三种固定液对神经纤维冰冻切片固定效果之比较

目的:观察比较10%甲醛、丙酮和Bouin三种固定液对神经纤维的固定效果,为临床做出更好的神经纤维的快速冰冻切片提供实验基础.方法:取健康大鼠双侧坐骨神经,冰冻切片后分别用三种固定液固定,然后做HE染色,观察各自的组织结构及染色情况.结果:10%甲醛固定的神经纤维组织结构较清楚但是组织发生收缩;丙酮固定的神经纤维染色效果较好,组织没有发生收缩;Bouin固定液固定的神经纤维结构和染色都比较好但是组织收缩最明显.结论:三种固定液都可用于固定神经纤维,但丙酮效果最好.     

冰冻切片免疫荧光中组织固定方法研究

目的通过对3种不同固定液对肝组织冰冻切片免疫荧光过程中固定情况的比较,探寻保存抗原最佳固定效果的方法。方法取Wistar大鼠肝脏,OCT包埋后置于冰冻机切片,片厚8～10μm。分别用10%甲醛、丙酮和1%多聚甲醛3种固定液固定后,进行免疫荧光染色,经Image-pro图像分析软件及单因素方差分析统计,比较其染色效果。结果丙酮固定的肝组织的免疫荧光组织结构清晰,核浆对比度好,其Heppar肝细胞抗原的阳性面积为(73.2±1.2)%,与10%甲醛(46.2±1.5)%及1%多聚甲醛(62.2±1.1)%固定的肝组织比较差异有统计学意义。结论在保存肝组织中抗原活性方面,相对于10%甲醛和1%多聚甲醛液,以丙酮固定液固定效果最好。     

脱钙液的组分与处理时间对骨髓活检组织HE和免疫组化染色的影响

目的：探讨不同组分的脱钙液及脱钙时间对骨髓活检组织HE染色和免疫组化染色效果的影响。方法：收集36例骨髓活检穿刺组织，分为10%硝酸甲醛液(A液)、10%盐酸甲醛液(B液)和30%甲酸甲醛液(C液)3组，每组12例，分别观察各组的脱钙时间。另收集5例骨髓活检穿刺组织，将同一例标本分成两份，观察不同组分的脱钙液和脱钙处理时间对HE染色和免疫组化染色效果的影响。结果：A液、B液的脱钙时间比C液短；3种方法的HE染色效果均较好；而C液脱钙2 h的Ki67免疫组化染色效果好，但其他方法的Ki67免疫组化染色效果欠佳。结论：采用30%甲酸甲醛液处理2 h的脱钙法，实验操作简便，HE染色和免疫组化染色效果较为满意。     

三种固定液对眼球组织固定效果的比较研究

目的从甲醛-戊二醛混合液、Davidoson液和10％福尔马林三种固定液中优选一种,用于对眼球组织的固定。方法取SD大鼠和新西兰兔的双侧眼球,分别用三种固定液固定,然后做成5μm厚的切片并HE染色,观察各自的组织结构及染色效果。结果用甲醛一戊二醛混合液固定的眼球组织,大鼠眼球切片厚度5μm,而新西兰兔切片时厚度8μm,才能切出完整的切片;Davidoson液和10％福尔马林固定的眼球,切片厚度5μm即可。HE染色后,10％福尔马林固定的眼球组织结构不完整,而Davidoson液固定后的眼球,结构清晰、组织完整。结论Davidoson液对大鼠和新西兰兔的眼球固定效果均佳,甲醛-戊二醛混合液对大鼠眼球固定效果也较佳。     

两种固定液对肺组织固定效果的比较

目的:比较Bouin和10%甲醛两种固定液对正常肺组织的固定效果。方法:取正常小鼠肺组织,分别用Bouin和10%甲醛两种固定液,按料液比1∶20固定24 h,常规制备肺组织石蜡切片,HE染色;光镜下分别在100倍和400倍比较两种切片的组织结构和染色情况并统计高倍镜下清楚细胞数;应用t检验进行统计分析。结果:Bouin固定的肺组织在低倍镜下见解剖结构无分离,组织着色均匀,细胞内外结构清晰,高倍镜下支气管上皮细胞核与质界限分明,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞清晰且易于辨别;10%甲醛固定的肺组织切片染色后,在低倍镜下观察效果与Bouin固定的肺组织切片无显著差异,高倍镜下支气管上皮细胞核与质界限不清,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞结构模糊,经t检验两者差异有统计学意义(P<0.001)。结论:Bouin固定的肺组织其HE染色效果较好,为肺组织切片的制备提供参考。     

不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片质量的影响

目的 探讨不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片HE染色效果.方法 应用SD大鼠肝脏组织分别在动物空腹和空腹条件下,选择三种常规的固定液：体积分数10％甲醛固定液、Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液,对肝脏组织进行固定、石蜡包埋、切片和HE染色,观察动物空腹与未空腹条件下组织固定对切片质量的影响,以及不同固定液对肝脏组织切片质量的影响.结果 在未空腹的条件下,肝脏组织结构显示不清晰,呈水样变性的形态改变;Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液固定的组织结构更清晰,但是切片色泽不如体积分数10％甲醛固定液的鲜亮.结论 大鼠是否处于空腹状态对肝脏组织结构影响很大,三种固定方法对大鼠肝脏组织切片质量影响差异不大.     

不同固定方法对冰冻切片间接免疫荧光结果的影响

目的：寻找一种冰冻切片间接免疫荧光染色以及HE染色过程中最佳的组织固定方法。方法：取健康成年小鼠双侧睾丸冰冻切片,分别采用3种方法进行固定：①丙酮4℃固定15分钟,-20℃保存24h;②95％酒精4℃固定15分钟,-20℃保存24h;③切片-20℃保存24h后,再用4℃丙酮固定15分钟。然后做间接免疫荧光和HE染色,观察组织结构及染色情况。结果：4℃丙酮固定的组织切片HE染色以及间接免疫荧光效果良好。-20℃保存24h后,4℃丙酮固定15分钟的冰冻切片HE染色和间接免疫荧光结果最差。结论：酒精和丙酮都可以固定组织,但是4℃丙酮固定效果最好。     

大鼠眼部晶状体标本石蜡切片的改良制作方法

目的:探讨应用改良固定液和加压脱水法制作大鼠晶状体石蜡切片的效果。方法:将大鼠晶状体投入到由甲醛、冰醋酸和丙酮组成的改良固定液中固定后制成石蜡切片,经HE染色后在显微镜下观察。结果:晶状体组织结构完整清楚。结论:此改良固定液和加压脱水法优于其它方法,是适合大鼠眼部晶状体标本石蜡切片的一种有效方法。     

不同固定液及固定时间对小鼠肝组织结构的影响

目的: 研究小鼠肝组织的最佳固定液及切片制作方法.方法:健康雄性成年昆明鼠,腹腔麻醉下取小鼠的肝脏中叶,分别入10%福尔马林、4%多聚甲醛、Bouin液及AAF液固定,固定时间为12、24及48 h.常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片,HE染色,观察比较不同固定液、不同固定时间下小鼠肝组织的光镜结构.结果: 10%福尔马林、4%多聚甲醛固定的肝组织小叶结构完整、清晰,肝细胞界限清楚,着色好,以固定24 h最为理想, 随固定时间延长,细胞出现过度收缩,细胞间隙有轻度增大,胞浆减少且部分细胞出现小空泡.Bouin液及AAF液固定的肝组织各时间点的肝细胞结构均不够完整,界限不清,胞浆中出现空泡,自溶现象明显.结论:肝组织固定剂首选10%福尔马林及4%多聚甲醛,固定时间以24h效果最佳.     

六种固定液对小鼠角膜固定效果的比较

目的观察6种不同固定液固定下,小鼠角膜的组织形态学特征并筛选出适合角膜固定的固定液。方法取60只NIH小鼠眼球,随机分为6组,每组10只,分别固定于6种固定液中,即95%乙醇、10%中性甲醛、Bouin’s液、甲醛-乙酸固定液和Davidson’s液。固定完成后,标本经80%、95%、100%梯度酒精脱水,TO型生物制片透明剂透明,石蜡浸泡,最后石蜡包埋。石蜡切片厚度均为4μm,分别做HE染色,显微镜下观察形态学特征并对角膜各区域厚度进行测量分析。结果不同固定液固定的小鼠角膜组织形态及厚度各具特征,而甲醛-乙酸液固定后的角膜组织细胞形态改变小。结论甲醛-乙酸液固定后组织细胞形态改变小,是比较合适的小鼠角膜固定液。     

降低解剖教学标本甲醛气味的实验研究

目的：研究比较降低局解教学标本中甲醛气味的3种防腐固定液配方。方法：实验家兔分为3组，分别用固定液1(30％乙醇、10％甘油、2％苯甲酸、3％甲醛)、固定液2(前3项同1、2％甲醛)、固定液3(前3项同1、1％甲醛)灌注固定家兔，10％甲醛浸泡6个月。再分别用处理液1(1％食用香料、10％氨水)、处理液2(1％食用香料、6％氨水)、处理液3(1％食用香料、3％氨水)再次灌注动物，并在相应处理液中浸泡6个月，大体解剖观察色泽、韧性并结合HE染色，观察腓肠肌、肝脏形态。结果：在3组标本中第3组香味最浓，甲醛气味最淡，而且肌组织柔软，色泽暗红，有利于解剖操作。HE染色显示肌细胞、肝细胞形态完整。结论：采用第3种固定液和处理液处理的标本色泽韧性较好并且明显减少了甲醛气味的刺激。     

固定液对恒冷箱切片组织结构与染色效果的比较观察

对Ｗｉｓｔａｒ大鼠６种器官进行恒冷箱新鲜冰冻切片,采用９种固定液分别固定切片,在同等条件下做Ｈ．Ｅ染色,观察不同固定液对器官组织结构与染色效果的影响,以寻找适用于恒冷箱切片的最佳固定液．结果表明：１０％中性甲醛固定的切片,器官的组织结构清晰,染色好,镜下与石蜡切片相似,我们推荐在恒冷箱切片Ｈ．Ｅ染色时选用１０％中性甲醛作为固定液,这对提高恒冷箱切片染色技术和临床病理快速诊断的准确性,有一定指导意义。     

保证免疫组化染色工作质量的途径

免疫组化染色是病理诊断的常规手段.总结我院病理科近10年开展免疫组化染色工作的实践,探讨提高免疫组化染色工作质量的途径. 　　1 组织固定 　　组织标本离体后一般30 min内应进入固定液.一种理想的固定液即要保持组织结构或细胞形态的完整,又不损害组织细胞内有效成分和抗原性.常用的固定液为10%中性缓冲福尔马林,这种固定液能保持长时间的稳定,固定液时间一般为6～12 h,不宜超过24 h,固定时间越长,抗原决定簇被封闭的可能性就越大.……     

一种优化的大鼠视网膜组织石蜡切片制作方法

目的针对大鼠视网膜石蜡切片过程中易出现标本脱离及断裂分离的问题,寻找并优化大鼠视网膜石蜡切片的制作方法并评估效果．方法分别用10％多聚甲醛固定液;4％多聚甲醛固定液;单独固定及使用4％多聚甲醛、95％酒精、冰醋酸混合固定液（FAA固定液）;预处理后再使用10％多聚甲醛分别固定等4种方法对大鼠视网膜组织进行固定,HE染色后显微镜下进行观察．结果单独使用10％多聚甲醛以及4％多聚甲醛固定均出现视网膜脱离及各层结构断裂分离现象,但经FAA固定液预处理的视网膜切片HE染色后颜色鲜明均匀,虽部分区域视网膜偶有脱离,但不易脱片,各层结构完整,未出现断裂分离．结论经FAA固定液及多聚甲醛处理过的视网膜石蜡切片固定效果明显优于单独使用多聚甲醛,甲醛浓度对HE染色结果无明显影响．     

去氧核糖核酸Feulgen染色方法的改进

Ｆｅｕｌｇｅｎ染色是经典显示去氧核糖核酸的方法 ,该法要求用Ｃａｒｎａｙ氏液固定的新鲜组织效果最好 ,洒精———甲醛液次之 ,单纯甲醛固定欠佳 ,效果不满意。我们在给研究生作“心肌缺血再灌注的保护用”课题时 ,在甲醛固定的组织作Ｆｅｕｌｇｅｎ染色过程中 ,增加了Ｃａｒｎａｙ氏液再固定程序 ,提高了反应效果 ,结果比较满意。改进后用 0 .0 5 %光绿作对比染色效果极佳 ,现将改进方法介绍如下。1　材料与方法1.1　取材料片小白鼠心肌组织 8块 ,用 10 %甲醛固定 ,石蜡包埋 ,常规制片 ,切片 4 μｍ ,每块切片 5张 ,1张作Ｈ·Ｅ染色 ,2…     

卵巢切片制作方法体会

目的比较2种固定液,块染和片染,苏木精-伊红(HE)染色和masson染色对家兔卵巢切片制作的影响。方法采用HE整块染色法、HE常规片染法、Masson三色染色法对家兔卵巢切片进行染色,镜检。结果投入Bouin液固定的卵巢组织比10%甲醛液中HE染色法的染色要亮丽,结构分明。结论 Bouin液对组织固定均匀且收缩较小,染色效果艳丽。     

环保型无醛固定液与甲醛固定液对免疫组化染色的效果比较

目的观察环保型无醛固定液对不同组织免疫组化染色的效果,探讨其取代甲醛固定液的可行性。方法25例新鲜手术标本分别用环保无醛固定液(无醛组)和甲醛固定液(甲醛组)固定1、3、7、14、30、60、120 d,免疫组化检测两组组织的抗原表达情况。结果固定时间在1、3、7和14d时两组免疫组化表达结果差异无统计学意义(均>0.05);甲醛组固定60 d和120 d时两组免疫组化表达结果差异有统计学意义(均<0.05);无醛组固定1 d的免疫组化结果与固定120 d差异无统计学意义(>0.05),甲醛组固定60 d的免疫组化结果与固定1 d差异有统计学意义(<0.05)。结论环保型无醛固定液组织固定效果好,安全环保,可以取代甲醛固定液作为病理工作中的组织固定液。     

非特异性酯酶染色实验条件探讨

目的：探讨非特异性酯酶染色的实验条件。方法：用10％甲醛生理盐水，40％甲醛和甲醛蒸气对非特异性酯酶染色固定条件进行了测定，同时用1／14mol／L、1／15mol／L、1／20mol／L的磷酸盐缓冲（pH7．4）配制的基质液分别在45、60、90分钟的染色条件进行了测定。结果：是选择甲醛固定5分钟染色结果最好。三种不同浓度的磷酸盐缓冲液和三个不同的孵育时间的染色结果经多因素方差分析，P〈0．05，结果有统计学意义。结论：最佳染色条件为甲醛蒸气固定5分钟，用1／15mol／LpH7．4磷酸盐缓冲液配制的基质液。染色孵育60分钟。本法帮助鉴别诊断急性单核细胞白血病和急性粒细胞白血病有较大的实用价值。     

改良金银花配方标本保存液对兔标本的固定效果

目的观察改良金银花配方标本保存液对兔标本组织清晰度、色泽、抗菌等方面保存的效果。方法用金银花提取液与甲醛、乙醇、水按比例配置的改良液与传统保存液甲醛以及乙醇做对比实验,从其组织结构清晰程度、组织肌肉色泽、防腐抗菌效果以及刺激性等方面,对比观察其固定效果。结果改良标本保存液与传统甲醛防腐抗菌效果相当,但改良液具有使标本保持色泽不变、组织结构层次分明且刺激性小等优点。结论改良标本保存液具有良好的标本固定效果,适用于展示标本。     

三种不同固定液对小鼠组织过碘酸雪夫染色效果比较

目的 比较小鼠肝脏、肾脏、小肠三种组织在质量分数4％多聚甲醛液、Carnoy's液、Bouin,s液三种固定液不同固定时间下的制片质量和过碘酸雪夫染色(PAS)效果,筛选出一种最为适用的固定方法.方法 取成年雄性C57BL/6小鼠肝脏、肾脏、小肠,分别固定于三种固定液,固定时间分别是质量分数4％多聚甲醛液:24h、48 h、72 h;Camoy's液:4h、8h、12 h;Bouin's液:12 h、24 h、48 h,充分固定后,常规制作石蜡切片,然后进行PAS染色,对比观察染色效果.结果 三种固定液对不同组织、不同固定时间下PAS染色结果存在差异.肝脏、肾脏、小肠经Camoy's液处理12h后PAS效果最佳,质量分数4％多聚甲醛液固定24 h基本满足观察检测效果,而经Bouin's液固定组织染色效果相对较差.结论 PAS反应对固定液和固定时间具有选择性,Camoy's液是组织进行PAS染色的理想固定液,但从固定效果、重复性、安全性、成本等多因素综合考虑,在PAS反应中,质量分数4％多聚甲醛液可以替代Camoy's液.