Smo和Gli1在胃癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Smo和Gli1在胃癌及癌旁组织中的表达与胃癌的临床病理因素之间的关系;并探讨两者之间在胃癌中的关系.方法:应用免疫组织化学EliVision法测定75例胃癌组织和45例对应的癌旁组织中Smo和Gli1的表达情况.应用RT-PCR技术检测30例新鲜胃癌组织及癌旁组(距切缘5 cm)组织中Smo mRNA和Gli1 mRNA的表达情况.结果:免疫组织化学染色结果显示,胃癌组Smo和Gli1表达阳性率均显著高于癌旁组(P<0.01);RT-PCR显示,胃癌组Smo和Gli1表达水平均较癌旁组显著升高(P<0.01).2种方法均提示Smo、Gli1在胃癌组织中的表达阳性率在病人年龄、性别、肿瘤分化程度及肿瘤大小间差异均无统计学意义(P>0.05),而在TNM分期、浸润深度、及淋巴结转移间差异均有统计学意义(P<0.01).结论:Smo与Gli1蛋白表达与胃癌淋巴结转移、临床分期、浸润深度等因素相关,提示两者可能与胃癌的恶性生物学行为有关.Smo与Gli1在胃癌中的表达呈正相关关系,两者可能协同促进肿瘤的发生与发展.     

Shh、Gli1和MMP-9在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌组织中Hedgehog(Hh)信号通路分子(Shh和Gli1)与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达以及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测54例人胃癌组织、癌旁组织和30例正常胃黏膜组织中Shh、Gli1和MMP-9蛋白的表达.结果 胃癌组织中Shh、Gli1和MMP-9的阳性表达率分别为68.52％、61.11％和64.81％,明显高于癌旁组织(阳性表达率分别为27.78％、24.07％和22.22％)和正常组织(阳性表达率分别为36.67％、26.67％和33.33％)(P＜0.05);三者的表达均与胃癌患者性别、年龄、部位无关(P＞0.05);而与分化程度、浸润深度以及淋巴结转移相关(P ＜0.05);Shh、Gli1分别与MMP-9表达呈正相关.结论 Hedgehog( Hh)信号通路可能通过上调MMP-9的表达促进胃癌的侵袭转移.联合检测胃癌组织中Shh、Gli1和MMP-9蛋白水平,可作为胃癌预后的客观参考指标.     

Gli1在乳腺癌中表达与临床预后的相关性研究

目的 评估乳腺癌患者Gli1表达的临床应用价值.方法 免疫化学法检测乳腺癌、癌旁组织、转移淋巴结组织中Gli1蛋白表达.结果 ①Glil蛋白在复发转移性乳腺癌组织表达显著增加,在发生复发转移的患者乳腺癌组织中,93.3％为Gli1高表达,没有发生转移的癌组织标本中81.2％高表达;同时发现复发转移组原发癌间质Gli1过表达率为89.3％,而非复发转移组间质Gli1过表达率仅为13.4％,差异有统计学意义（P ＜0.001）.②乳腺癌组织Gli1蛋白的表达与乳腺癌的早期复发转移密切相关,Gli1核过表达与无复发生存（relapse-free survival,RFS）呈明显相关（P =0.046）.在癌组织Gli1核高表达组乳癌复发率为17.8％,而Gli1低表达组乳癌复发率仅为6.2％ （P =0.046）.癌间质Gli1高表达组乳癌复发率为31.2％,而Gli1低表达组乳腺癌复发率为11.1％ （P ＜0.001）.结论 Gli1在乳腺癌原发癌、转移癌组织及癌间质中高表达与乳腺癌复发转移相关.     

Gli2在原发性肝细胞癌中的表达及与Cyclin D1、p21的关系

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中 Gli2、Cyclin D1 和 p21 的表达及其意义.方法 采用组织芯片和免疫组织化学方法以及 RT-PCR 检测了 44 对 HCC 和相应癌旁肝组织中 Gli2 蛋白和 mRNA 的表达情况,应用 Western blot检测了 Cyclin D1、p21 蛋白在两种组织中的表达差异.结果 免疫组化染色与 RT-PCR 示 Gli2 在 HCC 组织中的阳性表达率为 68.2%,而癌旁肝组织为38.6%,两者差异具有极显著性意义(P<0.01),且 Gli2 与 HCC 的组织分化和门静脉转移相关.Cyclin D1 蛋白在 HCC 中的表达显著高于癌旁肝组织(P<0.05).且与 Gli2 的表达呈正相关;而 p21 蛋白在癌旁肝组织中的表达显著高于 HCC,但与 Gli2 无明显相关性.结论 Gli2 过度激活可能通过上调 Cyelin D1 的表达而使肝癌细胞异常增殖,参与 HCC 的发生和发展.     

Foxm1、Gli2在乳腺癌中的表达及临床意义

目的检测Foxm1、Gli2在乳腺癌组织中的表达,探讨二者在乳腺癌发生、进展及侵袭转移中的作用,为乳腺癌的诊断及其转移评估提供参考指标。方法收集乳腺肿瘤标本106例,其中浸润性乳腺癌68例,乳腺纤维腺瘤38例。另以癌旁正常乳腺组织40例为对照。采用免疫组化法检测上述标本中的Foxm1、Gli2的表达,分析乳腺癌组织中Foxm1、Gli2阳性表达率的关系及两者与乳腺癌临床特征的关系。结果乳腺癌组织Foxm1蛋白、Gli2蛋白表达评分高于乳腺纤维腺瘤组织和正常乳腺组织(P<0.05)。有淋巴结转移者的乳腺癌组织中Foxm1和Gli2的阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.05)。Spearman相关分析显示,Foxm1与Gli2呈正相关(r=0.517,P<0.001)。结论Foxm1、Gli2在乳腺癌组织中均高表达,两者存在一定的相关性,可能参与了乳腺癌的发生和侵袭转移过程,因此对两者表达水平进行检测,可能对乳腺癌的诊断及是否转移的评估具有指导意义。     

端粒酶逆转录酶mRNA在胃癌中的表达及其意义

目的研究人类端粒酶逆转录酶(hTERT)在胃癌组织中的表达及其在胃癌发生发展中的作用.方法应用实时荧光定量PCR技术检测22例胃癌组织及癌旁正常黏膜组织中hTERT mRNA的表达水平,分析其与肿瘤恶性程度的关系.结果胃癌组织hTERT mRNA表达水平明显高于癌旁正常组织(P＜0.01),但不同胃癌TNM分期、组织分化程度之间的hTERT mRNA表达水平差别均无显著性意义(均P＞0.05).结论在胃癌组织中hTERT mRNA表达明显高于正常组织,可作为胃癌诊断的特异性指标之一.     

胃癌组织MMP-3及MMP-13蛋白的表达

目的 探讨MMP-3、MMP-13蛋白在胃癌组织中的表达及意义.方法 选择60例手术切除的胃癌及癌旁组织,并以15例慢性浅表性胃炎组织作为对照,采用免疫组化方法检测MMP-3、MMP-13蛋白表达.结果 MMP-3在胃癌组织中表达率为60.0%,癌旁组织表达率为16.7%(x2=23.8308,P＜0.05);MMP-13在胃癌组织中表达率为68.3%,癌旁组织表达率为21.7%(x2=26.3973,P＜0.05).胃癌组织MMP-3、MMP-13蛋白表达率显著高于癌旁组织(P＜0.05);淋巴结转移组显著高于无转移组(P＜0.05);在中、晚期胃癌中的表迭均高于早期胃癌.MMP-3、MMP-13之间呈正相关(r=0.8337,P＜0.05).结论 胃癌组织MMP-3、MMP-13蛋白表达率增高,与胃癌的漫润和转移有关.可作为判断胃癌恶性程度和预测预后的参考指标.     

人胃癌、癌旁及浅表性胃炎组织生长抑素受体各亚型表达及临床意义

目的 研究生长抑素受体(SSTR)各亚型在人胃癌、癌旁及浅表性胃炎组织的表达及其临床意义.方法 对40例手术及胃镜活检取得的胃癌及癌旁组织和浅表性胃炎组织标本(其中手术29例,胃镜活检11例)应用免疫组化方法检测组织中SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR5的表达.同时检测病理类型及淋巴结转移.结果 胃癌组SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR5表达较浅表性胃炎及癌旁组明显减少(P＜0.01).浅表性胃炎组及癌旁组间差异无统计学意义(P＞0.05).有淋巴结转移组与无淋巴结转移组SSTR1、SSTR3表达无统计学差异(P=0.270,P＝0.125).无淋巴结转移组较有淋巴结转移组SSTR2、 SSTR5表达增高(P＜0.05).中高分化胃癌组SSTR1、 SSTR2、 SSTR3表达较低分化胃癌表达增高(P＜0.05).结论 SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR5的减少可能在胃癌的发生发展中发挥一定作用,SSTR2、SSTR5的表达与胃癌有无淋巴结转移有关,SSTR1、SSTR2、SSTR3的表达与胃癌分化程度有关.     

Smo、Gli2及FoxM1对神经胶质瘤诊断和预后的评估价值

目的探讨Smo、胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(Gli2)及叉头框转录因子M1(FoxM1)对神经胶质瘤诊断和预后的评估价值。 方法取80例神经胶质瘤标本为神经胶质瘤组,60例正常脑组织标本为正常组。免疫组化法检测两组Smo、Gli2、FoxM1表达水平,分析其与神经胶质瘤患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析不同Smo、Gli2、FoxM1表达水平神经胶质瘤患者预后的差异,分析影响神经胶质瘤预后的相关因素。 结果神经胶质瘤组织Smo、Gli2、FoxM1高表达率均高于正常脑组织,且随神经胶质瘤患者组织学分级升高而表达率增高(P＜0.05)。不同组织学分级、不同Smo、Gli2、FoxM1表达水平的神经胶质瘤患者5年生存率存在显著差异(P＜0.05)。组织学Ⅲ~Ⅳ级、Smo高表达、Gli2高表达、FoxM1高表达是神经胶质瘤预后的危险因素(P＜0.05)。 结论Smo、Gli2、FoxM1高表达是神经胶质瘤预后的危险因素,三者有望作为神经胶质瘤诊断和预后的判断指标。     

Gli1基因在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞生物学特性的影响

目的：探讨胶质瘤相关癌基因1（Gli1）在胃癌组织中的表达,阐明Gli1基因对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法：收集95例胃癌患者胃癌组织和癌旁组织,RT-qPCR法检测胃癌组织和癌旁组织中Gli1mRNA表达水平,免疫组织化学法检测胃癌组织和癌旁组织中Gli1蛋白表达水平。以人胃癌细胞株MKN28、BGC823和SGC7901为研究对象,胃永生化上皮细胞株GES-1作为对照,RT-qPCR法检测各细胞株中Gli1mRNA表达水平。将Gli1-siRNA转染BGC823细胞后,实验分为对照组、con-siRNA组和Gli1-siRNA组;RT-qPCR法检测各组细胞中Gli1mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移能力,Western blotting法检测各组细胞P27、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白的表达水平。结果：胃癌组织中Gli1mRNA表达水平和蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织（t=27.606,P<0.01;χ²=54.782,P<0.01）。在GES-1、MKN28、SGC7901和BGC823细胞中Gli1mRNA表达水平比较差异有统计学意义（F=86.341,P<0.01）。Gli1-siRNA组Gli1mRNA表达水平明显低于对照组和con-siRNA组（F=48.322,P<0.01）。Gli1-siRNA组胃癌细胞增殖率明显低于对照组和con-siRNA组（F=54.428,P<0.01）。Gli1-siRNA组胃癌细胞的迁移数低于对照组和con-siRNA组（F=257.788,P<0.01）。与对照组比较,con-siRNA组细胞中P27、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平差异均无统计学意义（P>0.05）;与con-siRNA组比较,Gli1-siRNA组细胞中P27蛋白表达水平明显升高（t=-3.776,P=0.020）,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低（t=3.479,P=0.025;t=5.487,P=0.005）。结论：Gli1在胃癌组织表达水平高于癌旁组织,抑制Gli1基因的表达能抑制胃癌细胞增殖和迁移能力。     

Gli在HH信号通路中作用机制及在肿瘤治疗中的应用前景

HH(Hedgehog)信号通路首先发现于果蝇胚胎体节发育调节中,后来陆续在脊椎动物(包括人类)中分离出果蝇HH信号通路中的相关基因.研究发现,HH信号通路不仅调控胚胎时期各胚层组织发育,而且与肿瘤生成密切相关.Gli作为脊椎动物HH信号通路中的锌指核转录因子,与HH信号通路中下游基因的特定序列结合,直接调控HH信号通路目的基因的转录表达,在HH信号通路调控中起核心作用.本文就Gli的在HH信号中的作用机制及可能应用于肿瘤治疗的前景等作简要概述.     

细胞周期相关因子Gli2在大鼠自体移植静脉中的表达

目的 研究细胞周期相关因子Gli2在大鼠自体移植静脉中的表达变化及其与内膜增生的关系.方法 雄性Wistar大鼠36只,8周龄,体质量140 g.建立颈静脉-腹主动脉移植模型,分别于术后14 d、28 d各处死18只大鼠,取材移植血管,免疫荧光检测Gli2蛋白在移植血管新生内膜中的表达,Western印迹法观察Gli2及细胞增殖核抗原(PCNA)的表达,RT-PCR检测Gli2-mRNA的表达;以对侧颈静脉作为对照.结果 免疫组化结果显示,正常静脉、术后14 d和术后28 d移植静脉Gli2+细胞数比例分别为(3.2±0.4)%、(41.3±0.6)%和(58.3±0.6)%,正常静脉与移植静脉差异有统计学意义(P＜0.01).Western印迹法显示术后Gli2表达水平增加并与PCNA表达呈正相关(r=0.826,P＜0.01).RT-PCR结果显示术后14 d组和术后28 d组的Gli2 mRNA表达增加,分别为对照组含量的8.9和13.6倍.结论 自体静脉移植术后,Gli2在新生内膜中高表达并可能与细胞增殖相关.     

核转录因子Gli1在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的 观察肾透明细胞癌(Renal clear cell carcinoma,RCCC)及正常肾组织中Gli1 的表达,探讨RCCC中Gli1的异常表达与肾癌之间的关系.方法 采用免疫组化技术检测 RCCC 及正常肾组织中Gli1 蛋白的表达.结果 在正常肾组织中Gli1不表达,而在RCCC中Gli1高表达,且其表达与患者的年龄、性别及肿瘤大小均无关.结论 Hedgehog信号通路中Gli1表达上调可能参与了RCCC的发病,其在肾细胞癌的发生、发展等方面可能具有重要作用.     

早期高分化浆液性囊腺卵巢癌中Ptch及Gli2表达情况

目的 研究hedgehog （Hh）信号通路中Ptch及Gli2蛋白在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法 60例早期高分化浆液性囊腺卵巢癌组织标本为实验组,30例正常卵巢组织标本为对照组,应用免疫组化法检测Ptch及Gli2在实验组及对照组中的表达。结果 Ptch及Gli2在实验组的表达均高于对照组（P<0.05）。结论 Hh信号通路在卵巢癌组织中异常激活,且该信号通路可能参与卵巢癌的发生、发展过程,进而提示Hh是卵巢癌侵袭转移的一个重要信号通路,为进一步深化卵巢癌的机制研究和靶向治疗提供了一个新的思路。     

siRNA 下调Gli 基因影响食管腺癌OE33 细胞生长转移的实验研究

目的 研究Gli 表达下调对食管腺癌OE33 细胞生长转移的影响,并探讨其相关的分子机制。 方法 将Gli1、Gli2 siRNA 和空白对照siRNA 转染OE33 细胞48 h,实时荧光定量聚合酶链反应检测OE33 细胞Gli1 和Gli2 mRNA 表达水平;采用Western blot 检测OE33 细胞中Gli1、Gli2、Cyclin D1、p27、 E-cadherin 及N-cadherin 蛋白的表达水平;流式细胞术检测OE33 细胞增殖和细胞周期分布;Transwell 实 验检测细胞侵袭能力。结果 采用Gli1 和Gli2 siRNA 抑制Gli1 和Gli2 mRNA 及蛋白表达后,可下调Cyclin D1 和N-cadherin 蛋白表达,增加E-cadherin 和p27 蛋白表达,同时抑制细胞增殖,将细胞周期阻滞在G0/G1 期并降低细胞的侵袭能力,与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 Gli 在食管腺癌的生长转移 中具有重要作用,敲掉Gli 1 和Gli 2 基因表达可抑制食管腺癌细胞周期分布和上皮- 间质转化能力,这可能与 Cyclin D1、p27、E-cadherin 及N-cadherin 蛋白变化相关。