测定脱氧核糖核酸和脱氧核糖核酸酶抑制剂的新方法

众所周知,脱氧核糖核酸酶(DNase)在重组、复制和修复的系统中起着决定性的作用。可是至今还未阐明它们详细的作用机制。用特殊的DNase抑制剂的方法可以很好地显示出它们的作用机制。最近,Rosenthal和Lacks报告了从含有核酸和十二烷基硫酸钠的丙酰氨凝胶中分离到的核酸酶的测定方法。依此原理设计出琼脂平板法来测定脱氧核糖核酸(DNA)和DNase抑制剂。用这种方法筛选DNase抑     

一种蚯蚓脱氧核糖核酸酶分离纯化和性质研究

蚯蚓组织的NaAc抽提液经过热变性、酸变性和丙酮分段沉淀,再经过DEAE-Sepharose和CM-Sepharose层析纯化,从中分离纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(EWD2),经SDS-PAGE电泳、基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF)、毛细管等点聚焦电泳法测定.此DNase的相对分子质量测定为69 100,明显大于已发现的DNase Ⅰ和DNaseⅡ.该酶的等电点为6.05,温度稳定性、pH稳定性、激动剂和抑制剂等各项参数,与已发现的各种DNase相比较有明显差别.结果提示,蚯蚓组织中发现的这种脱氧核糖核酸酶具有特殊的酶学性质,可能是一种新型脱氧核糖核酸酶,其作用机理和分类还有待于进一步的研究.     

研究蚯蚓DNase的干琼脂糖薄膜覆盖法

目的研究蚯蚓脱氧核糖核酸酶(DNase)的测定方法。方法应用干琼脂糖薄膜覆盖法(DAFO)检测蚯蚓DNase。结果DAFO用于蚯蚓DNase的种类、数量的确定,新DNase类的筛选以及DNase活性的测定。结论DAFO是研究脱氧核糖核酸酶的一种重要方法。为蚯蚓DNase及其他DNase的测定提供了可行的实验方法。     

丹参凝胶对特应性皮炎小鼠的作用研究

目的研究丹参凝胶对特应性皮炎小鼠治疗作用并探讨其机制。方法用DNCB制备BALB/c小鼠特应性皮炎模型,观察丹参凝胶对皮炎小鼠的胸腺指数和脾指数、血清IgE、IgG2a及体外培养脾细胞中IL-4、IL-12、IFN-γ的含量差异。结果丹参凝胶能明显改善皮损情况,降低皮炎模型的胸腺指数和脾指数,并能降低血清IgE和脾细胞上清IL-4水平,显著升高血清IgG2a和脾细胞上清的IFN-γ水平(P<0.05)。结论丹参凝胶可以通过降低IgE、IL-4,以及提高IgG2a和IFN-γ的水平而发挥治疗特应性皮炎的作用。     

壳聚糖脱氧核糖核酸纳米球的制备及其相关特性研究

目的制备壳聚糖脱氧核糖核酸(DNA)纳米球并研究其理化性质和转染肝细胞系Hep G2和L 02 的活性。方法用绿色荧光蛋白（GFP）质粒做报告基因，GFP和壳聚糖通过复凝聚方法制备壳聚糖DNA纳米球，用扫描电镜观察其形态，激光粒度分析仪测定壳聚糖DNA纳米球粒度分布、表面电位，DNase Ⅰ保护实验研究壳聚糖DNA纳米球对包裹基因的保护作用，用体外基因转染实验定性评价纳米球的转染活性，MTT试验研究壳聚糖DNA纳米球对Hep G2和L 02的细胞毒作用。结果壳聚糖形成表面带正电荷的纳米球，保护DNA免受DNaseⅠ的降解。壳聚糖DNA纳米球作为非病毒载体转染肝细胞系，基因能有效表达。结论壳聚糖DNA纳米球作为非病毒载体转染肝细胞系有效，壳聚糖转染有细胞选择性。     

口服佐剂对乙型肝炎疫苗诱导抗-HBs应答的增强作用

作者选择牛磺酸、唾液腺素和锂作为乙型肝炎(HB)疫苗的口服佐剂,用DBA/2小鼠和无胸腺的C3H/He nu/nu及对HBsAg无应答的B10.M小鼠研究这三种物质作为佐剂的机理及其对HB疫苗的影响。牛磺酸(C_2H_7NO_3S)是分子量为125.1的简单物质,为半胱氨酸的代谢产物,大量存在于淋巴细胞中。作者发现10mg/ml牛磺酸能使DBA/2和无胸腺小鼠脾细胞DNA的合     

雾化重组人脱氧核糖核酸酶治疗囊性纤维性变

囊性纤维变性病人的呼吸道症状、复发性感染加重和进行性肺损害可归因于细菌的持续存在和粘性脓液分泌业累积于气道。脓液分泌物含有高浓度的白细胞释放的粘性物质细胞外DNA。为了评价重组人脱氧核糖核酸酶（rhDNase）的临床效用，人DNaseⅠ被无性繁殖和表达，且广泛地进行体外和多中心临床对照试验。1rhDNase的无性繁殖、表达和体外研究人DNaseⅠ是从人的胰补偿DNA库中应用两条长的低聚核昔酸探针、以牛胰DNase的氨基酸序列为基础进行无性繁殖，无性繁殖过程被分离，得到编码为260氨基酸蛋白质。为了表达中0Nase，用含有人DNasel无…     

1994年上市新药的预测

1994年可能上市的重要新药有: 1.α-脱氧核糖核酸酶(DNase,Pulmoz-yme,dornase alfa):此药是Genentech/Ro-che开发的重组DNase.用于囊肿纤维化。该产品于1993年底会在瑞典和奥地利首先上市,并将在今年8月提交给FDA的咨询会议,此外也正在等待加拿大和欧洲联合体的批准。     

胸苷酸合成酶抑制剂的研究进展

胸苷酸合成酶（Thymidylate synthase,TS）系由相同亚基构成的同源二聚体胞浆酶,它参与体内脱氧核糖核酸（DNA）生物合成所需的胸腺嘧啶核苷酸的起始合成过程,是该过程的限速酶。细胞在没有外源性的胸腺嘧啶供应时,这一限速反应是体内胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTMP）的唯一来源以及其后DNA合成的唯一途径。由于肿瘤细胞内的DNA合成水平明显高于正常细胞,因此肿瘤细胞在没有外源性的胸腺嘧啶的情况下,抑制TS活性将引起胞内胸腺嘧啶的缺失,从而使胞内的DNA合成不能正常进行,随之产生缺陷的DNA合成、裂解以及细胞凋亡。因此,TS已成为化疗药物一个非常重要的理想作用靶点。     

中药玉米须对小鼠胸腺免疫功能的影响的实验研究

目的 :观察玉米须水煎剂及其粗多糖对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠胸腺指数及胸腺 DNA含量的影响。方法 :利用环磷酰胺注射小鼠造成免疫功能低下模型 ,采用称重法、二苯胺法观察小鼠胸腺指数、胸腺 DNA含量的变化。结果 :(1)环磷酰胺所致模型小鼠的胸腺指数 (P <0 .0 5 ) ,胸腺 DNA含量均下降 (P <0 .0 5 )。 (2 )中药玉米须水煎剂及其粗多糖均能提高免低小鼠的胸腺指数 (P <0 .0 5 )及胸腺 DNA含量 (P <0 .0 5 )。结论 :(1)中药玉米须水煎剂及其粗多糖均能提高免低小鼠的胸腺指数及胸腺 DNA含量。(2 )中药玉米须水煎剂及其粗多糖对免低小鼠的胸腺指数及胸腺 DNA含量的提高作用无差别     

DNA的故事

什么是DNA DNA(脱氧核糖核酸)是核酸的一类,因分子中含有脱氧核糖而得名。 DNA分子极为庞大(分子量一般至少在百万以上),主要组成成分是腺嘌呤脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸和胸腺嘧啶脱氧核苷酸。DNA存在于细胞核、线粒体、叶绿体中,也可以以游离状态存在于某些细胞的细胞质中。大多数已知噬菌体、部分动物病毒和少数植物病毒中也含有DNA。     

望江南蒽醌苷对小鼠免疫功能的影响

目的探讨望江南蒽醌苷(AG)对环磷酰胺(CTX)造成的免疫低下小鼠的保护作用。方法体外,将小鼠胸腺和脾淋巴细胞与不同浓度的AG共培养,用MTT法检测AG对胸腺和脾淋巴细胞增殖的影响;体内,腹腔注射CTX形成免疫抑制模型。结果体内试验中,与模型对照组小鼠相比,能显著升高外周血的白细胞数,增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能,能促进胸腺/脾淋巴细胞增殖,增加胸腺指数和脾指数。结论AG具有免疫增强作用。     

望江南葸醌苷对小鼠免疫功能的影响

目的 探讨望江南蒽醌苷(AG)对环磷酰胺(CTX)造成的免疫低下小鼠的保护作用.方法 体外,将小鼠胸腺和脾淋巴细胞与不同浓度的AG共培养,用MTT法检测AG对胸腺和脾淋巴细胞增殖的影响;体内,腹腔注射CTX形成免疫抑制模型.结果 体内试验中,与模型对照组小鼠相比,能显著升高外周血的白细胞数.增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能,能促进胸腺/脾淋巴细胞增殖,增加胸腺指数和脾指数.结论 AG具有免疫增强作用.     

肉苁蓉总苷对照射损伤小鼠敏感器官超微结构的保护作用

观察肉苁蓉总苷 ( GCs)对小鼠经60 Coγ射线照射后胸腺、脾、睾丸超微结构变化的影响 ;结果表明辐射损伤后小鼠胸腺、脾、睾丸生物膜及细胞器受到不同程度的损伤 ,GCs可促进其恢复 ;推论 GSs对受照小鼠敏感器官超微结构有保护作用 ,其机制可能与抗氧化、促进 DNA、RNA合成有关。     

海带多糖的免疫调节作用

目的观察海带多糖 (BSP)对正常及免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法BSP经腹腔注射给药后 ,测定了各组小鼠胸腺、脾指数 ,外周血白细胞数 ,脾的T、B细胞增殖能力 ,脾细胞产生IL 2能力 ,以及血清和脾细胞溶血素含量等的变化。结果BSP 10 0mg/ (kg·d)× 10d能显著提高免疫低下小鼠胸腺、脾指数及外周血白细胞数 ,还能提高正常小鼠胸腺、脾指数 ;明显促进正常及免疫低下小鼠脾的T、B细胞增殖能力和脾细胞产生IL 2能力 ;BSP还能增加正常及免疫低下小鼠血清和脾细胞溶血素的含量。结论BSP是一种免疫调节剂 ,对正常及免疫低下小鼠的免疫功能具有促进作用。     

一种新型蚯蚓脱氧核糖核酸酶酶学性质的研究

目的研究蚯蚓组织中1种新型脱氧核糖核酸酶(EWD1)的主要酶学性质。方法用SDS-PAGE凝胶电泳、质谱分析、毛细管等点聚焦电泳法和酶活性测定等方法。结果EWD1的相对分子质量约为157000。Mn2+、Ca2+是该酶的抑制剂,Mg2+对酶的活性基本上没有影响。该酶的最适温度为37℃,最适pH值为5.2,等电点为6.12。以小牛胸腺DNA为底物,测得Km为1.58 mg/mL,Vmax为5.36 mg/(mL.min)。结论蚯蚓组织中发现的此种脱氧核糖核酸酶EWD1具有特殊的酶学性质,明显区别于已知的脱氧核糖核酸酶类。     

三角帆蚌多糖抑瘤作用的实验研究

目的　研究三角帆蚌多糖的抗肿瘤活性。方法　给荷HepA腹水瘤小鼠胃饲三角帆蚌多糖(每日剂量5 0 ,2 5 0和5 0 0mg/kg) 8d ,检测抑瘤率、胸腺指数和脾指数;采用³H-TdR掺入法,检测三角帆蚌多糖对HepA腹水瘤细胞DNA合成的影响。结果　在上述三种试验剂量,三角帆蚌多糖对小鼠HepA腹水瘤的抑制率分别为3 4.9%、48.6%和5 1.0 % ;与对照组比较,试验组的胸腺指数分别提高5 5 .6% ,61.1%和77.8% ,脾指数分别提高8.2 % ,12 .3 %和16.3 % ;在离体细胞培养试验中仅高浓度组(1000μg/mL)三角帆蚌多糖对HepA瘤细胞DNA合成和细胞增殖有显著的抑制作用(P<0.05)。结论　三角帆蚌多糖有一定的抗肿瘤活性,其作用机制可能与增强胸腺免疫功能有关。     

胸调素(Thymomodulin)体内给药的药动学研究

已证明,Leucotrofina(商品名)能减轻肿瘤化疗中的骨髓抑制,提高患者对病毒和细菌的抵抗力,并减少小儿哮喘的发作程度和次数;实验证明它可诱导正常或裸小鼠脾中前T 细胞成熟,使细胞表面出现免疫荧光可检测的Thy 1,2抗原。最近证明,牛胸腺提取物Lucotrofina 的有效成分是胸腺调节素(Thymomo-dulin),已获得高活性的纯化物。体外,试验证明,不同的胸调素制剂均能显著诱导脾细胞出现Thy 1.2膜抗原,其最适浓度为12.5μg.     

喹诺酮类药物色谱手性分析的进展

喹诺酮类(quinolones)药物是近年新开发的一类全合成抗菌药。此类以细菌的脱氧核糖核酸(DNA)为靶点,通过抑制细菌DNA消旋酶(grase)和DNA拓扑异构酶Ⅳ(topoisomerase Ⅳ),干扰细菌DNA的复制,造成细胞不可逆的损害,使细菌死     

三角帆蚌多糖抑瘤作用的实验研究

目的　研究三角帆蚌多糖的抗肿瘤活性。方法　给荷HepA腹水瘤小鼠胃饲三角帆蚌多糖 (每日剂量 5 0 ,2 5 0和5 0 0mg/kg) 8d ,检测抑瘤率、胸腺指数和脾指数 ;采用3H TdR掺入法 ,检测三角帆蚌多糖对HepA腹水瘤细胞DNA合成的影响。结果　在上述三种试验剂量 ,三角帆蚌多糖对小鼠HepA腹水瘤的抑制率分别为 3 4.9%、48.6%和 5 1.0 % ;与对照组比较 ,试验组的胸腺指数分别提高 5 5 .6% ,61.1%和 77.8% ,脾指数分别提高 8.2 % ,12 .3 %和 16.3 % ;在离体细胞培养试验中仅高浓度组 (10 0 0 μg/mL)三角帆蚌多糖对HepA瘤细胞DNA合成和细胞增殖有显著的抑制作用 (P <0 .0 5 )。 结论　三角帆蚌多糖有一定的抗肿瘤活性 ,其作用机制可能与增强胸腺免疫功能有关。