尿NMP22、UBC及BTA联合检测在膀胱癌早期诊断中的意义研究

目的 评价膀胱癌抗原核基质蛋白22(NMP22)、尿膀胱癌抗原(UBC)、膀胱肿瘤抗原(BTA)在诊断膀胱癌中的应用价值.方法 应用酶联免疫吸附实验,检测膀胱癌疑似患者尿中NMP22、UBC、BTA的水平,并与健康组进行对比,评价NMP22、UBC、BTA的诊断价值.结果 膀胱癌患者 3项标志物联合检测敏感性96.9...     

尿液膀胱肿瘤抗原水平检测在膀胱癌诊断中的意义

目的 　评估尿液膀胱肿瘤抗原（BTA）水平在膀胱癌诊断中的价值。方法　收集98 例膀胱癌患者、57 例非膀 胱癌患者以及68 例健康体检者晨尿标本,利用化学发光分析仪进行各样本中BTA 水平的检测。通过ROC 曲线下面积 计算,分析BTA 对膀胱癌的诊断灵敏度、特异度及最佳临界值。结果　膀胱癌患者尿液中BTA 水平[486.56（66.27, 2 013.81）] U/ml 明显高于健康对照组[25.71（10.40,53.39）] U/ml 及非膀胱癌组[55.47（26.55,296.24）] U/ml,差异 具有统计学意义（χ2=64.172,P <0.01）;BTA 诊断膀胱癌的ROC 曲线下面积为0.816,与参考线下面积相比,差异具 有统计学意义（P <0.01）,BTA 诊断膀胱癌的最佳临界值为84.38U/ml,诊断敏感度为70.8%,特异度为93.5%。结论　 尿液BTA 的检测在膀胱癌的诊断筛查中具有较高的临床价值,可用于膀胱癌的早期筛查。     

膀胱移行细胞癌尿液脱落细胞中survivin的表达及意义

目的:研究膀胱移行细胞癌(TCC)尿液脱落细胞中survivin的表达及意义。方法:留取49例TCC患者、10例泌尿系统其他疾病患者和8例正常健康成人的新鲜尿液,离心收集脱落细胞,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测TCC尿液脱落细胞中survivin的表达,并行尿脱落细胞学检查。结果:49例膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞中有41例检测出survivin表达,而10例泌尿系统其他疾病患者和8例正常健康成人的尿脱落细胞中均未检测出survivin的表达。以RT-PCR检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中survivin的方法敏感性为83.7%,特异性为100%。结论:初步的试验结果显示,RT-PCR法检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中survivin的方法可以作为诊断膀胱癌的无创性方法。     

RT-PCR检测尿液中细胞角蛋白20 mRNA与尿细胞学检查对膀胱癌诊断的荟萃分析

目的用荟萃(Meta)分析评价逆转录PCR(RT-PCR)技术检测尿液中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)20 mRNA和尿细胞学检查对膀胱癌的诊断意义。方法检索Pub Med、Web of Science、The Cochrane Library(2014年第1期)、EMbase、CNKI、VIP、CBM数据库,查找关于用RT-PCR检测尿液中CK20 mRNA与尿细胞学检查诊断膀胱癌的研究。根据QUADAS质量评价标准评价纳入文献质量,用Meta-Disc 1.4软件进行荟萃分析。结果最终纳入11篇研究文献,涉及研究对象共1 631例。Meta分析结果显示,RT-PCR检测尿液中CK20 mRNA和尿细胞学检查诊断膀胱癌的敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比汇总及95%CI分别是0.80(0.78,0.83)vs 0.53(0.49,0.56)、0.93(0.91,0.95)vs 0.90(0.88,0.93)、12.46(5.22,29.75)vs 6.04(3.37,10.84)、0.22(0.18,0.28)vs 0.51(0.42,0.63)。RT-PCR检测CK20 mRNA和尿细胞学检查诊断膀胱癌的敏感性随肿瘤分级、分期的升高而增高。两种检测方法的SROC曲线下面积分别是0.872 6和0.795 4,Q*指数分别是0.803 0和0.731 9。结论 RT-PCR检测尿液中CK20 mRNA诊断膀胱癌的敏感性高于尿细胞学检查,更适于膀胱癌的诊断。     

核基质蛋白22及尿膀胱癌抗原在膀胱移行细胞癌诊断中的价值

目的 探讨核基质蛋白22(NMP22)及尿膀胱癌抗原(UBC)的检测用于早期诊断膀胱移行细胞癌(BTCC)的可行性及影响因素.方法 膀胱移行细胞癌患者60例,泌尿系良性疾病患者25例,健康对照组20名,采用酶联免疫(ELISA)方法检测尿NMP22及UBC.膀胱镜检查前取尿样分别进行NMP22、UBC和脱落细胞学检测,分析比较3种方法的敏感性、特异性、阳性和阴性预测价值.结果 以大于正常对照组尿液NMP22水平上限10 U/ml为NMP22阳性界值,以12μg/L为UBC诊断膀胱移行细胞癌的临界值时,NMP22和UBC诊断膀胱移行细胞癌的敏感性分别为88.3%和86.7%,与脱落细胞学(40.0%)比较,差异均有统计学意义(P均<0.01),3种方法诊断膀胱移行细胞癌的特异性分别为80.0%、84.0%和92.0%,阳性预测值分别为91.4%、92.9%和92.3%,阴性预测值分别为74.1%、72.4%和38.9%.结论 尿NMP22和UBC检测技术简单,有较高的敏感性和特异性,可作为早期诊断膀胱移行细胞癌的肿瘤标记物.     

联合检测尿膀胱癌抗原和survivin诊断膀胱癌的临床应用

目的临床评价联合检测尿液中尿膀胱癌抗原（urinary bladder cancer antigen,UBC）和survivin基因诊断膀胱癌的临床应用价值。方法对64例膀胱癌患者、20例泌尿系其他良性疾病患者,在膀胱镜检查之前留尿将尿样分为3份,分别进行UBC、survivin和脱落细胞检测,分析比较三种方法诊断膀胱癌的临床应用价值。结果 UBC和survivin诊断膀胱癌的敏感度分别为85.9%（55/64）和93.8%（60/64）,与脱落细胞学（40.6%）比较,差异有统计学意义（P〈0.01〉,三种方法诊断膀胱癌的特异度分别为85.0%（17/20）、95%（19/20）和95%（19/20）。各分级和分期UBC和survivin诊断膀胱癌的敏感度均高于尿脱落细胞学检查;UBC值和survivin检测的敏感度在各分级和分期中差异无统计学意义（P〉0.05）;而尿脱落细胞学检查,肿瘤的分级越高,其敏感度越高（P〈0.01）,各分期之间差异无统计学意义（P〉0.05）。联合运用UBC和survivin,敏感度和特异度均达到100%。结论尿液中的UBC和survivin是早期诊断膀胱癌较好的肿瘤标志物,联合检测能提高诊断的敏感度和特异度。     

应用荧光原位杂交技术检测膀胱尿路上皮癌的研究

目的 比较荧光原位杂交技术(FISH)与尿液脱落细胞学在膀胱尿路上皮癌检测中的灵敏性与特异性,评估FISH在中国人群中筛查膀胱尿路上皮癌的作用.方法 2007年12月至2008年6月,收取20例健康志愿者的新鲜尿液,应用荧光标记的3号、7号、17号染色体着丝粒探针及p16位点探针,在尿液标本中的脱落细胞上进行FISH检测,建立正常人群的阈值.其后留取无膀胱癌病史的119例血尿患者的尿液标本,膀胱镜检查前同期行尿液脱落细胞学检查及FISH检测.对比尿液脱落细胞学检查及FISH检测结果 ,对FISH、尿液脱落细胞学检查检测膀胱尿路上皮癌的敏感性和特异性采用McNemar配对卡方检验进行统计学分析.结果 3号、7号和17号染色体非整倍性改变及p16位点异常的正常阈值分别为1.0%、2.0%、1.0%和2.0%.对血尿患者进行的FISH、尿液脱落细胞学检测膀胱尿路上皮癌总的敏感性分别为83.1%(54/65)和52.3%(34/65)(P<0.001).对于pTa～1期、pT2～4期肿瘤,FISH检测的敏感性分别为76.1%(35/46)和100.0%(19/19),而尿液脱落细胞学检查的敏感性分别为43.5%(20/46)和73.7%(14/19);对于低级别尿路上皮癌,FISH和尿液脱落细胞学的敏感性分别为72.2%(13/18)和5.6%(1/18),而对于高级别尿路上皮癌的敏感性分别为87.2%(41/47)和70.2%(33/47).FISH检测、脱落细胞学检查的特异性分别为92.6%(50/54)、94.4%(51/54)(P=1.0).FISH检测膀胱尿路上皮癌的敏感性明显优于尿液脱落细胞学检查,而两者的特异性并无统计学意义.结论 FISH技术能明显提高膀胱尿路上皮癌的筛查率,尤其是早期和低级别病变,可以成为筛查膀胱尿路上皮癌的一种新的无创性检查方法 .     

4种尿液检查方法对174例血尿标本的检测结果分析

目的 对比4种不同方法检测尿液红细胞结果,以分析其影响因素和临床价值.方法 采用UF-100尿沉渣分析仪、尿沉渣显微镜检查尿红细胞、干化学法、胶体金单克隆抗体法隐血试验对174例尿液标本联合检查,对4种检测结果进行对比.结果 以镜检法为标准,UF-100尿沉渣分析法红细胞准确度为86.2%,干化学法红细胞准确度为85.0%.尿隐血试验中,干化学敏感性为300 μg/L,单克隆抗体隐血为200 μg/L,干化学与胶体金单克隆抗体隐血指标(金标准)对比,干化学隐血法的敏感度为81.5%,特异性为85.6%.结论 4种检测方法的联合应用更能提高尿液检查的质量,对疾病的诊断、治疗及病程中动态观察有重要的参考价值.     

细胞角质素20和存活素在膀胱癌诊断中的价值

【目的】评价细胞角质素20(CK20)和存活素(Survivin)在膀胱癌诊断中的价值。【方法】采用前瞻性临床研究的方法,应用RT-PCR技术,对膀胱癌病人、泌尿系良性疾病病人和健康志愿者进行尿脱落细胞CK20mRNA、Survivin mRNA检测和尿细胞学(UC)检查,比较其在膀胱癌诊断中的价值。【结果】尿脱落细胞CK20mRNA、Survivin mRNA检测和UC检查的敏感性分别为86.1%、83.3%、31.9%,特异性分别为63.4%、90.2%、100%。【结论】尿脱落细胞CK20mRNA、Survivin mRNA检测的敏感性均明显高于尿细胞学检查,可以替代尿细胞学检查,作为膀胱镜检查的辅助手段。Survivin mRNA检测具有较高的特异性,适用于膀胱癌的临床诊断。     

尿液中核基质蛋白22联合端粒酶活性检测在膀胱癌诊断中的作用

目的探讨尿液中核基质蛋白22（NMP22）联合端粒酶活性检测在膀胱癌诊断中的价值。方法收集38例膀胱癌和28例非膀胱癌患者新鲜尿液,用化学发光分析法检测尿NMP22水平,TRAP—PCR-ELISA法检测尿脱落细胞端粒酶活性,并同时行尿脱落细胞学检查。结果尿液中NMP22对膀胱癌诊断的敏感性为79％,特异性为64％;端粒酶敏感性为82％,特异性为71％;细胞学检查敏感性为32％,特异性为97％。NMP22联合端粒酶活性检测,两者均为阳性时诊断为阳性,否则为阴性,则联合检测的敏感性为76％,特异性为89％。结论联合检测可使在维持较高敏感性的前提下,大大提高诊断的特异性,其特异性与细胞学检测相差较小,而敏感性却远高于细胞学检测,因而联合检测较单一指标的检测对膀胱癌具有更高的诊断价值。     

Trustline结核分枝杆菌IgG/IgM抗体检测试剂盒(胶体金法)的临床应用评价

目的 评价Trustline结核抗体IgG/IgM检测试剂盒临床应用效果。 方法 选用3家医院的1009份血清标本,其中628份为结核病患者血清(308例菌阳病例,320例菌阴病例);对照组381份非结核病血清。采用Trustline试剂盒及一种已上市的试剂盒(对照试剂盒)分别检测1009份血清,计算多项检测指标,从而评价试剂盒的检测效果。 结果 通过检测1009份临床血清标本, Trustline试剂盒检测血清抗体(IgG+IgM)的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、 Youden 指数分别为61.3%、79.8%、 83.3%、 55.6% 和0.411,对照试剂盒检测血清抗体(IgG) 的结果分别为53.7%、89.0%、88.9%、 53.8%和0.426。经统计分析表明Trustline试剂盒的灵敏度显著优于对照试剂盒(P0.01),特异度低于对照试剂盒(P0.01),但阳性诊断效率和阴性诊断效率方面差异无统计学意义,Youden指数相接近。 进一步分析显示Trustline试剂盒对菌阳样本及菌阴样本的检出率分别77.6%和44.7%,对照试剂盒则为67.9%和40.0%,对菌阳样本检出率的差异有统计学意义。检测1009份标本,Trustline试剂盒共得IgM阳性35例,其中结核组阳性30例(4.8%),非结核组阳性5例(1.3%)。 结论 Trustline试剂盒检测结核抗体的灵敏度显著优于对照结核抗体试剂盒,并可同时用于检测IgG/IgM抗体,可以应用于结核病的快速诊断。     

便潜血一步法检测试纸临床研究

目的 :将研制的单克隆抗体便潜血一步法胶体金检测试纸与已获国家新药证书的万华普曼公司产品进行临床对比实验。方法采集的 10 15例便潜血标本经临床验证比较两种试纸的特异性、灵敏度及阴性、阳性符合率等检测指标。结果两者的对比实验阴性、阳性符合率较高 ,分别达 93.9%和 92 .7%。本产品灵敏度可高达 0 .1μg/ml,优于万华的 0 .2 μg/ml。结论 :研制的单克隆抗体便潜血一步法胶体金检测试纸适用于检测人体粪便中可能出现的微量人血红蛋白 ,对诊断因各种原因引起的上下消化道出血疾病有重要的临床意义。     

心型脂肪酸结合蛋白金标记免疫层析法的建立

目的建立胶体金免疫层析检测人心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的方法。方法采用胶体金标记抗H-FABP单克隆抗体67D3,将其与生物素化的抗H-FABP单抗66E2包被于吸水纤维,将链霉亲合素结合于硝酸纤维素膜,制成免疫层析试条,依据试剂条上出现肉[可见的红色线条判定结果。用其检测93例发病6h内的胸痛患者血浆中的H-FABP,与心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)和肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)的检测结果比较,评价其诊断急性心肌梗死(AMI)的敏感性和特异性。结果金标记试条检测H-FABP的浓度低限值为16.8ng/ml,检测结果与ELISA方法比较符合率达96.9%,诊断发病3h内和6h内AMI的敏感性分别为64.29%和84.38%,高于cTnI(28.57%、53.13%)和CK-MB(21.43%、56.25%)(P<0.05),特异性无显著性差异。结论本法简便、快速、准确,可用于AMI早期筛查。     

化学发光免疫分析法快速检测血清登革热病毒NS1 抗原方法的建立及初步应用评价

目的 建立一种化学发光免疫分析法( chemiluminescence immunoassay,CLIA) 用于血清中登革热病毒（denguevirus,DENV）NS1 抗原的定量检测。方法 先制备NS1 单抗与吖啶酯发光剂的偶联物,同时活化磁珠并标记抗NS1的配对单抗,基于双抗体夹心检测方法的技术原理构建定量检测血清中NS1 抗原浓度的化学发光检测方法。通过对其灵敏度、特异度和参考区间等试验评估其检测性能。取85 例临床确诊的登革热阳性血清样本和20 份健康志愿者阴性血清样本,采用美国Cortez 公司的登革热NS1 快速检测试剂盒和该方法进行临床样本验证。结果 该方法对血清中NS1抗原的检测灵敏度为1.12ng/ml,线性范围在0.1 ～ 1 000ng/ml;与血清中常见干扰物质的交叉反应率均低于2%,检测特异度较好;参考区间的cut off 值为3.66ng/ml;对临床样本的检测准确度较高,与Cortez 公司NS1 检测试剂盒比较无显著性差异（χ2 检验P=1.000,一致性检验,Kappa=0.876）。结论 建立了一种可定量检测血清中登革热病毒NS1抗原的CLIA 法,该方法具有高灵敏度、高准确度、操作简单和方便快捷等优点,有望为登革热临床样品的早期准确筛查提供一种新的选择。     

尿膀胱癌抗原、透明质酸和存活素联合检测对膀胱癌的诊断运用探讨

目的探讨在对膀胱癌的诊断过程中,尿膀胱癌抗原、透明质酸和存活素的应用价值。方法膀胱癌患者74例,泌尿系统良性疾病患者20例,健康志愿者标本10例分别行膀胱癌抗原(UBC)、透明质酸(HA)、存活素(Sur-vivin)和尿脱落细胞学(UC)检查。结果 UBC、HA、Survivin和尿脱落细胞学的检测有利于膀胱癌的诊断,且UBC、HA、Survivin三者的有效性优于尿脱落细胞学的检测。UBC、HA、Survivin在检测膀胱癌的过程中,三者的敏感性和准确性高于尿脱落细胞学。UBC、HA、Survivin在肿瘤的各分级(G1、G2、G3)和各分期(pTa、pT1、≥pT2)中的敏感性明显高于尿脱落细胞学。结论尿膀胱癌抗原、透明质酸和存活素在诊断膀胱癌过程中应用价值优于尿脱落细胞学。     

Preliminary report of the clinical performance of a new urinary bladder cancer antigen test: comparison to voided urine cytology in the detection of transitional cell carcinoma of the bladder

We compared the ability of a new urinary bladder cancer antigen (UBC) test with conventional cytology for the detection of transitional cell carcinoma of the bladder using voided urine samples. The UBC was measured and corrected for the creatinine concentration in the urine of 61 patients with transitional cell carcinoma of the bladder (group 1), 23 patients without recurrent bladder tumors during follow-up (group 2), 28 patients with benign prostatic hyperplasia (group 3), nine patients with prostate cancer (group 4), and 90 healthy volunteers free of urological diseases (group 5). The UBC concentrations were 408.8+/-578.5, 18.8+/-26.6, 23.9+/-32.7, 17.5+/-18.6 and 4.6+/-6.7 ngmg(-1) creatinine (mean+/-S. D.) for groups 1-5, respectively. The level for group 1 was significantly higher than for any other group. The sensitivity and specificity, which were optimized using receiver-operating characteristic curves for groups 1 and 2 were 82.0% and 82.6%, respectively, at a threshold value of 39 ngmg(-1) creatinine. The sensitivity and specificity of cytology for these same groups were 60.7% and 86.9%, respectively. The sensitivity of the UBC was significantly higher than that of cytology, not only for total bladder tumors (82.0% vs. 60.7%, P<0.02) but also for grade I transitional cell carcinoma of the bladder (76.5% vs. 11.8%, P<0. 001). While offering a similarly high specificity, the UBC test might have an advantage over cytology in terms of superior sensitivity, particularly for low-grade tumors.     

心肌肌钙蛋白Ⅰ免疫层析试纸条的研制

目的制备人心肌肌钙蛋白Ⅰ免疫层析试纸条,建立一种快速检测人心肌肌钙蛋白I的检测方法。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记肌钙蛋白I单克隆抗体,喷于玻璃纤维纸上制成胶体金结合物垫。将另一株肌钙蛋白I单克隆抗体和抗鼠二抗分别喷于试纸条的检测线和质控线处,组装成试纸条并进行灵敏度、特异性及临床样品测定。结果该试纸条检测灵敏度为1μg/L,15min内可判断结果;与C-反应蛋白、人心肌脂肪酸结合蛋白、肌酸激酶、人心肌肌红蛋白无交叉反应;测定健康人血清样本40例,结果均为阴性;测定14例心肌梗死患者血清,结果均为阳性,且T线显色程度与发光法测定值呈正相关。结论该试纸条灵敏度高、特异性强、操作简便,结果判断直观,可用于急性心肌梗死的早期筛查。