雾化吸入γ-干扰素增强免疫低下大鼠肺部抗感染能力的实验研究

目的 研究雾化吸入γ－干扰素对免疫低下大鼠肺部感染能力的增强作用。方法 醋酸考的松皮下注射复制大鼠免疫低下模型,检测气管内注射白色念珠菌、或气管内注射白色念珠菌并雾化吸入γ－干扰素１、３、７天的免疫低下大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬及杀菌功能,抗原提呈功能,以及培养上清中ＴＮＦ－α活性,并于第７天进行左肺白色念珠菌培养计数。结果 雾化吸入γ－干扰素组大鼠肺白色念珠菌计数显著少于免疫低下组大鼠（Ｐ〈０．０５     

雾化吸入γ-干扰素增强免疫低下大鼠肺部抗白色念珠菌感染能力

目的 :研究雾化吸入γ 干扰素对免疫低下大鼠肺部抗感染能力的增强作用。方法 :醋酸考的松皮下注射复制大鼠免疫低下模型 ,检测气管内注射白色念珠菌或气管内注射白色念珠菌并雾化吸入γ 干扰素 1、3、7d的免疫低下大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬及杀菌功能 ,抗原提呈功能 ,以及培养上清中TNF α活性 ,并于第 7天进行左肺白色念珠菌培养计数。结果 :雾化吸入γ 干扰素组大鼠肺泡白色念珠菌计数显著少于免疫低下组大鼠 (P <0 0 5 )。雾化吸入γ 干扰素组大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬及杀菌百分率显著高于免疫低下组大鼠 (P <0 0 1)。雾化吸入γ 干扰素组大鼠肺泡巨噬细胞Ia抗原表达的阳性率显著高于免疫低下组大鼠(P <0 0 1)。雾化吸入γ 干扰素组大鼠肺泡巨噬细胞培养上清中TNF α的活性显著高于免疫低下组大鼠(P <0 0 5 )。结论 :雾化吸入γ 干扰素可明显增强免疫低下大鼠肺部抗白色念珠菌感染能力。     

雾化吸入γ-干扰素对免疫低下大鼠某些细胞因子的影响

目的：研究雾化吸入γ-干扰素(IFN-γ)对免疫低下大鼠细胞因子的影响。方法：醋酸考的松皮下注射复制大鼠免疫低下模型,检测气管内注射白色念珠菌并雾化吸入IFN-γ l、3、7d的免疫低下大鼠和对照组大鼠肺泡巨噬细胞(AM)培养上清中TNF-α活性和IL-1β、IL-6水平,支气管肺泡灌洗液(BALF)IFN-γ、TNF-α活性,肺组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6表达,以及血清IFN-γ活性和IL-1β、IL-6水平。结果：吸入IFN-γ组大鼠AM培养上清中TNF-α的活性和IL-1β、IL-6水平显著高于对照组大鼠。吸入IFN-γ组大鼠BALF中IFN-γ、TNF-α活性高于对照组大鼠(d7 TNF-α除外)。吸入IFN-γ组灌菌后d7肺组织IFN-γ和IL-1β的表达高于对照组,TNF-α表达低于对照组,IL-6表达二组无显著差异。吸入IFN-γ组大鼠血清IFN-γ活性和IL-1β、IL-6水平,除d3 IL-1β外,与免疫低下大鼠组相比无显著差异。结论 雾化吸入IFN-γ可明显提高肺内IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,但对相应血清细胞因子无明显影响。     

雾化吸入γ-干扰素对免疫低下大鼠某些细胞因子的影响

目的 研究雾化吸入γ-干扰素（IFN-γ）对免疫低下大鼠细胞因子的影响。方法 醋酸考的松皮下注射并气管内注射白色念珠菌复制大鼠免疫低下肺感染模型,检测雾化吸入IFN-γ1、3、7d的免疫低下大鼠和对照组大鼠肺泡巨噬细胞（AM）培养上清中TNF- α活性和IL-1β、IL-6水平,支气管肺泡灌洗液（BALF）IFN-γ、TNF-α活性,肺组织IFN-γ、TNF-α活性,肺组织IFN-γ、TNF-α、TNF-1β、IL-6表达,以及血清IFN-γ活性和IL-1β、IL-6水平,结果 吸入IFN-γ组大鼠AM培养上清中TNF-α的活性和IL-1β、IL-6水平显著高于对照组大鼠。吸入IFN-γ组大鼠BALF中IFN-γ、TNF-α活性高于对照组大鼠（第7天TNF-α除外）,吸入IFN-γ组大鼠血清IFN-γ活性和IL-1β的表达高于对照组,TNF-α表达低于对照组,IL-6表达二组无显著差异,吸入IFN-γ组大鼠血清IFN-γ活性和IL-1β、IL-6水平,除第3天IL-1β外,与免疫低下大鼠组相比差异不显著,结论 雾化吸入IFN-γ可明显提高肺内IFN-γ、TFN-α、IL-1β、IL-6水平,但对相应血清细胞因子无明显影响。     

雾化吸入r—干扰素增强免疫低下大鼠肺部抗感染能力的研究

免疫低下患者日益增多 ,难治性呼吸系统感染是这些患者的主要死亡原因 ,且已成为临床医学的研究重点。本研究旨在探讨雾化吸入提高肺局部干扰素γ(ＩＦＮ γ)水平 ,对免疫低下大鼠肺部抗感染能力和细胞免疫的影响。一、材料和方法1 实验方法 :(1)动物模型的制备、分组和标本留取 :方法请参见参考文献 [1]。 (2 )肺泡巨噬细胞 (ＡＭ)的吞噬及杀菌功能检测 :白色念珠菌法[2 ] 。 (3)ＡＭ的Ⅰａ抗原表达 :间接免疫荧光试验[3 ] 。 (4 )ＡＭ培养上清和血清中白细胞介素(ＩＬ) 1β、ＩＬ 6水平检测 :酶联免疫吸附 (ＥＬＩＳＡ)法。 (5 )ＡＭ培养…     

雾化吸入γ-干扰素增强免疫低下大鼠肺部抗感染能力的研究

免疫低下患者日益增多,难治性呼吸系统感染是这些患者的主要死亡原因,且已成为临床医学的研究重点。本研究旨在探讨雾化吸入提高肺局部干扰素γ(IFN-γ)水平,对免疫低下大鼠肺部抗感染能力和细胞免疫的影响。 　　一、材料和方法 　　1.实验方法：（1）动物模型的制备、分组和标本留取：方法请参见参考文献［1］。（2）肺泡巨噬细胞（AM）的吞噬及杀菌功能检测：白色念珠菌法［2］。（3）AM的Ⅰa抗原表达：间接免疫荧光试验［3］。（4）AM培养上清和血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平检测：酶联免疫吸附(ELISA)法。（5）AM培养上清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子(TNF)-α活性的检测：L929细胞毒性试验［4］。（6）血清和BALF中IFN-γ活性的检测：L929细胞病变抑制试验［5］。BALF的测定结果用小牛血清白蛋白的含量校正,以U/ml的形式表示。     

吸入γ—干扰素对哮喘患者气道高反应性的影响

的目：探讨人重组γ－干扰素（ｈｒＩＦＮγ）经雾化吸入后对哮喘患者气道高反应性（ＢＨＲ）的影响，试图寻找治疗哮喘的新途径。方法：选择１４例过敏性哮哮患者，每天吸入ｈｒＩＦＮγ１．０×１０＾６单位，并以吸入安慰剂（生理盐水）的１０例患者做对照，分别于吸入前、吸入后第７天和第１４天测定其气道反应性和肺功能。结果：ｈｒＩＦＮ－γ吸入组于治疗后第７天及第１４天其ＰＣ２０－ＦＥＶ１值均较治疗前有明显有明显提高     

大鼠γ-干扰素基因转染大鼠肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞的实验研究

目的：构建重组大鼠γ－干扰素真核表达载体，探讨其转染大鼠肺泡巨噬细胞（AM）和气道上皮细胞的可行性及表达水平。方法：采用RT－PCR技术克隆了大鼠γ－干扰素，并将其定向克隆到逆转录病毒载体pLXSN上，构成真核表达重组载体，将重组载体转染培养的AM和气道上皮细胞，用PCR法鉴定重组载体整合在细胞基因组DNA中，并检测细胞培养上清中γ－干扰素浓度和活性。结果：DNA测序证明，构建的重组载体中γ－干扰素的基因方向正确，DNA序列与Gene Bank中大鼠的γ－干扰素cDNA序列相同，转染后AM和气道上皮细胞基因组DNA的PCR产物电泳可见转染的重组载体DNA片段条带，pLXSN-IFN载体组的AM和气道上皮细胞培养上清中大鼠γ－干扰素学和活性显著高于pLXSN空载体组（P＜0．01）结论：本研究构建的大鼠γ－干扰素重组表达载体可成功地转染大鼠AM和气道上皮细胞，整合入基因组DNA，并分泌有活性的γ－干扰素，为进一步的体内基因转染研究奠定基础。     

rhG-CSF 和氟康唑联合应用对粒细胞减少小鼠念珠菌肺感染的疗效

为了研究人类重组粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）对中性粒细胞减少小鼠白色念珠菌肺感染的预防和治疗作用，腹腔注射环磷酰胺的小鼠被分成４组：①对照组，气管内注射白色念珠菌；②感染前皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ；③感染后１２ｈ腹腔注射氟康唑；④ｒｈＧ－ＣＳＦ和氟康唑联合应用。结果显示注射白色念珠菌前４ｄ，皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ１００μｇｋｇ－１ｄ－１对中性粒细胞减少合并白色念珠菌肺感染小鼠有明显的保护作用；白色念珠菌感染后２４ｈ，肺内中性粒细胞数较对照组明显增多；ｒｈＧ－ＣＳＦ和氟康唑联合应用较单独应用疗效好。     

STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和Smad4表达的影响

目的：观察信号转导子与转录活化子1（STAT1）反义寡核苷酸雾化吸入对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和Smad4表达的影响。方法：将45只雌性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和干预组,每组15只,对照组大鼠气管内灌注生理盐水、模型组和干预组大鼠气管内灌注博来霉素。于气管内灌注药物后0、2、4、6天对照组和模型组大鼠给予雾化吸入生理盐水,而干预组大鼠则雾化吸入STAT1反义寡核苷酸/DOTAP复合物。分别于气管内灌注药物后第7天、第14天和第28天每组各处死5只大鼠。肺组织HE染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化改变,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞总分数测定、ELISA测定BALF中TGF-β1的浓度、免疫组织化学SP法测定肺组织中TGF-β1、Smad4表达。结果：（1）干预组大鼠各时间点的肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组明显减轻。（2）干预组大鼠各时间点的细胞总数和中性粒细胞比例较模型组减少,巨噬细胞比例增加。（3）模型组大鼠BALF的TGF-1水平在第7d表达明显升高,14d、28d仍持续高于对照组。干预组大鼠各时间点BALF中TGF-β1含量均低于模型组。（4）模型组和干预组大鼠肺组织中TGF-β1、Smad4表达水平均明显高于对照组,模型组和干预组大鼠第7天TGF-β1、Smad4的表达值明显高于对照组,随后下降,第28天时仍高于对照组;干预组大鼠各时间点肺组织TGF-β1、Smad4表达水平均低于模型组。（5）干预组大鼠肺组织中羟脯氨酸含量明显低于模型组。（6）BALF中TGF-β1蛋白浓度、肺组织中TGF-β1蛋白表达、Smad4蛋白表达均与肺组织匀浆中羟脯氨酸含量呈正相关。结论：STAT1反义寡核苷酸雾化吸入能减轻博来霉素致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制TGFβ-Smads信号转导通路中的TGF-β1和Smad4有关。     

γ-干扰素雾化吸入治疗毛细支气管炎疗效观察

目的：探讨γ-干扰素雾化吸入治疗毛细支气管炎的疗效。方法：对132例毛细支气管炎的患儿按照治疗方法不同分为γ-干扰素治疗组67例，对照组65例，两组在使用抗生素、吸氧、吸痰、抗病毒、纠正酸中毒、镇静，合并心衰者予利尿、强心、扩管等综合治疗上相同。治疗组在综合治疗上使用γ-干扰素雾化吸入治疗。结果：γ-干扰素雾化吸入治疗组患儿咳嗽、气促、吼喘、呼吸困难和肺部哮呜音消失时间均较对照组明显缩短。（P均〈0．01）。结论：γ-干扰素雾化吸入治疗呼吸道合胞病毒（RSV）感染所致毛细支气管炎能迅速改善临床症状，缩短病程。     

吸入前列腺素E1对脂多糖所致大鼠急性肺损伤模型Th1/Th2的影响

目的 探讨雾化吸入前列腺素E1(PGE1)对脂多糖(LPS)所致大鼠急性肺损伤(ALI)模型Th1/Th2的影响.方法 尾静脉注射LPS复制大鼠ALI模型,PGE1雾化入宽大玻璃瓶内让大鼠自由吸入,用ELISA法检测大鼠外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的水平及IFN-γ/IL-4比值.结果 LPS组外周血及BALF中IFN-γ/IL-4比值较生理盐水对照组(NS组)显著升高(P＜0.01),PGE1组外周血IFN-γ/IL-4(Th1/Th2)比值在6、12及24 h时间点显著低于LPS组(P＜0.01),而BALF中各时间点IFN-γ/IL-4(Th1/Th2)比值显著低于LPS组(P＜0.01).结论 雾化吸入PGE1可使LPS所致大鼠ALI失衡的Th1/Th2趋于平衡,减轻LPS所致大鼠ALI.     

百合知母汤对哮喘模型大鼠IL-4、IFNγ-含量和EOS计数的影响

目的探讨百合知母汤治疗哮喘模型大鼠的作用机制。方法将70只W istar大鼠随机分为7组：空白对照组（A组）、模型对照组（B组）、百合知母汤大剂量组（C1组）、百合知母汤中剂量组（C2组）、百合知母汤小剂量组（C3组）、地塞米松激素组（D组）、地塞米松激素减量加百合知母汤中剂量组（E组）,每组10只。除A组外,其余6组通过腹腔注射卵蛋白（OVA）致敏及雾化吸入激发复制大鼠哮喘模型,百合知母汤各剂量组按大、中、小剂量灌胃给药1周,D组给予地塞米松1周,E组第1周给予地塞米松,第2周开始地塞米松每日递减并给予百合知母汤中剂量。然后处死大鼠,用放免法检测血清中的白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFNγ-）的含量,并通过肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞（EOS）的计数,观察百合知母汤对哮喘大鼠肺组织中EOS的影响。结果百合知母汤能显著延长咳嗽、诱喘潜伏期,减少咳嗽次数并具有祛痰作用,此外还可降低肺泡灌洗液中EOS计数和IL-4含量,升高IFNγ-含量,有效减少哮喘发作次数及控制哮喘症状,其中以中剂量作用最为明显;地塞米松虽能有效延长咳嗽、诱喘潜伏期,减少咳嗽次数和EOS计数,但其祛痰作用不明显。结论百合知母汤具有明显的止咳、化痰、平喘作用,并通过影响IL-4、IFNγ-的含量及EOS计数,从而调节免疫功能。     

不同时间点雾化吸入STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的：探讨雾化吸入信号转导子与转录活化子1（STAT1）反义寡核苷酸（ASON）干预肺纤维化大鼠的最佳时机。方法：清洁级健康雌性Wistar大鼠25只,随机分为生理盐水（NS）组、博来霉素（BLM）组和ASON 0 d组、ASON 7 d组、ASON14d组各5只。BLM组、ASON 0 d组、ASON 7 d组和ASON 14 d组大鼠气管内灌注BLM,NS组大鼠气管内灌注NS。大鼠气管内灌注BLM或NS后第0、2、4、6 d,NS组和BLM组大鼠雾化吸入NS,ASON 0 d组大鼠雾化吸入STAT1 ASON,ASON 7天组大鼠于气管内灌注BLM后第7、9、11、13d雾化吸入STAT1 ASON,ASON 14 d组于灌注BLM后第14、16、18、20d雾化吸入STAT1 ASON,各组均于气管内灌注BLM或NS后28d处死大鼠。左肺组织HE染色观察肺泡炎程度,Masson染色观察肺纤维化程度,免疫组织化学SP法测定肺组织中PAI-1、TGF-β1的表达。右肺测定肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达及羟脯氨酸含量。结果：①STAT1 ASON雾化吸入后,ASON 0 d组与BLM组、ASON 7 d组、ASON 14d组比较,肺泡炎和肺纤维化程度均明显减轻（P〈0.05）。②ASON 0d组与BLM组比较,肺组织转移生长因子β1（TGF-β1）表达减少（P〈0.05）。ASON 14d组与ASON 0d组比较,肺组织TGF-β1表达增多（P〈0.05）。③与BLM组比较,ASON 0d组和ASON 7d组肺组织PAI-1表达降低（P〈0.05）;与ASON 0d组和ASON 7d组比较,ASON 14d组肺组织PAI-1表达增加（P〈0.05）。④与BLM组比较,ASON 0d组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平降低,ASON 7d组肺组织Ⅲ型胶原mRNA表达水平降低（P〈0.05）;与ASON 0d比较,A-SON 7d组和ASON 14d组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平增高（P〈0.05）。⑤与BLM组比较,ASON 0d组、ASON 7d组羟脯氨酸含量均减少（P〈0.05）;与ASON 0d组比较,ASON 7d组和ASON 14d组羟脯氨酸含量增高（P〈0.05）;与ASON 7d组比较,ASON 14d组羟脯氨酸含量增高（P〈0.05）。结论：不同时间点雾化吸入STAT1 ASON对肺纤维化的干预作用是不同的,0d、7d可以减轻肺纤维化,其中0d雾化吸入是治疗的最佳时间。     

黄粉虫蛋白对白色念珠菌模型小鼠特异性免疫的调节作用

目的 研究黄粉虫蛋白对白色念珠菌模型小鼠特异性免疫的调节作用.方法 将小鼠分为正常对照组、正常用药组、免疫抑制对照组、免疫抑制用药组四个组.处死后用ELISA法分别测定各组小鼠IFN-γ水平和IgG水平,用平板培养计数法各组小鼠内脏活菌数目.结果 黄粉虫蛋白明显提高正常小鼠和免疫功能低下小鼠的IFN-γ水平和IgG水平...     

卡介苗免疫预防小鼠白色念珠菌感染的实验研究

目的探讨卡介苗（BCG）预先免疫对小鼠白色念珠菌感染的影响。方法采用BCG或灭菌生理盐水皮内注射预先免疫2周,然后由尾静脉注射白色念珠菌进行攻击,观察小鼠死亡率及计算存活小鼠肾组织带菌量。结果BCG免疫组存活时间长于生理盐水免疫组（P〈0.01）;存活小鼠肾组织菌落计数：BCG免疫组远少于省里盐水免疫组（P〈0.01）。结论BCG对小鼠白色念珠菌感染具有很好的保护作用。     

γ-干扰素联用α-细辛脑雾化吸入治疗小儿毛细支气管炎的疗效探讨

目的:探讨γ-干扰素联用α-细辛脑雾化吸入治疗小儿毛细支气管炎的疗效。方法:对确诊的120例患毛细支气管炎患儿随机分为4组,每组30例。γ-干扰素治疗组应用γ-干扰素0.5×105IU/次,加入生理盐水10 ml中雾化吸入;α-细辛脑组应用α-细辛脑4 mg/次加入生理盐水10 ml中雾化吸入;γ-干扰素联用α-细辛脑组联用以上两种方法,先吸入γ-干扰素。生理盐水对照组仅雾化吸入生理盐水10 ml,以上治疗均每日2次。结果:4种治疗方案中,γ-干扰素联用α-细辛脑组疗效最好,γ-干扰素组及α-细辛脑组均有效,优于生理盐水对照组,患儿气促、肺部音的消失时间以及住院时间均缩短。结论:联合α-细辛脑及γ-干扰素治疗小儿毛细支气管炎效果好。     

中药雾化治疗对慢阻肺大鼠SOD影响的研究

目的观察中药雾化吸入对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型超氧化物歧化酶（SOD）含量的变化及意义,探讨其对COPD的保护机理。方法采用＂烟熏并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法＂复制COPD大鼠模型。研究分为5个组：正常组、模型组、中药治疗组、西药治疗组、生理盐水雾化组,治疗时间为4周。观察肺泡灌洗液细胞数分类,血清中SOD含量。结果中药治疗组SOD水平较西药治疗组明显升高而MDA较西药组高,差异有统计学意义（P〈0.05）;中、西药治疗组SOD水平分别较模型组明显升高,而MDA较西药组低（P〈0.05）;肺泡灌洗液炎性细胞计数及分类中药组低于西药组（P〈0.05）。结论中药雾化能减轻支气管肺组织炎性细胞在肺内聚集,使SOD升高,MDA降低,对COPD大鼠肺具有保护作用。     

麻黄雾化液对过敏性哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞的影响

目的观察麻黄雾化液吸入对过敏性哮喘大鼠肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞（EOS）含量的影响。方法以卵蛋白（OVA）致敏并吸入激发法制备大鼠哮喘模型,在激发前予麻黄液雾化吸入治疗,连续7天治疗后处死大鼠并收集BALF,光镜下行EOS计数。结果与正常对照组比较,模型组大鼠BALF中自细胞总数和EOS计数明显升高（P〈0．01）,麻黄液雾化吸入治疗后大鼠BALF中自细胞总数和EOS计数明显下降（P〈0．01）。结论麻黄液雾化吸入能够降低BALF中EOS含量,减轻哮喘动物模型气道炎性细胞的聚集,抑制炎症反应。