金黄色葡萄球菌致病毒素基因与耐药性的相关性研究

目的研究金黄色葡萄球菌的致病毒素基因与耐药性的关系.方法对临床收集的74株金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因 mecA 和致病毒素基因中毒休克综合征毒素‐1(TSST‐1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验,对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株做 D‐试验.结果74株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为55.4%. MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因敏感外,对其他抗菌药物均高度耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对抗药物的耐药性较轻,两组间的耐药性差异有统计学意义(P<0.05). PVL 基因阳性的 MRSA 耐药性与 PVL 基因阴性的 MRSA 比较,两组间耐药性差异无统计学意义(P>0.05). PVL 基因阳性的 MSSA 耐药性比不携带 PVL 基因的 MSSA 强,两者间差异有统计学意义(P<0.05).携带 TSST‐1基因的 MRSA 除对万古霉素、呋喃妥因无耐药菌株外,对其他16种抗菌药物100%耐药. D‐试验阳性菌株占所检菌株的10.8%,占红霉素耐药、克林霉素敏感菌株的88.9%.只有1株 PVL 基因阳性的 MRSA D‐试验阳性.结论MRSA 的耐药性非常严重,表现为对多种抗菌药物同时耐药,并且具有较高的红霉素诱导克林霉素耐药率;PVL 和 TSST‐1可增强金黄色葡萄球菌的致病力及 MSSA 的耐药性,增加了临床抗感染治疗的难度.     

金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的相关性研究

目的研究携带TSST-1和PVL基因的金黄色葡萄球菌耐药特点、分布特征及与致病性的关系。方法临床收集74株金黄色葡萄球菌,采用PCR法检测TSST-1、PVL和mecA基因,纸片扩散法进行17种抗菌剂的耐药性检测。结果 74株金黄色葡萄球菌中mecA基因检出率为55.4%,其中22株检出PVL基因(30.3%),PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为15株(36.6%),甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)为7株(21.2%),两者间差异无统计学意义(P>0.05)。5株金黄色葡萄球菌中检出TSST-1基因(6.3%),均为MRSA。MRSA耐药性严重,并呈多重耐药性,携带基因PVL和TSST-1的MRSA除对万古霉素敏感外,对其他抗菌剂均耐药。结论携带基因TSST-1和PVL的金黄色葡萄球菌耐药性及致病力更强,增加了临床抗感染治疗的难度。     

金黄色葡萄球菌对临床常用抗菌药物的敏感性及毒力基因检测分析

目的分析金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)对临床常用抗菌药物的敏感性及毒力基因检测结果。方法分离金葡菌129株行药敏试验,金葡菌分离自胸腹水、脑脊液及血液等无菌体液标本中,万古霉素等常用抗菌药物对金葡菌的最低抑菌浓度(MIC)采用琼脂稀释法检测,耐甲氧西林金葡菌(MRSA)内耐药基因mec C、mec A和毒力基因sas X与杀白细胞毒素(PVL)基因采用聚合酶链反应(PCR)检测。结果苯唑西林琼脂稀释结果显示,70株为MRSA,其余59株为甲氧西林敏感金葡菌(MSSA);对临床分离所得的45株MRSA分别采用mec A、mec C基因的PCR引物进行PCR扩增,mec A阳性检出率为100.00%,sas X基因阳性检出率为46.67%(21/45),sas X基因阴性检出率为53.33%(24/45),mec C、PVL均未检出; MRSA对β内酰胺类药物的耐药率高于MSSA,且对左氧氟沙星、阿米卡星、庆大霉素等非β内酰胺类药物也有耐药性,但75.00%以上MRSA对甲氧苄啶与利福平比较敏感。MSSA对β内酰胺类药物和非β内酰胺类药物均比较敏感,耐药率均低于11.00%;sas X阴性或sas X阳性的MRSA对左氧氟沙星、磷霉素和β内酰胺类抗生素均比较耐药,但sas X阴性基因与sas X阳性基因对甲氧苄啶、利福平、阿米卡星及庆大霉素的耐药率不完全一致。结论 MRSA对临床大多数抗菌药物均有耐药性,临床需对MRSA加强监测。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及mecA和PVL基因检测

目的检测临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)mec A基因和杀白细胞素(PVL)基因携带情况,并分析其对常用抗菌药物的耐药性,指导临床上合理规范用药。方法应用96孔肉汤微量稀释法对菌株进行10种常用抗菌药物敏感性试验,全部药物敏感试验采用MIC法鉴定,采用聚合酶链反应(PCR)法检测mec A基因和PVL基因携带情况,并对PVL基因阳性菌株感染患者的临床资料进行分析。结果 60株MRSA对克林霉素、庆大霉素、利福平耐药率均80%,环丙沙星、莫西沙星、左氧氟沙星耐药率均90%,对呋喃妥因,复方新诺明较敏感,耐药率10%,60株MRSA对万古霉素,利奈唑胺均敏感。60株MRSA的mec A基因均为阳性,其中检出3株菌株携带PVL基因,占5.0%,另外57株MRSA为PVL基因阴性,占95.0%。结论本地区临床分离出的MRSA耐药性较高,以携带mec A耐药基因为主,因此治疗应以糖肽类抗生素为主,合理规范用药。MRSA-PVL基因阳性率相对较低,但其与一些严重的金黄色葡萄球菌感染有关,临床应予以关注并加强对PVL基因的监测,有效控制及防止此类菌株播散流行。     

杀白细胞素pvl基因阴性MRSA对抗菌药物的耐药性研究

目的研究杀白细胞素（PVL）pvl基因阴性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种抗菌药物的耐药性。方法采用头孢西丁纸片扩散法检测MRSA;用聚合酶链反应（PCR）检测m ecA基因及pvl基因;采用琼脂稀释法测定金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度（M IC）并检测pvl基因阴性MRSA对12种抗菌药物的耐药性。结果 71株金黄色葡萄球菌中检测出33株pvl基因阴性MRSA,检出率为46.4%（33/71）;对青霉素类抗菌药物的耐药率为100.0%;对其他类抗菌药物呈多重耐药并以ECLOTGMP为主要耐药模式,占66.7%（22/33）;未发现对达托霉素、替考拉宁和万古霉素耐药的菌株。结论医院感染中以pvl基因阴性MRSA为主,并呈现多重耐药;pvl基因阴性MRSA主要耐药模式为对红霉素、环丙沙星、克林霉素、苯唑西林、四环素、庆大霉素、复方磺胺甲口恶唑和青霉素耐药,是主要流行株,要谨慎使用以上8种抗菌药物。     

金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究

目的 研究金葡菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-Ⅰ(TSST-Ⅰ)基因和杀白细胞毒素 (PVL) 基因的分布特征.方法 收集临床分离的74株金葡菌,PCR法检测毒素基因TSST-Ⅰ、PVL和mecA耐药基因.结果 74株金葡菌 PCR法对其行mecA基因检测,检出率为55.4% (41/74).PVL阳性菌株的分离率为29.7%(22/74),PVL阳性的MRSA为15株(15/41,36.6%), PVL阳性的MSSA为7株(7/33,21.2%),差异无统计学意义(P>0.05).TSST-Ⅰ基因检出率为6.8%, MSSA中未检出TSST-Ⅰ基因.结论 MRSA呈多重耐药性,易造成医院内暴发流行,携带PVL和TSST-Ⅰ的金葡菌其致病力更强,应加强医院感染控制,防止其播散流行.     

金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌(SA)的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec(SCCmec)基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应(PCR)进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素(PVL)基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%(39/102)。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性，SCCmec分型及毒素基因的检测

目的调查北京大学第一医院致病性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型情况、耐药状况、PVL、TSST-1基因携带率,初步了解临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药原因,为临床感染控制提供依据。方法收集2007年9月至2008年3月住院患者首次分离的53株有致病意义MRSA,用全自动微生物分析仪进行药敏试验,应用PCR方法检测MBSA的SCCmec基因型、PVL、TSST-1基因。结果53株MRSA呈多重耐药特点,SCCmec分型以ⅢA为主（47．2％）,PVL基因均为阴性,12株（22％）MRSA TSST-1阳性。结论53株MILSA的多重耐药性与SCCmec结构密切相关,SCCmec分型技术是探索MRSA多重耐药性与耐药结构有效的分子生物学手段,TSST-1基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。     

血液和无菌体液分离金黄色葡萄球菌对抗菌药物的敏感性及毒力基因检测

目的了解1999-2014年复旦大学附属华山医院血液和脑脊液等无菌体液中分离的金黄色葡萄球菌(金葡菌)对临床常用抗菌药物的敏感性及其毒力基因检测。方法采用琼脂稀释法测定万古霉素等抗菌药物对临床分离金葡菌的最低抑菌浓度(MIC);采用聚合酶链反应(PCR)法检测MRSA的耐药基因mecA、mecC及其毒力基因PVL和sasX。结果258株金葡菌中MRSA菌株占54.3%(140/258),MSSA占45.7%(118/258),血液、脑脊液和胸腹水等无菌体液中MRSA的检出率由1999-2002年的71.9%逐年下降至2011-2014年的43.7%。药敏试验结果显示:MRSA对多数受试抗菌药物的耐药率均高于MSSA。MSSA对受试抗菌药仍然十分敏感,细菌耐药率除青霉素外,均≤11%。β内酰胺类(除青霉素外)对MSSA的MIC90值均≤1 mg/L。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。90株临床分离的MRSA mecA基因阳性检出率为100%,未检测到mecC基因;sasX基因的阳性检出率为46.7%,未检测到PVL基因。sasX阳性的MRSA和sasX阴性的MRSA菌株对β内酰胺类抗生素、磷霉素和左氧氟沙星均高度耐药,但sasX阳性MRSA菌株对阿米卡星和甲氧苄啶-磺胺甲唑的耐药率均高于sasX阴性的MRSA菌株。结论 MRSA对临床多数抗菌药物耐药,为临床合理应用抗菌药物,应重视和加强对金葡菌中MRSA的监测。     

金黄色葡萄球菌的药敏表型和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型

目的研究从临床标本中分离的金黄色葡萄球菌（SA）的耐药性、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的发生率及其葡萄球菌盒式染体色mec（SCCmec）基因分型。方法采用纸片琼脂扩散法进行SA耐药性检测及MRSA测定,应用多重聚合酶链反应（PCR）进行SCCmec各基因型及PV杀白细胞素（PVL）基因型的检测。结果 102株SA中检出39株MRSA,检出率为38.2%（39/102）。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）对克林霉素、复方磺胺甲口恶唑、四环素3种抗菌药物耐药率较高,分别为39.7%、31.7%、22.2%;对庆大霉素及喹诺酮类耐药率较低,为6.3%~14.3%。而MRSA对克林霉素、β-内酰胺类抗菌药物100%耐药,对其他药物表现为多重耐药。未检出万古霉素耐药菌株。MRSA菌株的SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,占71.2%,SCCmecⅣa占10.3%,未检测出PVL基因。结论临床分离的SA中,MRSA耐药率较MSSA高且表现为多重耐药,其SCCmec基因分型主要表现为SCCmecⅢ型,其次是SCCmecⅣa。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SPA基因分型研究与耐药性分析

目的 探讨鄂尔多斯地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株杀白细胞毒素(PVL)基因分布特点及药物敏感性。方法 收集2012年6月～2014年12月临床分离的SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株66株,应用聚合酶链反应对菌株进行PVL基因型检测,用琼脂稀释法测定PVL阳性菌株对常用抗菌药物的敏感性。结果 66例MRSA有6例PVL阳性,阳性率9.09%,其中Ⅱ型4株,Ⅲ型2株; 6株PVL阳性菌均对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺和对多种非β内酞胺类抗菌药敏感,对β内酞胺类、大环内酯类和克林霉素高度耐药。结论 在鄂尔多斯地区MRSA菌株中PVL阳性菌株较低,4株为CA-MRSA,2株为HA-MRSA,若以PVL阳性作为区分MRSA类型的标志有待进一步研究。     

重症监护病房患者金黄色葡萄球菌感染及其耐药特征分析

目的了解重症监护病房患者金黄色葡萄球菌感染及其对16种抗生素的耐药性特征与变迁,为临床治疗提供依据。方法按NCCLS版纸片扩散法标准,测定并判读金黄色葡萄球菌对抗生素的耐药性,同时用纸片法测定耐甲氧西林金葡菌（MRSA）耐药表型。结果重症监护病房金黄色葡萄球菌以感染呼吸道为主,占74.4%。从2001~2006年,MRSA检出率已从61.3%上升至97.4%,β-内酰胺酶阳性率达100.0%,未发现耐万古霉素和替考拉林菌株,但对其他各类抗生素均呈高度耐药,对青霉素的耐药率连续3年为100.0%。结论重症监护病房金黄色葡萄球菌感染以MRSA为主,并对各类抗生素呈多重耐药,临床应重视耐药菌的检测与报告,合理使用抗生素及采取其他有效措施控制MRSA的感染。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性、mecA及6laTEM基因检测

目的 了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicinin-resistant Staphylococcu8all—reus，MRSA）耐药性、mecA及6laTEM基因存在状况。方法采用ATBStaph药敏试验板微量肉汤法对40株MRSA进行15种抗菌药物敏感性测定，采用聚合酶链反应（PCR）技术检测mecA和6laTEM基因。结果 所有菌株对万古霉素、替考拉宁、呋西地酸和奎奴普丁-达福普汀均敏感。对青霉素、庆大霉素、红霉素、克林霉素、四环素、诺氟沙星和左旋沙星均耐药，对利福平、呋喃妥因、复方新诺明和米诺四环素的耐药率分别为5．0％、2．5％、97．5％和97．5％。mecA和blaTEM基因阳性率分别100．0％和37．5％。结论 临床分离的MRSA多重耐药性十分严重；金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药均由mecA基因介导．blaTEM基因阳性率较高；治疗MRSA引起的感染。应以药敏试验结果为依据。     

杀白细胞毒素基因阳性MRSA的临床和实验研究

目的了解2003-2006年我院MRSA临床分离株中杀白细胞毒素（PVL）基因的分布、SCCmec分型、药物敏感性及其临床特征。方法对2003年1月至2006年12月我院1366株MRSA临床分离菌株，用PCR方法筛选PVL基因阳性菌株，用多重PCR方法进行SCCmec分型；并进行回顾性研究，分析PVL基因阳性及阴性株所致感染的临床特点及相关危险因素；用琼脂稀释法测定其对临床常用抗菌药的敏感性（MIC）。结果在1366株MRSA菌株中共筛出5株PVL基因阳性菌株，阳性率为0．37％。50株MRSA临床分离菌株中，SCCmecI型1株，占2％（1／50）；SCCmecⅡ型26株，占52％（26／50）；SCCmecⅢ型16株（其中包括SCCmecⅢA1株），占32％（16／50）；SCCmecⅣ型1株，占2％（1／50）；SCCmecⅤ型2株，占4％（2／50）；4株（8％）未能分型。5株PVL基因阳性株中SCCmec11型1株，SCCmecIV型1株，SCCmecⅤ型2株，未分型1株。MIC结果显示PVL基因阳性株较阴性株对多种非β内酰胺类抗生素更为敏感，未发现万古霉素不敏感菌株。该5株PVL阳性菌株所致感染分别为皮肤软组织感染2例、肺部感染2例和尿路感染1例。结论PVL基因阳性MRSA已在我院检出，应加强医院感染控制防治其播散流行。     

MRSA和MSSA氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因检测

目的比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(M SSA)对氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因携带的不同。方法运用K-B法和PCR方法分别对16株M RSA和24株M SSA 4种氨基糖苷药物(丁胺卡那霉素、奈替米星、庆大霉素、妥布霉素)耐药性和氨基糖苷类耐药基因进行检测。结果M RSA与M SSA对氨基糖苷类药物耐药率分别为93.8%,62.5%,100%,100%和0.0%,0.0%,29.2%,33.3%,三种氨基糖苷类药物耐药基因aac(6')/aph(2')、aph(3')III、an t(4',4')携带率分别为68.8%,62.5%,6.3%和29.2%,8.3%,0.0%。结论M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物有着更高的耐药性和耐药基因携带率。M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物存在着更为复杂的耐药机制。     

147株金黄色葡萄球菌耐药现状分析

目的 研究金黄色葡萄球菌(SAU)临床分离株的耐药性,为合理使用抗菌药物提供依据.方法 采用VITEK 2 Compact型全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏试验,统计分析147株SAU的标本分布及耐药率.结果 分泌物标本SAU检出率最高;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达40.1%(59/147).SAU对多种抗菌药物具有不同程度的耐药性,对呋喃妥因、利奈唑胺、奎努普汀/达福普汀、替加环素、万古霉素敏感率为100.0%.结论 SAU临床分离株耐药现状严重,MRSA的耐药情况更为严重,临床微生物实验室应加强MRSA监测工作.     

金黄色葡萄球菌临床分离株spa分型和耐药特征研究

目的研究临床分离金葡菌的耐药性和分子特征。方法对2011年511月在成都某医院分离的56株金葡菌进行抗菌药物敏感性检测,检测菌株携带mecA基因和pvl基因情况,并进行spa基因分型分析。结果56株金葡菌中,共检出耐甲氧两林金葡菌（MRSA）21株（37．5％）,其中mecA基因阳性20株（95．2％）;甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）35株（62．5％）。与MSSA相比,MRSA对利福平、左氧氟沙星、莫西沙星、环丙沙星、庆大霉素和四环素的敏感率显著降低（P〈0．05）,MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替加环素、喹奴普丁达福普汀和呋喃妥因全部敏感。MRSA分为6个spa型别,以t030（66．7％）为主,MRSA～t030、MRSA—t002具有突出的多药耐药特征。MSSA共分为18个spa型别,以t189、t377和t034列前3位,分别占14．3％、／4．3％和1I．4％,并在脓液标本榆出I株新spa基因型new1。检出5株杀白细胞毒素（PVL）阳性菌株,其中3株为MSSA—t189。结论t030是医院MRSA临床分离株中的spa优势型别,具有突出的多药耐药特征,在医院内广泛传播。MSSA遗传多样性高,以t189、t377和t034列前3位。