半胱氨酸蛋白酶-3/-9在金葡菌诱导的U937细胞凋亡中的作用

诱导U937细胞凋亡.随着金葡菌感染时间的延长,Caspase-3和Caspase-9的表达渐增加,Caspase-3/-9蛋白酶活性随着培养时间的延长也逐渐上升.Caspases蛋白酶的抑制剂Z-DEVD-FMK和Z-LEHD-FMK能够抑制金葡菌诱导的U937细胞凋亡.结论 Caspase-3/-9参与了金葡菌诱导的U937凋亡过程并发挥了重要的作用.     

Caspase-3抑制剂研究进展

caspase是一个半胱氨酸蛋白酶家族,在细胞凋亡的过程中起着关键性作用。迄今,已发现14种哺乳动物的Caspase酶,这些酶以休眠的酶原状态存在,在特定的条件下经过处理变为有催化活性的成熟酶。基于底物特异性和细胞功能,Caspase可被分为3组：Ⅰ炎症组：Caspase-1、-4、-5、-11、-12、-13、-14。Ⅱ凋亡启始组：Caspase-6、-8、-9、-10。     

鲎素诱导HL-60细胞凋亡的机制探讨

目的 研究鲎素诱导HL-60细胞凋亡时,半胱氨酸蛋白酶(Caspases)活性的变化,探讨鲎素诱导HL-60细胞凋亡的可能机制.方法 以鲎素20 μg/ml处理HL-60细胞0～24 h.流式细胞仪检测线粒体膜电位.Western blot法和发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6、Caspase-8和Caspase-9活性变化.Western blot法检测胞质中细胞色素C的变化.结果 鲎素处理HL-60细胞后,线粒体膜电位下降.Caspase-3、Caspase-6、Caspase-8和Caspase-9被激活,呈时间依赖性改变.鲎素处理HL-60细胞6 h Caspase-8活性最高,而Caspase-9在12 h活性最高,Caspase-6活性在18 h达峰值,Caspase-3活性峰值时间在24 h后.胞质中细胞色素C含量呈时间依赖性增加.结论 鲎素诱导HL-60细胞凋亡可能是多途径的,至少与线粒体途径和死亡受体途径相关.     

Caspase-8及Caspase-3与细胞凋亡

细胞凋亡与多种疾病的发生、发展密切相关。Caspasec依赖的凋亡过程中caspase-8与caspase-3着关键作用。就Caspase-872．Caspase-3在细胞凋亡过程中的作用及其研究进展做一综述。     

细胞焦亡与溃疡性结肠炎研究的最新进展

细胞焦亡是一种新发现的由Gasdermin蛋白家族成员介导的程序性细胞死亡方式,特征为细胞质膜孔径形成和炎性因子的活化,表现为细胞肿胀、质膜大泡形成,破裂后细胞内容物释出,使炎症发生级联扩大反应。在受外界刺激后,炎性小体活化进而激活依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)的经典细胞焦亡通路和依赖Caspase-4/5/11的非经典细胞焦亡通路,活化的炎性Caspase激活白细胞介素（IL）-1β、IL-18,并将底物蛋白GSDMD 切割为有成孔活性的N末端,GSDMD-N通过在质膜和线粒体上聚合成孔介导细胞焦亡。另有研究证明在GSDME可被Caspase-3切割成GSDME-N片段介导细胞焦亡。研究表明,由微生物感染和危险信号引起的焦亡常与免疫失调有关,过度的炎症反应可导致多种炎症性疾病的发生。大量研究表明焦亡在炎症性肠病等炎症性疾病的发生中起着重要作用。本文旨在阐述细胞焦亡的信号通路及分子机制,并探讨细胞焦亡与溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)关系的研究进展, 为进一步阐明UC的发病机制提供新思路, 获得有效的防治措施提供可能。     

二氢青蒿素对膀胱癌T24细胞株的抑制作用及其机制研究

目的探讨二氢青蒿素体外抗膀胱癌T24细胞株活性及相关机制。方法采用体外培养的T24细胞株为研究对象,流式细胞仪检测二氢青蒿素作用后T24细胞凋亡率,Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性,免疫印迹法检测细胞凋亡关键蛋白p53、Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达变化。结果二氢青蒿素能够诱导T24肿瘤细胞凋亡（P〈0.01）,且呈剂量-效应关系;二氢青蒿素还可引发T24肿瘤细胞Caspase-3活性水平升高（P〈0.05或P〈0.01）,促凋亡蛋白Caspase-3、Bax高表达（P〈0.01）,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低（P〈0.01）,且均呈现时间-效应关系。p53表达水平无显著改变（P〉0.05）。结论二氢青蒿素具有明确的抑制膀胱癌T24细胞株的效应,其机制可能是激活非依赖于p53的Bcl-2家族介导的细胞色素C途径,进而引发T24细胞凋亡。     

退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及相关蛋白Caspase-8、Caspase-9的表达

目的探讨凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9在颈椎间盘退变中的作用。方法采用原位DNA片段末端标记和免疫组织化学方法,检测57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞及42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9的表达。结果57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞凋亡率(AI)为54.0%,Caspase-8蛋白阳性细胞百分率为43.0%,Caspase-9蛋白阳性细胞百分率为54.0%;42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡率(AI)为39.6%,Caspase-8蛋白阳性细胞百分比为35.4%,Caspase-9蛋白阳性细胞百分比为47.0%。两组间细胞凋亡率(AI)、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达差异均有显著性意义(P<0.05)。凋亡细胞数越多,Cas-pase-8、Caspase-9表达越强。结论Caspase-8、Caspase-9蛋白参与了颈椎间盘组织中细胞调亡的调节,可能在颈椎病颈椎间盘退行性变发生和发展中发挥重要作用,且细胞调亡蛋白Caspase-9的作用可能比Caspase-8强。     

细胞焦亡在肾脏疾病中的作用

细胞焦亡是一种依赖于半胱天冬氨酸蛋白酶caspase-1/4/5/11且由GSDMD介导并伴有炎性介质释放的程序性细胞死亡。NLRP3炎性小体调控细胞焦亡并促使炎性因子的活化与释放。NLRP3炎性小体调控的细胞焦亡参与多种肾脏疾病的病理生理过程。本文就NLRP3-caspase-1介导的细胞焦亡在肾脏疾病中的作用研究进展做一简述。     

内质网应激反应参与强噪声诱导豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡的研究

目的:探讨强噪声能否诱导豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞(SGC)的凋亡,及观察凋亡蛋白酶Caspase-12、内质网应激相关因子Bip/Grp78和CHOP/Gadd153在强噪声暴露后豚鼠耳蜗SGC中的表达,探讨内质网应激在强噪声暴露后豚鼠耳蜗SGC损伤中的作用.方法:选用健康雄性白色豚鼠20只,将实验组豚鼠暴露在4 kHz窄带噪声120 dB SPL噪声环境中4h,噪声刺激停止后1,4,14d组及对照组在处死前测ABR(每组各5只).通过透射电镜和脱氧核糖核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),检测SGC凋亡细胞,免疫组化检测Caspase12、Bip/Grp78,CHOP/Gadd153蛋白的表达.结果:透射电镜观察发现实验组SGC出现了凋亡细胞的特征性改变.实验组SGC的TUNEL染色明显增强,免疫组化检测实验组Bip/Grp78蛋白明显高于正常组,且在1,4,14d都维持在比较高的水平.Caspase-12、CHOP/Gadd153蛋白含量在噪声刺激后迅速增高,1d和4d达到高峰,14d减少.结论:强噪声可以诱导SGC凋亡,Caspase-12活化引起内质网应激反应性凋亡通道是此过程的信号途径之一.     

乙型肝炎病毒相关性膜性肾病肾组织细胞凋亡的意义

目的 观察儿童乙型肝炎病毒相关性膜性肾病(HBV-MN)肾组织的细胞凋亡情况,以探讨其在HBV-MN发病中的意义.方法 采用活性Caspase-3免疫组织化学染色和核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)观察HBV-MN患儿肾组织及正常肾组织中的凋亡现象.并分析其与肾组织病理改变、尿蛋白及临床免疫学指标等因素的关系.结果 正常肾组织中,Caspase-3仅表达于少数肾小管上皮细胞胞质;在HBV-MN患儿的肾小球和肾小管一间质区,Caspase-3不仅表达于细胞质尚可见于胞核区(即活性Caspase-3),且肾小球和肾小管-间质区活性Caspase-3的表达(凋亡指数)与TUNEL指数均显著相关.HBV-MN患儿肾组织的凋亡指数与肾脏病变病理分期显著相关.肾小球凋亡指数与蛋白尿程度相关,而与HBsAg的沉积强度、血清补体C3水平无相关性;肾小管-间质区凋亡指数与蛋白尿程度、尿视黄醇结合蛋白水平显著相关.结论 HBV-MN患儿肾小球及肾小管-间质区均存在依赖Caspase-3的肾脏固有细胞凋亡,活性Caspase-3的表达与肾脏病变严重程度、临床蛋白尿水平及尿视黄醇结合蛋白(RBP)水平相关.肾脏固有细胞凋亡可能在HBv-MN的病理过程中发挥重要作用.     

长链非编码RNA在天然免疫中的功能效应及分子机制

在哺乳动物的基因组转录本中,长链非编码RNA（lncRNA）绝对数量大、种类多,是一个重要的类群。LncRNA可以通过碱基互补配对或折叠成特殊三维空间结构等方式,与蛋白质、RNA、DNA等其他生物分子相互作用,发挥着多种生物学功能,共同构成了一个复杂而精细的调控网络。越来越多的研究表明lncRNA在天然免疫中有重要的调控作用,如调控免疫细胞分化、调节炎性细胞因子的分泌以及参与病毒等病原体和宿主的相互作用等。笔者结合近年来天然免疫相关lncRNA的研究发现,讨论lncRNA相关生物学效应,着重阐述其分子机制,并讨论天然免疫相关的lncRNA研究策略和技术进展。     

人β防御素3研究进展

人β防御素3是近年研究发现的一种内源性抗生素。它是一种存在于人皮肤和黏膜组织的小分子阳离子抗菌肽,具有广谱的抗微生物活性,可连接先天和获得性免疫应答,在各种疾病中起抗感染作用。Toll样受体在人β防御素3表达调控中起重要作用。本文就人β防御素3的分布、表达调控、生物学功能及其在疾病中的作用予以综述。     

环状RNA与支气管哮喘相关性研究

环状RNA（circular RNA，circRNA）是一类特殊的非编码RNA，参与许多细胞过程，与多种疾病的发生发展相关。circRNA在先天免疫、炎症反应中发挥重要作用，已有研究表明circRNA与慢性炎症性疾病关系密切。哮喘是一种慢性气道炎症，其发病机制尚不明确。本文就circRNA与哮喘的关系进行综述。     

Correlation between neuronal injury and Caspase-3 after focal ischemia in human hippocampus

Background Cerebral ischemia is a significant clinical problem, and cerebral ischemia usually causes neuron injury such as apoptosis in various brain areas, including hippocampus. Cysteinyl aspartate-specific protease (Caspases) are fundamental factors of apoptotic mechanism. Caspase-3 inhibitors show effect in attenuating brain injury after ischemia. But all the results were from animal models in research laboratories. This study aimed at investigating the correlation between the change of ischemic neuronal injury and Caspase-3 post-ischemia in human hippocampus.Methods We selected and systematized 48 post-mortem specimens from 48 patients, who died of cerebral infarction. Morphological change was firstly analyzed by observing hematoxyline/eosinstaining hippocampal sections. The expression of Caspase-3 was investigated using the methods of in situ hybridization and immunohistochemistry. Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated 2‘-deoxyuridine5‘-triphosphate-biotin nick-end labeling (TUNEL) method was used to clarify the involvement of Caspase-3 in neuron death. The loss of MAP 2 (MAP-2) was applied to judging the damaged area and degree of neuronal injury caused by ischemia.Results In the CA1 sector of hippocampus, Caspase-3 immunostaining modestly increased at 8 hours [8.05/high-power field (hpf)-], dramatically increased at 24 hours (24.85/hpf), decreased somewhat after 72 hours. Caspase-3 mRNA was detectable at 4 hours (6.75/hpf), reached a maximum at 16 hours (17. 60/hpf), faded at 72 hours. TUNEL-positive cells were detectable at 24 hours (10.76/hpf), markedly increased at 48-72 hours. The loss of MAP-2 was obviously detected at 4 hours, progressed significantly between 24 and 72 hours; MAP-2 immunoreactivity was barely detectable at 72 hours. Before 72 hours, the Caspase-3 evolution was related with the upregulation of TUNEL and the loss of MAP-2. The positive correlation between Caspase-3 mRNA and TUNEL was significant at the 0.05 level ( correlation coefficient was 0. 721 ) ; the negative correlation between Caspase-3 mRNA and MAP-2 was significant at the 0.05 level ( correlation coefficient is 0. 857). In the early stage (before 72 hours), the staining of Caspase-3 mRNA and immunohistochemistry was predominantly present in cytoplasm; the staining of TUNEL was predominantly localized in nucleus. At 4-16 hours, most neurons in hippocampal CA1 areas had relatively normal morphology; at 24-48 hours, neurons showed apoptotic morphology; at 72 hours, most cells showed significantly pathological morphology.Conclusions There exist a time-dependent evolution of neuronal damage after hippocampal ischemia in human brain, which wascharacterized by its close correspondence to Caspase-3.     

骨肉瘤中survivin、Caspase-8的表达及其与凋亡的相关性研究

目的探讨survivin mRNA、Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法分别采用RT-PCR和免疫组化技术检测40例骨肉瘤及正常组织中survivin mRNA和Caspase-8蛋白的表达,运用TUNEL方法检测细胞凋亡。结果77.5%的骨肉瘤组织survivin mRNA呈阳性表达,显著高于正常组织;Caspase-8蛋白在骨肉瘤和正常组织中的阳性表达率分别为27.5%和85%(P<0.05);在骨肉瘤组织中,survivin mRNA和Caspase-8蛋白表达呈负相关;survivin mRNA阳性的骨肉瘤中细胞凋亡指数明显低于survivin mRNA阴性组(P<0.05);Caspase-8蛋白阳性的骨肉瘤中细胞凋亡指数明显高于Caspase-8蛋白阴性组(P<0.05)。结论survivin、Caspase-8均参与骨肉瘤的发生、发展变化,survivin是通过抑制Caspase-8的活性而发挥其抑制细胞凋亡作用的。     

PI3K/AKT/mTOR信号通路调控Th17细胞的研究进展

CD4⁺ T细胞是一类在免疫反应中发挥重要作用的免疫细胞,它在激活后可分化为Th1、Th2、Th17和Treg等细胞亚群。其中Th17细胞是一类新型CD4⁺ 效应T细胞,在宿主防御各种病原体和炎症发病机制中发挥重要作用。PI3K/AKT/mTOR信号通路可以调控细胞的新陈代谢、增殖、分化和生存等生命过程,并参与肿瘤、自身免疫性疾病等的发生。本文针对PI3K/AKT/mTOR信号通路调控Th17细胞的研究进展进行综述。     

大鼠蛛网膜下腔出血后大脑皮质中神经元凋亡的研究

目的:研究大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后大脑皮质神经元凋亡与Caspase-3和Fas表达情况及其相互关系。方法:选用健康SD大鼠60只,随机分成正常对照组(n=6)、假手术组(n=6)和SAH组(n=48),SAH组在2、4、8、16h及1、3、5d和7d时相点各6只。采用枕大池二次注血法制备SAH模型,HE染色,光学显微镜观察大脑皮质神经元形态学改变,应用免疫组化法检测Caspase-3和Fas的表达。结果:大鼠SAH后2h大脑皮质中神经元凋亡细胞开始增加,3~7d呈典型凋亡细胞形态改变,随SAH时间延长Caspase-3和Fas在大脑皮质中的表达呈上升趋势,3d时达最高,7d时仍显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:Caspase-3和Fas参与了大脑皮质神经元凋亡的过程,Caspase-3是大脑皮质神经元凋亡进程中的重要物质之一。     

低氧预适应对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡和Caspase-3活性的影响

目的探讨低氧预适应(8%O2,3h)对大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注后12h神经细胞凋亡及Caspase-3活性的影响。方法低氧预适应后12h制作脑缺血再灌注模型,大鼠大脑中动脉阻塞2h,灌注损伤12h,用TUNEL法和荧光四肽底物法分别检测假手术组、缺血再灌注组和低氧预适应组的凋亡细胞百分率和Caspase-3活性水平。结果与缺血再灌注组比较,低氧预适应组和假手术组的凋亡细胞百分率和Caspase-3活性水平显著降低(P<0.05,P<0.01);低氧预适应组与假手术组比较,细胞凋亡率明显升高(P<0.01),Caspase-3水平反而降低(P<0.01)。结论低氧预适应可减少大脑中动脉缺血2h再灌注后Caspase-3活性,抑制神经细胞的凋亡。     

烟酰胺磷酸核糖转移酶在炎症中的作用研究进展

烟酰胺磷酸核糖转移酶（Nampt）又称内脏脂肪素（Visfatin）和前B细胞克隆增强因子。研究发现,Nampt是催化烟酰胺腺嘌呤二核苷（NAD）合成的限速酶,也是一种脂肪因子、细胞因子,参与免疫、代谢和应激等相关生理病理过程;值得关注的是,Nampt参与了一系列与炎症相关的疾病,包括急性肺损伤、动脉粥样硬化、心肌梗死、肥胖、2型糖尿病、关节炎等,因而Nampt被认为是炎症相关疾病的治疗药物开发新靶点。本文就Nampt在炎症中的作用研究进展作一综述。