中波紫外线辐射刺激HaCaT细胞产生IL-6及法莫替T的抑制作用

目的：观察中波紫外线辐射对体外培养的HaCaT细胞产生IL-6的影响及法莫替丁的作用。方法：用不同剂量中波紫外线辐射培养的HaCaT细胞,加入不同浓度的法莫替丁(分别为0、10-7、10-6、10-5、10-4mol／L),在不同时点收集上清液,ELISA法检测IL-6浓度。结果：与未辐射组相比,HaCaT细胞经300、600J／m2剂量的中波紫外线辐射后4h IL-分泌开始显著增加,经100J／m2剂量的中波露外线辐射后24h IL-6分泌开始显著增加(P＜0．05);与未加法莫替丁组相比,HaCaT细胞经300J／m2辐射加入法莫替丁后12、24h可显著抑制IL-6的产生(P＜0．05),最大抑制率为51．85％,出现在加入法莫替丁24h浓度为10-4mol／L时。结论：中波紫外线辐射可刺激HaCaT细胞产生IL-6,法莫替丁可抑制这种作用。     

表皮生长因子受体反义寡核苷酸对紫外线诱导的表皮角质形成细胞c-jun 活性的影响

目的探讨表皮生长因子受体（EGF-R）反义寡核苷酸转染体外培养的表皮角质形成细胞株HaCaT后,对紫外线诱导的表皮角质形成细胞转录因子c-jun活性的影响。方法用一种高灵敏度、高特异性的比色法测定不同剂量中波紫外线（UVB）辐射后以及EGF-R反义寡核苷酸转染后紫外线辐射的角质形成细胞c-jun活性的变化;RT-PCR方法测定EGF-R反义寡核苷酸转染后EGF-RmRNA的表达。结果10、20、30mJ/cm^2 UVB辐射角质形成细胞后均可显著增强c-jun活性（P〈0.05）,不同浓度的EGF-R反义寡核苷酸转染后对30mJ/cm^2 UVB诱导的EGF-RmRNA表达和c-jun活性均有显著抑制作用（P〈0.01）。结论脂质体介导的EGF-R反义寡核苷酸转染表皮角质形成细胞可以抑制UVB辐射诱导的表皮角质形成细胞c-jun活性,表明紫外线诱导角质形成细胞c-jun激活是通过EGF-R介导的。     

NADH抗紫外线诱导的肝细胞株L02凋亡

目的 研究还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）抗紫外线照射所致的细胞损伤的分子机制。方法 采用UVB紫外线照射正常肝细胞株L02（照射剂量为200J／m^2），实验组加／对照组不加NADH（400μg/ml）培养24h。AnnexinV/PI法检测细胞凋亡率，DNA凝胶电泳观察DNA断裂片断，流式细胞仪检测p53、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 NADH可明显抑制紫外线诱导的肝细胞凋亡，并且能够上调Bcl-2蛋白表达，下调p53、Bax蛋白表达。经紫外线照射后的肝细胞存在自身修复。结论 NADH能够抗紫外线诱导的细胞凋凋亡，其机制可能与上调Bcl-2，下调p53、Bax表达有关。     

宁夏川区春、夏季中波紫外线辐射的特征分析

目的 初步探讨宁夏川区中波紫外线（UVB）辐射的变化特征。方法 利用2004年2月至7月在宁夏川区用UV-B紫外辐射计进行的中波紫外线辐射监测资料进行统计、分析。结果 ①宁夏川区UVB辐射具有夏季高、春季低的特点;②到达地面的太阳UVB辐射强度银南〉银川〉银北;③宁夏川区UVB辐射具有明显的日变化,中午高,早晚低,日最高值出现在午后13时左右;④太阳UVB辐射强度在夏季最高可达5．33W／m^2。结论 宁夏川区中波紫外线辐射呈明显的季节、日变化特征。     

钩吻碱类提取物对小鼠脾细胞增殖反应的影响

钩吻碱类提取物在浓度大于１．２５μｇ／ｍｌ以上时对混合淋巴细胞培养反应（ＭＬＲ）均有不同程度的抑制作用，具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）的最低抑制浓度为２．５μｇ／ｍｌ，抑制率为１８．３％。单独采用Ｃ５７ＢＬ／６ｊ小鼠脾细胞进行实验，促有丝分裂剂为细菌脂多糟（ＬＰＳ５μｇ／ｍｌ），在钩吻碱类提取物浓度为４０μｇ／ｍｌ才出现抑制作用（Ｐ＜０．０５），抑制率为１８％，改用刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ２μｇ／ｍｌ）刺激，钩吻碱类提取物最低抑制浓度为２０μｇ／ｍｌ，抑制率为１２．４％（Ｐ＜０．０５）．脾细胞先经ＣｏｎＡ活化．后用白细胞介素２（５ｕ／ｍｌ）维持培养，此时钩吻碱类提取物的最低抑制浓度为４０μｇ／ｍｌ．抑制率为１７．１％（Ｐ＜０．０５）。     

中波紫外线辐射角质形成细胞核因子κB和P53信号通路的交互作用

目的 研究中波紫外线（UVB）辐射对表皮角质形成细胞核因子κB（NF—κB）和P53信号通路的影响以及NF-κB和P53信号通路的交互作用。方法 正常人表皮角质形成细胞（NHEK）（含野生型p53）和永生化人角质形成细胞株HaCaT（含突变型p53）各分2组于37℃、5％CO2环境培养。当细胞融合达85％时进行UVB（60mJ／cm^2）辐射,其中1组于辐射前1h加入终浓度为5μmol／L具有抗NF-κB活化作用的BAY11-7082。分别提取辐射前后NHEK和HaCaT细胞蛋白和核蛋白,应用Western印迹检测NF-KB、P53和P21蛋白的表达水平,应用电泳迁移变更分析（EMSA）检测NF-κB的转录情况。结果 UVB辐射可激活NHEK和HaCaT的NF-κB、P53和P21的蛋白表达和NF-κB的转录活性。BAY11-7082对NHEK和HaCaT的NF-κB的转录活性均具有显著的抑制作用。作为NF-κB的抑制剂,BAY11-7082还显著抑制了NHEK的P53和P21的蛋白表达（P53：0．08±0．07vs0．78±0．32,P〈0．01;P21：0．65±0．22vs1．58±0．77,P〈0．05）,但不影响HaCaT的P53和P21的蛋白表达。结论 UVB辐射激活表皮角质形成细胞的NF—κB和P53信号通路存在交互作用,这种交互作用与P53功能状况相关。     

EGCG对中长波紫外线引起的皮肤成纤维细胞光老化及光突变的干预作用

目的观察绿茶提取物中的主要活性成分没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）对经多次长、中波紫外线（UVA、UVB）照射后人皮肤成纤维细胞（HSF）光老化及突变情况的影响。方法分离并培养新生儿包皮HSF,将其分为正常对照组、EGCG干预组、UVA组、UVA＋EGCG组、UVB组、UVB＋EGCG组;UVB照射剂量为30mJ／cm^2,UVA照射剂量为10J／cm^2,每天照射HSF共持续2周。预实验选定EGCG浓度25μg／ml。采用组织化学染色法检测细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶的表达量,观察细胞老化情况;采用克隆法检测次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HPRT）基因位点突变频率,观察紫外线照射的致突变力以及加入EGCG干预后的情况。结果（1）正常对照组及EGCG组均只见少量的β-半乳糖苷酶阳性细胞。其他几组阳性细胞比率为UVB组：43％±4％;UVA组：54％±4％;EGCG＋UVB组：64％±5％;EGCG＋UVA组：75％±5％,4组细胞间阳性比率差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）正常对照组与EGCG处理组的HPRT自发突变率很低。单纯UVB及UVA照射诱导的突变分别是自发突变的72倍及241倍,而UVB＋EGCG组和UVA＋EGCG组分别较单纯UVB组和UVA组降低了52．78％和32．37％,差异有统计学意义（t=2．0742、2．7042,均P〈0．05）。结论UVA、UVB多次照射后均可上调HSF老化概率,加入EGCG可进一步上调其老化概率。UVA、UVB多次照射后均可增加HSF的HPRT基因位点突变频率,加入EGCG可显著减少HPRT基因位点突变频率。提示EGCG对UVA、UVB多次照射HSF后的保护干预作用可能与诱导突变细胞老化从而减少细胞突变频率有关。     

黄芩对皮肤细胞紫外线辐射损伤的保护作用

目的 研究传统中药黄芩对紫外线(UVA、UVB)损伤皮肤细胞(角质形成细胞和成纤维细胞)的保护作用。方法 采用30、60、90ml／cm^2的UVB和4、8、12J／cm^2的UVA照射培养的原代角质形成细胞和成纤维细胞，加入中药黄芩进行干预处理，以MTT法检测细胞活性。结果 UVA、UVB照射可引起皮肤角质形成细胞和成纤维细胞损伤，而黄芩预处理后细胞活性可恢复8％～38％。结论 黄芩具有光保护性能，可减轻UVA、UVB对皮肤细胞的损伤作用。     

黄色素对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究黄色素（ＳＹ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及其作用机制。方法 以培养的家兔ＶＳＭＣ为材料，采用细胞计数和＾３２Ｐ掺入法，研究了ＳＹ对ＶＳＭＣ的增殖及ＶＳＭＣ中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响。结果 ＳＹ对血清刺激的ＶＳＭＣ的增殖具有抑制作用，且呈剂量和时间依赖性。１．０ｇ／Ｌ达到最大抑制，抑制率为５４．６％，４ｄ（１．０ｇ／Ｌ ＳＹ）达到最大抑制，抑制率为５２．０％，超过４ｄ     

冈田酸促进ATRA诱导NB4细胞的分化及增殖抑制

目的：研究蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸（Okadaic acid，OKA）对全反式维甲酸（ATRA）诱导NB4细胞分化及增殖抑制作用的影响。方法：选用ATRA、OKA、ATRA＋OKA分别作用于NB4细胞，采用MTT法测定细胞增殖率，瑞氏染色法和NBT还原实验观察细胞形态的变化，流式细胞仪分析细胞表面CD11b的表达，丝／苏氨酸磷酸化酶试剂盒检测细胞内PP2A活性。结果：（1）MTT结果显示，OKA对NB4细胞增殖的抑制作用不明显；ATRA、ATRA＋OKA作用7天，对NB4细胞的增殖抑制率分别为25．1％、38．4％，ATRA＋OKA组与其他两组相比差异具有统计学意义（P〈0．05）。（2）细胞形态学、NBT及流式细胞仪结果显示，加入OKA能促进ATRA诱导的NB4细胞分化。（3）酶活性分析显示，ATRA诱导的NB4细胞分化过程中，PP2A活性较对照组明显下降，ATRA＋OKA作用后PP2A活性下降更加明显。结论：OKA促进ATRA诱导的NB4细胞增殖抑制作用，可能通过抑制PP2A活性参与细胞分化过程。     

脂多糖诱导滑膜细胞产生一氧化氮及木黄酮对其的抑制作用

目的：研究脂多糖（LPS）诱导滑膜细胞产生一氧化氮（NO）及酪氨酸激酶（PTK）抑制剂木黄酮对其的抑制作用。方法：LPS或LPS＋木黄酮体外刺激滑膜细胞，用Griess方法检测上清中NO的含量。结果：LPS能诱导滑膜细胞产生NO，此作用具有时间（0－72h)和剂量依赖性（0．01－100μg/ml）；木黄酮（6．25－50μmol/L）剂量依赖性地抑制LPS诱导滑膜细胞产生NO，50μmol/L木黄酮抑制率达到50．22％。结论：木黄酮能剂量依赖性地抑制LPS诱导滑膜细胞产生NO。     

共轭亚油酸对乳腺癌细胞系SKBr3生长与凋亡的作用

目的：比较共轭亚油酸(conjugated linoleic acid，CLA)和亚油酸(linoleic acid，LA)对乳腺癌细胞生长的影响，以探讨共轭亚油酸的抗肿瘤机制．方法：采用体外培养乳腺癌细胞系SKBr3，细胞计数法测定细胞增殖抑制率，检测细胞生长状况，透射电镜观察细胞形态学变化，流式细胞仪检测细胞周期以及Western杂交检测ERK蛋白活化水平．结果：细胞计数法结果显示CLA对SKBr3细胞生长有明显的抑制作用，且随着作用浓度和作用时问的增加，抑制作用增强．CLA各浓度组作用5d后抑制率分别为75．2％、57．9％、33．1％；LA各浓度组作用5d后抑制率分别为38．4％、25．4％、10．1％．电镜观察可见CLA可以引起细胞凋亡，而LA组未观察到明显的病理变化．流式细胞仪检测CLA作用后将细胞阻滞在G1期，作用5d后G1为72．2％，并出现凋亡峰．对照组G1期为50．6％．Western杂交显示CLA显著降低ERK1／2磷酸化水平．结论：CLA可能通过ERK信号转导通路抑制肿瘤的发展．     

丹参和枸杞对中波紫外线损伤角质形成细胞的保护作用

目的:观察丹参和枸杞对中波紫外线(UVB)损伤角质形成细胞的保护作用及作用机制。方法:用丹参和枸杞对HaCaT细胞进行预处理24小时,采用20、40、60mJ/cm2剂量的UVB照射细胞,以MTT法检测细胞生存率,以酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中TNF-α及IL-1β的分泌量。结果:角质形成细胞损伤程度与UVB照射剂量有关,丹参和枸杞均可提高UVB照射后角质形成细胞的生存率,丹参可抑制角质形成细胞释放TNF-α和IL-1β;枸杞只抑制TNF-α的释放,而对IL-1β无明显抑制作用。结论:UVB对角质形成细胞有损伤作用,且与剂量相关;丹参、枸杞可以通过降低UVB引起的炎症因子TNF-α和(或)IL-1β的分泌从而减轻紫外线辐射引起的皮肤损伤。     

TGF-β1对胃癌和耐药性胃癌细胞株的生长抑制与p53和cyclin D1蛋白相关性研究

目的通过已建立的耐药性胃癌细胞株模型，探讨TGF—β1对胃癌细胞及耐药性胃癌细胞株的生长抑制作用与P53和cyclin D1蛋白相关关系的研究。方法利用MTT、Western blot方法检测细胞生长抑制率、P53和cyclin D1蛋白的表达水平；结果TGF—β1明显抑制SNU-601／WT和SNU-601／cis2细胞的生长，与对照组相比具差异有显著性（P〈0．01），同时，对SNU-601／cis2细胞的抑制率与SNU-601／WT细胞相比，48和72h时明显增高（P〈0．05）。Western blot结果，TGF-β1可时间依赖性抑制P53蛋白的表达，与对照组相比差异具有显著性（P〈0．01）。而对cyclin D1蛋白的表达，在SNU-601／cis2细胞中24和48h有明显抑制作用（P〈0．01）。结论TGF—β1抑制SNU-601／WT细胞及SNU-601／cis2细胞的生长，在耐药性胃癌细胞中其抑制作用更明显。其抑制作用可能与抑制P53蛋白的表达有关；同时，在耐药性胃癌细胞株中早期可抑制cyclin D1蛋白的表达。     

普鲁卡因对豚鼠接触性湿疹模型的影响

目的：探讨普鲁卡因对豚鼠接触性湿疹模型的影响。方法：采用０．１％二硝基氯苯涂擦豚鼠耳部,激发接触性皮炎,每周１次,共４周,建立接触性湿疹模型,然后胜利腔注射普产因,每天１次共１４天,测人肿胀度、表皮朗格汉斯细胞数、真皮浸润细胞数。结果：普瞳因组明显地抑制豚亚急性／慢性湿疹。结论：普鲁卡因对湿疹具有治疗作用,其机制可能与朗格汉斯细胞减少有关。     

苯丙氨酸氨解酶抗白血病作用的实验研究

本文采用ＭＴＴ比色分析法对比观察了从绿豆中分离提纯的苯丙氨酸氨解酶（ＰＡＬ）对小鼠白血病Ｌ１２１０细胞和人白血病Ｋ５６２细胞的作用。结果表明：（１）ＰＡＬ对白血病细胞有明显的抑制作用，２．８μ／ｍｌ的酶作用４８小时后抑制率分别达６２．１％和８２．６％，与空白对照相比有显著性差异（Ｐ〈０．０１）。（２）随酶剂量的增加，抑制效果明显增强，同样作用４８小时，０．７μ／ｍｌ的酶其抑制率分别为５．２％和１４     

白藜芦醇合阿糖胞苷对HL-60细胞的增殖抑制作用

目的：观察白藜芦醇（resveratrol，Res）体外单独及联合阿糖胞苷（Ara-c）对白血病HL-60细胞的抑制作用。方法：在体外培养条件下观察不同浓度Res、Ara-c作用48小时后分别对HL-60细胞增殖的影响。然后根据以上抑制结果，选择对HL-60细胞抑制率15％～30％的Ara-c药物浓度，再与不同浓度的Res联合用药。在联合药物处理HL-60细胞48小时后，同样用MTT法检测联合用药对细胞增殖抑制作用。结果：Res、Ara-c体外单独用药均能显著抑制HL-60细胞的生长增殖，Res联合Ara-c（2．5μg／m1）后，对HL-60细胞的增殖抑制作用显著提高，与单独用药组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：Res体外能显著抑制人HL-60细胞的增殖，Res联合Ara-c能显著提高对HL-60细胞的增殖抑制作用。     

PPN抑制HBV-DNA表达及复制的体外实验

目的：体外观察PPN对HBV－DNA表达、复制的抑制效果及其细胞毒性作用。方法：取10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml PPN水溶液分别加入2.2.15细胞株培养悬液中，8天后用放射免疫法检测上清液中HBeAg的含量，并计算HBeAg抑制率、细胞存活率、HBeAg抑制率为50％时的药物浓度（ID50）、实验组存活细胞为对照组的50％时的药物浓度（CD50）和治疗指数（TI）。PCR技术检测HBV－DNA阳性血清中加入160μg/ml PPN水溶液后对HBV－DNA复制的抑制作用。结果：当加入的PPN浓度为160μg/ml和80μg/ml时，HBeAg抑制率分别为89．8％和82．4％，细胞存活率分别为98．7％和99．2％；HBV－DNA阳性血清中加入PPN后可有效抑制其复制。结论：PPN可有效抑制HBV－DNA的表达和复制，且对靶细胞（肝细胞）无细胞毒作用，有进一步研究和推广应用的价值。     

奥沙利铂联合地塞米松对肺腺癌 A549细胞增殖的影响

目的：研究奥沙利铂联合地塞米松对肺腺癌A549／DDP 细胞及肺腺癌患者外周纯化Th17细胞的影响。方法：使用不同浓度的奥沙利铂（0．3125μg／mL、0．625μg／mL、1．25μg／mL、2．5μg／mL、5μg／mL、10μg／mL ）及地塞米松（1nmoL／L、10nmoL／L、100nmoL／L、200nmoL／L、500nmoL／L、1000nmoL／L）在不同时间点（24h、48h、72h）干预人肺腺癌A49／DDP 细胞及Th17细胞,通过细胞增殖抑制实验、细胞凋亡实验检测肺腺癌细胞生长抑制率及细胞凋亡情况,结果：在1nmoL／L～200nmoL／L时地塞米松对肺腺癌A549细胞增殖无抑制作用,500～1000 nmoL／L的浓度范围内,地塞米松以剂量依赖性方式抑制肺腺癌A549细胞增殖,并表现出明显的量效关系（ r＝0．282, P＜0．05）;且随着作用时间的延长,抑制率逐渐增加,呈现出浓度和时间依赖性。在0．3125～1．25μg／mL奥沙利铂肺腺癌A549细胞增殖无抑制作用,2．5～10μg／mL奥沙利铂以时间及剂量依赖性对肺腺癌A549细胞的增殖产生抑制作用,当5μg／mL及10μg／mL奥沙利铂作用于肺腺癌A549细胞细胞72h后,抑制率分别为61．12±0．98％、63．67±0．18％,抑制作用相当（ P＞0．05）。连续给药24h、48h、72h后发现干预24h后即对肺腺癌A549细胞增殖产生抑制作用,联合用药组OD值明显低于单用组,即联合用药其抑制率显著高于其他单用组,且趋势随着用药时间的延长而逐渐明显。结论：地塞米松联合奥沙利铂联合用药能产生协同作用,抑制A549细胞增殖。     

UVA/UVB照射治疗63例玫瑰糠疹的临床观察

目的：探讨UVA／UVB光照射治疗玫瑰糠疹的疗效。方法：光照前2h口服甲氧沙林片，之后照射患处。剂量由2／0．01(J／cm^2)开始，每次递增0．5／0．01(J／cm^2)，隔日1次，共照7次。结果：63例玫瑰糠疹患者经过7次照射治疗后有49例痊愈，11例为显效，2例为进步，1例无效，总有效率达95．24％，痊愈率为77．78％。结论：UVA／UVB照射治疗玫瑰糠疹疗效确实，值得临床应用。