颗粒酶与感染性疾病

颗粒酶是活化的细胞毒性T细胞和自然杀伤细胞的效应分子,能导致被病原体感染的细胞发生凋亡。在机体清除病原及病原感染细胞中发挥着极其重要的作用。颗粒酶在感染性疾病中的作用提示,它很有可能成为扭转这些疾病的发生和进程以及治疗这些疾病的重要入手点。本文就颗粒酶生物学特征、作用机制及其与感染性疾病发生关系的作用简要综述。     

HIV感染继发嗜血细胞综合征一例

 患者男,28岁,未婚。因发热半个月于2010年2月24日入院。患者于半个月前受凉后出现发热,体温最高可达39℃,自行服用“感康”,体温有所下降,至17:00左右体温又升高,如此反复半个月,1周前在当地医院住院治疗,效果不佳,为求进一步诊治来我院,门诊以“发热原因待诊”收入我科。既往体健,否认冶游史。入院体检：体温39.3℃,脉搏92次/min,呼吸 20次/min, 血压 126/83 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）。颜面部、胸壁皮肤、球结膜及咽部充血,双侧颈部可扪及多个黄豆大小淋巴结,质软,活动可,双肺未闻及干湿性啰音,余未见阳性体征。入院当天WBC 5.51×10⁹/L,中性粒细胞计数（NEU）1.53×10⁹/L,淋巴细胞计数（LYM）3.48×10⁹/L,嗜酸性粒细胞计数（EOS）0,RBC 4.39×10¹²/L,Hb 127 g/L,血小板87×10⁹/L;ALT 119.4 U/L,AST 163.7 U/L, γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）140.0 U/L;血Ksup>+ 2.73 mmol/L, 血Na+ 132.9 mmol/L。入院初步诊断：发热原因待查：（1）感染性发热：①呼吸道感染？②肺结核？③病毒性肝炎？④HIV感染？（2）非感染性发热：①成人Still病？②淋巴瘤？③其他？给予物理降温、抗病毒、经验性使用抗生素、升白细胞及血小板、保肝降酶及加强补液处理。     

PA感染与定植中细胞因子变化的研究

目的探讨铜绿假单胞菌外毒素(PEA)在铜绿假单胞菌肺部感染及定植表达差异的临床价值。方法 SD大鼠180只,随机分为PA(铜绿假单胞菌)感染模型组,PA咽部定植组及生理盐水对照组。取肺组织HE染色光镜下观察肺部炎症情况。结果①细菌培养结果:模型组在接种后肺组织PA菌落数明显升高;定植组咽拭子培养见大量PA生长;定植组及对照组肺组织未见PA菌生长;②模型组血清IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α表达在接种后第3、7、11天均明显高于定植组及对照组(其差异有统计学意义)。结论血清细胞因子IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α检测有助于对铜绿假单胞菌感染与定植的鉴别诊断。     

大鼠白色念珠菌肺炎与淋巴细胞趋化因子的相关性研究

目的 探讨淋巴细胞趋化因子(lymphotactin,Ltn)与大鼠白色念珠菌肺炎发生发展过程的相关性.方法 选用清洁级健康雄性SD大鼠(150～180 g,鼠龄30～40 d)80只,随机分为模型组与对照组,每组40只.实验组从气管注入白色念珠菌菌液制备白色念珠菌肺炎模型,分别在接种完成后1 d、3 d、7 d、11 d处死大鼠(各组10只),取心室血,采用双抗体夹心ABC-酶联免疫吸附试验法测定血清Ltn、γ-干扰素(IFN-γ)、白介素2(IL-2)水平,取肺组织行组织病理检查及病原体培养计数,应用SPSS 13.0统计软件对数据结果进行处理.结果 模型1 d、3 d、7 d、11 d组均见明显炎症反应,Szapiel评分分别为(1.70±0.48)分、(3.60±0.70)分、(2.90±0.57)分、(1.30±0.52)分,菌体负荷数分别为(3.50±1.07)×106 du/ml、(4.60±1.08)×106cfu/ml、(1.30±0.48)×106cfu/ml、(0.10±0.32)×106cfu/ml.模型1 d、3 d、7 d组Ltn、IFN-γ、IL-2水平均高于对照组(P<0.05),模型组Ltn的消长与炎性程度、菌落数、IFN-γ、IL-2水平呈正相关(γ=0.816、0.647、0.846、0.823,P值均<0.05).结论 Ltn参与了真菌感染过程.与IFN-γ、IL-2在消除病原体方面起着相互协同的积极作用.     

STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和Smad4表达的影响

目的：观察信号转导子与转录活化子1（STAT1）反义寡核苷酸雾化吸入对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和Smad4表达的影响。方法：将45只雌性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和干预组,每组15只,对照组大鼠气管内灌注生理盐水、模型组和干预组大鼠气管内灌注博来霉素。于气管内灌注药物后0、2、4、6天对照组和模型组大鼠给予雾化吸入生理盐水,而干预组大鼠则雾化吸入STAT1反义寡核苷酸/DOTAP复合物。分别于气管内灌注药物后第7天、第14天和第28天每组各处死5只大鼠。肺组织HE染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化改变,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞总分数测定、ELISA测定BALF中TGF-β1的浓度、免疫组织化学SP法测定肺组织中TGF-β1、Smad4表达。结果：（1）干预组大鼠各时间点的肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组明显减轻。（2）干预组大鼠各时间点的细胞总数和中性粒细胞比例较模型组减少,巨噬细胞比例增加。（3）模型组大鼠BALF的TGF-1水平在第7d表达明显升高,14d、28d仍持续高于对照组。干预组大鼠各时间点BALF中TGF-β1含量均低于模型组。（4）模型组和干预组大鼠肺组织中TGF-β1、Smad4表达水平均明显高于对照组,模型组和干预组大鼠第7天TGF-β1、Smad4的表达值明显高于对照组,随后下降,第28天时仍高于对照组;干预组大鼠各时间点肺组织TGF-β1、Smad4表达水平均低于模型组。（5）干预组大鼠肺组织中羟脯氨酸含量明显低于模型组。（6）BALF中TGF-β1蛋白浓度、肺组织中TGF-β1蛋白表达、Smad4蛋白表达均与肺组织匀浆中羟脯氨酸含量呈正相关。结论：STAT1反义寡核苷酸雾化吸入能减轻博来霉素致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制TGFβ-Smads信号转导通路中的TGF-β1和Smad4有关。     

全麻有创机械通气下支气管肺泡灌洗对COPD合并肺部感染和Ⅱ型呼吸衰竭的疗效

目的 探讨全麻有创机械通气下经纤维支气管镜(纤支镜)支气管肺泡灌洗(BAL)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺部感染和Ⅱ型呼吸衰竭的疗效.方法 50例不需立即有创机械通气治疗的COPD合并肺部感染和Ⅱ型呼吸衰竭患者,随机分为对照组26例和灌洗组24例.对照组行常规治疗及无创正压通气(NIPPV);灌洗组在对照组治疗基础上在全麻有创机械通气下行BAL.分析比较两组在治疗前、治疗后4小时、第4天动脉血气变化及两组在治疗前和第4天C反应蛋白(CRP)和外周血常规变化、治疗第7天两组X线胸片变化,并比较两组痰培养阳性率、持续有创机械通气上机率、严重并发症、住院时间.结果 两组治疗后4小时动脉血气指标均较治疗前明显改善,而两组治疗第4天均较治疗后44,时改善(P<0.01或P<0.05);灌洗组治疗后4小时和第4天血气指标均分别优于对照组相应时间点(P<0.01 ).第4天灌洗组血白细胞总数(WBC)、中性粒细胞率、血CRP水平较对照组明显降低(P<0.01).灌洗组细菌培养阳性率及观察第7天X线示胸片炎性病灶吸收率均明显高于对照组(P<0.01).灌洗组持续有创机械通气上机率、住院时问明显低于对照组(P<0.05),治愈率明显高于对照组(P<0.05),二组病死率差异无统计学意义(P>0.05).两组均无严重并发症发生.结论 对不需立即行持续有创机械通气治疗的COPD合并肺部感染和Ⅱ型呼吸衰竭患者,全麻有创机械通气下行BAL治疗较安全,能迅速改善呼吸衰竭、控制肺部感染,提高治愈率、减少持续有创机械通气需要和住院时间.     

IL-35与炎症性疾病

IL-35是一种抑制性细胞因子,属于IL-12细胞因子家族的新成员,它是由调节性T细胞结构性分泌产生,由P35和EBI3两个亚基组成.研究发现,IL-35在自身免疫性疾病、炎症性疾病、肿瘤等治疗中有重要作用.在临床上,感染性疾病的控制一直是个难题,IL-35的应用也许为临床提供一种新的思路和方法.     

噻托溴胺治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的临床观察

目的 研究AECOPD患者的肺通气功能和气道阻力特点以及对M胆碱能受体阻断剂的反应.方法 通过支气管舒张试验,20名AECOPD的住院患者被分为支气管舒张试验阳性组和阴性组,后者又随机分为阴性一组和阴性二组,均给予基础治疗,阳性组和阴性一组加用胆碱能受体阻断剂(噻托溴胺一水合物)治疗.治疗前后分别行普通肺功能及IOS检查.结果 治疗后阳性组和阴性一组的各指标均有改善(P<0.05),阴性二组的MEF50、MEF75、X5、R5、Z5改善不明显(P>0.05),MEF25、R20、FEV1、FVC、Fres有改善(P<0.05).结论 加用胆碱能受体阻断剂后,支气管舒张试验阳性的AECOPD患者疗效较好,而支气管舒张试验阴性的AECOPD患者也有效,但疗效相对较差.     

丹参联合川芎嗪对肺纤维化大鼠肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1表达的影响

目的:观察丹参联合川芎嗪腹腔注射对博来霉素(bleomycin,BLM)致肺纤维化大鼠肺组织蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导与转录活化因子1(STAT1)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:将90只成年雄性SD大鼠随机分为以下6组:生理盐水(NS)组、BLM组、地塞米松(DM)组、小剂量中药(A)组、中剂量中药(B)组、大剂量中药(C)组,每组大鼠各15只。BLM组、DM组、A组、B组、C组气管内灌注BLM复制大鼠肺纤维化模型,NS组气管内灌注等体积的NS,造模成功24h后各组大鼠给予药物腹腔注射。NS组和BLM组每日给予腹腔注射NS,DM组每日给予腹腔注射DM,A组、B组及C组每日给予不同剂量丹参和川芎嗪复合制剂腹腔注射,分别于造模后第7天,第14天和第28天处死每组大鼠各5只,肺组织多聚甲醛固定后行HE染色和Masson染色观察肺泡炎及肺纤维化程度;免疫组织化学法测定肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达;血清用于肝肾功能的检测以评价药物安全性。结果:①大鼠血清肝肾功能检测结果显示各组两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。②NS组大鼠各时间点肺组织未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润及纤维化的形成。BLM组大鼠第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,第14天时炎性细胞减少,肺泡间隔内成纤维细胞显著增多,肺泡结构破坏,第28天时肺纤维化程度进一步加重,形成广泛纤维化。与BLM组比较,DM组大鼠各时间点肺泡炎及纤维化程度减轻(P<0.05)。A组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度与BLM组类似。B组、C组第14天肺泡炎及肺纤维化程度明显低于BLM组(P<0.05)。B组、C组第28天肺纤维化程度明显低于BLM组(P<0.05)。③与NS组比较,BLM组、DM组、A组、B组、C组肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达水平明显升高(P<0.05)。④与BLM组比较,DM组及B组、C组肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达水平明显降低(P<0.05)。⑤肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1的表达与肺泡炎及肺纤维化评分呈正相关。结论:丹参联合川芎嗪腹腔注射能减轻BLM致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,其机制可能与抑制肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1的表达有关。     

骨桥蛋白对脂多糖致急性肺损伤大鼠IFN-γ和IL-4表达的影响

目的：观察骨桥蛋白（OPN）对脂多糖（LPS）所致急性肺损伤（ALI）大鼠干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）表达的影响。方法：将56只雄性SD大鼠随机分为对照组8只、ALI组24只、干预组24只,其中ALI组和干预组2、4、8h各8只。对照组经尾静脉注射生理盐水1ml,ALI组和干预组经尾静脉注入LPS液1ml（含LPS 6mg/kg）,5min后干预组再尾静脉注入抗OPN抗体（1∶32）0.5ml,而对照组和ALI组注射生理盐水0.5ml。对照组4h处死大鼠,而ALI组和干预组分别在2、4、8h处死大鼠各8只,检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞数（PMN）、肺组织病理学改变和ALI评分;酶联免疫吸附实验（ELISA）测定大鼠血清IFN-γ、IL-4水平。逆转录-聚合酶联反应（RT-PCR）检测肺组织IFN-γ和IL-4 mRNA表达。结果：BALF中PMN数、ALI评分：ALI组2、4、8h较对照组相同时间点明显升高（P〈0.01）,而干预组在相同时间点较ALI组降低（P〈0.05）。ALI组2、4、8h血清IL-4水平和肺组织IL-4 mRNA表达均较对照组明显升高（P〈0.01）,但干预组与同时间点ALI组比较有显著升高（P〈0.05）。ALI组2、4、8h血清IFN-γ水平和肺组织IFN-γmRNA表达、血清IFN-γ/IL-4比值和肺组织IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值较对照组同时间点明显升高（P〈0.01）,但干预组则较ALI组同时间点明显降低（P〈0.05）。结论：OPN可促进LPS所致ALI大鼠IFN-γ表达而抑制IL-4表达,加剧IFN-γ/IL-4失衡,促进PMN在肺内聚集,加重LPS所致大鼠ALI。