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1.
同型半胱氨酸诱导培养的人脐静脉内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白1α 总被引:6,自引:4,他引:6
探讨同型半胱氨酸是否可诱导人脐静脉内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 1α ,使培养的人脐静脉内皮细胞暴露于不同浓度的同型半胱氨酸 ,采用逆转录聚合酶链反应和免疫细胞化学方法观察其巨噬细胞炎性蛋白 1α的表达。结果发现 ,培养的人脐静脉内皮细胞可表达巨噬细胞炎性蛋白 1α。暴露于同一浓度 (0 .1mmol L)同型半胱氨酸 ,分别孵育 4、8和 16h ,其巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA表达水平分别是对照组的 2 .0 8倍、3.2 6倍和 3.35倍 ;免疫细胞化学发现 ,上述各组巨噬细胞炎性蛋白 1α蛋白表达的平均吸光度值分别是 0 .0 71± 0 .0 0 6、0 .0 81± 0 .0 0 6和 0 .12 8± 0 .0 0 9,均显著高于对照组 (0 .0 4 9± 0 .0 0 5 ,P <0 .0 1)。暴露于不同浓度 (0 .1mmol L、0 .5mmol L和 1mmol L)的同型半胱氨酸 ,孵育 8h后 ,各组巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA表达水平分别是对照组的 2 .0 8倍、4 .35倍和 4 .5 7倍 ,巨噬细胞炎性蛋白 1α蛋白表达的平均吸光度值分别是 0 .0 81± 0 .0 0 6、0 .110± 0 .0 0 9和 0 .118± 0 .0 0 8,均显著高于对照组 (0 .0 4 9± 0 .0 0 5 ,P <0 .0 1)。结果提示 ,同型半胱氨酸可诱导人脐静脉内皮细胞表达高水平的巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA和蛋白。 相似文献
2.
平滑肌细胞源性趋化因子所致单核细胞迁移的钙依赖性研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本文以培养的兔主动脉平滑肌细胞条件培养基作为趋化因子的来源,用改良的Boyden小室微孔滤膜法进行单核细胞的迁移试验,并观察戊脉胺和细胞外Ca2+对其影响。用Fura-2检测单核细胞胞液游离钙浓度,并观察上述条件培养基及戊脉胺对其影响。结果表明,该条件培养基对单核细胞有明显趋化作用并被戊脉胺所抑制;它也能明显地升高单核细胞胞液游离钙浓度,并被戊脉胺所抑制。细胞外Ca2+也能影响单核细胞的迁移。以上结果提示,单核细胞迁移对细胞内、外Ca2+均有依赖性。 相似文献
3.
复制高胆固醇血症(hypercholesterolemia,HC)兔模型,取其血液分离单核细胞(monocytes,MC),培养于含或不含伴刀豆球蛋白A(concanavalinA,ConA)的无血清DME/F12培养基中,收集不同条件的MC条件培养基(MC-conditionedmedium,MC-CM)。并检测其促有丝分裂活性。结果表明,经ConA激活的HC兔的MC-CM刺激3H-TdR掺入NIH3T3 相似文献
4.
为了研究血管平滑肌细胞是否表达极低密度脂蛋白受体mRNA,采用Northern blot分析法检测培养兔主动脉平滑肌细胞表达极低密度脂蛋白受体mRNA的情况。结果发现,培养兔主动脉平滑肌细胞可以表达极低密度脂蛋白受体mRNA;而且,细胞因子白细胞介素-1β能使表达增强约2倍。提示极低密度脂蛋白受体有可能参与动脉平滑肌细胞源性泡沫细胞;白细胞介素-1β上行调节平滑肌细胞表达极低密度脂蛋白受体mRNA 相似文献
5.
复制高胆固醇血症(hypercholesterolemia,HC)兔模型,取共血液分离单核细胞(monocytes MC),培养于含或不含伴刀豆球蛋白A(concanavalin A,COnA)的无血清DME/F12培养基中,惧要不同条件的MC条件培养基(MC-conditioned medium,MC-CM)并检测其促有丝分裂活性。结果表明经Con A激活的HC兔的MC-CM刺激^3H-TdR掺 相似文献
6.
为探讨天然及氧化型极低密度脂蛋白能否诱导培养的人脐静脉内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 1α ,使内皮细胞分别暴露于上述脂蛋白后 ,用原位杂交、逆转录聚合酶链反应及免疫细胞化学法分别检测各组细胞的巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA和蛋白的表达。原位杂交发现 ,培养的内皮细胞能表达巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA ,两脂蛋白组内皮细胞的积分吸光度值明显高于对照组 (P <0 .0 1)。逆转录聚合酶链反应发现 ,两脂蛋白组内皮细胞的巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA的积分吸光度值分别为对照组的 15 .4倍和 14 .2倍。免疫细胞化学发现 ,两脂蛋白组内皮细胞胞浆的巨噬细胞炎性蛋白 1α蛋白表达 (棕色颗粒 )的积分吸光度值显著高于对照组 ,方差分析表明 ,组间差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结果提示 ,天然及氧化型极低密度脂蛋白均可诱导培养的人脐静脉内皮细胞表达高水平的巨噬细胞炎性蛋白 1αmRNA和蛋白 ,通过促进单核细胞迁入内膜在动脉粥样硬化发生中起重要作用 相似文献
7.
为探讨脂质过氧化损伤能否诱导血管内皮细胞表达细胞间粘附分子 1,用胰酶消化法分离人脐静脉内皮细胞进行原代培养 ,内皮细胞用不同浓度联胺作用相同时间或同一浓度联胺作用不同时间 ,使之发生脂质过氧化损伤 ,逆转录聚合酶链反应检测内皮细胞细胞间粘附分子 1mRNA表达 ,细胞酶链免疫吸附实验测定内皮细胞细胞间粘附分子 1蛋白表达。逆转录聚合酶链反应结果发现 ,不同浓度联胺 (1μmol L、5 μmol L和 10 μmol L)作用 8h ,内皮细胞细胞间粘附分子 1对 β actin吸光度比值依次为 0 .5 35、0 .90 8和 1.186 ,分别是对照组 (0 .185 )的 2 .89倍、4 .91倍和 6 .4 1倍 ;而同一浓度联胺 (5 μmol L)作用 4h和 2 4h ,吸光度比值依次为 0 .5 98和 1.2 92 ,分别是对照组 (0 .185 )的 3.2 3倍和 6 .98倍。细胞酶链免疫吸附实验结果发现 ,经 1μmol L、5 μmol L和 10 μmol L联胺作用 4h后 ,内皮细胞细胞间粘附分子 1蛋白表达的吸光度值依次为 0 .1387、0 .1775和 0 .2 32 6 ,分别是对照组 (0 .10 35 )的 1.34倍、1.71倍和 2 .2 5倍 (P <0 .0 1)。结果表明 ,联胺诱导的内皮细胞细胞间粘附分子 1的表达在一定作用时间和浓度范围内呈时间和剂量依赖性。提示联胺诱导的脂质过氧化损伤可能上调细胞间粘附分子 1mRNA和 相似文献
8.
氧化低密度和极低密度脂蛋白对单核细胞血小板源性生长因子B链表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
在单核细胞的培养基中分别加入25mg·L-1低密度脂蛋白(lowdensitylipoprotein,LDL)、氧化LDL(oxidizedLDL,OLDL)、极低密度脂蛋白(verylowdensiylipoprotein,VLDL)和氧化极低密度脂蛋白(oxidizedVLDL,OVLDL),培养24h后再用无血浆脂蛋白培养基收集条件培养基,并观察此条件培养基对 ̄3H-TdR投入血管壁平滑肌细胞DNA的影响。用抗血小板源性生长因子B链抗体(抗PDGF-B抗体)作疫组织化学染色。结果表明,单核细胞能表达PDGFB,OLDL和OVLDL能明显地促进单核细胞PDGF-B的表达,其条件培养基亦能促进 ̄3H-TdR掺入平滑肌细胞DNA内。上述结果提示,OLDL和OVLDL通过加强单核细胞分泌PDGF-B并促进平滑肌细胞增殖而在动脉粥样硬化的发病过程中起作用。 相似文献
9.
脂质过氧化诱导培养的内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白-1 总被引:4,自引:4,他引:4
在人脐静脉和牛主动脉内皮细胞培养基中加入联胺,引发其脂质过氧化损伤,观察能否诱导内皮细胞表述单核细胞起化蛋白河。用斑点杂交法检测内皮细胞暴露于联胺后其单核细胞趋化蛋白-1mRNA的表达,杂交用的探针为了r32P5’末端标记的寡核苷酸探针。同时,用酶联免疫反应检测内皮细胞暴露于联胺后.其条件培养基中的单核细胞趋化蛋白-1蛋白含量。斑点杂交显示.培养的内皮细胞可表达单核细胞趋化蛋白-1mRNA,暴露于联胺后.其单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达水平明显升高。而且,单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达水平与联胺的作用时间和浓度均呈正相关。酶联免疫反应显示,各组条件培养基中的单核细胞趋化蛋白-1蛋白含量亦与联胺作用的时间和浓度呈正相关。提示内皮细胞的脂质过氧化损伤可诱导其产生单核细胞起化蛋白-1增加,在动脉粥样硬化发生过程中单核细胞的聚集可能起重要作用。 相似文献
10.
用培养的兔腹有空巨噬细胞条件培养基作为趋化因子的来源,用改良的Boyden小室微孔滤膜法进行单核细胞趋化试验,观察了兔腹腔巨噬细胞条件培养基对单核细胞的趋化作用和抗单核细胞趋化蛋白-1抗体对单核细胞迁移的影响,同时用Northern blot分析方法检测了MCP-1 mRNA在该巨噬细胞的表达。结果显示,该条件培养基对单核细胞有明显的趋化作用,并被抗MCP-1抗体所抑制,同时该巨噬细胞也能表达MC 相似文献