定坤丹治疗子宫内膜薄型不孕的临床效果

目的 观察定坤丹治疗子宫内膜薄型不孕的临床效果,为优化子宫内膜薄型不孕的治疗方案提供参考。方法 选取187例子宫内膜薄型不孕患者,在保证组间基本特征匹配原则上,利用计算机软件产生的随机数,按照1∶1的比例分为对照组(93例)和观察组(94例)。对照组给予雌二醇+地屈孕酮干预,观察组在对照组的基础上加用定坤丹。比较治疗3个周期后两组患者的子宫内膜厚度、孕激素浓度及临床妊娠率。结果 观察组患者排卵期平均子宫内膜厚度显著高于对照组(P<0.01),黄体期孕激素浓度显著高于对照组(P<0.01),累计临床妊娠率显著高于对照组(P<0.05)。结论 定坤丹可以明显改善子宫内膜薄型不孕患者排卵期子宫内膜厚度,提高黄体功能,改善妊娠结局。     

转染血管内皮生长因子基因对大鼠任意皮瓣成活的影响

目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因对体内转染皮瓣成活的影响。方法 将30只SD大鼠随机均分为pcDNA₃-VEGF₁₆₅组、pcDNA₃组(两组均为术前48h、术中两次转染)和生理盐水(对照)组,术后7d计算各组大鼠皮瓣的成活面积。对皮肤标本行病理观察,免疫组化染色检测VEGF表达情况。结果 三组大鼠术后皮瓣平均成活率分别为48.46+3.35%、30.20±2.16%、31.35±1.99%,pcDNA₃-VEGF₁₆₅组显著高于其余两组(P<0.05);免疫组化染色示pcDNA₃-VEGF₁₆₅组染色深度亦显著深于其余两组(P<0.05)。结论 转染pcDNA₃-VEGF₁₆₅能够改善任意皮瓣的成活率,并显著表达VEGF₁₆₅。     

小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜的作用

目的 探讨小柴胡汤(XCHT)对大鼠子宫内膜异位症(内异症)异位内膜的作用。方法 建立大鼠内异症动物模型,通过透射电镜技术观察XCHT对异位内膜细胞结构的影响。结果 中、高剂量XCHT (500、750 g/L)组对异位内膜生长有非常显著的抑制作用,异位内膜体积明显减小(P<0.01),低剂量XCHT(250 g/L)组异位内膜体积也显著减小(P<0.05),而对照组体积无显著变化(P>0.05)。透射电镜下可见中、高剂量XCHT组治疗后腺上皮细胞出现凋亡特征,表现为细胞体积变小、核固缩、胞质和核染色质凝集、密度增高、细胞间有凋亡小体,同时间质细胞中也可见一些坏死细胞或退行性改变。结论 XCHT对内异症大鼠异位内膜有明显抑制作用,其作用机制可能是通过调整宿主局部环境中的免疫状态和功能而诱导细胞凋亡和坏死。     

结直肠癌患者手术前后营养及免疫功能的对照观察

目的 探讨结直肠癌患者手术前后的营养及免疫功能临床指标。方法 随机检测40例结直肠癌患者术前、术后营养和免疫指标并与对照组比较。结果 结直肠癌患者术后IgM、IgG、白蛋白、前白蛋白显著低于术前(P<0.05),而对照组良性肿瘤手术患者手术前后指标无显著差异。结论 结直肠癌术后营养及免疫功能显著差于术前。     

血管内皮生长因子受体启动子驱动重组腺病毒双自杀基因系统选择性杀伤大肠癌细胞

目的 探讨血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动重组腺病毒CDglyTK融合基因体系对结直肠癌细胞株LOVO及人脐血管内皮细胞株ECV30的选择性杀伤作用.方法 将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的LoVo、ECV30细胞和对照组不表达KDR的LS17T细胞,并给予不同浓度的前药GCV(ganciclovir)和/或5-FC(5-fluorocytosine),观察该体系对细胞株的杀伤效应.结果 制备的病毒滴度为2.0×1012pfu/ml.3种细胞的感染率相似,且感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当MOI为200时,所有细胞株均接近100%感染.以MOI为100的重组体分别感染各细胞株,发现其对前药的敏感性不同:表达KDR的LoVo和ECV30细胞对前药具有较高的敏感性,且二者敏感性无显著差异(P>0.1);与前二者相比,LS17T细胞对前药不敏感(P<0.001).同时,CDglyTK双自杀基因的疗效优于任一单自杀基因(P<0.001).流式细胞术检测表明该体系抑制LoVo细胞DNA的合成,表现为S期细胞比率增多及G1期细胞减少(P<0.001).结论 KDR基因启动子调控的CDglyTK融合基因体系可选择性杀伤结直肠癌LoVo细胞和血管内皮细胞.     

活血开窍方-脑醒喷鼻剂对缺血性中风患者血管内皮细胞功能的影响

目的 探讨活血开窍方对缺血性中风患者血管内皮细胞(VEC)功能的影响。方法 遵循随机、对照、双盲双模拟的原则,纳入98例急性缺血性中风(AIS)患者,治疗组65例、对照组33例,分别给予活血开窍方和尼莫通治疗3周,观察疗效并检测血栓素/前列环素、一氧化氮/血管内皮素。结果 治疗组总有效率为92.3%,显效率为73.8%;对照组总有效率为87.8%,显效率为57.6%,两组总有效率和显效率比较无显著差异(P>0.05)。结论 活血开窍方能可能通过纠正血栓素/前列环素、一氧化氮/血管内皮素的失衡,改善血管内皮细胞功能,缓解动脉痉挛,增加脑血流,对缺血性脑细胞损伤具有保护作用。     

野生型p53基因转移预防血管成形术后再狭窄的实验研究

目的探讨逆转录病毒载体介导的人野生型ｐ５３基因转移对预防血管成形术后再狭窄的作用。方法构建野生型ｐ５３基因逆转录病毒载体，通过逆转录病毒载体介导，将野生型ｐ５３基因转导至大鼠球囊损伤的颈动脉再狭窄模型中，２１ｄ后观察其对新生内膜形成的影响，并检测ｐ５３蛋白表达水平。结果构建和包装了人野生型ｐ５３基因的重组逆转录病毒载体，并在体外细胞中表达；用逆转录病毒载体转导野生型ｐ５３基因至大鼠球囊损伤的颈动脉，免疫组化检测表明转导血管局部表达人野生型ｐ５３蛋白，且与对照组相比，损伤血管新生内膜／中层面积比降低了４４％。结论人野生型ｐ５３基因治疗对血管成形术后再狭窄有一定的预防作用     

生脉成骨胶囊对血管内皮细胞增殖及分泌VEGF功能的影响

目的 探讨生脉成骨胶囊兔血清对人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304细胞)增殖及分泌血管内皮生长因子(VEGF)功能的影响。方法 以MTT法测定体外培养的ECV304细胞增殖,采用ELISA法检测培养液上清中VEGF浓度,应用透射电镜技术观察药物血清作用12h后细胞显微结构。结果 不同剂量生脉成骨胶囊兔血清在作用12h和36h后对ECV304细胞增殖无促进作用,中剂量和高剂量兔血清在36h表现出抑制ECV304细胞增殖的作用(P<0.01),低剂量兔血清作用1h后可显著促进ECV304细胞分泌VEGF(P<0.01)。结论 生脉成骨胶囊兔血清对ECV304细胞增殖无促进作用,低剂量生脉成骨胶囊兔血清可促进ECV304细胞分泌VEGF,提示这可能是生脉成骨胶囊促进血管生成的主要作用机制之一。     

老年高血压患者血管弹性和红细胞携氧能力与其心肺功能和生活质量关系

目的:探讨老年高血压患者的血管弹性和红细胞携氧量与其心肺功能和生活质量的关系。方法:随机选择100名老年受试者分为两组:观察组为老年高血压患者（50例）;对照组为相对健康的老年人（50例）。对比两组:（1）血管弹性指标:大动脉和小动脉的弹性指数、动脉血管顺应性、血管僵硬度以及血管壁厚度;（2）红细胞血氧能力指标:测定血氧饱和度50%时的氧分压（P₅₀）,用ELISA检测患者红细胞内2,3-二磷酯甘油酸（2,3-DPG）及丙酮酸激酶（PK）含量;（3）心脏功能检测:主动脉直径、左房内径、左室舒张内径、右房内径、右室内经、肺动脉内径、左室射血分数、室间隔厚度、左室后壁厚度及左室前壁厚度;（4）静态肺功能检测:潮气量、每分钟通气量、肺活量、最大通气量、第1秒用力呼气量、第1秒率及深吸气量;（5）采用生存质量核心问卷（QLQ-C30）对患者进行生存质量评估。对检测结果进行统计学分析。结果:对照组大、小动脉弹性指数均明显高于观察组（P<0.05）;对照组血管顺应性明显高于观察组（P<0.05）;而观察组血管僵硬度则明显高于对照组（P<0.05）;观察组动脉内膜中层厚度大于对照组（P<0.05）;观察组动脉脉搏波速高于对照组（P<0.05）。观察组外周血P₅₀高于对照组（P<0.05）;观察组外周血2,3-DPG和PK含量均高于对照组（P<0.05）。对照组主要心肺功能指标均优于观察组（P<0.05）;观察组在躯体、角色、认知、情绪、社会等方面功能和整体生活质量各项指标评分均明显低于对照组（P<0.05）。结论:老年高血压患者动脉血管弹性降低、红细胞携氧能力下降,由此会进一步造成患者心肺功能的下降和生活质量的降低。     

重组腺相关病毒介导内皮抑素的表达及体外活性研究

目的 构建携带人内皮抑素基因的重组腺相关病毒rAAV-hEndo,介导其体外表达并检测其生物活性。方法 采用无需包装辅助病毒的双质粒共转染方法制备rAAV-hEndo,测定其滴度及感染效率。免疫荧光染色检测内皮抑素蛋白在体外感染细胞中的表达,并通过MTT法、细胞周期检测及TUNEL法检测细胞凋亡指数,观察其对人脐静脉内皮细胞ECV304的影响。结果 所制备的重组腺相关病毒滴度为2×10¹²vg/ml,感染效率达98%。免疫荧光染色显示内皮抑素蛋白主要表达于细胞胞质。rAAV-hEndo感染细胞培养上清对ECV304细胞72h增殖抑制率为67.3%。内皮细胞转染内皮抑素基因后细胞周期明显阻滞于G₁期,其G₁期占(72.5±4.0)%,与对照组(52.1±2.1)%比较有显著差异(P<0.01)。TUNEL法检测实验组内皮细胞凋亡指数为(32.6±3.2)%,与对照组(4.2±1.9)%比较有显著差异(P<0.01)。结论 所制备的重组腺相关病毒rAAV-hEndo能有效介导具有生物活性的内皮抑素表达,为进一步肿瘤抗血管生成基因治疗动物实验奠定了基础。     

转导C型钠尿肽基因对血管成形术后新生内膜增生及内皮功能的影响

OBJECTIVE: To investigate the effects of C-type natriuretic peptide (CNP) gene transduction on neointimal hyperplasia and endothelial function after angioplasty. METHODS: Eighty-four rabbits were divided into 3 equal groups, namely normal control group, alkaline phosphatase gene transduction group and CNP gene transduction group. The rabbits in the latter two groups were given high-cholesterol diet 7 d before the experiment, followed by establishment of restenosis models by injuring the iliac artery and the specified gene transfer via retroviral vectors. Those in the normal control group were fed with normal diet. Before high-cholesterol diet and killing respectively, 2 ml venous blood samples were taken for testing blood lipid and serum CNP concentration. In the two groups with gene transduction, the injured rabbit iliac arteries were harvested for ex vivo vascular ring tension test, histological and pathological examinations, as well as immunohistochemistry analysis of CNP. The lumen area, neointimal thickness, neointimal area, ratio of intimal to medial area were measured by image analysis system. RESULTS: There were no significant differences in blood lipid and serum CNP concentration between the two gene transduction groups at the same time points both before and after operation. In CNP gene transduction group, endothelium-dependent relaxation of the vascular rings was significantly improved in comparison with the other two groups (P<0.01), irrespective of L-Arg pretreatment, whereas endothelium-independent relaxation function varied little between the 3 groups (P>0.05). Poor relaxation function to Ach of the vascular rings was resulted after pretreatment with LMMA. CNP gene expression at the site of gene transfer was detected in the CNP gene transduction group and in 2 weeks after balloon injury, the neointimal thickness, neointimal area and ratio of the neointimal to tunica media area were markedly increased in the two gene transduction groups, but the measurements were significantly lower in CNP group (P<0.01). CONCLUSION: CNP gene can be successfully transferred and effectively expressed at the injured site in the blood vessels to decrease the hyperplasia and significantly improve endothelial function after angioplasty.     

复方丹参滴丸、普罗布考对动脉损伤后内膜增殖与血管重塑的影响

目的：探讨复方丹参滴丸、普罗布考对兔髂动脉损伤后内膜增殖、血管重塑及血管内皮生长因子表达的影响。方法：雄性日本大耳白兔40只,随机平均分为对照组、普罗布考组、复方丹参滴丸组和联合组,高脂喂养两周后行髂动脉球囊内皮拉伤术,从术前3d开始对照组予单纯高脂喂养,治疗组分别以普罗布考（1．0g／只·d^-1）、复方丹参滴丸（300mg／只·d^-1）及两药联合灌喂至术后4周,取病变血管行病理形态学观察,免疫组化检测血管内皮生长因子（VEGF）和增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平。结果：与对照组比较,普罗布考组、复方丹参滴丸组增殖内膜面积明显减小（P〈0．05）,普罗布考组内弹力膜包绕面积增大（P〈0．05）;与单独用药组比较,联合组内弹力膜包绕面积明显增大（P〈0．05）,但增殖内膜面积无改变（P〉0．05）;各治疗组VEGF、PCNA表达均较对照组明显减少（P〈0．05）。结论：复方丹参滴丸、普罗布考均可抑制动脉损伤后平滑肌细胞增殖,减轻内膜增生;普罗布考兼有改善血管重塑的作用,两药联合使用可取得改善血管重塑的协同效应,其机制可能与减少VEGF在血管内、中膜的表达水平有关。     

普罗布考和科素亚对血管成形术后生长因子表达的影响

目的 :研究普罗布考和科素亚对血管成形术后再狭窄的预防作用和对生长因子表达的影响。方法 :新西兰白兔30只均予高脂饮食 ,1周后进行髂动脉球囊拉伤术 ,随机分为对照组 (C组 )、普罗布考组 (P组 )、科素亚组 (L组 )。术后第 4周进行血管形态学检查 ,用免疫组化方法检测胰岛素样生长因子 - 1受体 (IGF- 1 R)、血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原 (PCNA)表达。结果 :与 C组相比 ,P组和 L 组血管腔面积明显扩大 (P<0 .0 1 ) ,IGF- 1 R、VEGF和 PCNA表达明显减少 (P<0 .0 1 ) ,P组和 L组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 :普罗布考和科素亚可以显著减轻兔髂动脉血管成形术后再狭窄的形成 ,抑制 IGF- 1、VEGF和 PCNA的表达 ,而两药之间则无显著性差异     

吡咯列酮对家兔血脂水平的影响及安全性评估

目的:探讨吡咯列酮对家兔血脂水平的影响及安全性。方法:将36只新西兰白兔随机分为正常对照组、高胆固醇饮食组、高胆固醇饮食加吡咯列酮组,喂养8周后处死,取兔血清测定血脂、肝功及肾功。结果:高胆固醇饮食组及高胆固醇饮食加吡咯列酮组TC、TG、LDL-C均高于正常对照组,HDL-C水平均低于正常对照组(P<0.05);高胆固醇饮食加吡咯列酮组TG水平低于高胆固醇饮食组,HDL-C高于高胆固醇饮食组(P<0.05)。三组间血清谷丙转氨酶、肌酐水平比较均无显著性差异(P<0.05)。结论:吡格列酮可降低高脂饮食兔血清TG水平,升高高脂饮食兔血清HDL-C水平,对肝肾功能无影响。     

Effects of tetrandrine on phenotypic modulation of vascular smooth muscle cells and expression of p38 MAPK as well as MKP-1 after intimal injury of rabbit carotid arteries

Objective： To study the effects of tetrandrine （Tet） on phenotypic modulation of vascular smooth muscle cells （VSMCs） and expression of p38 mitogen-activated protein kinase （p38MAPK） as well as mitogen-activated protein kinase phosphatase-1 （MKP-1） after vascular intimal injury. Methods： HE staining was used to analyze vascular morphology of sham-injured group, injured group and Tet-treated group at day 28. lmmunohistochemistry, Western blot and RT-PCR were respectively used to detect the expression change of smooth muscle a-actin （SMa-actin）, proliferation cell nuclear antigen （PCNA）, p38MAPK and MKP-1 of injured group and Tet group at days 7, 14 and 28 after balloon injury. Results： ① All layers of vascular wall in sham-injured group were intact at day 28. The neointimal area was significantly increased and the lumen area notably decreased in injured group at day 28. The neointimal proliferation in Tet treated group was less than that in injured group, and the lumen area of Tet group was significantly increased than that of injured group at day 28. ②Compared with the injured group, the expression of SMa-actin, PCNA, p38MAPK and MKP-1 of vascular wall in Tet group was no difference, and the neointimal proliferation condition was also basically as same as injured group at day 7 after injury. The expression of PCNA and p38MAKP in Tet group was obviously lower than that in injured group, and the expression of MKP-1 in Tet group was obviously higher than that in injured group at days 14 and 28 after injury. The expression of SMa-actin in Tet group was slightly higher than that in injured group at days 14 and 28 after injury. Conclusions： Tet could reduce neointimal proliferation by inhibiting VSMCs phenotypic modulation and p38MAPK signaling transduction pathway as well as its down regulation.     

粒细胞集落刺激因子对兔髂动脉球囊损伤后内膜修复和增生的影响

目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对兔髂动脉球囊损伤后再内皮化和内膜增生的影响。方法将制模成功的56只新西兰大白兔随机分为2组,观察组皮下注射rhG-CSF 30μg/（kg.d）,7 d后经颈动脉行左髂总动脉球囊导管拉伤,术后14 d用伊文氏蓝染色、HE染色、免疫组织化学方法,观察血管再内皮化、新生内膜增厚及细胞增殖情况;对照组用生理盐水代替rhG-CS,其余同观察组。结果造模14 d后,观察组的内膜再生面积（An）和内膜损伤总面积（At）比值明显高于对照组[（68.60±6.25）%vs（46.60±3.36）%,P〈0.01];内膜厚度（Ti）/中膜厚度（Tm）比值明显低于对照组（1.53±0.14 vs 2.43±0.15,P〈0.01）。结论内皮前体细胞动员剂rhG-CSF能显著促进血管损伤后内皮化,有效抑制了支架内再狭窄的发生。     

重组生长激素对兔血管内皮功能的保护作用

目的研究重组生长激素(recombinant growth hormone,rGH)对高胆固醇饮食的新西兰兔动脉粥样硬化的作用及rGH对血管内皮功能的影响。方法健康新西兰白兔,均为雄性,兔龄4个月,体重(2.2±0.3)kg,随机分为rGH组、对照组(NC)、高胆固醇组(HC)观察高胆固醇饮食的条件下,rGH对血脂、一氧化氮(nitric oxide,NO)、内皮素(endothelin,ET)和动脉粥样硬化的效应。测定血管环对乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)、硝酸甘油(nitrogenglycerine,NG)的舒张反应。结果(1)rGH组动脉粥样硬化的面积和发生率均低于对照组。(2)rGH组对Ach的最大舒张反应明显高于HC组(P<0.01),但对NG的最大舒张反应rGH组与HC组无明显差异。结论rGH能够有效地抑制高胆固醇饮食条件下的动脉粥样硬化的损伤程度,并改善高胆固醇饮食条件下血管内皮细胞的乙酰胆碱依赖性舒张功能。     

雷帕霉素洗脱支架抑制猪颈动脉成形术后近期再狭窄的实验研究

目的:研究自膨式雷帕霉素洗脱支架防治猪颈动脉血管成形术后近期再狭窄的有效性安全性,及其作用机制.方法:国产小型猪6只,分别行双侧颈总动脉球囊扩张损伤后,随机分为对照组(裸支架组)和实验组(雷帕霉素洗脱支架组),各置入6枚.术后4周重复动脉造影后处死动物.取出支架段血管,测算支架处血管管腔面积、新牛内膜厚度与面积及管腔狭窄百分比以评价内膜增生程度.应用TUNEL法检测新生内膜细胞凋亡指数(apoptotic index,AI),免疫组化检测血管平滑肌细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Bcl-2、Bax表达水平.结果:雷帕霉素洗脱支架组支架内管腔面积大于裸支架组(P<0.05);新生内膜面积小于裸支架组(P<0.05);新生内膜厚度小于裸支架组(P<0.05);细胞凋亡多于裸支架组(P<0.05):PCNA阳性细胞及Bcl-2表达低于裸支架组(P<0.05);Bax表达高于裸支架组(P<0.05).结论:雷帕霉素洗脱支架能抑制新生内膜形成.在支架植入后4周能预防猪颈动脉血管成形术后近期再狭窄的形成.可能通过上调Bax,下调Bcl-2的表达.从而抑制血管平滑肌细胞增殖发挥作用.     

192Ir endovascular irradiation prevents restenosis after balloon angioplasty in rabbit

Objective　To examine the effect of endovascular irradiation on restenosis after balloon angioplasty in rabbit. Methods　After the establishment of rabbit iliac atherosclerosis model, balloon angioplasty was performed at the lesion segment of the iliac artery. Rabbits were randomly divided into three groups: control group, 10 Gy irradiated group and 18 Gy irradiated group. Endovascular irradiation was performed for irradiated groups at the dilated sites by introducing the 192Ir radioactive guidewire through a catheter. After four weeks, the animals were killed and the target segments were cut down. Histopathologic and morphometric analyses were carried out. Results　The mean final lumen area in the 18 Gy group was larger than that in the control or 10 Gy group (P&lt;0.05). The intimal area in the 18 Gy group was smaller (P&lt;0.05). Conclusions　192Ir endovascular irradiation may prevent restenosis after balloon angioplasty. The effect is related to the delivered dose. The mechanism is involved in inhibition of neointimal proliferation.     

192Ir 血管内照射防止兔球囊血管成形术后再狭窄

目的　本研究旨在检验192 Ir血管内照射对兔球囊血管成形术后再狭窄的作用。方法　建立兔髂动脉粥样硬化模型 ,对病变血管行球囊成形术 ,同时随机分为对照组 ,10Gy照射组和 18Gy照射组。以导管导入192 Ir放射性导丝对照射组动物的扩张处进行血管内照射。 4周后处死动物 ,取出血管标本 ,进行病理组织学分析。结果　 18Gy照射组最终管腔面积较对照组及 10Gy照射组大 (P <0 0 5) ,18Gy照射组内膜面积较小 (P <0 0 5)。结论　本动物实验提示192 Ir血管内照射可防止球囊血管成形术后再狭窄 ,其效果与照射剂量相关 ,其机制涉及抑制新生内膜增殖。