山豆根颗粒及其饮片抗肿瘤作用及其机制

目的: 观察山豆根颗粒及其饮片对肝癌H22腹水瘤、S180实体瘤的抑制作用,探讨其作用机制. 方法: 采用小鼠移植性肝癌H22腹水瘤、S180实体瘤的体内实验方法,以环磷酰胺(CTX)为阳性对照,分别取种瘤成功的小鼠随机分为9组,即:正常组,模型组,山豆根饮片高、中、低剂量组(生药7.0,3.5,1.75 g·kg^-1)、山豆根颗粒高、中、低剂量组(生药7.0,3.5,1.75 g·kg^-1)、CTX组(0.02 g·kg^-1).于分组第2天,CTX组ip给药,其余各组ig给予相应的药物,连续给药11 d,每日1次,给药体积均为20 mL·kg^-1体重,分别观察山豆根颗粒及其饮片对荷瘤肝癌H22腹水瘤小鼠和S180实体瘤小鼠瘤重、抑瘤率的影响,并用放射免疫法测定小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)、白介素-2(IL-2)的含量. 结果: 山豆根颗粒及其饮片均能显著抑制小鼠肝癌H22腹水瘤、S180实体瘤的生长,且能显著提高荷瘤小鼠血清中TNF-α,INF-γ,IL-2的水平(P<0.0,或P<0.01). 结论: 山豆根颗粒及其饮片均可对抗肝癌H22腹水瘤、S180实体瘤,其作用机制均可能与其抑制细胞因子的表达有关.山豆根颗粒抗肿瘤作用与其饮片作用相当.     

红树莓果实中鞣花酸和树莓酮的含量测定

目的: 利用高效液相色谱法(HPLC)测定红树莓Rubus corchorifolius Linn.f.果实中鞣花酸和树莓酮的含量。方法: 鞣花酸 ODS CAPCELL PAK C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相CH₃OH-0.2%磷酸(45:55),检测波长254 nm,流速1.0 mL·min^-1;树莓酮 ODS CAPCELL PAK C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相CH₃OH-H₂O(30:70),检测波长271 nm,流速1.0 mL·min^-1。结果: 鞣花酸含量在0.056~0.402 g·L^-1与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 4(n=5),平均加样回收率为100.2%,RSD 1.5%。树莓酮含量在0.014 4~0.033 6 g·L^-1与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 5(n=5),平均加样回收率为99.4%,RSD 1.8%。结论: HPLC简便,准确,重复性好,可用于红树莓果实提取物中鞣花酸和树莓酮的含量测定。     

加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用

目的 探讨加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用,为加味当归贝母苦参丸联合免疫检查点抗体治疗肝癌提供依据。方法 建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组、加味当归贝母苦参丸低、中、高剂量组（4、8、16 g·kg^-1·d^-1）,连续给药14 d,第15天处死小鼠。给药第0、4、8、12、15天测量肿瘤体积;称取瘤重、计算胸腺指数和脾指数;将脾脏淋巴细胞与H22肝癌细胞共培养,细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测肿瘤细胞增殖抑制率;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测脾脏和肿瘤组织中程序性细胞死亡蛋白-1（PD-1）、淋巴细胞活化基因-3（LAG-3） mRNA的表达情况;免疫组织化学法（IHC）检测脾脏和肿瘤组织中CD4⁺、CD8⁺ T细胞数量及PD-1、LAG-3蛋白的表达情况。结果 给药后第8天,各给药组肿瘤体积较模型组均有不同程度下降,第15天肿瘤体积和瘤重均较模型组显著降低（P<0.01）,其中顺铂组下降最为明显。与模型组、顺铂组比较,加味当归贝母苦参丸中、高剂量组胸腺指数显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各用药组脾脏指数均明显升高（P<0.05,P<0.01）,其中顺铂组升高最为显著;与模型组、顺铂组比较,加味当归贝母苦参丸各组脾脏、肿瘤组织中CD4⁺、CD8⁺ T细胞数量和肿瘤细胞杀伤率均显著增高（P<0.01）,LAG-3 mRNA和蛋白表达均明显降低（P<0.05,P<0.01）;加味当归贝母苦参丸高剂量组肿瘤组织中PD-1 mRNA表达较模型组、顺铂组显著降低（P<0.01）。结论 加味当归贝母苦参丸可能通过下调LAG-3表达,促进H22肝癌荷瘤小鼠CD4⁺、CD8⁺ T细胞的增殖并向肿瘤微环境浸润,从而改善T细胞免疫活性、抑制肿瘤生长,为加味当归贝母苦参丸与免疫检查点抗体联用治疗肝癌提供实验依据。     

环磷酰胺联合柿叶乙酸乙酯部位对H22小鼠瘤组织抗氧化能力及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响

目的: 通过研究环磷酰胺(CTX)联合柿叶乙酸乙酯部位(PE)对H22荷瘤小鼠瘤组织的抗氧化作用和对瘤组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白表达的影响,探讨两药联合应用的效果。 方法: 昆明种小鼠,取H22荷瘤鼠腹水接种于昆明种小鼠右前肢腋窝皮下,建立H22荷瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠随机分为模型组,CTX组(0.1 g ·kg^-1),CTX联合PE高、中、低剂量组(2,1,0.5 g ·kg^-1),连续ig给药10 d,处死小鼠后计算抑瘤率,采用金氏q值法判断两者合用的效果,检测瘤组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力,丙二醛(MDA)含量,采用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白表达情况。 结果: 与模型组比较,各给药组抑瘤率明显升高,SOD水平和Bax蛋白表达均明显升高,MDA水平和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);CTX联合PE各剂量组的抑瘤率均高于CTX组,0.85<q<1.15,两药合用作用相加;与CTX组比较,联合用药各剂量组SOD水平和Bax蛋白表达均升高,MDA水平,Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax均降低(P<0.05,P<0.01)。 结论: CTX联合PE能使抑瘤作用相加,其机制可能与两药合用能明显增强H22小鼠机体抗氧化能力,下调Bcl-2蛋白及上调Bax 蛋白的表达有关。     

不同采收时期牻牛儿苗中4种酚酸类活性成分的动态分析

目的： 测定不同采收时期牻牛儿苗中活性成分没食子酸、原儿茶酸、柯里拉京及鞣花酸的含量,为最佳采收期的确定提供依据。 方法： 采用RP-HPLC,AgilentTC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,0.4%磷酸水溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,检测波长259 nm,柱温30 ℃。 结果： 没食子酸,原儿茶酸,柯里拉京,鞣花酸的线性范围分别为0.492~4.920 g·L^-1（r=0.999 3）,0.497~4.970 g·L^-1（r=0.999 7）,0.995~9.950 g·L^-1（r=0.999 8）,0.989~9.890 g·L^-1（r=0.999 7）;平均回收率分别为100.46%（RSD 2.1%）,99.78%（RSD 1.3%）,100.18%（RSD 1.0%）,100.21%（RSD 1.4%）。 结论： 牻牛儿苗中没食子酸及原儿茶酸的含量在五月末达到最大值,柯里拉京及鞣花酸的含量在六月末达到最大值。4种酚酸活性成分总量在六月末达到最高。     

四氢异葎草酮对S180荷瘤小鼠抑瘤及抗血管生成作用的研究

目的 探讨四氢异葎草酮 (TH) 对 S₁₈₀ 荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及其抗血管生成作用。方法 以 S₁₈₀ 荷瘤小鼠为研究对象，分组后给予不同剂量的 TH，给药 7 d 后测定抑瘤率，并运用免疫组化 SABC 法测定肿瘤组织微血管密度 (MVD)。结果 100、200 mg/kg TH 对 S₁₈₀ 荷瘤小鼠的抑瘤率分别达到 24.84% 和 47.27%，瘤质量与对照组比较有显著性差异 (P＜0.05、0.01)；TH 100、200 mg/kg 剂量组肿瘤组织相应的 MVD 平均值分别为 19.568 和 16.100，与对照组比较差异有统计学意义 (P＜0.05、0.01)。结论 TH 对 S₁₈₀ 小鼠实体瘤的生长具有一定的抑制作用，并可抑制肿瘤组织中的微血管生成。     

肺瘤平对S180荷瘤小鼠抑瘤作用及免疫功能的影响

目的：探讨肺瘤平对S180荷瘤小鼠的抑瘤活性及免疫调节作用。方法：SPF级ICR小鼠腋下接种S180肉瘤细胞后随机分为模型组、阳性药紫龙金组（2.60 g·kg^-1,ig）、肺瘤平高、中、低剂量组（生药量25.00,12.50,6.25 g·kg^-1,ig）,另设正常对照组。连续给药10天后处死动物,检测抑瘤率、免疫器官指数、脾淋巴细胞增殖活性、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能、血清半数溶血值（HC₅₀）以及自然杀伤细胞（NK）活性。结果：肺瘤平对S180肉瘤的生长具有显著的抑制作用,高、中、低剂量组的抑瘤率分别为51.88%,32.33%,37.59%,对荷瘤小鼠免疫器官指数没有明显影响;可显著增加荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和NK细胞杀伤活性,提高血清半数溶血值,促进淋巴细胞增殖反应。结论：肺瘤平对S180荷瘤小鼠具有抑瘤和增强免疫功能作用,且效果优于紫龙金片。     

枸杞多糖联合趋化因子对肝癌小鼠T辅助淋巴细胞分化的影响

目的: 探讨枸杞多糖(LBP)及枸杞多糖联合趋化因子(CXCL10)对实验性肝癌荷瘤小鼠辅助性T细胞分化的影响。 方法: 建立H22肝癌小鼠皮下移植瘤模型,分为模型组、LBP高剂量组(ig 100 mg·kg^-1)、LBP低剂量组(ig 50 mg·kg^-1)、LBP+CXCL10组(ig 100 mg·kg^-1+15 μg·kg^-1)、CTX组(ip 20 mg·kg^-1),另设正常对照组。连续给药2周后小鼠眼球取血,颈椎脱臼处死。分离小鼠肿瘤、脾脏、胸腺,计算肿瘤抑制率、胸腺指数、脾指数,流式细胞术检测小鼠外周血T辅助细胞1/T辅助细胞2(Th1/Th2)分化情况。 结果: 与模型组相比,LBP低、高剂量组、LBP+CXCL10组对肿瘤抑制率分别为37.83%,12.50%,14.14%; Th1/Th2分别4.44±3.05,2.48±2.93,4.36±1.96,其中LBP低剂量组及LBP+CXCL10组P<0.05。 结论: 低剂量LBP及LBP+XCL10能显著提高H22肝癌荷瘤小鼠Th1/Th2比率。     

黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞的作用

目的: 探讨黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞(Treg)免疫活性的影响。方法: 建立B16-F10荷瘤小鼠模型,C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、环磷酰胺(CTX)组、黄芪多糖低剂量组(0.15 g·kg^-1)、黄芪多糖高剂量组(0.3 g·kg^-1)。造模后第2天开始ig给药,给药14 d后处死各组小鼠,取肿瘤称重计算抑瘤率,取脾脏制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Treg的比例,通过实时定量PCR检测小鼠脾脏中转化生长因子-β (TGF-β)mRNA,白细胞介素-10(IL-10) mRNA的表达。结果: 黄芪多糖能够抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长(P<0.05),降低脾脏中Treg的比例(P<0.01),降低脾脏中TGF-β mRNA, IL-10 mRNA(P<0.05)的表达。结论: 黄芪多糖可能通过降低荷瘤鼠脾脏中Treg数目,抑制TGF-β, IL-10分泌,从而实现其抑瘤作用。     

六君子汤调控STAT3/泛素蛋白酶体途径防治肺癌恶病质小鼠肌肉萎缩的机制

目的 基于信号传导及转录激活因子3（STAT3）/泛素蛋白酶体途径，体内探讨六君子汤防治肺癌恶病质小鼠肌肉萎缩的作用机制。方法 6周龄雄性C57BL/6J小鼠40只，随机分为空白组，模型组，六君子汤组，抑制剂组，六君子汤联合sttatic组（联合用药组），每组8只。除空白组外，其余各组采用小鼠肺癌细胞（Lewis细胞）右前腋下皮下接种的方法建立肺癌恶病质肌肉萎缩小鼠移植瘤模型，在造模第8天，六君子汤组给予六君子汤灌胃（9.56 g·kg^-1·d^-1）和抑制剂组腹腔注射抑制剂［25 mg·kg^-1·（2 d）^-1］治疗。药物干预3周后取材，称量小鼠体质量、腓肠肌质量；苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠腓肠肌肌纤维病理变化及横截面积的改变；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠腓肠肌中磷酸化-STAT3（p-STAT3），STAT3，肌肉萎缩盒F基因（MAFbx），肌肉环状指基因1（MuRF1）蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠腓肠肌中STAT3，MAFbx，MuRF1 mRNA的表达情况。结果 与空白组比较，模型组小鼠体质量及腓肠肌质量明显减轻，腓肠肌肌纤维横截面积明显减小，腓肠肌中p-STAT3，STAT3，MAFbx，MuRF1蛋白表达及STAT3，MuRF1，MAFbx mRNA的表达明显增加（P<0.05）；与模型组比较，六君子汤组小鼠体质量、腓肠肌质量、肌纤维横截面积明显增加（P<0.05），腓肠肌p-STAT3，STAT3，MuRF1，MAFbx蛋白表达及STAT3，MAFbx mRNA的表达均下降（P<0.05）；与模型组比较，抑制剂组小鼠体质量及腓肠肌肌纤维横截面积增加（P<0.05），抑制剂组腓肠肌p-STAT3，STAT3，MuRF1，MAFbx蛋白表达及STAT3，MAFbx mRNA表达均下降（P<0.05）；与模型组比较，联合用药组小鼠体质量及腓肠肌质量增加（P<0.05）；腓肠肌p-STAT3，STAT3，MuRF1蛋白表达及STAT3，MAFbx mRNA表达均下降（P<0.05）；与六君子汤组比较，抑制剂组、联合用药组腓肠肌中p-STAT3蛋白表达下降（P<0.05）。结论 六君子汤可以防治肺癌恶病质小鼠肌肉萎缩，其机制可能与调控STAT3信号介导的泛素蛋白酶体途径相关蛋白和基因的表达有关。     

Hair Growth‐Promoting Effect of Carthamus tinctorius Floret Extract

The florets of Carthamus tinctorius L. have traditionally been used for hair growth promotion. This study aimed to examine the potential of hydroxysafflor yellow A‐rich C. tinctorius extract (CTE) on hair growth both in vitro and in vivo. The effect of CTE on cell proliferation and hair growth‐associated gene expression in dermal papilla cells and keratinocytes (HaCaT) was determined. In addition, hair follicles from mouse neonates were isolated and cultured in media supplemented with CTE. Moreover, CTE was applied topically on the hair‐shaved skin of female C57BL/6 mice, and the histological profile of the skin was investigated. C. tinctorius floret ethanolic extract promoted the proliferation of both dermal papilla cells and HaCaT and significantly stimulated hair growth‐promoting genes, including vascular endothelial growth factor and keratinocyte growth factor. In contrast, CTE suppressed the expression of transforming growth factor‐β1 that is the hair loss‐related gene. Furthermore, CTE treatment resulted in a significant increase in the length of cultured hair follicles and stimulated the growth of hair with local effects in mice. The results provided the preclinical data to support the potential use of CTE as a hair growth‐promoting agent. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.     

电针对慢性应激抑郁大鼠海马转化生长因子β3和碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的:观察电针对慢性应激模型大鼠海马转化生长因子β3(TGF-β3)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的影响,探讨电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经的营养再生作用。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、氟西汀组,每组10只。除空白组外,其余组均采用慢性应激结合孤养方法造模28d。电针组于造模前1h选取"百会""印堂"穴进行电针,氟西汀组于造模前1h给予盐酸氟西汀混悬液5mL/kg灌胃治疗。通过旷场实验对大鼠进行行为学评价,采用生物素标记抗体芯片技术筛选出海马中差异蛋白TGF-β3、bFGF。结果:造模结束后,与空白组相比,模型组大鼠水平穿越格数、竖立次数均显著减少(P0.01);与模型组相比,电针组和氟西汀组大鼠水平穿越格数、竖立次数均显著增加(P0.01)。与空白组比较,模型组大鼠海马TGF-β3蛋白水平下降(fold change=0.48),bFGF蛋白水平上升(fold change=1.36);与模型组比较,电针组、氟西汀组TGF-β3蛋白水平上升(fold change=1.61,1.61),bFGF蛋白水平下降(fold change=0.61,0.45)。结论:电针可能通过上调TGF-β3蛋白表达水平参与促进神经血管的营养再生,并且良性调节具有神经保护作用的bFGF,使其趋于正常水平,从而改善慢性应激抑郁模型大鼠的行为学症状,这可能是针刺抗抑郁作用的分子机制之一。     

川红拔瘤膏对小鼠脑胶质瘤生长的影响及作用机制

目的:观察川红拔瘤膏外敷对小鼠G422脑胶质瘤生长的抑制作用及其抗肿瘤的机制。方法:选取清洁级小鼠50只,随机分为:对照组、环磷酰胺组、川红拔瘤膏高、中、低3个剂量组。中药组右腋下皮肤涂抹给药,给药量为0.5mL。连续给药14天,阳性对照组连续给药7天。连续观察川红拔瘤膏对肿瘤生长的抑制情况,末次处死后,取肿瘤组织,流式细胞仪检测细胞周期变化与细胞凋亡。RT-PCR法检测肿瘤组织中caspase-3的表达。结果:拔瘤膏高浓度组的瘤重(0.516±0.107)g与其他组比较(除环磷酰胺组)对实体瘤的生长具有显著的抑制作用(P0.05)。高浓度组肿瘤抑制率为31.28%。流式细胞仪结果显示,与空白组比较川红拔瘤膏高剂量组明显将小鼠肿瘤组织细胞阻滞于G0/G1期(P0.05),S期细胞数明显减少(P0.05)。细胞凋亡分析可知,高剂量组作用的肿瘤细胞的凋亡率为(23.6±4.35)%,明显高于对照组(8.86±1.23)%,差异有统计学意义(P0.05)。其他组与对照组比较,差异无统计学意义。caspase-3分析结果显示,与低剂量组、中剂量组,caspase-3表达强度无明显改变[(8.23±0.43),(7.96±0.52)vs(7.24±0.36),P0.05]。高剂量组的caspase-3表达显著增加[(23.45±2.31)vs(7.24±0.36),P0.01]。结论:川红拔瘤膏对小鼠G422脑胶质瘤具有抑制生长的作用,其作用可能与其抑制肿瘤细胞DNA合成、周期阻滞、诱导凋亡及上调凋亡基因caspase-3表达有关。     

黄芪对维生素D缺乏大鼠骨质的保护作用

目的：观察黄芪对维生素D 缺乏大鼠骨质的保护作用。方法：选用30只雄性SD大鼠,随机分为3组：对照组、模型组、黄芪组。实验周期8周。实验结束后,酶免法检测血清25羟维生素D3[25（OH）VD3]、成纤维生长因子-23[FGF-23]、Klotho,股骨HE 染色。结果：与正常对照组比较,维生素D 缺乏大鼠模型组血清25（OH）VD3、Klotho降低,FGF-23升高,存在骨质疏松。与模型组比较,黄芪组血清25（OH）VD3、FGF-23降低,Klotho升高;黄芪组骨质疏松明显改善。结论：黄芪具有调节维生素D 缺乏大鼠FGF-23、Klotho,保护骨质作用。     

乳康饮对裸鼠乳腺癌自发性转移模型淋巴管生成的干预作用

目的观察复方中药乳康饮对乳腺癌移植瘤小鼠淋巴管生成和淋巴结转移的影响,探讨其抗肿瘤转移机制。方法 30只裸鼠乳腺原位种植人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,建立乳腺癌移植瘤自发性转移模型,随机分成6组,分别为模型组,5-氟尿嘧啶（5-FU）对照组,乳康饮小、中、大剂量组以及乳康饮加5-FU组,每组5只。模型组给予生理盐水0.4 mL/d灌胃;5-FU对照组给予30 mg/（kg.d）5-FU腹腔注射;乳康饮小、中、大剂量组分别给予乳康饮18、45、90 g/（kg.d）灌胃;乳康饮加5-FU组给予5-FU 30 mg/（kg.d）腹腔注射,同时给予乳康饮45 g/（kg.d）灌胃,均每天1次,连续6周。用药后检测肿瘤体积、抑瘤率和腋窝淋巴结转移抑制率;免疫组化法检测乳腺癌组织微淋巴管密度（lymphatic microvessel density,LMVD）和血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C）、血管内皮生长因子受体-3（vascular endothelial growth factor re-ceptor-3,VEGFR-3）的表达。结果与模型组比较,各用药组肿瘤体积明显减小,VEGF-C和VEGFR-3表达水平显著下调,LMVD明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;其中以乳康饮加5-FU组抑瘤率及腋窝淋巴结转移抑制率最高,LMVD最低,与其他用药组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论乳康饮可能通过干预VEGF-C及VEGFR-3的表达,影响淋巴管的生成,抑制乳腺癌淋巴转移。     

骨骺干细胞研究现状

骨骺干细胞又称前软骨细胞,存在于胚胎或新生动物四肢干骺端LaCroix环中的一种成体干细胞,其在体外有持续增值及定向分化的能力,是近年来研究发现的保持有干细胞特性的成体干细胞,它的分离和培养为未能找到理想种子来修复软骨缺损和退化所导致的临床一系列疾病的病人带来了希望。然而只分离出骨骺干细胞只是找到了种子来源,如何体外培养并调控骨骺干细胞使其保持生物学特性成为近年来实验研究的热点。     

冬凌草甲素抑制血管生成活性及作用机制

目的:研究冬凌草甲素抑制血管生成的活性及其作用机制。方法:采用体外和体内两种模式,研究冬凌草甲素在血管生成方面的抑制效应。通过体外培养心脏微血管内皮细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的活力,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血管内皮生长因子(VEGF)的含量;体内选择斑马鱼(Fli1-GFP)生物模式,观察冬凌草甲素对胚胎期血管生成和成鱼期血管损伤后再生的影响,并采用相对荧光定量PCR法检测VEGF通路上主要相关基因VEGFA,血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)2,VEGFR3的表达量。结果:冬凌草甲素具有抑制血管生成活性的作用,可抑制体外内皮细胞活力,其半抑制浓度(IC50)8.04 mg·L~(-1),可使细胞血清中VEGF的表达量明显下降;可抑制斑马鱼胚胎期体节间血管生成,且抑制成鱼期血管损伤后再生,可能通过降低体内VEGFA,VEGFR2,VEGFR3基因的表达量从而抑制血管生成。结论:冬凌草甲素可有效抑制血管生成,为其抗肿瘤血管生成治疗提供了重要的科学依据。     

血管内皮生长因子-2 抑制剂细胞筛选模型的构建及应用

 目的 建立针对以血管内皮生长因子受体-2（vascular endothelial growth factor receptor-2, VEGFR-2）为靶标的特异及灵敏的细胞模型体系,用于酪氨酸激酶受体（receptor tyrosine kinase, RTK）抑制剂的筛选和研究。方法 构建人源VEGFR-2真核表达载体pcDNA3.1-VEGFR-2,将其转染至NIH 3T3细胞,获得稳定转染的细胞克隆,并对其进行功能学鉴定及应用;应用瞬时转染VEGFR-2的HeLa细胞,建立VEGF依赖性的受体磷酸化细胞模型及应用。结果 在无血清培养条件下,稳定转染 VEGFR-2的NIH 3T3细胞获得VEGF依赖性的细胞增殖特征;HeLa细胞经瞬时转染VEGFR-2后,可以检测出明显的VEGF依赖性的受体酪氨酸磷酸化。通过应用已知VEGFR-2抑制剂及自行合成化合物,确证以上细胞模型具有较高机制针对性的特征。结论 所构建并确证的细胞模型具有较高特异性和灵敏性,可适用于VEGFR-2和其他RTK抑制化合物的体外筛选与研究。     

Ojeok-san,a traditional Korean herbal medicine attenuates airway inflammation and pulmonary fibrosis induced by repeated ovalbumin challenge

Ethnopharmacological evidence

Ojeok-san, a traditional Korean herbal medicine, is widely used in China, Japan and Korea for treatment of the common cold, pain and fever.

Aim of the study

In this study, we investigated the protective effects of Ojeok-san aqueous extract (OJS) against pulmonary fibrosis using a chronic asthma murine model.

Methods

Mice were sensitized by intraperitoneal injection of ovalbumin (OVA), followed 1 weeks later by an airway challenge with OVA delivered three times a week for 4 weeks. OJS (50 mg/kg or 100 mg/kg) was also administered by oral gavage once a day for 4 weeks.

Results

OJS significantly reduced interleukin (IL)-4, IL-13, eotaxin, immunoglobulin E and the number of inflammatory cells in bronchoalveolar lavage fluid; in addition, it reduced inflammatory cell infiltration and mucus production in the respiratory tract. We found that OJS also attenuated the OVA-induced increase in vascular endothelial growth factor (VEGF), transforming growth factor (TGF)-β₁ and Smad3 protein in lung tissue, as determined by Western analysis and immunohistochemistry. These inhibitory effects of OJS were accompanied by a reduction in pulmonary fibrosis, consistent with the histopathology of lung tissue stained with Masson's trichrome.

Conclusion

Administration of OJS reduced the airway inflammation and pulmonary fibrosis, as well as the level of T helper type 2 cytokines and VEGF and TGF-β₁/Smad3 expressions in lung tissue. These results suggest that OJS might represent a useful new oral therapy for the treatment of chronic asthma.     

虎杖总蒽醌对糖尿病肾病模型小鼠肾皮质 TGF-β1,Smad3的影响

目的:观察虎杖总蒽醌对糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾脏皮质转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3的影响.方法:将成模小鼠随机分为模型、开搏通、虎杖总蒽醌高、中、低剂量5组,每组17只,另外选取17只小鼠做为空白组.给药组分别ig高、中、低剂量的虎杖总蒽醌(400,200,100 mg·kg-1),共给药8周.运用免疫组化法,分别观察虎杖总蒽醌对DN模型肾脏皮质TGF-β1,Smad3的影响.结果:NH小鼠DN模型肾皮质TGF-β1,Smad3蛋白表达水平明显升高,而中剂量虎杖总蒽醌组NH小鼠肾皮质Smad3蛋白表达水平明显下降(IA为542.00±116.89)(P＜0.05);虎杖总蒽醌高、中、低剂量组肾TGF-β1 IA值有降低的趋势,但无统计学意义.结论:TGF-β1,Smad3与DN形成有关;虎杖总蒽醌能显著抑制NH小鼠DN模型肾皮质Smad3蛋白表达.