压力超负荷对大鼠心肌PPARα和MCAD mRNA表达的影响

目的 :了解压力负荷性肥厚心肌过氧化物酶体活化受体α(PPARα)和中链脂酰基辅酶A脱氢酶(MCAD)mRNA的表达变化 ,探讨PPARα对肥厚心肌脂肪酸 β氧化关键酶基因表达的调控作用及肥厚心肌能量底物的变化。方法 :观察大鼠腹主动脉缩窄术后 1、4、8、16周血流动力学参数、心室重塑指标、血清和心肌游离脂肪酸 (FFA)的含量及PPARα和MCADmRNA的表达变化。结果 :随着肥厚程度的增加 ,血清和心肌FFA蓄积增加 ,心肌PPARα和MCADmRNA的表达也逐渐下调 ,且与脂肪酸的利用下调相一致。结论 :肥厚心肌PPARα活性下调 ,与MCAD基因表达变化一致 ;PPARα在转录水平调控脂肪酸氧化酶基因的表达 ;PPARα与肥厚心肌能量底物转换密切相关     

卡维地洛减弱肥厚心肌能量代谢向胚胎型转换的分子机制

目的 :观察压力负荷性大鼠肥厚心肌能量代谢的转换模式及卡维地洛的作用 ,探讨卡维地洛减弱压力负荷性心肌能量代谢胚胎型转换的分子调控机制。方法 :用卡维地洛治疗腹主动脉缩窄术后 4周的雄性 Waster大鼠 ,治疗 12周后观察假手术组、腹主动脉缩窄组和卡维地洛干预组大鼠血流动力学参数、心室重构指标、血清和心肌游离脂肪酸的含量及肌型肉毒碱棕榈酰转移酶 I（ M-CPT-I）和中链脂酰辅酶 A脱氢酶 （ MCAD） m RNA的表达变化。结果 :术后 16周大鼠左室心肌明显肥厚 ,血清和心肌游离脂肪酸的含量增加 ,左室肥厚心肌 M-CPT-I和MCAD m RNA的表达下调。卡维地洛治疗 12周后能够明显改善上述变化。结论 :压力负荷性大鼠肥厚心肌能量代谢模式发生胚胎型转换 ;卡维地洛能够减少左室心肌脂肪酸氧化限速酶和关键酶的基因表达 ,减弱心肌胚胎型能量代谢的转换     

压力负荷性大鼠肥厚心肌过氧化物酶体增殖剂活化受体α（PPARα）和肉碱棕榈酰转移酶（M—CPT—I）mRNA的表达变化

目的 了解压力负荷性肥厚心肌PPARα和M—CPT—ImRNA的表达变化，探讨PPARα调控心肌线粒体脂肪酸摄取及维持能量和脂质平衡的作用。方法 观察大鼠腹主动脉缩窄术后2、4、8、16周血流动力学参数、心室重塑指标、血清和心肌游离脂肪酸的含量及PPARα和M—CPT—ImRNA的表达变化。结果 随着肥厚程度的增加，压力负荷性大鼠血清和心肌游离脂肪酸蓄积增加，心肌PPARα和M—CPT—ImRNA的表达逐渐下调，而且与脂肪酸的利用下调相一致。结论 病理性肥厚心肌能量代谢底物发生改变，脂肪酸氧化不占主导地位；PPARα在转录水平上失活，对心肌线粒体脂肪酸摄取起重要的调控作用；PPARα可能与肥厚心肌能量和脂质失衡有关。     

压力负荷性大鼠肥厚心肌过氧化物酶体增殖剂活化受体α(PPARα)和肉碱棕榈酰转移酶(M-CPT-I) mRNA的表达变化

目的了解压力负荷性肥厚心肌PPAR α和M-CPT-I mRNA的表达变化,探讨PPARα调控心肌线粒体脂肪酸摄取及维持能量和脂质平衡的作用.方法观察大鼠腹主动脉缩窄术后2、4、8、16周血流动力学参数、心室重塑指标、血清和心肌游离脂肪酸的含量及PPAR α和M-CPT-I mRNA的表达变化.结果随着肥厚程度的增加,压力负荷性大鼠血清和心肌游离脂肪酸蓄积增加,心肌PPAR α和M-CPT-I mRNA的表达逐渐下调,而且与脂肪酸的利用下调相一致.结论病理性肥厚心肌能量代谢底物发生改变,脂肪酸氧化不占主导地位;PPAR α在转录水平上失活,对心肌线粒体脂肪酸摄取起重要的调控作用;PPAR α可能与肥厚心肌能量和脂质失衡有关.     

过氧化物酶体增殖剂活化受体α信号通路对肥厚心肌能量代谢胚胎型再演的调控作用

目的 研究压力负荷性大鼠左室肥厚心肌中链脂酰辅酶A(MCAD)、肌型肉碱棕榈酰转移酶(M—CPT-I)和过氧化物酶体增殖剂活化受体α(PPARα)基因／蛋白的表达变化，阐明肥厚心肌能量代谢“胚胎型再演”的分子机制和PPARα的调控作用。方法取健康雄性Wistar大鼠行腹主动脉缩窄(CAA)制成左室肥厚模型，随机分为2周组(CAA2w组)、4周组(CAA4w组)、8周组(CAA8w组)、16周组(CAA16组)，设立假手术组作为对照，以上每组均为12只，观察各组大鼠各项指标的变化。结果(1)与假手术组比较，CAA各组大鼠左心室湿重／体重、平均动脉压升高，4周后左室舒张末压、左室收缩压、 dp／dtmax开始升高，术后8周-dp／dtmax开始降低，以CAA16w组最显著，而CAA各组右心室湿重／体重无明显变化；(2)CAA各组大鼠血清和心肌游离脂肪酸含量进行性增加；(3)CAA各组大鼠左室心肌M—CPT-I、MCADmRNA的表达逐渐下降；(4)CAA各组大鼠左室心肌PPARα基因表达下调，术后8周PPARα蛋白水平开始下调，以CAA16w组最显著。结论(1)在腹主动脉缩窄所致的肥厚心肌模型中，血清和心肌游离脂肪酸含量增加，表明脂肪酸的利用减少，心肌能量代谢呈“胚胎型再演”，调控脂肪酸氧化关键酶(M—CPT-I和MCAD)的基因表达下调，可能是导致“胚胎型再演”的分子基础；(2)核转录因子PPARα活性下调，与肥厚心肌编码线粒体脂肪酸氧化酶核基因的表达和脂肪酸的利用下调相一致，提示PPARα信号对压力负荷肥厚心肌的能量代谢具有重要的调控作用。     

大鼠左室肥厚心肌PPARα信号通路失活及其意义

目的 :观察压力超负荷左室肥厚心肌过氧化物酶体增殖剂活化受体α(PPARα)mRNA和蛋白的表达变化 ,探讨PPARα信号通路失活与左室肥厚心肌能量底物转换的关系。方法 :检测大鼠腹主动脉缩窄术后 2周、4周和 8周血流动力学参数、心室重塑指标、血清和心肌游离脂肪酸的含量及PPARαmRNA和蛋白的表达变化。结果 :术后 2周左室已出现肥厚 ,伴有PPARαmRNA表达下调 ;术后 8周PPARα蛋白水平开始下调 :随着肥厚程度的增加 ,血清和心肌游离脂肪酸蓄积增加 ,左室心肌PPARαmRNA和蛋白的表达进行性下调。结论 :病理性肥厚心肌PPARα活性下调与能量底物的利用变化相一致 ,预示PPARα信号通路是病理性心室重塑防治新策略的一个有效靶点     

压力超负荷对大鼠左室心肌牵张敏感性钾通道TREK-1 mRNA和蛋白表达的影响

目的探讨压力超负荷状态下左室心肌牵张敏感性钾通道TREK-1mRNA及其蛋白表达的变化。方法雄性W istar大鼠被随机分为腹主动脉缩窄组(n=30)和假手术组。腹主动脉缩窄组依观察时间随机分为2,4,8周组各10只。每组观察期结束后,计算左右室肥厚指数(LVM I、RVM I)。HE染色观察压力超负荷对心肌组织结构的影响。采用RT-PCR和免疫组织化学SABC法分别检测牵张敏感性钾通道TREK-1mRNA与蛋白水平表达的改变。结果腹主动脉缩窄术后2周,出现左室肥厚,但无统计学意义。腹主动脉缩窄术后4,8周,左室肥厚指数较正常组明显增加(P<0.05),光镜下显示心肌肥厚。术后2,4,8周组左室心肌牵张敏感性钾通道TREK-1mRNA上调(P<0.05),心肌细胞内TREK-1蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论压力超负荷致大鼠左室肥厚的同时可诱导牵张敏感性钾通道TREK-1的表达增加。     

卡维地洛改善大鼠肥厚心肌能量代谢及其机制

目的探讨卡维地洛对压力超负荷大鼠肥厚心肌能量代谢的影响及其机制。方法将雄性SD大鼠随机分为假手术组、腹主动脉缩窄组和卡维地洛治疗组,15周后观察大鼠血流动力学参数、心室重构指标。采用密度梯度法提取大鼠心肌线粒体,用抑制剂终止法测定线粒体腺苷酸转运体（adenine nucleotide translocator,ANT）的转运活性,高效液相色谱法测量心肌组织及线粒体内腺苷酸含量。结果大鼠腹主动脉缩窄术后15周出现左心室肥厚及心功能减退;组织及线粒体内ATP、ADP及（ATP+ADP）含量及ANT转运活性降低。卡维地洛减轻心室肥厚、改善心功能的同时,增加组织及心肌线粒体腺苷酸含量,增强ANT转运活性。结论肥厚心肌心功能减退,心肌线粒体腺苷酸含量及ANT活性降低,使能量的产生和利用异常。卡维地洛改善心肌肥厚和心功能,且可能通过增强ANT活性而促进线粒体内产能,从而改善心肌能量代谢。     

压力超负荷致心室重构大鼠线粒体内腺苷酸转运体表达的改变

目的探讨压力超负荷致心室重构时大鼠心肌线粒体内膜腺苷酸转运体(ANT)表达的改变及其意义。方法雄性SD大鼠52只行腹主动脉缩窄术,随机分为腹主动脉缩窄5周组(A5w组)、腹主动脉缩窄15周组(A15w组)、假手术5周组(SH5w组)和假手术15周组(SH15w组)4组,每组13只大鼠,观察大鼠血流动力学参数、心室重构指标,密度梯度法提取大鼠心肌线粒体,高效液相色谱法测量心肌组织及线粒体腺苷酸含量,Western blot法分析心肌线粒体ANT表达。结果大鼠腹主动脉缩窄术后5周出现左心室肥厚,术后15周加重并有心功能减退;分别与同时间SH5w组和SH15w组比较,A5w组及A15w组心肌组织ATP、ADP含量均降低,A15w组线粒体内ATP及ADP含量降低;A15w组线粒体ANT表达降低,并与心肌线粒体内ATP及ADP含量变化相一致。结论心室重构伴心功能减退时,心肌线粒体ANT表达降低,导致细胞内腺苷酸分布异常,是肥厚心肌能量代谢障碍的重要机制。     

肉碱棕榈酰转移酶—Ⅰ的研究进展

肉碱棕榈酰转移酶（CPT－I）是脂肪酸氧化过程中的一种限速酶，催化脂肪酸转运至线粒体基质进行β氧化。它位于线粒体外膜，通过过氧化物酶体增殖物激活受体、丙二酰辅酶A、磷酸化／脱磷酸化依赖的细胞骨架成分在转录水平、翻译及翻译后水平接受调节，由于它在能量代谢中起关键作用，CPT－I相关抑制剂已被试图应用于临床。     

三七总皂苷对腹主动脉缩窄致大鼠心肌肥厚能量代谢紊乱的抑制作用

目的 探讨三七总皂苷(PNS)对腹主动脉缩窄致大鼠心肌肥厚的抑制作用及机制.方法 取75只大鼠,采用腹主动脉缩窄法致心肌肥厚;随机取15只大鼠进行假手术作为对照(假手术组).1周后,手术大鼠随机分为4组:模型组、低剂量PNS组(50 mg/kg)、中剂量PNS组(100 mg/kg)和高剂量PNS组(150 mg/kg).给药11周,测定大鼠血流动力学改变;计算心脏指数和左心室质量指数;病理切片作HE染色观察大鼠左心室心肌形态学改变;取出左心室部分心肌组织进行乳酸、游离脂肪酸测定;采用逆转录聚合酶链反应测定心肌组织心房钠尿肽mRNA的表达;采用高效液相色谱法测定心肌中的三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)含量.结果 与模型组相比,PNS可以降低肥厚指数,改善其血流动力学,降低心房钠尿肽mRNA的表达,降低心肌肥厚大鼠心肌乳酸和游离脂肪酸含量,增高心肌ATP、ADP和AMP含量.结论 PNS能够有效抑制腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚并改善其能量代谢紊乱.     

细胞核CaMK和Calcineurin参与大鼠心肌肥厚的发生

目的：研究大鼠心肌肥厚时，钙依赖的蛋白激酶和蛋白磷酸酶在心肌细胞膜、细胞浆和细胞核的分布规律，以探讨核钙信号与核反应在心肌肥厚发生过程中的病理生理意义。方法：制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型、差速离心和密度梯度离心提纯心肌细胞核，同位素32P掺入法测激酶活性，无机磷生成显色法测定蛋白磷酸酶活性。结果：腹主动脉缩窄术后4周大鼠心肌显著肥厚，伴有明显的血液动力学异常。与正常对照组相比较，腹主动脉缩窄心肌肥厚组心肌细胞核钙调素蛋白激酶（CaMK）活性增加1．011倍（p〈0．001），膜升高40．16％（p〈0．001），胞浆不变（p〉0．05）；心肌细胞核钙调神经磷酸酶（Calcineurin）活性增加43．57％（p〈0．05），膜和胞浆增加无显著性（P〉0．05）。正常组和腹主动脉缩窄心肌肥厚组心肌细胞CaMK和Calcineurin活性分布为核〉膜〉胞浆（p〈0．01）。结论：腹主动脉缩窄心肌肥厚时核内钙依赖的CaMK和Calcineurin活性增加，提示压力超负荷时细胞核内钙调节的蛋白磷酸化和去磷酸化水平增高，可能在介导心肌肥厚的发生中起重要作用。     

心复康丸对压力超负荷大鼠心肌肥厚的影响

目的观察心复康丸对压力超负荷性心肌肥厚大鼠超声心动指标及心肌肥厚程度的影响。方法 Wistar雄性大鼠采用腹主动脉缩窄的方法复制心肌肥厚和心室重构的模型。造模4周后,随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)、依那普利组(E组)、心复康丸低剂量组(L组)、心复康丸高剂量组(H组)。分别于术后8周、12周采用超声心动评价心功能,并观察心脏肥大指数变化。结果术后8周,M组大鼠出现压力超负荷介导的向心性肥厚,术后12周,M组大鼠心功能进入失代偿期,E组和H组大鼠上述病理性改变均能被抑制;此两组还具有降低心脏肥大指数的作用(P0.01)。结论心复康丸具有改善超声心动指标,延缓心肌肥厚的作用,并存在一定量效关系。     

小剂量卡托普利防治急性压力超负荷后大鼠心肌损伤的作用

目的 :探讨小剂量卡托普利防治急性压力超负荷大鼠心肌损伤的作用。方法 :腹主动脉部分缩窄法制作急性压力超负荷模型。 5 0只大鼠随机分为对照组、腹主动脉部分缩窄组和药物干预组。药物干预组给予卡托普利 30mg (kg·d)灌胃。分别测定各组大鼠心肌力学、心肌代谢酶活性、心肌血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量及心肌超微病理分析。结果 :急性压力超负荷大鼠心肌超微结构出现明显缺氧性损伤 ,琥珀酸脱氢酶活性降低 ,收缩、舒张功能相对下降 ,心肌中AngⅡ含量显著升高。小剂量卡托普利可基本抑制压力超负荷大鼠心肌中AngⅡ的升高 ,显著减轻心肌的形态损伤、代谢酶活性降低和心肌收缩、舒张功能下降。结论 :小剂量卡托普利可有效防治急性压力超负荷导致的大鼠心肌损伤     

心肌AngⅡ和NADPH氧化酶源性的ROS在心肌肥厚中的作用

目的探讨心肌组织NADPH氧化酶源性的活性氧（ROS）在血管紧张素II（AngⅡ）调控心肌肥厚发生发展中的作用。方法采用腹主动脉缩窄术（AC）构建大鼠压力超负荷心肌肥厚模型,给予血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）卡托普利和NADPH氧化酶抑制剂Apocynin（Apo）干预8周,测定左心室重/体重比（LV/Bwt）;放免法检测心肌AngⅡ含量;激光共聚焦显微镜检测心肌组织O2.-水平;免疫组化检测心肌NADPH氧化酶的表达。结果⑴AC术后大鼠心肌组织AngⅡ含量、NADPH氧化酶表达及O2.-水平均升高;（2）卡托普利干预可显著降低心肌中AngⅡ含量、NADPH氧化酶表达及O2.-水平,并使心室肥厚程度显著降低;（3）Apo干预对肥厚心肌中AngⅡ含量、NAD-PH氧化酶表达无明显影响,但可部分降低心肌O2.-水平并抑制心室肥厚。结论持续压力超负荷致心肌AngⅡ含量升高可调控NADPH氧化酶表达上调,进而引起O2.-水平升高,这可能是压力超负荷致心室肥厚的重要调控路径。     

解耦联蛋白-2与压力超负荷大鼠心肌肥厚中的细胞凋亡

目的探讨心肌解耦联蛋白-2（ucP2）与压力超负荷心肌肥厚中心肌细胞凋亡的关系。方法采用腹主动脉缩窄法建立大鼠压力超负荷模型,假手术大鼠作为对照组。术后1,2,4,7,14,21,30d,RT-PCR法测定UCP2mRNA含量,TUNEL法检测心肌细胞凋亡水平。结果（1）与对照组比较,压力超负荷组在术后4d UCP2 mRNA含量上调,并持续增高至30d。（2）压力超负荷组心肌细胞凋亡在术后1d即升高,在4d时进入高峰期并持续至7d,其后低水平持续存在,直至实验结束。而对照组未发现凋亡细胞。结论UCP2可能参与了压力超负荷心肌肥厚中细胞凋亡的调控,但其确切机制有待进一步研究。     

肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ的研究进展

肉碱棕榈酰转移酶 (CPT Ⅰ )是脂肪酸氧化过程中的一种限速酶 ,催化脂肪酸转运至线粒体基质进行 β氧化。它位于线粒体外膜 ,通过过氧化物酶体增殖物激活受体、丙二酰辅酶A、磷酸化 脱磷酸化依赖的细胞骨架成分在转录水平、翻译及翻译后水平接受调节 ,由于它在能量代谢中起关键作用 ,CPT Ⅰ相关抑制剂已被试图应用于临床     

非诺贝特对压力超负荷大鼠心肌细胞凋亡和凋亡相关基因Fas、Fas-L表达的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体α（PPARα）配体非诺贝特对压力超负荷致大鼠左心室肥厚过程中心肌细胞凋亡的调控,并观察其对凋亡相关基因Fas/Fas-L表达变化的影响。方法雄性Wistar大鼠腹主动脉缩窄致压力超负荷模型,术后48 h存活的大鼠随机分成:单纯模型组术后4周亚组、单纯模型组术后8周亚组、非诺贝特干预组术后4周亚组、非诺贝特干预组术后8周亚组。以假手术组为对照。分别于给药处理4周和8周后观察心室重构指标、心肌细胞凋亡指数（CAI）及凋亡相关基因Fas/Fas-L蛋白表达的变化。结果与同期单纯模型组比较,非诺贝特干预组术后4周亚组的心室重构指标、CAI及Fas/Fas-L表达差异无显著性,但非诺贝特干预8周可显著减轻压力超负荷诱导的心肌肥厚,降低CAI,下调Fas/Fas-L的表达。结论PPARα配体长期干预（8周）能减轻压力超负荷大鼠的心肌肥厚,抑制心肌细胞凋亡,对心力衰竭进程中的心室重构具有抑制作用;凋亡相关基因Fas和Fas-L参与了PPARα途径对心肌细胞凋亡的调控。     

大鼠心肌肥厚过程中亲环素A表达时程变化

目的探讨大鼠压力负荷性心肌肥厚过程中左心室心肌组织中亲环素A表达的时程变化。方法采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷性大鼠心肌肥厚模型。术后4周和8周,检测左心室重量和体质量比值观察心肌肥大程度。然后用蛋白免疫印迹检测左心组织中亲环素A表达变化。结果在术后4周和8周,腹主动脉缩窄组左心/体质量比值比假手术对照组分别增加38.10%和37.70%。蛋白免疫印迹结果显示,两组亲环素A的表达均随鼠龄的增长而增加,但在术后4周和8周,腹主动脉缩窄组左心室心肌组织中亲环素A表达明显高于假手术对照组,亲环素A表达分别增加26.06%和31.95%。结论大鼠心肌肥厚的同时伴随亲环素A表达增多,提示心肌肥厚发病机制可能涉及亲环素A。     

心肌缺血与糖代谢

心肌缺血可以描述为心肌能量需要和能量供给之间失平衡 ,这一病理状态使心肌能量代谢转为以外源葡萄糖为主要代谢底物 ,代谢效率由高效转向低效。越来越多的实验室和临床研究表明 :改善心肌能量代谢对减少心肌缺血所引起的损害有积极的作用。加强心肌碳水化合物代谢有可能改善心功能和 /或减少组织损害。1　正常心肌的能量代谢正常心肌代谢的底物主要是碳水化合物和脂肪酸。在饥饿状态下 ,血游离脂肪酸水平高 ,心肌对游离脂肪酸的摄取增加 ,并抑制葡萄糖氧化代谢 ,此时游离脂肪酸成为心肌能量的主要来源。而摄取的葡萄糖则主要转化为糖原储…