卵母细胞冷冻的临床应用进展

人类卵母细胞冷冻作为生育力保存的一种方式,在辅助生殖技术中起关键作用,目前已在辅助生殖领域得到越来越广泛的应用,并成为生殖医学的研究热点之一。卵母细胞冷冻技术经过多年的发展也取得了较大的进步,冷冻方法上新兴的玻璃化冷冻法逐步取代了传统的程序化慢速冷冻。但不同成熟期人卵母细胞冷冻保存的研究仍有诸多争议。卵母细胞的冷冻保存不论冷冻方法还是冷冻技术如何,都有与年龄相关的婴儿出生率下降的趋势。     

玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎中的应用

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,在保存未成熟卵细胞、成熟卵细胞、原核期胚胎、卵裂早期胚胎及囊胚方面均取得成功,并相继有临床妊娠分娩的报道。本文总结了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎方面的应用。     

玻璃化冷冻技术在人卵裂期胚胎冷冻保存中的应用结局分析

低温冷冻保存技术是人类辅助生殖技术的重要组成部分,胚胎冷冻技术的应用大大提高了临床治疗的效果、丰富了临床治疗方案[1,2].目前主要应用的是胚胎冷冻技术,包括程序冷冻和玻璃化冷冻.程序冷冻技术已相对成熟和稳定并已得到广泛应用,而玻璃化冷冻技术作为一项新技术备受关注.     

玻璃化冷冻人成熟卵母细胞的临床应用

目的 探讨玻璃化冷冻在人成熟卵母细胞冻存中的临床应用效果.方法 运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,冻融后成功复苏的卵母细胞行胞质内单精子注射一胚胎移植(ICSI-ET),观察复苏后卵母细胞受精、卵裂以及生化妊娠、临床妊娠情况.结果 15例共81枚成熟卵母细胞冻融后进行卵胞浆内单精子注射或者体外受精-胚胎移植(IVF-ET),有69枚卵母细胞成功复苏.52枚卵母细胞受精,39枚卵母细胞卵裂,移植后4例患者获得临床妊娠.结论 玻璃化冷冻人成熟卵母细胞方便、快捷、成本低下、冷冻损伤小,有极大的临床应用价值.     

人卵母细胞冷冻研究进展

玻璃化冷冻技术是目前最有效的卵母细胞冷冻方法,已广泛应用于女性生育力保存。不同医学中心卵母细胞冷冻成功率的差异较大,女性年龄、卵母细胞成熟度及其冷冻方法、冷冻载体和冷冻保存时间是影响卵母细胞冷冻临床结局的主要因素。由于成熟卵母细胞具有体积大、表面积体积比小、含水量高、细胞内含物特殊和存在减数分裂纺锤体的特点,其在冷冻复苏过程中极易发生冷冻损伤。卵母细胞冷冻保存与产科和围生期并发症的发生率升高无关,但仍需密切关注其子代安全。     

玻璃化冷冻与慢速程序冷冻法保存人MⅠ期卵母细胞的效果比较

目的:探讨玻璃化冷冻与慢速程序冷冻法对人未成熟卵母细胞的存活及胚胎发育潜能的影响。方法:体外受精-胚胎移植中获得的251个MⅠ期卵母细胞随机分3组,第1组94个先玻璃化冷冻保存,第2组63个先慢速程序冷冻保存,两组冻融后的未成熟卵母细胞再进行IVM,用ICSI技术对成熟卵母细胞完成授精,并进行体外胚胎培养。第3组94个MⅠ期卵母细胞先进行IVM,再进行玻璃化冷冻保存,与第1组先玻璃化冷冻保存再IVM的顺序不同,冻融后同样用ICSI技术对获得的成熟卵母细胞完成授精,并进行体外胚胎培养。结果:玻璃化冻融组复苏存活率、体外成熟率、受精率、及卵裂率均高于慢速程序冻融组(P均<0.05);先玻璃化冷冻再IVM与先IVM再玻璃化冷冻的复苏存活率、体外成熟率、可用卵比率、受精率及卵裂率无统计学意义(P均>0.05)。结论:玻璃化冻融人未成熟卵母细胞能获得更好的冷冻保存效果;玻璃化冷冻与IVM的顺序不影响未成熟卵母细胞的利用。     

人类卵母细胞冷冻的研究进展

随着辅助生殖技术的发展,卵母细胞冷冻技术随之发展起来,但是相对于胚胎冷冻,卵母细胞冷冻在临床上有其局限性,目前冷冻损伤是卵母细胞冷冻保存的主要障碍[1].近年来随着冷冻技术的不断提高和ICSI技术的应用,卵母细胞冷冻效果也有了提高,现就人卵母细胞冻存的影响因素及冷冻现状作一综述.     

卵母细胞玻璃化冻融获成功妊娠1例

目的 探讨玻璃化冷冻方法在冷冻保存卵母细胞中的临床应用价值.方法 2015年3月在我中心行卵母细胞玻璃化冷冻1例,于2015年7月行玻璃化解冻,行卵胞浆内单精子注射受精,获得胚胎后进行移植和冷冻.结果 共冷冻13枚卵母细胞,解冻后存活12枚(92.3％),对12枚成熟卵母细胞行单精子卵浆内显微注射,9枚(75.0％)正常受精,8枚(88.9％)卵裂,再次解冻移植获单胎妊娠,现正在妊娠中.结论 玻璃化冻融卵母细胞是一种方便可行的方法,在特殊情况下发挥着不可替代的作用,可以获得临床妊娠.     

冷冻载体对小鼠卵母细胞玻璃化冷冻效果影响的研究

目的探讨不同冷冻载体对小鼠卵母细胞快速玻璃化冷冻回收率、复苏率和解冻后胚胎发育潜能的影响。方法以小鼠卵母细胞为实验材料,以玻璃化冷冻方法冻存小鼠卵母细胞,分别以冷冻叶片（A）组、冷冻小钩（B）组、电镜铜环（C）组、自制冷冻叶片（D）组为冷冻载体冷冻小鼠卵母细胞,通过对解冻后卵子回收率、复苏率、卵子受精率及早期胚胎发育率等分析判断冻存效果。结果回收率D组明显低于其他3组,差异有统计学意义（P〈0.01）;D组与其他3组卵母细胞冷冻保存后卵子复苏率、胚胎受精率、继续发育潜能的比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 4种玻璃化冷冻载体都是小鼠卵母细胞快速玻璃化冷冻保存中可行的冷冻载体,自制叶片组的卵子回收率明显低于其他3组,需更进一步熟练叶片制作的技术和实验人员操作技能。     

人类卵母细胞冷冻现状的研究进展

<正>20世纪后半段,人类辅助生殖技术已经显著进步。卵母细胞冷冻是辅助生殖技术领域的一项重要成就。这项技术对于生育期妇女生育力的保存提供了更有效的解决办法。卵母细胞冷冻技术主要有慢速冷冻(slow cooling)和玻璃化冷冻(vitrification)。卵母细胞冷冻前后的细胞质量是评价冷冻方法效果的最基本指标。MⅡ期卵母细胞一般以细胞形态、极体的位置和大小,是否存在细胞质空泡和其他异常情况来评价其细胞的质量。卵母细胞冷冻复苏后的质量关系到胚胎或囊     

人卵母细胞冷冻保存的影响因素

随着体外受精 胚胎移植 (Invitrofertilization embryotrans plantation ,IVF ET)和冷冻技术的发展 ,人们认识到了保存卵母细胞的重要性。冷冻保存人卵母细胞 ,可以治疗卵巢发育不良和卵巢早衰等原发性不育 ,为接受放疗和化疗的患者提供以后妊娠的机会 ,IVF ET剩余的卵可以保存以备以后的周期使用 ,辅助生殖技术的效率也可得到提高。卵母细胞的冷冻保存还能减少由胚胎冷冻引起的道德和法律问题。虽然卵母细胞冷冻保存技术经过了二十几年的研究 ,然而获得的成功还是非常有限的。目前 ,冷冻损伤是卵母细胞冷冻保存的主要障碍[1 ] 。有报…     

人卵母细胞冻融的研究与应用

冷冻卵母细胞与冷冻胚胎对于治疗不孕症都具有重要价值.冷冻胚胎技术于1983年首次成功用于人类胚胎的保存[1].这些年来精子及胚胎冷冻已普遍用于生殖领域,但卵母细胞冷冻仍未在临床上广泛应用.1986年澳洲Chent2]首次报告卵母细胞冷冻合并体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization embryo transfer,IVF-ET)成功妊娠1例.目前这方面成功的经验仍不多.     

猪卵母细胞OPS玻璃化冷冻保存的研究

猪卵母细胞由于脂肪含量高,对低温敏感,相较其他动物卵母细胞的冷冻保存更加困难,因此在种质的保护保存、胚胎工程研究产生极大的阻碍。本试验研究了猪卵母细胞的OPS玻璃化冷冻保存方法,研究乙二醇、甘油和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为冷冻保护剂,对比不同的浓度梯度和两种冷冻保护剂联合使用对冷冻效果的影响。研究未经体外成熟培养和不同时间体外成熟培养的猪卵母细胞的冷冻保存效果。对比改良优化的OPS玻璃化冷冻方法和传统的程序化冷冻方法的保存效果。实验表明,体外成熟12h(GV期)的猪卵母细胞用乙二醇添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)进行玻璃化冷冻,解冻后体外成熟率、细胞的形态正常率与未经体外成熟的的卵母细胞相比差异显著,与成熟48h(MII期)卵母细胞相比差异不显著。但卵裂率和桑椹胚囊胚率体外成熟12h(GV期)的猪卵母细胞用乙二醇添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为冷的保护剂组要好于其他组。     

玻璃化冷冻技术在辅助生殖中的应用

目的:探讨玻璃化冷冻技术在人类辅助生殖技术中的有效性。方法:对进行IVF治疗的不育症患者通过超促排卵后,在肌注HCG 36 h后进行取卵,并进行体外受精,将D3移植后的剩余胚胎进行玻璃化冷冻保存,若患者新鲜周期妊娠失败,则将其解冻并移植。结果:在2011年4月至2012年3月,共解冻经玻璃化冷冻的胚胎560枚,存活531枚,存活率为94.8%;将存活的531枚胚胎移植给243例患者,共计有76例患者成功妊娠,其植入率为19.4%,妊娠率为31.3%。结论:玻璃化冷冻技术在人类辅助生殖技术中是一项有效的、实用的IVF衍生技术。     

OPS法及自制冷冻叶法玻璃化冷冻小鼠MⅡ期卵母细胞的研究

目的:以小鼠为研究模型,建立优化的玻璃化冷冻卵母细胞方法以及研究超排卵对卵母细胞质量的影响,为人类卵母细胞玻璃化冷冻技术的改善提供基础研究依据.方法: 建立小鼠超排卵周期模型,比较ops(open pulled straw,开放式拉细麦管)和(自制)冷冻叶两种玻璃化冷冻方法冷冻小鼠MⅡ期卵母细胞的复苏率及体外受精率.结果:超排卵周期组中(自制)冷冻叶法玻璃化冷冻卵母细胞复苏率为66.5%,高于OPS法的冷冻复苏率(45.2%),2者比较差异有统计学意义(P<0.05).(自制)冷冻叶法玻璃化冷冻卵母细胞冷冻后体外受精率为47.4%,高于OPS法的冷冻后体外受精率(32.9%),2者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:(自制)冷冻叶玻璃化法冷冻是小鼠MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻的较优方法.     

一种安全有效的卵母细胞封闭式玻璃化冷冻载体

目的 探讨封闭式玻璃化冷冻载体冻存小鼠卵母细胞的可行性.方法 以小鼠MII期卵母细胞为模型,以开放式玻璃微细管法(GMP)为对照组,比较两种玻璃化冷冻载体对小鼠卵母细胞冷冻后的存活率、受精率、卵裂率及囊胚率的影响.结果卵母细胞经冻融后,封闭式冷冻载体组和GMP组的存活率、受精率、卵裂率和囊胚率均没有明显差异(92.80%vs 93.11%,49.80%vs 51.67%,36.73%vs 35.83%,12.65%vs 14.17%%;P>0.05).结论 封闭式冷冻载体能安全、有效的冷冻保存小鼠卵母细胞.     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床初步应用

目的探讨玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用效果。方法应用玻璃化冷冻保存技术冻存了22例患者的96枚4-16细胞期的早期胚胎。结果对82枚冷冻胚胎进行了解冻,存活65枚,胚胎存活率为79.27%（65/82）,存活胚胎均予移植,种植10枚,种植率为15.38%（10/65）,共进行了25个冷冻胚胎移植周期,获得8例妊娠,妊娠率32%（8/25）。结论玻璃化冷冻保存技术是一种冷冻保存人类早期胚胎的有效方法。     

人卵母细胞玻璃化冷冻的临床应用及成功分娩

目的探讨人卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值。方法将从促排卵周期获得的人的卵母细胞用冷冻环进行玻璃化冷冻保存,复苏后行卵细胞浆内单精子注射-胚胎移植,观察复苏后卵母细胞形成胚胎的发育能力。结果冷冻后融解235个卵母细胞,存活169个（71．9％,169／235）,受精122个（72．2％,122／169）。移植11例,获得临床妊娠2例。第1例于2005年12月15日妊娠35^＋2周行剖宫产,为双胎女婴,均发育正常。第2例为单胎妊娠,现妊娠16周,目前胎儿及孕妇健康。结论卵母细胞玻璃化冷冻是一种较理想的保存女性生育力的方法,但是其技术应用于临床有待进一步研究和实践。     

冻存人类未成熟卵母细胞的研究进展

冻存人类未成熟卵母细胞体外成熟有广阔的应用前景。经过20多年的探索,研究主要集中在小鼠、牛等哺乳动物的未成熟卵母细胞,冷冻方法也不尽相同,解冻后卵母细胞的存活率及胚胎发育潜力低。虽然经不同冷冻方法保存的人未成熟卵母细胞出生的婴儿国外已有个别报道,但是获得妊娠的机率还非常有限。本文将从人类未成熟卵母细胞的冻存优势、冷冻方法及影响因素等方面综述如下。1 冻存未成熟卵母细胞的研究现状1977年,Whittingham首次冻存小鼠成熟卵母细胞获得成功,揭开了卵母细胞冷冻保存的序幕。1986年Chem采用慢速冷冻-快速复温法首次冻存人成熟卵母细胞成功并获得妊娠26周胎儿。随后对卵母细胞冻存进行大量研究,     

不同冷冻载体对小鼠成熟卵母细胞玻璃化冷冻的影响

目的:探讨玻璃化冷冻小鼠成熟减数第二次分裂中期(MⅡ期)卵母细胞的最佳冷冻载体及冷冻方法。方法:用乙二醇和蔗糖为玻璃化冷冻保护剂,将小鼠成熟MⅡ期卵母细胞分为冻融、暴露和对照组。冻融组分别采用普通麦管、封闭式拉细麦管(CPS)和开放式拉细麦管(OPS)作载体,采用玻璃化快速冷冻和快速复温的方法冻存小鼠成熟卵母细胞;暴露组卵母细胞仅暴露在冷冻和复苏液中,不进行冷冻;对照组卵母细胞不接触冷冻和复苏液。观察各组处理后卵子回收、受精、卵裂等情况。结果:冻融组普通麦管、CPS和OPS处理的卵母细胞回收率分别为92.0%、92.3%和72.3%,OPS处理卵母细胞的回收率显著低于普通麦管和CPS处理的卵母细胞(P<0.001);普通麦管、CPS和OPS处理的卵母细胞复苏存活率分别为43.5%、72.2%和76.5%,CPS和OPS处理卵母细胞的复苏存活率显著高于普通麦管组处理的卵母细胞(P<0.001)。冻融、暴露和对照组的卵裂率分别为38.6%、69.2%和73.5%,冻融组显著低于暴露和对照组(P<0.001)。结论:CPS法在玻璃化冷冻保存成熟的卵母细胞方面有价值。