRNA的表达变化。结果雌激素组ERα和DNMT3bmRNA平均表达强度为0.17±0.03和0.24±0.11;他莫昔芬组为0.19±0.05和0.23±0.14;对照组为0.27±0.08和0.29±0.13。雌激素组ERαmRNA平均表达强度显著低于对照组(t=2.69,P<0.05),而他莫昔芬组的ERαmRNA平均表达强度与对照组差异无显著性意义(t=2.23,P>0.05)。DNMT3bmRNA水平在3组间差异均无显著性意义(F=0.52,P>0.05)。结论雌激素可以影响原代培养的子宫内膜上皮细胞ERαmRNA的表达,表现为降调节作用;他莫昔芬对原代培养子宫内膜上皮细胞ERα基因表达的影响不同于雌激素;雌激素对原代培养子宫内膜细胞DNMT3b基因转录的影响不明显。     

ezrin和细胞骨架在子宫内膜异位症中的表达与定位

目的 通过检测子宫内膜异位症中的ezrin、微丝及微管的表达及定位,探讨子宫内膜异位症中ezrin与细胞骨架的改变及关系。 方法 利用免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测13例非子宫内膜异位症中正常子宫内膜、11例子宫内膜异位症中在位及异位内膜组织中ezrin、微丝及微管的表达及定位;用荧光强度代表表达强度,通过对荧光强度的半定量测定,比较各组间ezrin、微丝及微管的表达。其中,荧光强度分析采用SPSS 11.5 for windows软件进行统计分析,配对的2组之间的均数分析采用t检验。 结果 ezrin在异位子宫内膜间质内呈弥散分布,失去正常细胞极性,ezrin蛋白在异位子宫内膜间质中的表达(47.88±6.75)显著高于正常子宫内膜间质(8.64±1.61)及在位子宫内膜间质(7.97±0.93)的表达水平(P＜0.05);微丝在异位子宫内膜间质及腺上皮组织中表达极性均不明显,微丝在异位子宫内膜间质(71.36±4.27)中的表达显著高于在位子宫内膜间质(35.98±5.76)及正常子宫内膜间质(40.68±6.12)的表达水平(P＜0.05),而在腺上皮组织中的表达(上述3组中表达分别为21.74±2.28,37.99±6.60,41.54±2.14)则相反(P＜0.05);各组间微管表达差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 子宫内膜异位症的细胞迁徙、种植过程中伴随了细胞骨架的重构;ezrin与子宫内膜异位症的形成及细胞骨架重构有关;间质细胞在子宫内膜异位症中细胞迁徙与侵袭过程中扮演了主要角色。      

整合素α5及整合素β3在子宫内膜异位症中表达的研究

目的探讨整合素α5、β3在子宫内膜异位症(EM)患者在位和异位内膜中的表达. 方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对18例EM患者在位内膜、异位内膜(研究组)和18例非EM患者子宫内膜(对照组)行整合素α5、β3 mRNA检测.同期放射免疫法测定EM患者体内雌二醇(E2)、孕酮(P)、糖类抗原125(CA125)水平,对EM患者术中行美国生殖学会评分系统(AFS-r)评分. 结果整合素α5 mRNA在EM患者在位内膜、异位内膜及对照组子宫内膜中表达水平分别为0.773±0.113、1.077±0.032、0.924±0.120,各组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05);整合素β3 mRNA在EM患者在位内膜、异位内膜及对照组子宫内膜中表达水平分别为0.653±0.080、0.963±0.132和0.763±0.090,各组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05).EM组血清E2水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.793、0.917;而P水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均无相关(P>0.05).CA125水平与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.763、0.754,AFS-r评分与异位内膜整合素α5、β3 mRNA表达均呈正相关(P<0.05),相关系数分别为0.801、0.773. 结论EM异位内膜组织中整合素α5、β3高表达可能与EM黏附发生有关,整合素α5、β3表达受雌激素调控.     

核受体共激活因子AIB1在子宫内膜癌组织中的表达及其意义

目的 研究子宫内膜癌组织中核受体共激活因子（AIB1）mRNA和蛋白质的表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测51例子宫内膜癌、13例不典型增生子宫内膜、15例复合型增生子宫内膜、19例单纯型增生子宫内膜和18例正常子宫内膜组织中AIB1 mRNA表达;同时采用免疫组化技术检测AIB1蛋白的表达。结果 子宫内膜癌组织中AIB1呈过表达状态。内膜癌组织中AIB1 mRNA阳性表达率和相对表达水平明显高于增生子宫内膜组织及正常子宫内膜组织（2^χ=11.025,F=6.930,P〈0.01）。不典型增生子宫内膜组织中AIB1 mRNA阳性表达和相对表达水平高于复合性增生内膜组织和单纯性增生内膜组织（χ^2=6.133,F=4.213,P〈0.05）。内膜癌组织中AIB1蛋白阳性表达率明显高于增生内膜组织和正常子宫内膜组织（χ^2=13.546,P〈0.01）。子宫内膜癌组织、异常增生内膜组织及正常子宫内膜组织间AIB1蛋白表达强度不同,三者间比较差异有显著性（H=6.023,P〈0.01）。AIB1蛋白表达强度在子宫内膜癌组织中呈现过表达,在不典型增生内膜组织中为高表达,在正常组织中为阴性表达或弱表达;AIB1 mRNA和蛋白的过表达与肿瘤的病理类型、组织学分级、淋巴结转移和病人的年龄无关（P〉0.05）,但与肿瘤组织的肌层浸润深度及ERα蛋白表达有关（χ^2=4.832、4.674,t′=2.201、2.362,P〈0.05）。结论 AIB1过表达发生在子宫内膜癌的早期和癌前病变阶段,过表达的AIB1可能在子宫内膜癌癌变发展过程中发挥作用。     

SLE患者血管内皮生长因子受体Flt和KDR的表达及相关性

目的:探讨血管内皮生长因子受体flt-1及KDR在系统性红斑狼疮(SLE)皮损中的表达及意义。方法:免疫组化法(SP)检测SLE患者皮损中flt-1与KDR蛋白的表达与分布特征,同时检测皮损中的微血管密度(MVD)。结果:(1)在表皮组织中flt-1与KDR在患者组与正常对照组中均有表达,但表达强度差异无统计学意义(P>0.05),正常对照组中flt-1与KDR均匀表达于表皮全层,而患者组flt-1与KDR在颗粒层表达最强,其中SLE活动期最强,稳定期次之。(2)真皮组织中flt-1与KDR主要表达在真皮乳头微血管上,且患者组真皮乳头微血管上的表达程度要明显高于正常对照组(P<0.01),活动期最强,稳定期次之。(3)患者组皮损真皮乳头血管MVD明显高于正常对照组(P<0.01),真皮乳头微血管flt-1与KDR阳性表达组的MVD明显大于阴性表达组的MVD(P<0.01)。flt-1与KDR与MVD三者之间任何两者均存在正相关关系(flt-1与KDR相关系数为0.88,MVD与flt-1相关系数为0.66,MVD与KDR相关系数为0.82,P均<0.01)。(P<0.05)。结论:SLE患者皮损中VEGF受体flt-1与KDR蛋白均高表达。真皮乳头微血管flt-1与KDR的表达与真皮乳头血管的生成存在正相关关系。     

子宫内膜癌中VEGF-C及其受体mRNA的表达及临床意义

目的 研究子宫内膜癌组织中血管内皮生长因子C及其受体mRNA的表达情况,分析其在肿瘤转移中的作用.方法 采用RT-PCR法分析48例新鲜子宫内膜癌组织标本中VEGF-C/KDR/Flt-4mRNA的表达情况,并分析其与各临床病理参数之间的关系.结果 48例子宫内膜癌组织中的VEGF-C及其受体mRNA表达率明显高于正常子宫内膜组织,肿瘤组织中VEGF-CmRNA表达与Flt-4mRNA的表达呈显著正相关.结论 VEGF-C可能在子宫内膜癌转移尤其是淋巴转移中起重要作用,是一个反映病人淋巴转移和预后的良好指标.     

B超诊断纵隔子宫14例

目的探讨B超诊断纵隔子宫的临床应用价值.方法对经子宫、腹腔镜联合检查或三维超声重建成像(3D-US)确诊及分型的14例纵隔子宫的B超声像图分析.结果该组14例中10例B超诊断为部分性纵隔子宫,2例B超诊断为完全性纵隔子宫,1例B超诊断为完全性纵隔子宫合并阴道纵隔,1例正常.B超表现有:子宫体腔内膜分离征象13例,具有两个子宫颈管声像3例,具有阴道纵隔声像1例,当时显示正常1例.结论B超对于纵隔子宫的分型、诊断具有重要的临床意义.     

VEGF受体flt-1和KDR在骨髓间充质干细胞中的表达及意义

目的:观察血管内皮生长因子(VEGF)受体flt1和KDR在成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的表达情况,探讨MSCs分化为血管内皮细胞的可能性。方法:采用Percoll(1.073g·mL-1)分离液分离骨髓单个核细胞,体外培养MSCs,流式细胞术分析鉴定MSCs的纯度,在激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)下观察flt1和KDR的表达,RTPCR检测VEGF作用下flt1及KDR表达改变情况。结果:经Percoll分离、体外培养扩增的MSCs,细胞纯度可达95%左右;flt1和KDR定位于MSCs的胞膜及胞浆;经VEGF处理的MSCs和flt1mRNA的表达较对照组增强,KDRmRNA的表达无明显改变。结论:培养的MSCs在体外稳定扩增,具有VEGF受体,传导VEGF的刺激,在适宜的环境和诱导因子的作用下,MSCs有望分化为血管内皮细胞。     

非黑色素性皮肤癌组织中血管内皮生长因子及其受体1和受体2的表达

目的:检测皮肤鳞状细胞癌(SCC)和基底细胞癌(BCC)组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体1(Flt-1)、受体2(KDR)的表达。方法:应用免疫组化SP法检测26例皮肤SCC、18例BCC组织中VEGF、Flt-1和KDR的表达。取10例正常皮肤组织标本作对照。结果:皮肤SCC、BCC和正常皮肤组织中VEGF的表达水平分别为(129.05±9.93)、(119.40±9.37)及(85.25±12.98),Flt-1的表达水平分别为(130.48±12.02)、(116.90±13.45)及(82.19±9.15),KDR的表达水平分别为(136.60±6.67)、(120.95±6.33)和(85.43±9.33),3组间VEGF、Flt-1和KDR蛋白的表达差异均有统计学意义(F分别为83.418、78.137和169.125,P均<0.001)。皮肤SCC组织中VEGF与Flt-1(r=0.773,P<0.001)、VEGF与KDR(r=0.676,P<0.001)、Flt-1与KDR(r=0.718,P<0.001)的表达均呈正相关。结论:VEGF及其受体的过表达可能与非黑色素性皮肤癌的发生有关。     

VEGF反义寡核苷酸对人胆囊癌细胞VEGF、Flt-1及KDR mRNA和蛋白水平表达的影响

目的 体外研究Oligofectamine介导的血管内皮生长因子（VEGF）反义寡核苷酸（ASODN）转染对人胆囊癌细胞VEGF、Fit-1及KDR在mRNA和蛋白水平的表达及生长增殖和凋亡的影响。方法运用Oligofectamine介导的VEGFASODN和SODN转染人胆囊癌细胞GBC-SD,半定量RT-PCR检测各组细胞VEGF、Fit-1及KDRmRNA转染前后不同时间的表达变化、ELISA测定转染后各组细胞培养上清液VEGF蛋白浓度。结果ASODN组及ASODN＋Oligofectamine组都能显著抑制VEGF、Fit-1及KDRmRNA的表达,且VEGFASODN＋Oligofectamine的抑制作用比ASODN更强（P〉0．05）。ELISA测定结果显示ASODN组及ASODN＋Oligofectamine组均抑制VEGF蛋白的分泌（P〈0．05）,且ASODN＋Oligofectamine组的VEGF蛋白浓度低于ASODN组（P〉0．05）。结论VEGFASODN能抑制人胆囊癌细胞VEGF、Fit-1和KDR在mRNA水平的表达和VEGF蛋白的表达,从而促进GBC-SD细胞的凋亡;Oligofectamine能明显增强VEGFASODN的抑制效果。     

血管内皮生长因子及其受体Flt-1在乳腺癌中的表达及意义

目的　试图揭示血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (Flt 1)在乳腺癌组织中的表达规律 ,探讨其与血管生成和肿瘤浸润、转移等生物学行为的关系。方法　应用原位杂交和免疫组织化学技术 ,检测 4 8例乳腺癌组织中VEGF和Flt 1的mRNA和蛋白表达特性。结果　乳腺癌细胞高表达VEGFmRNA和蛋白 ,阳性率分别为 75 %、70 8% ,而血管内皮细胞几乎不表达 ;血管内皮细胞主要表达受体Flt 1mRNA和蛋白 ,阳性血管数分别为 2 6个 / 0 72mm2 ± 12个 / 0 72mm2 、2 4个 / 0 72mm2 ± 12个 / 0 72mm2 ,而少数癌细胞有少量表达 ;VEGF和Flt 1高表达组血管密度明显高于低表达组 ;VEGF和Flt 1表达与组织学分级和淋巴结转移密切相关。结论　VEGF以旁分泌途径促进乳腺癌血管形成 ,并参与肿瘤浸润和淋巴道转移过程 ,检测VEGF和Flt 1表达可做为判定乳腺癌血管生成、恶性度以及浸润转移等生物学行为的可靠指标。     

电针对急性脑梗死大鼠VEGF/Flt-1基因及其蛋白表达的影响

[目的] 以大脑中动脉阻塞（MCAO）大鼠为研究对象,通过观察血管内皮生长因子及其受体（VEGF/Flt-1）基因及其蛋白表达的变化以探讨电针对急性脑梗死大鼠血管新生的干预机制。[方法] 将120只Wistar大鼠随机分为3组,即空白组、模型组、电针组,模型组和电针组按术后3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、12 d各分为7个时相组,每时相各8只。各组造模后,电针组依时相进行电针人中穴的治疗。各组大鼠依时间段处死后,进行实时荧光定量聚合酶连反应（PCR）及免疫组化的检测。[结果] 电针组VEGF/ Flt-1的mRNA及蛋白表达均较模型组有显着上调。[结论] 电针对急性脑缺血大鼠VEGF/ Flt-1的表达有良性调整作用,可促进缺血半暗带的血管新生。