黄芪皂苷在大鼠血管钙化中作用及可能机制

摘要 目的：在大鼠血管钙化模型上用黄芪皂苷注射液腹腔注射观察对血管钙化的影响,并探讨黄芪皂苷在血管钙化中作用及可能机制。方法：采用维生素D3和尼古丁制备大鼠血管钙化模型;运用von Kossa染色、原子吸收测定钙含量及碱性磷酸酶(ALP)活性测定判断血管钙化程度;用生物化学方法测定血管一氧化氮、超氧化物歧化酶和丙二醛含量;原位缺口末端标记法检测血管平滑肌细胞凋亡。结果：VDN处理组大鼠血管von Kossa染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量棕黑色颗粒聚集;主动脉钙含量和ALP活性分别较对照高3.6和1.7倍(P<0.01),血管钙化后可加重血管组织氧化性损伤,增加血管平滑肌细胞凋亡;而诱导钙化后注射黄芪皂苷明显改善上述指标,减轻血管钙化程度和组织氧化损伤,平滑肌细胞凋亡细胞数量明显减少。结论：黄芪皂苷主要通过抑制血管平滑肌细胞氧化应激和细胞凋亡而减轻血管钙化。     

糖尿病大鼠血管钙化的实验研究

目的 观察实验性糖尿病对大鼠血管钙化的影响及其可能机制.方法 用肌注维生素D3和灌胃尼古丁建立大鼠血管钙化模型;采用腹腔注射链脲佐菌素(SIZ)方法,建立大鼠糖尿病模型.运用Von Kossa染色,原子吸收分光光度法测定钙含量,放射免疫分析法测定血浆、血管骨钙素(OC)和肿瘤坏死因子(TNF)含量,以及血浆、血管碱性磷酸酶(ALP)活性.结果 钙化组大鼠血管Von Kossa染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量黑色颗粒聚集;与对照组相比,主动脉钙含量、ALP活性、OC含量分别增高1.98、2.83倍和84.12%,主动脉TNF含量明显增加(P均相似文献   

辛伐他汀和阿司匹林对大剂量VitD3致大鼠血管钙化的预防

目的研究辛伐他汀和阿司匹林对大鼠血管钙化的治疗作用。方法用大剂量维生素D3造成大鼠血管钙化模型,同时分别用辛伐他汀和辛伐他汀加阿司匹林进行治疗,比较模型组和治疗组大鼠主动脉主动脉血管钙化程度及其血脂水平。结果模型组和治疗组大鼠主动脉均出现钙化,辛伐他汀组大鼠血管钙含量、钙化面积百分比及血清总胆固醇含量较模型组均有不同程度的下降,辛伐他汀加阿司匹林组较模型组无明显改善。结论辛伐他汀对维生素D3造成的大鼠血管钙化有治疗作用。     

肾脏保护作用的研究

目的 探讨黄芪多糖与三七总皂苷配伍对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法 通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠肾病模型,将糖尿病肾病模型大鼠随机分为模型对照组、黄芪多糖组、三七总皂苷组、黄芪多糖与三七总皂苷配伍组、贝那普利组, 每天给药 1 次,连续给药 8 周。8 周后测定大鼠 24 h 尿总蛋白,血糖,血肌酐和尿素氮;并对肾脏进行病理组织学检查。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠 24h 尿总蛋白、血糖、血肌酐和尿素氮显著升高(P﹤0.01);病理组织学检查可见模型组大鼠肾小球基底膜增厚,肾小管出现大量炎症细胞浸润,间质纤维化;与模型组比较,黄芪多糖组大鼠的尿蛋白、血糖和肌酐含量明显下降(P﹤0.05);三七总皂苷组大鼠的血糖和肌酐含量下降(P﹤0.05);黄芪多糖和三七总皂苷配伍组大鼠的尿蛋白、血糖、肌酐和尿素氮含量均明显下降(P﹤0.01)。各给药组肾脏病理改变均有不同程度的改善。结论 黄芪多糖与三七总皂苷配伍对糖尿病肾病大鼠的肾脏具有保护作用,其作用优于黄芪多糖和三七总皂苷单用组。     

绿茶对实验大鼠血管钙化的影响

目的观察饮用绿茶对大鼠血管钙化的影响及其可能机制。方法用肌注维生素D3和灌胃尼古丁诱导大鼠血管钙化模型。实验分为对照组、钙化组、低剂量和高剂量绿茶干预组。Von Kossa染色,原子吸收分光光度法测定钙含量,放射免疫分析法测定血浆、血管骨钙素(osteocalcin,OC)、血管紧张素Ⅱ(angiotensin II,AngⅡ)及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性。结果钙化组大鼠血管染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量黑色颗粒聚集;与对照组相比,主动脉钙含量、ALP活性、OC和AngⅡ含量均有明显增加;采用50g/L和100 g/L绿茶防治大鼠均可抑制血管钙化,且高剂量时效应强于低剂量;与钙化组相比较,血管组织钙化指标均下降,而主动脉AngⅡ含量亦有减少。结论饮用绿茶可能部分通过拮抗血浆和血管组织局部的AngⅡ系统效应而产生抑制大鼠血管组织钙化的作用。     

醛固酮促进大鼠血管钙化的可能机制

目的:在大鼠血管钙化模型上,探讨醛固酮(aldosterone,Aldo)在血管钙化中的作用及其可能机制。方法:肌注维生素D3和灌胃尼古丁(VDN)诱导大鼠血管钙化,运用von Kossa染色、原子吸收测定钙含量、45Ca2+沉积及碱性磷酸酶(ALP)活性测定判断血管钙化程度,半定量RT-PCR方法测定骨桥蛋白(OPN)mRNA水平;放射免疫法测定血浆和血管组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和Aldo含量。结果:VDN处理组大鼠血管von Kossa染色见平滑肌细胞内和细胞间基质有大量棕黑色颗粒聚集;主动脉钙含量较对照组高5.8倍(P<0.01);血管组织45Ca2+聚积和ALP活性分别较对照组高3倍和2.5倍(P<0.01);血管OPN mRNA表达明显上调58%(P<0.01);AngⅡ和Aldo含量分别较对照组高58%和80%(P<0.01)。运用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)和Aldo受体阻断剂可明显改善上述指标变化,与单纯VDN处理组大鼠相比较,VDN+captopril组主动脉钙含量、45Ca2+聚积及ALP活性分别较单纯钙化组低37%、59%和62%(均P<0.01)。而VDN+spironolactone组分别低32%、44%和60%(均P<0.01)。血管OPN mRNA水平亦较单纯钙化组低30%和29%(P<0.01)。结论:VDN诱导的血管钙化大鼠血管组织AngⅡ和Aldo生成增加,ACEI和Aldo受体阻断剂明显减轻血管钙化,提示Aldo促进血管钙化并参与钙化发生。     

黄芪皂苷Ⅳ对大鼠脑缺血/再灌注后海马血管生成的影响

目的探讨黄芪皂苷Ⅳ对大鼠缺血/再灌注损伤后海马中血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)表达的影响。方法实验动物随机分为假手术组、模型组、尼莫地平对照组、黄芪皂苷Ⅳ组。缺血2h再灌注72h后,各组进行神经功能评分,采用Westernblot及免疫组化方法检测VEGF蛋白表达,免疫组化法进行CD34染色计数MVD。结果黄芪皂苷Ⅳ组神经功能损害评分低于模型组和尼莫地平对照组(P<0.05);与尼莫地平对照组和模型组比较,黄芪皂苷Ⅳ组可明显上调VEGF蛋白表达及MVD(P<0.05)。结论黄芪皂苷Ⅳ对大鼠脑缺血/再灌注有神经保护作用,其作用机制可能与促进海马VEGF蛋白表达,增加MVD有关。     

雌激素减轻大鼠血管钙化的实验研究

目的探讨雌性激素在血管钙化中的作用。方法制备30例维生素D3加尼古丁诱导雌性大鼠血管钙化模型,比较去势和去势补充雌激素对血管钙化的影响。放射免疫法测定血浆雌激素水平,并进行VonKossa染色、钙含量、45Ca2+沉积及碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性测定。结果钙化组大鼠血管主动脉平滑肌细胞及其间质内有大量黑色颗粒沉积,主动脉钙含量、45Ca2+沉积及ALP活性分别较对照高2.5倍、3.3倍和2.4倍(均P<0.01)。预先去势的动物(去势+钙化组)钙含量、45Ca2+沉积及ALP活性分别较单纯钙化组升高28%、34%和20%(均P<0.01)。补充雌激素减轻去势+钙化组钙含量、45Ca2+及ALP活性分别低37%、37%和31%(均P<0.01)。结论去卵巢大鼠主动脉钙化程度加重,补充雌激素能减轻钙化,提示雌激素具有保护血管、拮抗钙化的效应。     

2型糖尿病大鼠模型血管钙化及相关因素分析

目的观察2型糖尿病大鼠模型血管钙化发生情况并分析其危险因素。方法用高脂肪、高热量饲料加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型,对照组予常规饲料。通过VonKossa染色和原子分光光度计方法观察2组大鼠血管钙化情况,同时检测血糖、胰岛素、尿白蛋白和肌酐清除率(Ccr)等变化。结果血糖、胰岛素和腹腔注射葡萄糖糖耐量试验等结果证实造模成功。2组大鼠胸主动脉HE、VonKossa染色未见明显钙盐沉积,原子分光光度计定量检测显示实验组大鼠血管钙含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。相关分析未发现体质量、血糖、血胰岛素、尿白蛋白和Ccr与血管钙含量相关。结论用高脂肪、高热量饲料和腹腔注射STZ建立的糖尿病大鼠模型的胸主动脉钙含量明显增加,其血管钙化的原因和机制有待于进一步研究。     

比色法测定黄芪中黄芪总皂苷含量

目的:建立黄芪中黄芪总皂苷的含量测定方法.方法:采用比色法测定黄芪中黄芪总皂苷的含量.结果:比色法测定的线性范围为43～258 μg,相关系数r=0.999 6;平均回收率为100.32%,RSD为1.34%(n=6).结论:本法简便、准确、灵敏度高、重复性好,可用于黄芪药材及含黄芪制剂的含量测定.     

血管紧张素Ⅱ对大鼠血管钙化的影响

目的在钙化大鼠主动脉血管平滑肌细胞上观察血管紧张素Ⅱ对钙化的影响及其信号通道。方法用β磷酸甘油制备钙化的大鼠血管平滑肌细胞,再以血管紧张素Ⅱ,血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂缬沙坦,通过Von Kossa染色及检测钙含量、碱性磷酸酶活性、骨钙素浓度来探讨血管紧张素Ⅱ对钙化的影响及其信号通道。结果血管紧张素Ⅱ增加大鼠体内碱性磷酸酶活性、血管平滑肌细胞钙含量、体内骨钙素浓度升高,其P0.05;而血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂可通过鼠体内血管紧张素Ⅱ对于血管平滑肌细胞钙含量调节和对其碱性磷酸酶活性及骨钙素浓度上调作用(P0.05)。结论血管紧张素Ⅱ可促进β磷酸甘油诱导的血管平滑肌细胞钙化。     

紫外分光光度法测定不同产地黄芪中总皂苷含量

目的通过对不同产地黄芪中总皂苷含量的比较分析,为新型治疗药物及保健品研制的选材提供科学参考和依据。方法以黄芪甲苷为对照,利用紫外分光光度法测定不同产地黄芪的总皂苷含量。结果不同产地黄芪的总皂苷含量(mg/g)为,山西:3.307;内蒙古:2.386;吉林:2.327;河北:2.098;青海:1.372;陕西:1.183;甘肃:1.013。结论各地黄中总皂苷含量由多到少依次为山西、内蒙古、吉林、河北、青海、陕西、甘肃。     

黄芪皂苷和黄芪多糖对乳鼠肥大心肌细胞线粒体膜电位的影响

目的观察黄芪皂苷和黄芪多糖对心肌细胞线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）的干预作用,初步探讨黄芪防治心衰的机理。方法将体外培养乳鼠心肌细胞分为对照组、模型组、黄芪皂苷组、黄芪多糖组、黄芪皂苷＋多糖组。除对照组外各组加血管紧张素Ⅱ（Angn）造成肥大细胞模型,给药组予黄芪皂苷、黄芪多糖干预,分别测定各组24h、48h时心肌细胞MMP。结果24h时MMP比较：模型组较对照组下降,有显著性差异（P〈0．01）;3个给药组较模型组升高,有显著性差异（P〈0．01）;黄芪皂苷组较对照组升高,有显著差异（P〈0．01）。48h时MMP比较：模型组较对照组下降明显（P〈0．01）;3个给药组较模型组升高,以黄芪皂苷组、黄芪皂苷＋多糖组明显,与模型组比较有显著性差异（P〈0．01）。结论AngⅡ使心肌细胞MMP下降,黄芪皂苷和黄芪多糖使MMP趋于正常,黄芪皂苷和黄芪多糖可拮抗AngⅡ减低心肌细胞MMP的作用,这可能是黄芪防治心衰的机理之一。     

不同年龄对维生素D_3和尼古丁诱导大鼠血管钙化的影响

目的:比较不同年龄大鼠对维生素D3和尼古丁诱导血管钙化的反应性,以利于血管钙化动物模型制备的合理选择。方法:不同月龄大鼠用维生素D3肌肉注射(300 000 IU/kg)和尼古丁灌胃(25 mg/kg)处理后6周,测定各组大鼠颈动脉血压和心功能、血管钙含量及碱性磷酸酶活性;用Von Kossa染色方法检测血管钙沉积;用竞争性半定量逆转录聚合酶链反应方法测定主动脉骨标志蛋白骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、基质Gla蛋白(matrixGla protein,MGP)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)的mRNA水平;用Western blot的方法检测主动脉平滑肌肌动蛋白-α(smooth musule actin-α,α-SMA)水平。结果:2、8和16月龄钙化组大鼠收缩压(systolic blood pressure,SBP)分别升高了20.7%、29.4%和22.2%(P<0.05);左心室收缩末压(left ventricular systolic pressure,LVSP)分别升高13...     

黄芪饮片中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷的含量测定分析

目的:探讨黄芪饮片中黄芪皂苷Ⅰ 、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷的含量测定方法和结果.方法:本次医学研究对黄芪饮片中黄芪皂苷Ⅰ 、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷的含量进行了测定 ,并对各类成分对于黄芪饮片药效峰面积的影响进行了分析.结果:黄芪饮片药物治疗效果的发挥 ,会直接受到黄芪皂苷Ⅰ 、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷等含量的影响.结论:对黄芪饮片中黄芪皂苷Ⅰ 、黄芪皂苷Ⅲ和黄芪甲苷的含量进行分析 ,有助于提高药物治疗效果.     

罗格列酮延缓糖尿病大鼠血管钙化的发展

目的: 观察罗格列酮对糖尿病大鼠钙化血管的治疗作用及对骨转录因子Msx2表达的影响.方法: 在高脂饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射处理的基础上,加用维生素D3和尼古丁处理,制备糖尿病合并血管钙化大鼠模型(糖尿病合并血管钙化组),给予部分糖尿病合并血管钙化组大鼠罗格列酮灌胃 (2 mg·kg-1,每天1次,共8周)处理(罗格列酮组),同时设立空白对照组.实验第21周末,处死各实验组大鼠,检测各组大鼠的代谢指标,进行血管 von Kossa染色,检测血管钙含量和碱性磷酸酶活性,应用real-time PCR方法检测 Msx2 mRNA 及蛋白免疫印迹方法检测 Msx2 蛋白在血管中的表达变化.结果: 与对照组相比,糖尿病合并血管钙化组大鼠血管内存在弥漫性的钙盐沉积,血管内钙含量增高,碱性磷酸酶活性增强,Msx2 mRNA和蛋白表达明显增高 (均P<0.05);而给予罗格列酮处理后,钙盐在血管内的沉积明显减少,钙含量和碱性磷酸酶活性分别下降8.37%、10.59%,Msx2 mRNA和蛋白表达也分别下降 36.73 %、 42.55 %(与糖尿病合并血管钙化组相比,均P<0.05).结论: 罗格列酮可以延缓糖尿病大鼠血管钙化的发展,并可以减少钙化血管中Msx2的表达.     

脂质体携载精氨酸对大鼠钙化血管精氨酸/NO途径的影响

目的:观察钙化血管精氨酸/NO途径的改变和脂质体携载精氨酸对血管钙化及精氨酸/NO途径的影响。方法:维生素D3注射制备大鼠血管钙化模型,检测血管钙含量、血浆精氨酸和亚硝酸盐含量、血管环磷酸鸟苷(cGMP)含量、血管一氧化氮合酶(NOS)活性及血管精氨酸水平。结果:钙化组大鼠血管钙含量较对照组升高7.5倍(P<0.01),血浆NO生成减少,血管cGMP水平降低,血管NOS活性增高(P<0.01),但精氨酸含量明显减少(-19.1%,P<0.01)。脂质体携载精氨酸治疗后血管钙含量较钙化组降低51.2%(P<0.01),血浆NO生成增加,血管cGMP含量增加5.1%(P均<0.05),血管精氨酸含量增加15.7%(P<0.05)。结论:给予脂质体携载精氨酸治疗可以减轻大鼠的血管钙化程度,改善钙化血管L-Arg/NOS/NO/cGMP途径紊乱,提示脂质体携载精氨酸对防治动脉粥样硬化等疾病的血管钙化可能具有潜在临床意义。     

腺嘌呤诱导慢性肾脏病大鼠模型的骨与矿物质代谢异常

目的观察腺嘌呤诱导的慢性肾脏病(CKD)大鼠模型矿物质代谢生化标志物、血管钙化和肾性骨病改变的特点。方法 20只雄性SD大鼠随机分2组:正常对照组和CKD组。第2周末,行血清生化标志物检测。第6周末处死大鼠,行血清生化标志物检测、主动脉血管病理学检查和血管钙磷含量测定,取股骨和第五腰椎做骨密度(BMD)检查、骨形态计量学分析。结果在第2和第6周末,CKD组大鼠血肌酐、尿素氮、血磷、血清甲状旁腺激素较正常对照组均明显升高,血钙明显下降。CKD组有50%的大鼠发生中膜血管钙化,正常对照组无血管钙化发生。CKD组的血管钙、磷含量均明显大于正常对照组。BMD检查,与正常对照组比较,CKD组的全股骨、股骨皮质骨、股骨小梁骨和第五腰椎BMD均明显降低。骨形态计量学方面,CKD组大鼠的小梁骨骨吸收和骨形成均处于高水平,处于高转换状态;CKD组大鼠小梁骨和皮质骨骨量明显低于正常对照组大鼠;CKD组大鼠小梁骨骨矿化与正常对照组大鼠比较无明显差别。结论腺嘌呤诱导的CKD大鼠模型表现为低血钙、高血磷和高血清甲状旁腺激素;血管钙化表现为中膜钙化;肾性骨病表现为小梁骨高转换、正常矿化和低皮质骨和小梁骨骨量,也符合纤维性骨炎的特点。腺嘌呤诱导的慢性肾脏病大鼠模型可以作为未来开展慢性肾脏病骨及矿物质代谢异常研究的良好载体。     

血管钙化与高脂血症的关系及辛伐他汀的干预

目的探讨血管钙化和高脂血症的关系及辛伐他汀的治疗作用。方法将SD大鼠随机分为正常组、钙化组、高脂组、钙化高脂组、钙化辛伐他汀组、钙化高脂辛伐他汀等6组,6周后分别测定各组大鼠血脂水平,血管碱性磷酸酶和钙含量,并对血管进行VonKossa染色观察钙沉积。结果钙化组血管钙含量和碱性磷酸酶比正常组增高288.89%和259%,高脂组血清总胆固醇比正常组增高520.11%,高密度脂蛋白降低22%。钙化高脂组钙含量和碱性磷酸酶比钙化组增高36.49%和21.94%,血清总胆固醇比高脂组增高571.56%,高密度脂蛋白降低30%。结论辛伐他汀能减轻血管钙化的程度,高脂血症和血管钙化间互为因果关系,辛伐他汀在降低血脂的同时能减缓血管钙化的进程。