复方藤梨根制剂抑制胃癌转移与MMP-9、TIMP-1和E-cad表达的关系研究

目的观察复方藤梨根制剂对胃癌细胞MMP-9、TIMP-1和E—cad蛋白表达的影响,探讨其抗胃癌细胞转移的作用机制。方法以SGC-7901胃癌细胞株建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,将裸鼠随机分为0．9％氯化钠溶液组（对照组）、复方藤梨根制剂低剂量、中剂量及高剂量组,接受连续21d灌服治疗。待裸鼠衰竭或死亡后解剖观察肿瘤转移等情况;用免疫组化方法检测肿瘤组织中MMP-9、TIMP-1和和E—cad蛋白表达的变化。结果根据胃癌裸鼠动物模型的转移部位进行赋值评分,氯化钠溶液与中、高剂量组比较差异有统计学意义（F=5．15,P〈0．05）,与低剂量组之间比较差异无统计学意义（F=1．27,P〉0．05）。经免疫组化法检测．对照组的胃癌细胞的MMP-9明显高于中、高剂量复方藤梨根制剂组（B3．86,P〈0．05）;对照组的胃癌细胞的,TIMP-1蛋白表达明显低于中、高剂量复方藤梨根制剂组（止4．30．P〈0．05）：而E—cad表达各组之间差异无统计学意义（F=0．41。P〉0．05）。结论复方藤梨根制剂可能是通过下调MMP-9和上调TIMP-1的途径发挥抗胃癌转移作用：而对E—cad的异常表达没有明显调节作用。     

miR-124在胃癌中的表达及其临床意义

【目的】探讨miR-124（Homo sapiens miR-124）在胃癌组织中的表达及临床意义。【方法】收集胃癌患者手术标本176例（研究组）,以相应癌旁组织作为正常对照（对照组）,制成组织芯片,运用原位杂交检测胃癌及癌旁组织中miR-124的表达,分析其与胃癌临床病理参数之间的关系。【结果】研究组miR-124阳性表达率18．18％显著低于癌旁对照组86．36％,差异有统计学意义（P〈0．01）;miR-124的表达随着胃癌临床分期演进和浸润深度的增加而下调,各组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;miR-124的表达与胃癌的分化程度相关,分化越差其表达越低,各组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;且有淋巴结转移的miR-124的表达显著低于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】miR-124的表达下调可能是胃黏膜恶性转变及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志。     

术后腹腔温热灌注化疗联合静脉化疗治疗进展期胃癌

【目的】比较分析进展期胃癌术后腹腔温热灌注化疗联合静脉化疗与单纯静脉化疗的临床疗效。【方法】将70例进展期胃癌术后患者按随机原则分为治疗组（腹腔灌注化疗＋静脉化疗组,35例）及对照组（单纯静脉化疗组,35例）,比较两组患者的不良反应及近、远期疗效。【结果】两组1年生存率及腹腔外脏器转移率相比较差异无统计学意义（P〉0．05）,而治疗组3年、5年生存率及无瘤生存率高于对照组（P〈0．05）,Ⅱ度以上胃肠道反应、肝肾功能损害及骨髓抑制等化疗副反应均低于对照组,两者差异有统计学意义（P〈0．05）,治疗组腹部隐痛发生率显著高于对照组（P〈0．05）。【结论】腹腔温热灌注化疗联合静脉化疗可延长进展期胃癌术后患者生存期,降低胃肠道反应、骨髓抑制、肝肾功能损害等不良反应的发生率,而不增加腹腔外器官转移率。     

VEGF及其受体Flt、KDR表达与胃癌临床病理特征的关系

【目的】4g讨血管内皮生长因子（VEGF）及其受体Fit、KDR的表达与胃癌临床病理特征的关系。【方法】选取本院手术切除的胃癌标本112例及癌旁组织作为对照,采用免疫组织化学方法检测VEGF及其受体Flt、KDR表达。【结果】胃癌组织VEGF、Fh和KDR阳性表达率分别为70．54％、59．82％和64．29％,均高于癌旁组织的16．07％、25．89％和22．32％,且差异有显著性（P〈0．05）;有淋巴转移纽VEGF、Fit和KDR阳性表达率高于无淋巴转移组（P〈0．05）;浸润程度超过肌层组的EGF、Flt和KDR阳性表达率高于未超过肌层组（P〈0．05）。在不同性别、年龄、肿瘤分化程度、组织类型中VEGF、Flt和KDR表达差异无显著性（P〉0．05）;VEGF表达与Flt和KDR表达呈一定的正相关关系（rs=0．233和O．418,P〈0．05）,Fit和KDR表达同样呈正相关关系（rs=0．263和P〈0．05）。【结论】胃癌中广泛表达VEGF及其受体Fit、KDR,且与胃癌淋巴结转移和浸润程度有一定关系。     

75岁以上高龄胃癌患者临床特征分析

【目的】探讨75岁以上高龄胃癌患者临床病理特征及预后影响因素。【方法】回顾性分析2005年1月至2011年1月于本院接受手术治疗的310例老年（年龄≥60岁）胃癌患者的临床资料,310例患者按年龄分为高龄组（年龄〉75岁,n=170）与老年组（年龄≤75岁,n=140）,比较不同年龄胃癌患者的临床病理特征,分析其预后差异,筛选影响胃癌患者预后的危险因素。【结果】①高龄组男性、合并淋巴结转移、联合切除、肿瘤高／中分化、临床Ⅲ分期、肿瘤直径≥8cm、N3分期所占比例高于老年组（P〈0．05）,其胃下段肿瘤及N2分期、可耐受化疗所占比例低于老年组（P〈0．05）;②高龄组各并发症发生率均高于老年组,但仅腹痛、贫血、胃溃疡发生率相比较差异有显著性（P〈0．05）;③高龄组3年、5年生存率均低于老年组,且差异有显著性（P〈0．05）;④多因素分析显示联合切除、临床分期、N分期、淋巴结转移、耐受化疗是影响高龄胃癌患者预后的独立危险因素（P〈0．05）。【结论]75岁以上高龄胃癌患者以男性多见,多伴淋巴结转移,患者肿瘤分化程度高、临床分期及N分期晚、肿瘤直径大,术后并发症发生率高,对化疗耐受度低,预后较差;联合切除、淋巴结转移、临床分期、N分期、对化疗的耐受性均为影响高龄胃癌患者预后的危险因素。     

乙肝肝硬化致肝癌患者癌组织miRNA-145的表达及其与预后的关系

【目的】探析乙肝肝硬化致肝癌患者癌组织miRNA-145的表达情况及与预后的关系。【方法】选取本院2009年1月至2012年1月共收治的74例乙肝肝硬化致肝癌患者作为研究对象,均于术中留取癌组织标本,进行癌组织中miRNA-145表达的检测及实时定量RT-PCR、细胞增殖检测及侵袭试验,根据miRNA-145浓度分为50nmol／L、100nmol／L、150nmol／L,对照组为体脂质体处理。结合临床探讨乙肝肝硬化致肝癌患者的miR—NA-145表达、miRNA-145对肿瘤细胞增殖能力、侵袭与转移能力的影响及与患者预后的关系。【结果】肝癌组织与人肝癌HepG2细胞株的miRNA-145表达水平均高于正常组织,差异有统计学意义（P〈0．05）。24h时各组细胞相对增殖（D490）的差异无统计学意义（P〉0．05）;48h与72h时,miRNA-145转染不同浓度组的细胞相对增殖（D490）均低于脂质体处理组,差异有统计学意义（P〈0．05）。试验组相对穿出小室膜的肿瘤细胞数为（0．29±0．05）个,低于脂质体处理组的（0．36±0．12）个,差异有统计学意义（P〈0．05）。miRNA-145高表达患者的生存期长于低表达组,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】miRNA-145的表达可抑制肿瘤增殖、控制肿瘤进展,并减弱肿瘤细胞的侵袭与转移能力、促进肿瘤细胞凋亡,从而延长肝癌患者生存期,值得临床深入研究。     

基质细胞衍生因子1在胃腺癌组织中的表达及其与微血管密度的关系

目的研究基质细胞衍生因子1（SDF-1）在胃腺癌组织中的表达,分析其与相关临床病理指标的关系及其与微血管密度（MVD）的关系,探讨肿瘤细胞SDF-1的表达对胃癌生长和转移、肿瘤血管生成的影响。方法采用免疫组织化学方法检测胃癌组织中SDF-1的表达,同时免疫标记CD34,检测胃腺癌组织中MVD。结果58例胃腺癌组织中肿瘤细胞SDF-1表达显示低分化、有淋巴结转移、有浆膜侵犯明显高于高分化、无淋巴结转移、元浆膜侵犯,与淋巴结转移、组织学分级、浆膜侵犯、临床分期等临床病理参数呈正相关（P〈0．05）,而肿瘤细胞SDF-1表达与患者性别、年龄、肿瘤大小无关（P〉0．05）;肿瘤细胞SDF．1表达与胃癌组织中MVD呈正相关。结论SDF-1可能通过促进肿瘤的血管形成而参与胃癌的浸润转移,影响胃癌患者预后;肿瘤组织表达SDF-1在胃癌生长、浸润、转移中发挥着重要作用。     

STCl过表达对宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响

【目的】研究转染STCl基因对人宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响。【方法】通过MTT、集落形成、划痕实验、Tranwell实验、裸鼠成瘤等方法检测STCl基因转染对宫颈癌CaSki细胞增殖、迁移、侵袭、体内成瘤能力的影响。【结果1MTT和集落形成实验表明,与空载体组相比,CaSki／STCl细胞生长受到抑制,细胞存活率和集落形成率较低（P〈0．05）。划痕实验显示CaSki／STCl较CaSki／NC组细胞迁移率降低（35±3．2％ VS 64±4．5％,P〈0．05）。TranweⅡ实验显示CaSki／NC的85±5,而CaSki／STCl组穿膜细胞数较少为54±4（P〈0．05）。裸鼠成瘤实验显示,CaSki／STCl组和CaSki／NC组的肿瘤平均质量依次为（O．285士0．057）g、（0．523±0．154）g,差异具有统计学意义（P,0．01）。【结论】sTCl过表达抑制宫颈癌细胞增殖、转移及侵袭,STCl基因可用于宫颈癌的基因治疗。     

小飞蓬活性成分对乳腺癌MCF-7荷瘤裸鼠的体内抑制作用

目的探讨小飞蓬活性成分对人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及可能的作用机制。方法将人乳腺癌MCF-7细胞接种于16只裸鼠右背部皮下建立荷瘤裸鼠模型,将裸鼠随机分为3组,其中生理盐水组5只,小飞蓬组6只,5-FU组5只;接种细胞24h后进行腹腔注射给药治疗,检测各组荷瘤裸鼠体重变化,绘制肿瘤体积生长曲线,待第一只正常死亡裸鼠出现时处死所有裸鼠,检测肿瘤的体积和重量。应用免疫组化方法检测各组肿瘤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、半胱氨酸天冬氨酸酶（Caspase-3）的表达情况。结果①各治疗组荷瘤裸鼠的生长较对照组均有不同程度的抑制（P〈0.01）;治疗后各组肿瘤重量和抑瘤率相互比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;②各组肿瘤组织中PCNA表达水平均显著低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,而Caspase-3表达明显高于对照组、差异有统计学意义（P〈0.05）。结论小飞蓬体内可抑制荷瘤裸鼠人乳腺癌的生长。     

人胃癌组织CCR7和COX-2的表达及意义

【目的】检测胃癌患者癌组织中趋化因子受体7（CCR7）和环氧化酶-2（cox-2）的表达及意义。【方法】检测43例胃癌患者癌组织和35例癌旁正常胃组织中CCR7mRNA和COx-2mRNA的表达情况。【结果】胃癌组织中CCR7mRNA和COX-2mRNA的表达阳性率分别为62．79％和58．14％,相对表达量分别为0．59±0．28和0．66±0．21,均明显高于癌旁正常胃组织阳性率（分别为14．29％和8．57％）和相对表达量（分别为0．13±0．05和0．09土0．01）,两组比较差异均有显著性（P〈0．05）。CCR7mRNA和COX-2mRNA在胃癌组织中的阳性表达率和相对表达量均随癌细胞浸润程度的加深、临床分期的增加及淋巴结转移明显增高（P〈0．05）,但与性别和肿瘤分化程度无明显相关（P〉0．05）。【结论】CCR7和COX-2在胃癌组织中高表达,可能与癌细胞的浸润与淋巴转移有关。     

消痰散结方干预对胃癌组织核转录因子NF-κB P~(65)蛋白表达影响的研究

目的通过建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,观察消痰散结方对胃癌组织核转录因子NF-κB P65蛋白表达的影响,探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型,随机分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,观察消痰散结方干预对胃癌组织NF-κB P65蛋白表达的影响。结果①消痰散结方低、中、高剂量组抑瘤率分别为36.62%、44.82%、58.11%,呈现出剂量依赖效应,且消痰散结方高剂量组抑瘤率高于5-Fu组(51.82%),差异无统计学意义;②消痰散结方低剂量组NF-κB P65蛋白的阳性表达与模型组相比无统计学差异(P>0.05),消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κB P65蛋白的阳性表达与模型组相比P<0.05,有统计学意义,但组间相比无统计学意义。结论消痰散结方对裸鼠人胃癌原位移植瘤有较好的抑制肿瘤生长作用,揭示其发挥作用的关键与抑制NF-κB P65蛋白的表达有关,从而阻断胃癌发展,控制肿瘤复发与转移。     

反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生物学行为的影响

目的探讨反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生长及转移的影响。方法通过构建裸鼠原位膀胱癌移植瘤模型并灌注携带基因的腺病毒载体,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时采用免疫组化法检测肿瘤细胞增殖和凋亡指数。结果肿瘤大小:治疗组为(14.60±5.31)mm2,对照组为(58.92±7.16)mm2,两组比较P<0.01;肿瘤细胞增殖率:治疗组为41.30%,对照组94.70%,两组相比P<0.05;凋亡指数治疗组和对照组分别是30.18和9.53,两者比较P<0.05;治疗组5只中无一只发生盆腔淋巴结转移,而对照组3只出现转移(60.0%),两组比较P<0.01。上述各项组间差异均有统计学意义。结论反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对人膀胱癌裸鼠原位移植瘤具有良好的靶向性,能够通过抑制肿瘤细胞增殖和加速肿瘤细胞凋亡,遏制实验性裸鼠膀胱移植癌模型的生长转移,从而为该载体用于人类膀胱癌的治疗提供了一定的实验依据。     

血管内皮生长因子C与胃癌淋巴管生长关系的研究

目的：研究血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C）与胃癌淋巴管生长间的关系。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）,从人胃癌旁组织中扩增人VEGF-CcDNA全长,经T-A克隆酶切,鉴定并测序得到的完整序列后,进行亚克隆并构建pEGFP/VEGF-C真核表达载体,将其转染低表达VEGF-C的胃癌细胞株MKN45;另转染pEGFP空载体,作为对照组。通过体外G418抗生素筛选,得到高表达VEGF-C的肿瘤细胞克隆,用这种高表达VEGF-C的胃癌细胞与对照组细胞接种于裸鼠皮下（2组各为10只）,观察肿瘤组织内淋巴管密度及裸鼠瘤体质量。结果：对照组和转染pEGFP/VEGF-C组肿瘤质量分别为（2.64±0.92）g、（5.55±0.81）g,差异有统计学意义（P〈0.001）;2组肿瘤组织内的淋巴管密度分别为9.77±1.12,13.87±1.29,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：VEGF-C能在胃肿瘤中促淋巴管生长。     

术中植入缓释氟尿嘧啶预防胃癌术后复发

目的探讨术中植入缓释氟尿嘧啶预防胃癌术后复发的临床效果。方法选择胃癌患者60例,按随机数字表法分成对照组30例和治疗组30例。所有患者均行胃癌根治术,其中近端胃切除术28例,远端胃切除术22例,全胃切除术10例,治疗组在手术基础上另加腹腔植入缓释氟尿嘧啶。随访观察患者术后复发情况。结果胃癌术后复发与性别、年龄无明显关系（P〉0.05）,胃癌患者手术方式、切缘情况、肿瘤分化程度、TNM分期则直接影响到肿瘤的复发时间（P〈0.05）。治疗组术后复发时间[（20.6±4.0）个月]明显较对照组[（16.7±5.0）个月）延长（P〈0.05）。2组术后在不同时期内局部复发率治疗组明显低于对照组（均P〈0.05）。结论胃癌根治术中植入缓释氟尿嘧啶可有效地降低胃癌术后复发率,减少术后复发及转移的发生,实现治愈胃癌的目的 。     

长期低浓度3，3’二吲哚甲烷处理鼻咽癌细胞后对裸鼠移植瘤增殖及转移的抑制作用

目的低浓度3,3I_二吲哚甲烷（3,3＇-Diindolylmethane,DIM）处理鼻咽癌细胞5．8F和CNE-2后,鼻咽癌细胞的增殖及转移能力的抑制作用及其机制。方法浓度为20ImaoVLDIM处理鼻咽癌细胞株5．8F和CNE-2一个月,48只BALB／C裸小鼠随机分为CNE-2／DIM（实验组）及5-8F／DIM（实验组）、CNE-2（对照组）及5-8F（对照组）4组,实验组于裸鼠背部靠腋窝皮下接种经过DIM处理的人鼻咽癌细胞CNE-2／DIM和5-8F／DIM,对照组接种未经DIM处理的鼻咽癌细胞,给予常规裸鼠饲料,每周记录移植瘤的体积,于接种第8周处死动物,并留取裸鼠移植瘤及腋窝和腹股沟的淋巴结组织,检验其PCNA、Ki-67及E．Cadherin、Vimentin的表达。结果接种鼻咽癌细胞8周后,实验组移植瘤体积明显小于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。对照组移植瘤成功率及转移率明显大于实验组中PCNA、Ki-67及Vimentin的相对表达强度低于对照组（P〈0．01）,而E-cadh丽n的相对表达强度明显高于对照组（P〈0．01）。结论低浓度DIM长期处理鼻咽癌细胞后具有抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖和转移的作用,其机制可能与PCNA、Ki-67、Vimentin及E．Cadherin相关。     

豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响的实验研究

目的观察豆蔻提取物对人胃癌细胞裸鼠移植瘤的影响及可能的机制。方法建立24只裸小鼠胃癌原位移植瘤模型,随机分成4组(每组6只):对照组、5-FU组、豆蔻提取物组、联合组,各组按设计剂量给药,实验期间,每3 d测量移植瘤瘤径及体积,4周后,颈椎脱臼法处死,计算抑瘤率,用免疫组化法检测各组移植瘤瘤体中COX-2和VEGF的表达情况。结果成功建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型,各组实验裸鼠体重下降明显低于对照组,各组抑瘤率分别为:5-FU组55.99%,豆蔻提取物组42.81%,联合用药组67.36%,联合用药组瘤体中COX-2和VEGF的表达明显下调。结论豆蔻提取物可抑制胃癌原位移植瘤的生长,豆蔻提取物联合5-FU可显著抑制胃癌原位移植瘤的生长,2组具有协同作用,其抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用机制可能与下调COX-2和VEGF的表达有关。     

老年妇女乳腺癌48例临床病理特点分析

目的]探讨老年乳腺癌病理特点.[方法]回顾分析 48例 65岁以上老年女性乳腺癌患者雌激素受体 （ER）、孕激素受体 （PR）、人表皮生长因子受体2 （C-erbB-2）、P53、肿瘤大小、淋巴结转移等预后因子, 以同期 69例65岁以下非老年女性乳腺癌患者作为对照组.[结果]65岁以上老年组乳腺癌 ER（＋）、PR（＋）较非老年组乳腺癌有较高的表达,差异有显著性（P〈0.05）;老年乳腺癌P53、C-erbB-2阳性表达率低于非老年组,差异有显著性（P〈0.01）.老年组乳腺癌淋巴结转移率低于非老年组（P〈0.05）.[结论]65岁以上老年女性乳腺癌患者往往分化程度更高、侵袭性更低、预后更好.     

两种方法建立人胃癌裸鼠移植瘤模型的比较

目的采用两种不同方法建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法人胃癌细胞悬液直接注射法:将处于对数生长期的人胃癌细胞悬液接种于裸鼠皮下;胃癌裸鼠瘤转瘤法:将胃癌细胞悬液接种入裸鼠,待肿瘤生长直径在8 mm左右时,处死裸鼠并取其肿瘤组织边缘新鲜的组织,接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤。观察并比较两种方法所建立的模型肿瘤移植成功率及瘤体生长速度,实验结束后MSP法检测移植瘤组织中Reprimo基因的甲基化水平并采用免疫组织化学法检测移植瘤的Ki-67和CD31分子表达。结果细胞悬液直接注射组的瘤体成瘤速度较瘤转瘤组慢(P<0.05);瘤转瘤组的Reprimo基因甲基化水平及Ki-67和CD31的表达均高于细胞悬液直接注射组(P<0.05)。结论胃癌裸鼠皮下瘤转瘤法的瘤体生长状况优于胃癌细胞悬液直接注射法。     

三维组织培养药物敏感性检测技术在胃癌术后个体化化疗中的应用研究

目的 研究三维组织培养药物敏感性检测（three—dimensional histocuhure drugresponseassay。TDHDRA）技术在指导胃癌术后个体化化疗中的临床价值。方法将147例胃癌患者随机分为肿瘤药敏组和经验化疗组。肿瘤药敏组应用TDHDRA技术,检测5-氟尿嘧啶（5-FU）、多西他赛（DTX）、顺铂（DDP）、紫杉醇（TXT）、奥沙利铂（OXA）、表阿霉素（EADM）、伊立替康（CPT-11）这7种单药和DTx＋DDPI＋（5-FU）、EADM＋DDP＋（5-FU）、DDP＋（5-FU）、OXA＋（5-FU）、CPT-11＋（5-FU）这5组联合用药对胃癌组织的抑制率,计算胃癌组织对药物的敏感率,并通过随访,记录两组的无进展生存期（progressionfreesurvival。PFS）和总生存期（overallsurvival,os）,比较两组的化疗效果。结果单药中5-FU对胃癌组织的抑制率和敏感率最高,分别为（44．8±12．1）％和57．9％;联合用药中DTX＋DDP＋（5-FU）组合对胃癌组织的抑制率、敏感率最高,分别为（64．3±15．6）％、75.4％。经验化疗组与肿瘤药敏组分别有16例、7例出现复发转移;肿瘤药敏组中位PFS（162d）显著高于经验化疗组（84d）,且差异有统计学意义（P〈0．05）;肿瘤药敏组OS（476d）虽高于经验化疗组（392d）,但两组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论TDHDRA技术检测结果符合临床实际,在指导胃癌术后个体化化疗中有很好的临床价值。