LC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平的浓度

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平的浓度。方法以卡马西平-d2作为内标,血浆经甲醇直接蛋白沉淀后进样分析,色谱柱为CAPCELL PAK C18(100 mm×2.0 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1 mmol·L-1乙酸铵水溶液(含0.02%乙酸)(70∶30),流速0.3 m L·min-1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析。卡马西平和内标卡马西平-d2的离子对分别为m/z 237.1→194.1和m/z 239.1→196.1。结果卡马西平在质量浓度3.077 9~1 231.2μg·L-1内线性良好(r=0.999 3,n=10);批内和批间精密度良好(RSD均<7.0%);提取回收率为98.94%~108.84%,RSD<15%;基质效应为92.76%~98.54%,RSD<5%。结论本方法灵敏度、重复性以及专属性均较好,样品处理简便易行,可用于卡马西平的血药浓度测定及药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平的浓度及其在室间质评中的应用

目的:建立并验证测定人血浆中卡马西平(CBZ)浓度的方法,并应用于CBZ的室间质评。方法:血浆样品经乙腈沉淀后,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定。内标为氯雷他定,色谱柱为Kromasil C18,流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈,梯度洗脱,流速为0.6 ml/min,柱温为40℃;采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z237.1→194.0(CBZ)、m/z 383.1→267.0(内标)。结果:CBZ血药浓度在5~1 000 ng/ml范围内线性关系良好(r>0.998),定量下限为5 ng/ml;日内、日间RSD为1.00%~6.42%,相对偏差为-6.93%~0.32%;5个室间质评样品的检测结果分别为679.0、475.0、104.0、29.2、26.2 ng/ml,评价结果通过率为100%。结论:该方法灵敏、准确、专属性强,可用于CBZ血药浓度测定及其室间质评。     

UPLC-MS/MS法同时检测人血浆中拉莫三嗪和卡马西平浓度

目的采用高效液相色谱-质谱联用技术同时检测人血浆中拉莫三嗪和卡马西平浓度。方法采用UPLC-MS/MS法,以西替利嗪为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为ACQUITY BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为甲醇-含0.1%甲酸的水溶液(70∶30,v/v),流速为0.2 ml/min,进样体积为10μl。质谱采用ESI离子源,正离子MRM模式扫描分析,拉莫三嗪、卡马西平和内标西替利嗪的离子对分别为m/z 256.0→211.2、m/z 237.0→194.1、m/z 389.2→201.2。结果拉莫三嗪和卡马西平线性范围分别为5～1 000 ng/ml (r=0.999 5)和5～1 000 ng/ml (r=0.997 5),定量下限均为5 ng/ml。批内、批间精密度RSD<15%;平均提取回收率分别为81.3%～84.9%和82.7%～87.3%。结论本方法样品前处理简便、快速,检测准确、灵敏度高,适用于临床治疗药物检测和药代动力学研究。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、文拉法辛、罗格列酮和硝苯地平的浓度

目的:建立同时测定人血浆中卡马西平、文拉法辛、罗格列酮和硝苯地平浓度的方法。方法:血浆样品经甲醇(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后,以盐酸吡格列酮为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18),流动相为含0.01%甲酸的水溶液-含0.01%甲酸的甲醇溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为50℃,进样量为5μL;采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 237.00→194.05(卡马西平)、m/z 278.20→58.10(文拉法辛)、m/z 358.08→135.04(罗格列酮)、m/z 347.15→315.17(硝苯地平)、m/z 357.09→134.06(内标)。结果:卡马西平、盐酸文拉法辛、盐酸罗格列酮、硝苯地平血药浓度的线性范围分别为2.00~2 000.00、2.12~2 120.00、2.00~2 000.00、2.04~1 020.00 ng/mL(r分别为0.995 9、0.990 5、0.991 5、0.991 0,n=5),最低检测限分别为0.200、0.106、0.100、1.020 ng/mL;日内、日间RSD均小于15%,相对误差的绝对值小于15%;提取回收率为65.66%~96.36%(RSD<15%,n=5),基质效应为80.99%~114.33%。采用该法测得2例癫痫患者体内卡马西平的血药浓度分别为(1 500.41±169.11)、(1 159.01±59.24)ng/mL(RSD分别为11.27%、5.60%,n=3),2例高血压患者体内硝苯地平的血药浓度分别为(14.68±1.92)、(21.18±3.59)ng/mL(RSD分别为16.98%、13.10%,n=3)。结论:该方法操作简便,专属性强,灵敏度、准确度高,可用于上述药物的血药浓度监测及药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中抗耐多药结核活性化合物macozinone(PBTZ 169)浓度及其药代动力学研究

目的:建立UPLC-MS/MS法测定抗耐多药结核新型活性化合物macozinone (PBTZ 169)在大鼠血浆中的浓度,并应用于大鼠体内的药代动力学研究。方法:以卡马西平为内标,经乙腈沉淀蛋白后,采用XBridge?BEH C₁₈(100 mm×2.1 mm, 2.5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相,进行梯度洗脱分离,流速0.5 mL·min^-1,进样量10μL;采用电喷雾离子源(ESI),正离子扫描,分别以m/z 457.2→344.1和m/z 237.2→194.2作为PBTZ 169和内标(卡马西平)的质谱检测条件。大鼠灌服20 mg·kg^-1 PBTZ 169后,不同时间点取样测定其血浆浓度,计算药代动力学参数并进行统计分析。结果:PBTZ 169质量浓度在0.7～740.0 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r>0.996 0);PBTZ 169和内标的提取回收率在99.5%～110.2%;日内、日间的RSD范围为1.3%～4.2%;PBTZ 169血浆样品在室温下放...     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度

目的 建立同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度的方法。方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法（UPLC-MS/MS）,以磺胺甲噁唑（SMZ）为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为WatersACQUITYUPLCHSSPFP柱（2.1mm×100mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸的5mmol·L1乙酸铵水溶液-0.1%甲酸的甲醇溶液（0~5min,35∶65→10∶90）,流速为0.2mL·min1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮的离子对分别为m/z237.0→194.06、m/z255.98→144.95、m/z316.01→270.0、m/z285.04→193.07和m/z287.02→241;内标磺胺甲噁唑的离子对为m/z253.96→91.97。结果 卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮血药浓度分别在2.4~600ng·mL1（r=0.9997）,2.52~630ng·mL1（r=0.9920）,2.08~520ng·mL1（r=0.9979）,2.28~570ng·mL1（r=0.9982）,8.0~800ng·mL1（r=0.9992）线性关系良好;最低检出限分别为0.24,0.63,0.52,0.57,3.2ng·mL1。日内、日间精密度均〈15%;提取回收率均〉70%,且RSD〈15%。结论 该方法灵敏、快速、专属性强,可用于临床血药浓度测定及药动学研究。     

高效液相色谱-质谱串联法同时测定人血清中拉莫三嗪及卡马西平的含量

目的:建立高效液相色谱-质谱串联(LC-MS/MS)法测定人血清中拉莫三嗪及卡马西平的含量。方法:取人血清经乙腈直接沉淀后进样分析,色谱柱为Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶0.2%甲酸水溶液,流速为0.4 mL.min-1;流动相采用梯度洗脱。质谱采用ESI离子源,正离子多反应监测扫描分析,拉莫三嗪离子对为m/z 256→145,卡马西平离子对为m/z 237→194。结果:卡马西平和拉莫三嗪血药浓度分别在5～500μg.L-1(r=0.998 9)和5～500μg.L-1(r=0.997 2)范围内线性关系良好,定量下限分别为5μg.L-1。日内、日间RSD均<7.0%;提取回收率均>85%。结论:本方法处理样品简便,适用于临床血药浓度监测及为联合用药的药动学研究奠定基础。     

LC/MS/MS法测定人血浆中头孢克肟含量

目的 建立人血浆中头孢克肟的LC/MS/MS法.方法 血浆样品经蛋白沉淀提取,采用C8色谱柱分析,以乙腈:水:甲酸(40:60:0.5,v/v/v)为流动相,三重四级杆质谱检测器,正离子多反应监测模式(MRM),监测离子分别为:m/z 454.3→m/z 285.2(头孢克肟),m/z 282.2→m/z 212.2(...     

人血浆中左乙拉西坦和卡马西平同时测定方法的建立

目的 建立同时测定人血浆中左乙拉西坦和卡马西平浓度的方法.方法 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以卡马西平-D10为内标,采用高效液相色谱-串联质谱法测定其中左乙拉西坦和卡马西平的浓度.以XBridge BEH C18为色谱柱,以甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,柱温为40℃,进样量为...     

LC-MS/MS法同时测定人血清中卡马西平和拉莫三嗪浓度

目的:建立同时测定人血清中卡马西平和拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用液-质联用法,以伐地那非和红地那非为内标,血清经乙腈直接沉淀后进样分析。色谱柱为XbridgeTMPhenyl,流动相为含0.02%甲酸的水溶液-含0.02%甲酸的乙腈溶液(60∶40),流速为0.3mL·min-1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平和内标伐地那非的离子对分别为m/z237→194和m/z489→72;拉莫三嗪和内标红地那非的离子对分别为m/z256→43和m/z467→111。结果:卡马西平和拉莫三嗪血药浓度分别在5～500μg·L-1(r=0.9988)和100～10000μg·L-1(r=0.9964)范围内线性关系良好,定量下限分别为5、100μg·L-1。日内、日间RSD均<8%;平均提取回收率分别在88.9%～100.9%和89.5%～100.3%范围内。结论:本方法样品处理简便,适用于临床血药浓度监测及药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定犬血浆中的盐酸右哌甲酯

目的建立犬血浆中盐酸右哌甲酯的UPLC-MS/MS检测方法。方法用甲基叔丁基醚提取犬血浆,离心后取上清液用氮气吹干,用甲醇-水(80∶20)溶解后进行质谱分析。采用BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸(80∶20),流速0.1 mL·min-1,柱温45℃,进样量5μL。电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),盐酸右哌甲酯及卡马西平内标的检测离子对分别为m/z 234.33→84.56和237.35→194.31。结果盐酸右哌甲酯的线性范围为0.1～50 ng·mL-1(r=0.994,n=5),在犬血浆基质中,高、中、低浓度的日内、日间RSD均小于15%,方法的回收率为89%～103%,血浆基质对测定无干扰。结论所用方法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,为盐酸右哌甲酯制剂的临床药物动力学研究提供了简便、准确的分析测定方法。     

UPLC-MS/MS测定犬血浆中的氢溴酸加兰他敏

目的采用超高效液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中氢溴酸加兰他敏(GH)的含量。方法采用BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L-1醋酸铵(含0.1%甲酸)(40∶60),流速0.1 mL·min-1,柱温40℃,进样量3μL。GH及内标盐酸克仑特罗的监测离子分别为:m/z 288.23→198.06,m/z 277.08→202.93。结果 GH的线性范围为2.38～609.60μg·L-1(r=0.998,n=5),在人血浆基质中,高、中、低浓度(4.76、38.10、304.80μg·L-1)的日内、日间RSD均小于15%,方法的平均回收率为102.3%;血浆基质对测定无干扰。结论所建方法处理简单、快速、灵敏、特异性高,定量准确,适用于血浆中GH的测定。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度。方法:血浆样品用甲基叔丁基醚提取,离心后取上清液氮气吹干,流动相复溶后进行UPLC-MS/MS测定。色谱柱:BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相:乙腈-0.01 mol.L-1醋酸铵(72∶28);流速:0.15 mL.min-1;柱温:40℃,进样量:8μL。电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸及内标洛伐他汀的检测离子对分别为:m/z 419→199,437→303,405→199。结果:血浆样品中辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸线性范围分别为0.241～61.76 ng.mL-1(r=0.999,n=5)和0.344～88.16 ng.mL-1(r=0.997,n=5),日内、日间精密度(RSD)均小于15%,方法的平均回收率分别为100.6%和106.0%,血浆基质对血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸测定无干扰。结论:建立的UPLC-MS/MS法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,为辛伐他汀制剂的临床药代动力学研究提供了简便、准确的分析测定方法。     

人血浆中卡巴拉汀及其代谢物NAP226-90的LC-MS/MS测定研究

目的：建立LC-MS/MS法同时检测卡巴拉汀及其代谢物NAP226-90血药浓度。方法：血浆经甲基叔丁基醚-二氯甲烷提取预处理,用Phenomenex-curocil PFP（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,0.1%甲酸0.05%甲酸铵溶液-0.1%甲酸0.05%甲酸铵甲醇为流动相,梯度洗脱分离,ESI正离子化三重四极杆质谱MRM测定,检测反应离子对：卡巴拉汀m/z 251.0→206.0、NAP226-90 m/z 166.0→121.0、内标（美托洛尔）m/z 268.4→74.3。结果：卡巴拉汀及NAP226-90血药浓度在0.2～30 ng·mL-1范围内均线性关系良好,定量下限均为0.2 ng·mL-1,经方法学验证符合生物样品测定要求。结论：建立的LC-MS/MS方法可用于重酒石酸卡巴拉汀胶囊人体药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度

目的:建立灵敏的超高效液相色谱-质谱联用法测定比格犬血浆中的阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度。方法:选用Waters BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,分别以0.5%甲酸/5 mmol.L-1醋酸铵-乙腈和2 mmol.L-1醋酸铵-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样品采用乙酸乙酯提取后进样,通过电喷雾电离源,以多重反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 178.9→136.9(阿司匹林)、m/z 136.9→64.9(水杨酸)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定阿司匹林和水杨酸;m/z 249.6→58.9(单硝酸异山梨酯)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定单硝酸异山梨酯。结果:阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的线性范围分别为2.0～2000.0,20.0～16000.0,9.6～9557.0 ng.mL-1;定量下限分别可达2.0,20.0,9.6 ng.mL-1;日内、日间精密度(RSD)均小于15%。结论:本方法灵敏度较高,血浆用量少,适用于比格犬血浆样品中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的测定和药物动力学研究。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中替诺福韦的浓度

目的:建立大鼠血浆中替诺福韦浓度的测定方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。取6只大鼠单次灌胃给予富马酸替诺福韦酯100mg.kg-1,检测给药45min后血浆中药物浓度,以恩替卡韦为内标,选用阳离子固相萃取柱除去血浆中的蛋白质。色谱柱为AcquitybenUPLC-C18,流动相为0.2%甲酸水溶液(含40mmo.lL-1醋酸铵)-乙腈=97:3,流速为0.25mL.min-1,柱温为40℃,电喷雾正离子(ESI+)源,监测离子对分别为质荷比(m/z)287.9→175.7(替诺福韦)和m/z277.9→151.7(恩替卡韦)。结果:替诺福韦检测浓度的线性范围为10～800ng.mL-1(r=0.9992),最低检测限为10ng.mL-1,回收率为(100.22±9.47)%～(102.76±4.99)%,日间、日内RSD均小于9.4%;给药45min后血浆样品中替诺福韦的平均浓度为819.2ng.mL-1。结论:该方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于血浆中替诺福韦的浓度测定。     

UPLC-MS法测定艾滋合并结核患者血浆中替诺福韦浓度

目的:建立血浆中替诺福韦(tenofovir,TFV)含量测定的方法,测定艾滋合并结核患者给药后血浆中替诺福韦的浓度。方法:血浆采用甲醇沉淀蛋白,色谱柱为Kinetex Phenyl-Hexyl(50 mm×3.0 mm,2.6μm),流动相为5 mmol·L^-1甲酸铵溶液(A)-甲醇溶液(B),每个样品分析时间为3.5 min,进样量:10μL。采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS)中的正离子多反应监测模式(MRM)进行检测,TFV和同位素内标(TFV-d7)m/z分别是288.0→176.1,295.3→183.2。该方法用于21例艾滋合并结核患者的血浆标本检测。结果:TFV在1~200 ng·mL^-1范围内呈线性关系,定量下限为1 ng·mL^-1,日内和日间精密度均<15%,准确度在85%~115%,低、高浓度质控的提取回收率分别为114.36%、112.96%,基质效应89.49%、89.60%。稳定性试验和稀释质控样品实验(稀释因子=5和4)中低、高浓度质控准确度均在85%~115%。21例患者的TFV平均浓度为108.53±87.94(2.02~413)ng·mL^-1。患者TFV的浓度有71.4%在线性范围内。结论:该方法简单、快速、灵敏,可用于测定该类患者血浆中TFV的含量。     

达卡巴嗪原料药中N-亚硝基二甲胺和N-亚硝基二乙胺的UHPLC-APCI-MS/MS方法的建立

目的:采用UHPLC-APCI-MS/MS法测定达卡巴嗪原料药中的N-亚硝基二甲胺(NDMA)和N-亚硝基二乙胺(NDEA),建立控制该药品遗传毒性杂质的方法。方法:采用Kinetex F5色谱柱(3 mm×100 mm,2.6μm),流动相为0.1%甲酸溶液-甲醇,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温40℃,质谱离子化方式为APCI,正离子模式,多重反应监测,检测离子对为m/z 75.1/58.0(NDMA),103.0/47.0(NDEA)。结果:NDMA和NDEA在一定范围内线性关系良好(r>0.990),检出限溶液浓度分别为0.03030、0.003787 ng·mL(-1),精密度、稳定性试验满足检测要求,回收率为97~115%,RSD均小于5%。结论:本文建立的方法准确、快速灵敏、专属性强,可用于控制达卡巴嗪原料药中遗传毒性杂质NDMA和NDEA的含量。     

LC-MS／MS法测定人血浆中的帕珠沙星

目的：建立一种快速灵敏检测帕珠沙星血药物浓度的液相色谱－串联质谱方法。方法色谱柱为 Agilent Eclipse XDB－C18（4．6mm ×150mm,5μm）;流动相为乙腈：水（0．005mol· L－1甲酸铵,0．1％甲酸）＝（30∶70）;流速：0．5mL· min －1;质谱条件为电喷雾电离源（ESI）;采用选择反应监测（SRM）对帕珠沙星（m／z 319．0→301．1）和环丙沙星（m／z 332．2→314．2）进行测定。样本处理采用乙腈沉淀蛋白法,吸取上清液1μL进样。结果帕珠沙星的线性范围为0．02～20μg· mL －1,提取回收率为82％～92％,日内和日间精密度均小于15％。结论本方法简便、灵敏,该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于临床药物浓度的测定和药代动力学的研究。