绞股蓝皂甙对早期糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β1蛋白含量影响的研究

目的:探讨绞股蓝皂甙对早期糖尿病肾病的防治作用及机制。方法:采用Western Blot蛋白印迹法对糖尿病肾病模型大鼠肾脏中TGF-β1的蛋白含量进行测定,分析绞股蓝皂甙改善肾功能的机制。结果:和正常大鼠相比,各组糖尿病大鼠TGF-β1的蛋白表达均增高;各给药组TGF-β1的蛋白表达较模型组降低;中剂量绞股蓝皂甙组对TGF-β1蛋白表达的降低作用与人参皂苷组相似。结论:绞股蓝皂甙对早期糖尿病肾病具有防治作用,其机理与抑制TGF-β高表达,减少肾小球系膜区ECM积聚有关。     

中药复方对糖尿病大鼠肾脏TGF—β_1 mRNA表达的影响

目的:观察健脾益肾活血化瘀法组成的中药复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质转化生长因子β1(TGFβ1)的影响,探讨其作用机理。方法:实验采用链脲佐菌素(STZ)按53mg/kg剂量腹腔一次性注射建立糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后随机分为中药组(中药复方)、西药组(瑞泰)、模型组和正常组。灌胃8周后RT—PCR法检测大鼠肾皮质TGFβ1mRNA表达。结果:各治疗组与模型组比较均明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1mRNA表达(P<0.01),且中药组优于西药组(P<0.01)。结论:中药复方通过降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1mRNA的表达,从而起到保护肾脏,延缓肾脏病理损害,抑制糖尿病肾病形成的作用。     

三七皂苷对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的：观察三七皂苷（PNS）对糖尿病（DM）大鼠肾脏转化生长因子β1（TGFβ1）、纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）mRNA表达的影响,探讨PNS对DM大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法：以四氧嘧啶复制DM大鼠模型,动物分为正常组、模型组、PNS高、低剂量治疗组。生化检测空腹血糖（FBG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）及尿蛋白（Upro）;HE、PAS染色,光镜观察肾组织形态学改变;RT—PCR检测肾组织TGFβ1、PAI—mRNA表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠FBG、BUN、Cr、Upro、TC、TG水平升高（P〈0．01）,肾小球基底膜增厚,TGFβ1、PAI-1mRNA表达增加（P〈0．05）。PNS治疗组大鼠以上生化指标均降低,肾小球纤维化程度减轻,TGFβ1、PAI-1mRNA表达减少,与模型组比较,有显著性差异（P〈0．01）。结论：三七皂苷可能通过降低TGFβ1、PAI-1mRNA表达,进而对DM大鼠肾脏具有保护作用。     

中药复方对糖尿病大鼠肾皮质转化生长因子β1、Ⅳ型胶原mRNA表达的影响

目的观察健脾益肾活血化瘀法组成的中药复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质转化生长因子β1(TGFβ1)与Ⅳ型胶原mRNA表达的影响,探讨其作用机理。方法采用链脲佐菌素(STZ)按53mg/kg剂量腹腔一次性注射建立糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后随机分为中药组(中药复方)、西药组(瑞泰)、模型组和正常组。灌胃8周后RT-PCR法检测大鼠肾皮质TGFβ1与Ⅳ型胶原mRNA表达。结果各治疗组与模型组比较均明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、Ⅳ型胶原mRNA表达(P<0.01),且中药组优于西药组(P<0.01)。结论中药复方通过降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1、Ⅳ型胶原mRNA的表达,从而起到保护肾脏、延缓肾脏病理损害、抑制糖尿病肾病形成的作用。     

绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病大鼠结缔组织生长因子表达的影响

目的:为探讨CTGF在糖尿病肾病发生中的作用,寻找有效的干预药物,观察绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病大鼠肾脏CTGF表达的影响。方法:采用肾脏病理形态以及免疫组织化学检查对糖尿病肾病模型大鼠肾脏中CTGF mRNA含量的测定,分析绞股蓝皂苷改善肾功能的机制。结果:病理切片示各造模组大鼠肾小球系膜区细胞外基质呈不同程度的积聚。和正常大鼠(F组)相比,各组CTGF mRNA含量均增高;各给药组(A、B、C、D组)CTGF mRNA的蛋白表达较模型组(E组)降低;D组对CTGFmRNA蛋白表达的降低作用与B组相似。结论:绞股蓝皂苷能明显抑制实验性糖尿病肾病大鼠CTGF表达,从而减少肾小球系膜区ECM的积聚。     

川芎嗪对IgA肾病大鼠的肾脏保护作用及TGF—β表达的影响

目的：研究川芎嗪对IgA肾病（IgAN）大鼠肾脏的保护作用及对TGF—β表达的影响。方法：建立IgA肾病大鼠模型,随机分成模型组、地塞米松组、川芎嗪组,另设正常对照组;光镜观察肾组织形态,RT-PCR检测肾组织的TGF-βmRNA、表达,ELISA法测血清TGF—β水平。结果：光镜下川芎嗪治疗组IgAN大鼠的肾组织病理损害减轻。RT—PCR结果显示地塞米松与川芎嗪下调TGF-βmRNA,与模型组相比差异有统计学意义（P〈0．01）;ELISA结果提法明地塞米松与川芎嗪显著降低血清TGF—β水平,与模型组相比差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论：川芎嗪能明显改善IgAN大鼠肾组织的病理损害。川芎嗪能够下调肾组织TGF-βmRNA、TGF—β蛋白水平,这可能是川芎嗪治疗IgA肾病的作用机制之一。     

健脾补肾益气养阴法对Ⅱ型糖尿病大鼠肾脏CTGFmRNA、TGF-β1mRNA表达的影响

目的:观察健脾补肾、益气养阴法对糖尿病肾病大鼠肾脏基因表达的影响.方法:选用Wistar大鼠,通过高脂高糖饮食加腹腔小剂量注射链脲佐菌素复制糖尿病肾损伤大鼠模型,采用逆转录聚合酶链反应检测肾内TGFβ1 mRNA、CTGF mRNA表达情况.结果:健脾补肾、益气养阴法能下调TGFβ1 mRNA、CTGF mRNA的表达...     

雪芪通肾汤对糖尿病肾病大鼠尿蛋白定量及TGF—β1表达的影响

目的：观察雪芪通肾汤对糖尿病肾病大鼠TGF—β1表达的影响。方法：造模成功后进行24周给药，测24h尿蛋白定量，取左侧肾脏，检测TGF-β1、TGF—β1mRNA在肾组织中的表达。结果：与模型组比较，治疗组24h尿蛋白降低（P〈0．01）；和模型组比较，TGF-β1半定量免疫组化分析、RT—PCR检测结果均显示，治疗组的表达低（P〈0．01），治疗组之间的比较则无明显差异（P〉0．05）。结论：雪芪通肾汤可降低蛋白尿，可能通过抑制DN大鼠肾组织中TGF-β1的表达，发挥抗肾脏纤维化、延缓DN病程进展保护肾脏的作用。     

糖肾颗粒对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及对炎症的影响

目的：进一步探讨糖肾颗粒对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及从炎症角度探讨其机制。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和糖肾颗粒治疗组（含生药21g/kg）。以高脂高糖饮食加低剂量注射链脲佐菌素（STZ,30mg/kg）复制2型糖尿病大鼠模型。观察各组生化指标,光镜（HE和PAS染色）观察肾脏病理,免疫组化技术检测转化生长因子β1（TGFβ1）蛋白表达,荧光定量PCR技术检测肾脏组织中TGFβ1mRNA表达,ELISA技术检测血清巨噬细胞趋化因子1（MCP-1）、细胞间黏附分子1（ICAM-1）和肿瘤坏死因子α（TNFα）的浓度。结果：实验8周末,模型组血糖、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、24h尿微量蛋白（U-alb）均升高,肾脏TGFβ1蛋白和mRNA表达增加,血液中MCP-1、ICAM-1和TNFα水平均增高,与正常对照组比较,均P〈0.01;肾间质炎症细胞浸润。与模型组比较,糖肾颗粒治疗可改善生化指标P〈0.05;减轻肾脏病变及炎症细胞浸润;抑制TGFβ1基因和蛋白的表达,P〈0.05;降低血液中炎症因子的含量,ICAM-1和TNFα,P〈0.05。结论：糖肾颗粒对糖尿病肾脏具有保护作用,其部分机制可能通过抑制炎症因子的释放,减少炎症细胞浸润实现的。     

糖肾宁对糖尿病肾病模型大鼠TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:观察糖肾宁对糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织中TGF-β1 mRNA表达的影响。方法:用三联造模法(单侧肾摘除+高糖高脂+小剂量STZ腹腔注射)建立早期糖尿病肾病大鼠模型,药物干预12 w后,采用RT-PCR方法研究糖肾宁对肾脏组织中TGF-β1 mRNA表达的影响。结果:用三联造模法可成功复制早期糖尿病肾病大鼠模型,模型大鼠的肾脏组织中TGF-β1 mRNA表达呈异常增多趋势,糖肾宁可减少TGF-β1 mRNA在模型大鼠肾脏组织中的异常表达。结论:糖肾宁可有效过降低TGF-β1 mRNA在模型大鼠肾脏组织中的异常表达,可能对肾功能起到保护作用。     

LOX-1和炎症因子在糖尿病肾病中的作用及糖肾颗粒早期干预研究

目的:探讨LOX-1和炎症因子在糖尿病肾病中的作用及其机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组。以高脂高糖饮食加低剂量注射链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型。动态观察:生化指标和肾脏病理变化,LOX-1和TGFβ1蛋白和m RNA表达,检测血清MCP-1、ICAM和TNFα的浓度。结果:随着造模时间的延长,模型各组血清TC、TG、LDL含量和24h尿蛋白量逐渐升高;MCP-1、ICAM和TNFα水平均增高;LOX1和TGFβ1蛋白和m RNA表达逐渐增加;糖肾颗粒组指标降低,和模型组比较有显著差异。结论:糖肾颗粒可降低LOX-1和TGFβ1的表达,降低炎症因子的释放,提示糖肾颗粒可能是通过抑制LOX-1和TGFβ1表达进而抑制炎症反应从而起到保护肾脏的作用,提示LOX-l在DN发生和发展过程中起重要作用。     

葛根素对糖尿病大鼠肾脏糖基化终产物和转化生长因子-β1表达的影响

目的 研究葛根素对糖尿病大鼠肾脏糖基化终产物（AGEs）和转化生长因子-β1 （TGF—β1）表达及肾脏病理形态学的影响。方法 大鼠随机分为正常对照组（CN组）、糖尿病模型组（DM组）和葛根素治疗组（DP组）。葛根素处理10周后，测定血糖、尿白蛋白、肾小球基底膜厚度（GBMT）和肾脏肥大指数，以光镜和电镜观察肾脏病理改变。用荧光显微镜曝光时间法测定肾组织AGEs含量，用免疫组化法检测肾组织TGF-β1的表达。结果 糖尿病大鼠尿白蛋白、肾脏肥大指数、GBMT均显著高于正常对照组（P〈0．01），葛根素处理后上述指标均明显下降（P〈0．01）。葛根素治疗组的肾组织AGEs荧光曝光时间较糖尿病模型组延长（P〈0．05），肾组织TGF-β1的表达阳性率明显低于糖尿病模型组（P〈0．01），并且肾脏病理改变也有所改善。结论 糖尿病大鼠肾组织中AGEs含量及TGF—β1的表达均明显增加。葛根素可以减少其肾组织AGEs含量，下调TGF—β1的表达，改善糖尿病大鼠早期肾脏病理改变。     

牛蒡子提取物减轻糖尿病大鼠肾脏病变的机理研究

导师陈以平教授在继承传统中医的精华的基础上，结合个人丰富的临床经验，提出用复方牛蒡子合剂治疗糖尿病肾病，并且已应用于临床，取得了良好的治疗效果。既往的研究已证实，复方牛蒡子合剂可改善糖尿病大鼠的肾脏病理改变，为了明确其主药牛蒡子对糖尿病肾损害的作用机制，我们针对单味药牛蒡子，以其对大鼠肾皮质TGF—β1和MCP—1mRNA表达的影响为依据，进行了一部分实验研究。目的：研究牛蒡子及其提取物对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠肾脏TGF-β1 mRNA和MCP—1mRNA表达的影响。方法：以链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠为动物模型，中药治疗组分别给予牛蒡子粉饲料、牛蒡子水提物、醇提物进行6周的实验，观察了大鼠的一般状况，聚合酶链反应(RT—PCR)方法测定肾皮质TGFBβ1、MCP-1mRNA的表达。结果：牛蒡子提取物能明显改善STZ大鼠多饮、多食和体重增加减少等症状．减少肾组织转化生长因子β1(TGF—β1)mRNA、单核趋化蛋白1(MCP-1)mRNA的表达。结论：牛蒡子提取物对糖尿病大鼠肾脏病变有一定的改善，其作用机制可能与降低肾脏TGF-β1和MCP—1mRNA的表达有关。研究表明：牛蒡子醇提物较其水提物和粗粉疗效更为显著。     

糖肾平干预糖尿病肾病大鼠肾脏组织TGF-β1和FN表达的实验研究

目的：通过研究糖肾平对糖尿病肾病大鼠肾脏组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）和纤连蛋白（FN）表达活性的影响，探讨糖肾平治疗早期糖尿病肾病的机理。方法：将60只雄性Wistar大鼠分成四组（每组15只），分别设定为正常组、糖尿病肾病模型组、糖尿病肾病＋贝那普利组、糖尿病肾病＋贝那普利＋糖肾平组。各给与相应处理，糖肾平组给喂服糖肾平方，治疗6周，处死大鼠，取出取左侧肾脏，免疫组化测定肾脏组织TGF-β1和FN的表达活性。比较治疗前后各组TGF-β1和FN的表达活性。结果：TGF-β1在正常对照组主要在肾小管细胞浆中表达，而肾小球系膜区表达较少；在糖尿病肾病模型组，TGF-β1表达明显增加（P〈0．01）；在糖肾平联合贝那普利组上述明显增加的表达受到显著抑制（P〈0．05）。正常对照组肾小球系膜细胞、肾小管基底膜有少量FN表达；在糖尿病肾病模型组，这些成分表达明显增加（P〈0．01）。在糖肾平联合贝那普利组上述明显增加的表达受到显著抑制（P〈0．05）。结论：糖肾平能够抑制TGF-β1、FN在糖尿病肾病大鼠。肾组织中的表达。     

Exendin-4干预对糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β_1mRNA和蛋白表达的影响

目的通过Exendin-4对糖尿病肾病（DN）大鼠进行干预治疗,观察其对肾组织转化生长因子1（TGF-β1）mRNA和蛋白表达的影响。方法用高糖高脂饲料结合小剂量的链尿佐菌素建立糖尿病肾病模型,随机分为糖尿病肾病模型组、Exendin-4低剂量治疗组[4μg/（kg.d）]和Exendin-4高剂量治疗组[20μg/（kg.d）],治疗6周后测定各组大鼠24h蛋白尿、血糖、血脂,HE染色光镜下观察肾组织的病理变化,用免疫组化法及RT-PCR两种方法检测TGF-β1的表达。结果与糖尿病肾病模型组相比,Exendin-4治疗组的血糖、血脂、24h尿蛋白定量均下降（P〈0.05）,高剂量治疗组改善更明显（P〈0.05）。与糖尿病肾病模型组相比,Exendin-4治疗组大鼠肾组织的TGF-β1表达明显下降（P〈0.05）,高剂量治疗组大鼠肾组织的TGF-β1表达下降更明显（P〈0.05）。结论 Exendin-4对糖尿病肾病大鼠具有一定的肾脏保护作用,且有剂量依赖性,其机制可能与降低TGF-β1mRNA和蛋白的表达进而抑制细胞外基质的堆积有关。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因CcL5mRNA表达的影响

目的：比较糖尿病肾病（DN）大鼠和中药复方肾消康治疗组大鼠肾脏组织中基因表达的差异，并用Evegreen实时荧光RT—PCR技术定量检测CcL5mRNA在各组大鼠肾脏组织的表达水平。方法：（1）差异表达基因的筛选：实验大鼠分为空白组、模型组、治疗组。从肾脏组织中抽提mRNA，由纯化的总RNA合成双链cDNA，并将其纯化，以生物素标记cRNA合成，纯化和质控体外转录（IVT）产物，片断化cRNA，然后进行杂交、洗脱、染色、芯片扫描并用软件进行统计分析，筛选出差异表达数据。不同肾脏组织样本用灰度扫描图和杂交信号强度散点图表示。（2）荧光定量RT—PCR的检测：RNA样品反转录，荧光定量PCR反应。结果：仅对筛选出差异表达基因谱中的CcL5mRNA进行报告。糖尿病肾病模型组肾脏组织基因CcL5mRNA表达上调，中药复方肾消康治疗组肾脏组织基因CcL5mRNA表达下调。结论：CcL5mRNA在糖尿病状态下肾脏也有表达，并且表达上调，而中药复方肾消康可使其下调，这也是中药复方对糖尿病性肾组织损伤具有保护作用的机制之一。     

雷公藤多甙对早期糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的：探讨雷公藤多甙（TW）对糖尿病肾病（DN）模型大鼠肾组织中TGF-β1表达的影响。方法：采用高脂饲料＋链脲佐菌素诱导糖尿病肾病造模,用TW灌胃DN大鼠,生化检测实验大鼠24小时尿蛋白、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、血浆白蛋白（ALB）;LeicaQwinPlus图像分析系统测量肾小球直径;PAS染色观察大鼠肾脏病理变化;免疫组化（IHC）检测肾组织TGF-β1表达。结果：TW能够降低实验大鼠24小时尿蛋白、SCr、BUN,升高ALB,减小肾小球直径及减轻肾重,改善肾脏病理变化及降低肾组织TGF-β1表达,与模型组相比,具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：TW可能通过影响DN大鼠肾组织中TGF-β1的表达,改善上述生化指标,减轻肾脏病理损害。     

糖肾平胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织TGF-茁1蛋白及mRNA表达的影响

目的：探讨糖肾平胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织TGF-茁1 蛋白及mRNA 表达的影响。方法：雄性SD 大鼠,50 只,按体重随机分为正常组10 只,模型组40 只。模型组大鼠按55mg·kg-1,腹腔一次性注射链脲佐菌素,72h 后血糖逸16.7mmol·L-1,尿糖逸4垣者为造模成功。将造模成功的大鼠按血糖高低随机分为模型组、厄贝沙坦组、糖肾平胶囊组。每周称体重,第4、8、12 周分笼收集24h 尿液检测24h 尿蛋白定量。用药12 周,处死大鼠行血液生化指标BUN、Scr、TG 检测及肾组织Mallory 染色,观察生化指标和肾组织病理形态学改变,采用免疫组织化、原位杂交方法观察分析肾组织TGF-茁1 蛋白及mRNA 的表达情况。结果：模型组大鼠摄食减少、精神不振、活动迟缓、尿量减少、体重减轻、24h 尿蛋白定量增高、肾脏病理改变等,而糖肾平胶囊组对以上指标均有不同程度改善,并优于厄贝沙坦组;正常组及用药组肾小管上皮细胞、肾间质细胞胞浆有轻度TGF-茁1 蛋白及mRNA 表达,模型组则呈强阳性表达。糖肾平胶囊组与模型组比,TGF-茁1 蛋白及mRNA 表达明显减少（P<0.05）。结论：糖肾平胶囊可通过对肾组织TGF-茁1 蛋白及mRNA 表达下调而发挥治疗和预防糖尿病肾病的作用。     

新加下瘀血汤对糖尿病大鼠肾脏骨形成蛋白7和转化生长因子β1表达的影响

目的:观察新加下瘀血汤对糖尿病大鼠肾脏组织中转化生长因子β1(TGFβ1)和骨形成蛋白7(BMP7)表达的影响,以探讨新加下瘀血汤对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和新加下瘀血汤治疗组。以四氧嘧啶复制糖尿病模型。12周后观察空腹血糖、血肌酐水平及24h尿微量蛋白,光镜(PAS染色)观察肾脏病理,RT-PCR技术检测肾脏组织中BMP7,TGFβ1及纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)mRNA表达。结果:与模型组比较,新加下瘀血汤明显降低糖尿病模型大鼠血糖、肌酐水平和尿蛋白的排泄,肾脏病理显示肾损害明显减轻,BMP7表达明显增加,TGFβ1及PAI1 mRNA表达明显降低。结论:新加下瘀血汤对糖尿病肾脏有明显的保护作用,其机制可能与其降低肾脏TGFβ1表达,增加BMP7的表达进而降低PAI1表达有关。     

绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的影响及机制

目的:研究绞股蓝总皂苷对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏足细胞相关分子(nephrin)、血管通透因子(VEGF)mRNA表达的影响,探讨其降低尿蛋白、保护肾脏的机制。方法:采用单侧肾切除加链脲佐菌素(STZ)注射法改良复制DN模型,实验分为正常组、模型组、治疗组(绞股蓝总皂苷高、中、低剂量组)和缬沙坦组。干预4周后电镜观察肾小球超微结构改变,RT-PCR检测nephrin、VEGF mRNA表达。结果:各治疗组病理变化较模型组均有不同程度改善:足突增宽或部分融合,基底膜增厚减轻,同时nephrin mRNA表达水平较模型组明显上调(P0.01),VEGF表达明显抑制(P0.01),其中高剂量组和缬沙坦组效果类似,明显优于低剂量组(P0.01)。结论:绞股蓝总皂苷可能通过上调足细胞相关分子nephrin表达,抑制分泌VEGF过表达,减轻足细胞超微结构改变,从而保护足细胞,降低尿蛋白,延缓肾小球硬化。