不同染色法对精子顶体染色效果及适用性的比较

目的:通过比较瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精子顶体染色的效果,寻找有效、更易于判读精子顶体的染色方法.方法:100份精液标本同时采用瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精液涂片进行染色,分析四种染色方法的结果.结果:四种染色方法对Ⅰ型、Ⅳ型精子顶体的评估结果无显著性差异(P＞0.05);改良巴氏染色法相对其他三种染色法对精子顶体染色效果稳定.结论:改良巴氏染色法相对其他三种染色法在精子顶体完整率的判读上具有染色效果稳定的优势,且染液价格经济,适于精子顶体完整率的判读.     

三种精子染色法的染色效果比较

目的评价一种新的精子染色方法BASO（改良Diff-Quik）法在精子顶体检测中的应用。方法收集60例不育症男性精液,用BASO法、改良巴氏法和瑞姬氏混合染色法,同时进行染色,比较其固定和染色时间均数,并分析其精子顶体不完整率检测的差异。结果BASO法固定和染色约需7min,明显短于改良巴氏法和瑞姬氏混合染色法,而精子顶体不完整率检测的差异无显著性。结论BASO法操作步骤简单省时,可用于临床精子标本的染色,分析精子形态及精子顶体完整性。     

精子形态学分析中染色方法的比较

目的：评价改良巴氏染色法、瑞-吉染色法和考马斯亮蓝染色法对形态正常精子率和顶体完整率检测结果影响。方法：分别采用改良巴氏染色法、瑞-吉染色法和考马斯亮蓝染色法对55例男性不育症患者精液涂片染色,计算形态正常精子率和顶体完整率。结果：①3种染色方法检测的形态正常精子率两两比较,差异均无显著性(P>0.05),瑞-吉染色法评价颈部和中段缺陷精子率及尾部缺陷精子率显著低于改良巴氏染色法和考马斯亮蓝染色法（P<0.05）。②3种染色方法检测的Ⅰ型、Ⅳ型顶体完整率两两比较,差异均无显著性 (P>0.05),改良巴氏染色法检测的Ⅱ型和Ⅲ型顶体完整率明显高于考马斯亮蓝染色法和瑞-吉染色法（P<0.05）。③3种染色方法检测的形态正常精子率间均呈显著正相关关系(r=0.535、P<0.01, r=0.601、P<0.01,r=0.329、P<0.05)。3种染色方法检测的顶体完整率间均呈显著正相关关系（r=0.604,P<0.01, r=0.682、P<0.01, r=0.446、P<0.01）。结论：3种染色方法均可作为检测人精子形态和顶体完整率实用方法,其中改良巴氏染色法更适于精子形态学分析,瑞-吉染色法更适于顶体完整率判读。     

精子形态分析在男性不育诊断中的临床应用

目的探讨精子形态染色技术在男性不育诊断中的临床应用。方法已生育健康男性精液标本对照组40例、不孕组男性患者精液200例,精液经处理后涂片,用WHO推荐的改良巴氏染色法对精子进行形态染色,计数正常及异常形态精子,并计算精子正常形态的百分率和多重精子缺陷指数。结果对照组精液标本中精子正常形态率为40.85%,不孕组精子正常形态率为10.53%,显著低于对照组,两组相比有极显著性差异（P〈0.01）。结论精子形态染色在临床男性不育的诊断中占有重要地位。精子形态学染色对男性不育患者的诊治有很大帮助,有助于临床为不孕患者选择助孕方式,为有不良孕产史夫妇查找病因,作为临床诊治的依据。     

瑞氏-姬姆萨与巴氏染色法对精子形态染色效果比较

目的 比较瑞氏-姬姆萨染色法和巴氏染色法对精子形态染色的效果,寻找可替代巴氏染色法的简单、有效的精子形态染色方法.方法 随机选取21份精液标本,每份标本同时采用瑞氏姬姆萨染色法和巴氏染色法对精液涂片进行染色,分析两种染色方法的结果.结果 两种染色方法对精子形态的评估结果无显著性差异(P>0.05);且对正常形态精子和异常形态精子的评估分别具有正相关性,r值为0.984、0.986(P均<0.01).结论 瑞氏-姬姆萨染色法是一种简单有效的精子形态染色方法,可替代巴氏染色法.     

冷冻保护剂对不同质量精液顶体完整性的影响

目的 探讨冷冻保护剂对不同质量精液顶体完整性的影响.方法 采集青壮年自愿者500份精液标本,按照WHO推荐方法进行精液分析,并将其分为6组:正常组、少精子组、畸形精子组、弱精子组、少弱精子组、少弱畸精子组.将各组精液分为3份用于试验.冷冻保护剂用甘油、卵黄及柠檬酸钠配制,精液于液氮中缓冻,1个月后复苏,采用巴氏染色,光...     

顶体形态与精子活力、活率关系分析

目的探讨精子顶体形态与精子活力、活率关系.方法123例男性不育患者,采用精子自动分析质量检测系统检测精液常规,采用伊红Y水实验分析精子活率,采用联苯胺染色计数精液白细胞浓度,用改良巴氏染色法分析精子形态及顶体形态.结果精子活率正常组顶体完整率明显高于精子活率异常组(P＜0.05);精子活力正常组与精子活力异常组顶体完整率比较差异无显著性(P＞0.05);精液参数正常组顶体完整率明显高于精液参数异常组(P＜0.05);顶体完整率与正常形态精子百分率、精子活率呈显著正相关关系(P＜0.05,P＜0.01),与白细胞浓度呈显著负相关关系(P＜0.05).结论顶体形态分析可以在一定程度上反映男性生育力,是男性不育症诊断的一个有价值指标.     

不同染色方法对精子形态学评估的影响

目的:探讨Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法对精子形态学评估的异同性及相关性。方法:对80例标本分别涂片两张,利用Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法分别进行染色,并记录同一标本不同染色方法其正常精子百分率、头部缺陷精子百分率、颈部和中段缺陷精子百分率、尾部缺陷精子百分率、畸形精子形态指数(TZI)、精子畸形指数(SDI)等。结果:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中,正常形态率、各种类型的缺陷率(头部、颈部与中段、尾部)、畸形精子指数、精子畸形指数等均无统计学意义(P>0.05)。结论:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中具有较为一致的结果;改良巴氏染色法虽经典,但过于繁琐;在病人多且急需出具精子形态学检验报告的情况下,可以考虑使用Diff-Quik染色法作为精子形态评估染色方法。     

Diff-Quik与改良巴氏染色法对精子形态染色效果比较

目的:比较Diff-Quik染色法与改良巴氏染色法对精子形态染色效果,寻找简单、快速、准确的精子形态染色方法,替代传统的改良巴氏染色法。方法:选取83份精液标本,每份标本同时采用上述两种染色法对精液图片进行染色,分析两种染色方法的结果。结果:两种染色方法对精子形态评估结果差异无统计学意义(P>0.05);且两种方法对精子正常形态率的评估具有显著正相关性(r=0.926,P<0.01)。结论:Diff-Quik染色法是一种简单、快速、准确的精子形态染色方法,可以替代改良巴氏染色法。     

精子顶体完整率与顶体酶活性的关系

选择精子顶体完整率正常烽异常的男性不育患者以及生育男性新鲜精液标本各１０例，研究精子顶体完整率对顶体酶活性的影响。提示精子顶体完整率与精子顶体酶活性有一定的相关性。     

男性不育症患者精子形态结果分析

目的:对男性不育症患者异常精子形态结果进行统计分析,为临床提供诊断和治疗依据.方法:以2014年5月~2015年5月来我院生殖中心就诊的2180例患者为研究对象,采用改良巴氏染色法用西班牙SCA全自动精子质量分析系统进行精液常规分析和精子形态分析.根据精液分析的相关指标将对象按精子数量和精子活力两两分组即:少精子症组、精子正常数量组;弱精子症组、精子正常活力组;对各组结果进行统计学分析.结果:少精子症组和弱精症组中畸形精子的阳性率明显高于精子正常数量组和精子正常活力组.精子形态的畸形结构分类中,以头部异常为主,其次是颈部和尾部.颈部异常率,尾部异常率两组比较无统计学差异.少精子症组、弱精子症组与精子正常数量组、精子正常活力组的精子正常形态的百分率与其它组比较,有统计学意义.在精子头部尺寸分类中,以小头精子异常为主.头部形态分类中,以无定形头异常为主,其次是圆头异常.顶体区分类中,以空泡异常为主.少精子症组、弱精子症组与其它组比较;头部尺寸、顶体区有统计学意义,头部形态无统计学意义.结论:在不育症患者异常精子形态畸形结构分类中,精子形态异常以头部为主.精子头部尺寸异常分类中,以小头精子异常为主.头部形态异常分类中,以无定形头异常为主,其次是圆头异常.顶体区异常分类中,以空泡异常为主.少精子症、弱精子症患者子精子形态畸形率会明显升高.     

精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率与卵子体外受精率的相关性研究

目的:通过检测常规体外受精中(in vitro fertilization IVF)精液常规分析正常男性的精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率并分析其与卵子的体外受精率之间的关系,旨在为辅助生殖技术提供几种可靠的判断精子生育力的参数与指标。方法:选择2008年7月1日到2009年12月30日间在广西医科大学第三附属医院生殖医疗中心进行控制性长方案超排卵下行常规IVF-ET的100对夫妻,共100个周期的资料做前瞻性分析,男方精液常规分析属正常范围,分析100份标本精子正常形态率、精子顶体完整率以及精子顶体反应率;观察并记录获卵个数、成熟卵个数、受精卵个数、未受精卵个数,计算其受精率。然后应用计量资料t检验,F检验以及线性相关等统计学方法对精子各项参数与卵子受精率之间的相关性进行分析。结果:实验组1,精液标本按其正常精子形态百分率分为3组,A组:≥5%而<10%、B组:≥10%而<15%、C组:≥15%,卵子体外受精率分别为67.05%、74.51%、82.49%,各组间两两相比差异有统计学意义(P<0.05)。实验组2,按顶体完整率分为两组,A组:≤85%组、B组:>85%组,卵子体外受精率分别为74.25%和82.14%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组3,按顶体反应率分为三组,A组:<14%、B组:≥14%而≤25%、C组:>25%,其卵子体外受精率分别为73.45%、77.19%、82.74%,各组间的差异有统计学意义(P<0.05)。实验组4,按精子正常形态百分率分为两组<15%和>15%组,所对应的顶体完整率分别为79.51%、87.27%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组5,用多重线性回归分析,精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率的标准化系数和P值分别为0.352、0.497、0.271;0.045、0.005、0.017,各个系数均有统计学意义。其中又以顶体完整率的标准化系数最大。结论:1.对于精液常规分析正常的男性,约有50%存在着不同程度的精子形态异常。卵子的受精率随正常形态精子所占百分率的升高而增高;其正常精子形态率≥5%,仍可得到一个较好的体外受精率,因此可行常规体外受精助孕。2.对于精液常规分析正常的男性,约有65%男性的精子顶体完整率>85%,随着精子顶体完整率的增加,卵子的受精率也明显增高;3.对于精液常规分析正常的男性,其78%男性精子顶体反应率≥14%,在体外受精中卵子的受精率随着精子顶体反应率所占百分比的增加而增高;4.上述三者都是影响卵子受精的重要因素,卵子体外受精率与以上三项指标间存在较强的相关关系,而其中又以顶体完整率对卵子体外受精率的影响程度最大。5.对于精液常规分析正常的男性,若正常精子形态率≥5%,在体外受精助孕前,精子顶体完整率和精子顶体反应率的检测,可不作为常规检查项目。     

两种精子优选法对精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率的影响

目的：评价Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法对人精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率影响。方法：收集12例男性不育症患者精液样本,分别采用Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法(简称上游法)进行精子优选,应用伊红-Y染色分析优选前后精子活率和尾部低渗肿胀率,应用改良巴氏染色法分析优选前后精子形态。结果：①Percoll法和上游法优选后精子活率和尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较精子活率和尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。Percoll法和上游法优选后B-G型精子尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较B-G型精子尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。②Percoll密度梯度离心法和上游法优选后形态正常精子百分率均明显高于优选前（P<0.05）,上游法优选后形态正常精子百分率明显高于Percoll法优选后形态正常精子百分率（P<0.05）。上游法优选后锥型头、无定型头和颈/中段缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;Percoll法优选后锥型头、无定型头和尾部缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;上游法优选后无定型头、颈/中段缺陷和尾部缺陷形态异常精子百分率明显低于Percoll优选后（P<0.05）。结论：Percoll法和上游法优选后精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率较优选前明显改善, 此两种优选法均可广泛应用于生殖医学,其中上游法优于Percoll法。     

Evaluation on Sperm Acrosome Integrity of Infertile Men with Varicocele

Objective To determine the sperm acrosome integrity of samples from infertile men with varicocele. Methods Forty-nine infertile men with varicocele were divided into three groups according to the grade of varicocele. Group A （grade Ⅰ）, B （grade Ⅱ）, and C （grade Ⅲ） consisted of 15, 18, and 16 cases, respectively. Besides, 15 semen samples from normospermic donors were used as the control. The acrosome integrity of sperm was examined with fluorescein-labeled Pisum sativum agglutinin. Acrosomal ultrastructure was observed with transmission electron microscopy. Results In three varicocele groups, most samples had high sperm abnormal morphology rates. There were significant differences in acrosome integrity rates between each varicocele group and the control （P〈0.01）. Group C had the lowest acrosome integrity rate among the three groups. Ultrastructural observation showed that acrosome malformations revealed acrosomal membranes defects, swelling, hypoplasia, and dissolution of the matrix. Conclusions Infertile men with varicocele had low level of acrosome integrity. Severe varicocele for infertile men might be associated with severe acrosomal defects. Evaluating sperm acrosome should aid the understanding of the sperm structural state and benefit the treatment for infertile men.     

两种处理方法对精子顶体完整性和DNA损伤的影响

目的研究上游法和密度梯度离心法处理对精液常规参数、顶体完整性及DNA损伤的影响。方法 90例男性精液标本用上游法和密度梯度离心法处理,检测处理前后精液常规参数、精子顶体完整率及精子DNA碎片指数。结果两种方法处理后,精子浓度明显下降（P〈0.01）,精子活率、活力明显提高（P〈0.01）;正常形态精子比例和顶体完整率显著提高（P〈0.05）,DNA碎片指数显著降低（P〈0.01）,两种处理方法比较差异无统计学意义。结论两种处理方法均可以使顶体完整精子比例较处理前明显提高,DNA损伤精子比例较处理前明显降低,但两法之间无统计学差异。两种处理方法均可以不同程度优化精液质量,实验室可根据精液情况选择处理方法。     

飞行环境对飞行人员精子头部及尾部超微结构的影响

目的研究飞行环境对飞行人员精子头部及尾部超微结构的影响。方法利用WEILI-9000电脑精液自动分析仪和透射电镜对23例平均飞行1000h以上的歼击机、轰炸机、运输机飞行人员新鲜精液样本的精液常规及精子头、尾部超微结构进行观察。结果精液常规中,飞行人员精液量、液化时间、精子密度、a级精子活力正常;在电镜下飞行人员精子存在形态超微结构异常类型：①头部异常精子,包括尖头精子、头部含空泡精子;②顶体异常精子,包括顶体发育不良、缺失,顶体内形成包涵体精子;③尾部异常精子,尾部形态异常精子包括无尾精子、短尾精子,尾部结构异常精子包括线粒体缺失精子、尾部线粒体多种形态和结构异常。结论飞行环境对飞行人员精液常规无较大影响且具有可逆性,但可致精子顶体、头部、尾部线粒体微观结构异常。