抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体的制备和生物学性质

用经Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰４ｈ和２４ｈ的小鼠低密度脂蛋白（ｍｕｒｉｎｅＯ－ＬＤＬ）混合物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于融合前３天用经Ｃｕ￣（２＋）氧化修饰４ｈ和２４ｈ人低密度脂蛋白（ｈｕｍａｎＯ－ＬＤＬ）的混合物加强免疫，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤ＳＰ－（２／０）细胞融合，获得５株抗人氧化修饰低密度脂蛋白单克隆抗体，命名为ＨＯＬ－１、ＨＯＬ－２、ＨＯＬ－３、ＨＯＬ－４、ＨＯＬ－５。这些单抗均有较高的抗体效价，抗体类型为ＩｇＧ－（２ａ），单克隆抗体相加实验表明，ＨＯＬ－１、ＨＯＬ－３、ＨＯＬ－４识别Ｏ－ＬＤＬ的同一抗原位点，ＨＯＬ－２识别另一个，ＨＯＬ－５识别第３个。竞争性ＢＡ－ＥＬＩＳＡ实验显示：ＨＯＬ－１能够识别丙二醛修饰的ＬＤＬ（ＭＤＡ－ＬＤＬ）、乙酰化修饰的ＬＤＬ（Ａｃｅｔｙｌ－ＬＤＬ）和各种修饰度的Ｏ－ＬＤＬ，但与未修饰ＬＤＬ（ｎ－ＬＤＬ）无交叉反应。     

当归对氧化低密度脂蛋白所致血管内皮细胞损伤的保护作用

通过培养人脐静脉内皮细胞,观察当归对氧化低密度脂蛋白损伤的内皮细胞乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的漏出量及扫描电镜下ＥＣ形态结构的影响,并观察当归在体外对Ｃｕ＾２＋诱导的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的作用。结果显示;在作用２４ｈ后,ｏｘ－ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出明显增加,超微结构明显受损。当归＋ｏｘ－ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出显著减少,超微结构基本正常。     

一种获取氧化修饰型低密度脂蛋白(Ox-LDL)的有效方法

探讨了不同培养体系对血单核细胞源性巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白能力的影响,旨在录求一种获得Ｏｘ－ＬＤＬ的有效方法。实验分为４组,分别为ＨａｍＦ－１０、ＭＤＥＭ、ＤＭＥＭ＋３μｍｏｌ／ＬＦｅ＾２＋、ＤＭＥＭ＋１μｍｏｌ／ＬＣｕ＾２＋。通过测定细胞存活率以及培养液上清中硫代巴比妥酸反应物（ＴＢＡＲＳ）,反映不同培养体系对巨噬细胞生长状态及氧化修饰ＬＤＬ能力的影响。结果表明：ＨａｍＦ－１０培养液对血单核     

高密度脂蛋白氧化修饰对大鼠巨噬细胞胆固醇流出的影响及其…

研究高密度脂蛋白－３（ＨＤＬ３）氧化修饰对其介导大鼠腹腔巨噬细胞胆固醇（ｃｈ）流出功能影响及细胞ｃｈ流出机制。ＨＤＬ３和其组分载脂蛋白Ａ－Ｉ（ＡｏｏＡ－Ｉ）经Ｃｕ＾２＋氧化修饰后分别与巨噬细胞（ＭΦ）一起培养，测定细胞ｃｈ流出量。结果：牛血清白蛋白（对照组）介导３．９８％细胞ｃｈ流出，ＨＤＬ３和氧化ＨＤＬ３（Ｏｘ－ＨＤＬ３）组分别为４１．７８％和１７．４３％，ＡｐｏＡ－Ｉ和Ｏｘ－ＡｐｏＡ－Ｉ分别为     

协同刺激信号α—CD28单抗增强肿瘤特异性CTL体内外的杀瘤活性

目的 采用α－ＣＤ２８单抗增强α－ＣＤ３单抗刺激的肿瘤特异性Ｔ细胞的杀瘤活性。方法 采用２种方案培养ＦＢＬ－３免疫的小鼠脾细胞。（１）使用α－ＣＤ３单抗４８ｈ后,加入α－ＣＤ２８单抗同时使用４８ｈ后,加入α－ＣＤ３单抗、α－ＣＤ２８单抗和２０Ｕ／ｍｌ ｒＩＬ－２（α－ＣＤ３＋α－ＣＤ２８＋ＩＬ－２组）。＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测两组效应细胞的增殖水平。标准４ｈ－＾５１Ｃｒ释放法检测两组效应细胞的杀伤     

芦丁,槲皮素对已受到Fe^2＋和Cu^2＋氧化修饰的低密度脂蛋白…

以反映低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰程度的硫代巴比妥酸反应物质（ＴＢＡＲＳ）及荧光物质含量为指标，研究了芦丁、槲皮素对已受到Ｆｅ＾２＋和Ｃｕ＾２＋氧化修饰ＬＤＬ的抑制作用。结果表明：槲皮素、芦丁对已受到Ｆｅ＾２＋氧化修饰ＬＤＬ有明显的抑制作用，芦丁优于槲皮素；而对已受到Ｃｕ＾２＋氧化修饰的ＬＤＬ，槲皮素显示了较为显著的抑制作用，芦丁只具有轻微的作用。     

高密度脂蛋白的氧化修饰的特征及对低密度脂蛋白氧化的影响

研究高密度脂蛋白（ＨＤＬ）氧化修饰后对其结构及对低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化的影响。在体外用Ｃｕ＾２＋氧化人血浆ＨＤＬ，观察其蛋白和脂质部分的变化，并测定在ＨＤＬ条件下ＬＤＬ氧化的何苦充代巴比妥酸值（ＴＢＡＲＳ）。结果：氧化ＨＤＬ（ＯＸ－ＨＤＬＯ）的ＴＢＡＲＳ值升高，色氨酸残苦（Ｔｒｐ）的特征荧光吸收强度降低且λｍａｘ（发射）从３３５ｎｍ升至３４１ｎｍ，紫外吸收增高，琼脂糖凝胶是泳迁移增快，ＬＤＬ氧     

分泌抗人促甲状腺激素（hTSH）单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＳＰ２／０骨髓瘤细胞与经人促甲状腺激素（ｈＴＳＨ）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞融合，融合率６０．４％，抗体阳性率４．３％，经３－４次克隆化，筛出３株稳定分泌ＴＳＨＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。用放射免疫分析法（ＲＩＡ）检测小鼠腹水，抗体效价为１０＾－４时，抗体结合率为４５．５％。用ＥＬＩＳＡ方法检测小鼠腹水，抗体效价达１０＾－５。其中３株细胞做琼脂糖免疫双扩散试验，均显示为ＩｇＧ１，亚类。染色体计数     

天然及氧化型低密度和检低密度脂蛋白诱导培养的内皮细胞 …

为探讨天然及氧化修饰脂蛋白对培养的内皮细胞ＭＩＰ－１α及ＶＤＭ－１ｍＲＮＡ表达的作用，取正常人新鲜血液，用超速梯度离心法分离出ＬＤＬ和ＶＬＤＬ后，加Ｃｕ＾２＋使之氧化，成为ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ。培养人脐静脉内皮细胞（ＥＣ），待其汇合后分别加放ＬＤＬ、ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、ＯＸ－ＶＬＤＬ，使其终浓度为２５ｕｇ／ｍｌ，对照组不加脂蛋白。培养２４ｈ后，收集ＥＣ，用异硫氰酸胍法提取其总ＲＮＡ，用     

HDL的体外氧化及丙丁酚的抗氧化作用

目的 探讨高密度脂蛋白（ＨＤＬ）的体外氧化过程及丙丁酚对ＨＤＬ氧化的抑制作用。方法 采用一次性密度梯度超速离心法获取人血清ＨＤＬ，以Ｃｕ＾２＋介导其氧化，荧光法检测样品中硫代巴比妥酸反应产物（ＴＢＡＲＳ）的含量，用于判定氧化效果。结果 Ｃｕ＾２＋可有效地介导ＨＤＬ的体外氧化，并在一定范围内呈浓度和时间依赖性：预先加入丙丁酚可有效阻止ＨＤＬ的体外氧化，５μｍｏｌ／Ｌ丙丁酚即有显著的抗氧化作用。结论     

当归对氧化低密度脂蛋白所致血管内皮细胞损伤的保护作用

通过培养人脐静脉内皮细胞,观察当归对氧化低密度脂蛋白（ｏｘ ＬＤＬ）损伤的内皮细胞（ＥＣ）乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的漏出量及扫描电镜下ＥＣ形态结构的影响,并观察当归在体外对Ｃｕ２＋诱导的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的作用。结果显示：在作用２４ｈ后,ｏｘ ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出明显增加,超微结构明显受损。当归＋ｏｘ ＬＤＬ组ＬＤＨ漏出显著减少,超微结构基本正常。在体外,当归能明显抑制Ｃｕ２＋介导的ＬＤＬ氧化,且随着当归浓度的增高显示抑制作用增强。结果表明：当归对ｏｘ ＬＤＬ所致血管ＥＣ损伤具有保护作用,其机制可能与当归抗氧化作用有关。     

冠心病42例血浆载脂蛋白E基因型及脂类、内皮素、一氧化氮水平检测

目的：为了观察血浆载脂蛋白Ｅ（ＡＯＰＥ）基因多态性与冠心病（ＣＨＤ）患者血浆脂类水平及动脉粥样硬化病变进程的关系。方法：测定４２例ＣＨＤ患者的血浆ＡｐｏＥ基因型,分别测定,１：Ｅ２／２＋Ｅ２／３＋Ｅ３／３和１：Ｅ２／４＋Ｅ３／４＋Ｅ４／４两组患者血浆甘油三酯（ＴＧ）,胆固醇（ＴＣ）,高密度脂蛋白－胆固高脂蛋白－胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）,低密度脂蛋白－胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）,ＡｐｏＥ,载脂蛋白Ａ１（Ａｐｏ     

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者T淋巴细胞亚群的变化

目的：探讨阻塞性睡眠呼吸道暂停综合征（ＯＳＡＳ）患者的血Ｔ淋巴细胞亚群（Ｔ－ＬＳ）的变化。方法：将经多导睡眠图检查确诊的ＯＳＡＳ患者按睡眠呼吸紊乱指数（ＡＨＩ）≤３０次／ｈ分为Ａ组（４４例）,ＡＨＩ〉３０次／ｈ分为Ｂ组（４７例）。正常对照组为Ｃ组（１０例）。测定３组患者血Ｔ－ＬＳ。结果：Ａ,Ｂ两组的ＣＤ＾＋２,ＣＤ＾＋４,ＣＤ＾＋８ ,ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８比较差异无显著性（Ｐ〉０．０５）。Ａ组,     

丙肝核酸免疫效果初步观察

目的 观察丙肝核酸疫苗的免疫效果。方法 用丙肝病毒Ｃ＋Ｅ１区基因的真核表达重组质粒ｐＳＶＬ－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１免疫蛇毒预处理的ＢＡＬＢ／Ｃ和Ｃ５７ＢＬ小鼠，两周后采用ＥＬＩＳＡ法开始检测抗体滴度。结果 真核表达重组质粒ｐＳＶＬ－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１免疫能诱导习免疫应答，产生高水平的特异抗体。特别是Ｃ５７ＢＬ小鼠抗体反应最好，初次免疫就能产生高水平的特异抗体，加强后能持续数周，最高滴度ＯＤ值达１．４５。结     

氧化修饰低密度脂蛋白对血管内皮依赖性舒张的影响

目的：探讨氧化修饰低密度脂蛋白（Ｏｘ－ＬＤＬ）中溶血性卵磷脂（ＬＰＣ）与血管效应的关系。方法：采用Ｃｕ＾２＋对低密度脂蛋白进行了氧化修饰,测定Ｏｘ－ＬＤＬ的磷脂含量及其对血管舒张的影响,结果：Ｏｘ－ＬＤＬ中的ＬＰＣ量增加,卵磷脂（ＰＣ）量减少,Ｏｘ－ＬＤＬ明显抑制血管内皮依赖性舒张,且抑制强度与ＬＰＣ量呈正相关,结论：Ｏｘ－ＬＤＬ对血管舒张的抑制作用与ＬＰＣ有关。     

病毒性肝炎病人外周血T淋巴细胞亚群检测意义的再认识

对１５０例病毒性肝炎病人采用免疫光抗体法进行了外周血Ｔ淋巴细胞亚群的检测，以３０名健康人为对照，并探讨了该亚群与ＡＬＴ、ＨＢＶ－Ｍ的关系。与对照组相比，ＡＨ、ＣＰＨ、ＣＡＨ、ＬＣ组，除ＬＣ组ＣＤ８，ＡＨ组ＣＤ４／ＣＤ８外，ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ５均明显减少（Ｐ〈０．０１）〉但各分间无显著差异（Ｐ〉０．０５）；ＡＬＴ５０ｕ以下及以上组，除５０ｕ以下组ＣＤ８，５１ｕ以上组ＣＤ４／ＣＤ５外     

含CpG寡聚脱氧核苷酸对肿瘤抗原肽P815AB的免疫佐剂效应研究

目的 以肿瘤抗原Ｐ８１５ＡＢ抗原肽为模式抗原,研究ＣｐＧ寡聚脱氧核苷酸（ＣｐＧ ＯＤＮ）对该肿瘤抗原表位肽的免疫佐剂效应。方法 用［＾３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法研究ＣｐＧ ＯＤＮ体外刺激小鼠脾细胞增殖效应,用ＥＬＩＳＰＯＴ和［＾３Ｈ］－ＴｄＲ释放法检测不同构成形式的疫苗在体诱发特异性ＣＴＬ应答的效应。结果 ＯＤＮ１８２６在体外可刺激小鼠脾细胞显著增殖,经４次免疫,在“肽＋ＯＤＮ１８２６＋ＩＦＡ”组中,４     

乙酰水杨酸对实验性动脉粥样硬化形成过程中脂代谢的影响

雄性家兔３４只，体重１．５－２．５ｋｇ，随机分为３组喂养，正常组（１０只）饲以基础饲料，模型组（１２只）加饲胆固醇１．５ｇ．ｄ＾－１／只，预防级（１２只）加饲胆固醇１．５ｇ．ｄ＾－只及乙酰水杨酸ＡＳＡ７．５饲ｍｇｄ＾－１／ｋｇ，持续３个月。结果显示，与同模型组相比，预防组血浆ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＡｐｏＢ水平明显下降，ＨＤＬ－Ｃ／ＴＣ升高，主动脉组织Ｃｈ、ＡｐｏＢ及肝组织Ｃｈ含量减少，主动脉粥样硬化程     

IL—12提高DNA疫苗诱导小鼠抗HBV皮下移植瘤的免疫研究

目的 观察ＩＬ－２真核表达载体（ｐＷＲＧ３１６９）对ＨＢＶ－ＳＤＮＡ疫苗（ｐＣＲ３．１－Ｓ）诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２＾ｄ）的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达ＨＢｓＡｇ的小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５细胞（Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ）成瘤性的影响。方法肌肉注射ＤＮＡ疫苗,背部皮下接种Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ细胞,观察成瘤情况,４ｈ＾５１Ｃｒ释放法检测小鼠脾细胞ＣＴＬ活性。结果 对照组、ｐＣＲ３．１－Ｓ及共同免疫     

MBPP^89—101致小鼠实验性变太反应性脑脊髓炎和对M…

用ＭＢＰＰ＾８＾９＾－＾１＾０＾１加完全佐剂免疫ＳＪＬ／Ｊ小鼠，建立ＥＡＥ动物模型，取发病动物淋巴结作细胞培养，并用ＭＢＰＰ＾８＾９＾－＾１＾－＾１激活培养３周，其间２次经Ｆｉｃｏｌｌ－Ｈｙａｐａｑｕｅ分离纯化激活细胞并用Ｘ线照射的脾细胞作为抗原提呈细胞。应用＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法检测细胞对抗原的特异性反应并用ＰＥ－抗－ＣＤ４荧光直接染色和ＦＡＣＳ分析细胞表型阳性％，证明建立的ＣＤ４＾＋Ｔ细胞株对Ｐ