cDNA探针地高辛标记法检测肺中诱生型一氧化氮合成酶的表达

目的：探讨内毒素（ＬＰＳ）诱导后家兔肺组织中诱生型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）的表达。方法：采用地高辛标记ｉＮＯＳｃＤＮＡ探针，并用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术和比色法检测ｉＮＯＳ表达。结果：经内毒素诱导后ｉＮＯＳ在家兔肺组织中有表达，注射ＬＰＳ５小时后表达量最大，２４小时表达量减少。结论：地高辛标记ｉＮＯＳｃＤＮＡ探针可较好地用于ｉＮＯＳ基因表达的研究。     

兔内毒素血症肺组织诱生型一氧化氮合酶基因表达的原位检测

本实验观察了家兔内毒素的主要成分脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅ，ＬＰＳ）注入后１小时和５小时，诱生型一氧化氮合酶ｉＮＯＳ蛋白和基因表达的肺内分布。一、材料与方法图１阳性信号可见于ＬＰＳ注入后５小时组肺内的巨噬细胞，棕黄色ＡＢＣ法×４００图...     

iNOS与内毒素血症中淋巴循环的关系

目的：研究内毒素血症中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）对大鼠肠系膜淋巴管微循环动力学的影响。方法：给大鼠注入脂多糖（ＬＰＳ）和Ｓ－甲基异硫脲（ＳＭＴ），用倒置显微镜和图像处理系统观察及测量大鼠淋巴管的口径和运动频率，用免疫组化染色法观察ｉＮＯＳ在大鼠淋巴管的表达。结果：ＬＰＳ组肠系膜淋巴管口径比正常扩大，运动频率降低，ｉＮＯＳ阳性细胞增多。而ＬＰＳ＋ＳＭＴ组的淋巴管口径和运动频率未见明显变化，ｉＮＯＳ阳性细胞较ＬＰＳ组显著降低。结论：ｉＮＯＳ过量表达影响了淋巴循环；ＳＭＴ可通过抑制ｉＮＯＳ的活性而对内毒素血症期间的淋巴管起保护作用。     

地塞米松对大鼠星形胶质细胞诱导型一氧化氮合酶活性的影响

目的：探讨地塞米松对内毒素诱导的大鼠星形胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）活性的影响。方法：应用Ｇｒｉｅｓｓ法,动态测定内毒素（ＬＰＳ）诱导体外培养的大鼠星形胶质细胞ｉＮＯＳ活性的变化以及地塞米松（ＤＥＸ）对其的影响。结果：细菌ＬＰＳ能够刺激星形胶质细胞ｉＮＯＳ活性的表达,且与ＬＰＳ剂量和作用时间有关,ＤＥＸ对星形胶质细胞ｉＮＯＳ活性表达具有负调节作用,而且与加入ＤＥＸ的间隔时间有关。结论：星形胶质细胞ｉＮＯＳ可能参与中枢神经系统细菌感染的病理过程,而ＤＥＸ能抑制这种损害作用。     

诱生性一氧化氮合酶cRNA探针的制备及敏感性检测

目的 制备地高辛标记的大鼠诱生性一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）ｃＲＮＡ探针。方法 首先对携带大鼠ｉＮＯＳ ｃＤＮＡ的ＰＭＯＳ Ｂｌｕｅ质粒进行转化扩增。然后提取扩增的质粒ＤＮＡ并用Ｂａｍ ＨⅠ内切酶酶切处理使其线性化。以线性化的ｃＤＮＡ为模板,在Ｔ７ＲＮＡ聚合酶的作用下,体外转录带有地高辛的ｉＮＯＳ ｃＲＮＡ探针。     

SD幼鼠内毒素血症小肠iNOS免疫活性表达

目的 探讨ＳＤ幼鼠内毒素血症时小肠ｉＮＯＳ免疫活性表达,方法 用生物化学方法测定内毒素血症幼鼠小肠组织积匀浆中ＮＯＳ和ＮＯ水平,用免疫组织化学方法显示小肠诱导性一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）免疫活性表达。结果 内毒素可使ＮＯＳ活性增加ＮＯ浓度提高,并且ＮＯＳ和ＮＯ之间有较好的相关性,内毒素可增加小肠巨噬细胞,嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的ｉＮＯＳ表达。结果 小肠ｉＮＯＳ免疫活性表达和小肠匀浆中ＮＯＳ和Ｎ     

内毒素血症大鼠肠道传输改变及一氧化氮作用

目的 探讨内毒素血症状态与肠道传输改变及一氧化氮变化,为多器官功能衰竭的发生提供理论依据。方法 １０４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,随机分为对照组和内毒素血症组：肠道伟输速度研究采用腹腔注射ＬＰＳ １０ｍｇ／ｋｇ;观察内毒素血症肌间神经丛,以及空肠免疫组化染色显示ＮＯＳⅡ阳性神经在肠道分布及骨毒素血症后的变化。结果 内毒素血症后小肠传输速度加快,内毒素血症３、６、１２小时血浆ＮＯ、空肠ＮＯＳ活性（ｉＮＯ     

失血性休克对内毒素的增敏作用及其分子机制

目的探讨失血性休克对内毒素的增敏作用及其机制，为失血性休克的治疗提供理论依据。方法采用生化、逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）及细胞原位杂交技术，观察了失血性休克条件下低剂量内毒素的作用及其可能机制，以及大鼠肝、肺、肾组织内脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）ｍＲＮＡ的表达。结果输入脂多糖（ＬＰＳ）后，失血性休克（ＨＳ）＋ＬＰＳ组家兔血压持续显著下降，血浆乳酸、β葡萄糖醛酸酶水平显著升高，与单纯ＬＰＳ或ＨＳ组比差异有显著意义。休克后２４小时，ＨＳ＋ＬＰＳ组动物全部死亡，而其余两组动物存活；ＲＴ－ＰＣＲ结果显示，休克及复苏后，大鼠肝、肺、肾组织内ＬＢＰｍＲＮＡ表达相继增多；细胞原位杂交结果表明，休克及复苏后，小鼠腹腔巨噬细胞内ＣＤ１４ｍＲＮＡ表达也明显增加。结论失血性休克能增敏内毒素的作用，其机制可能与休克上调ＬＢＰ／ＣＤ１４的表达有关。     

一氧化氮与血吸虫病肝损伤发病机制的关系研究

为了研究一氧化氮在血吸虫病肝损伤发病中的作用，采用Ｓ－Ｐ免疫组织化学法，观察家兔（ｎ＝４０）经皮肤感染血吸虫尾蚴后８、１２、１６、２０、２４周家兔肝诱导型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）和巨噬细胞（ＣＤ６８）的免疫组织化学表达与定位。结果显示，血吸虫病家兔肝的虫卵肉芽周围、门静脉分支管壁、肝窦壁、中央静脉壁有ｉＮＯＳ和ＣＤ６８阳性免疫反应物，肝细胞内有ｉＮＯＳ阳性免疫反应物。正常家兔肝脏ｉＮＯＳ和ＣＤ６８免疫组织化学染色均为阴性。认为一氧化氮在血吸虫肉芽形成及肝脏微循环障碍中具有重要作用     

颌面部创伤早期LPO与SOD的改变及维生素C抗氧化治疗的实验研究

本文报告了对７８只大白鼠同１２只家兔人工创伤颌面部软组织及使下颌骨粉碎性骨折，动态观察伤前及伤后３０分钟，１、２、４、６及１２小时的ＬＰＯ、ＳＯＤ的改变。检测创伤后不论在血中，创伤组织或肝组织中，均为ＬＰＯ上升，ＳＯＤ下降，ＳＯＤ／ＬＰＯ比值下降。受伤早期大剂量使用维生素Ｃ抗氧化治疗，能够抑制ＬＰＯ的合成，增加ＳＯＤ／ＬＰＯ的比值，并能提高机体的代偿能力，对机体的结构组织有一定的保护作用，作者对创     

强直性脊柱炎患者的食管运动功能

研究诱导型一氧化氮合酶 （ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｎｉｔｒｉｃ 　ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ, ｉＮＯＳ）在电离辐射导致的神经细胞凋亡中的作用。 方法：以单剂量２．０ Ｇｙ γ射线照射出生后 ０ ｄ的 Ｗｉｓｔａｒ大鼠,用 ＡＢＣ法检测照射后第 ０．５、１、２、４、６、８、１２、２４、４８小时大脑皮质内ｉＮＯＳ的表达。结果：照射组各时间点均有不同程度的ｉＮＯＳ表达,第６小时达峰值。各对照组未见ｉＮＯＳ表达。结论：ｉＮＯＳ所具有的神经毒作用可能是电离辐射导致的发育中脑神经细胞凋亡的重要因素。     

电离辐射诱导新生大鼠大脑皮质诱导型一氧化氮合酶的表达

目的：研究诱导型一氧化氮合酶在电离辐射导致的神经细胞凋亡中的作用。方法;以单剂量２．０Ｇｙγ射线照射出生后０ｄ的Ｗｉｓｔａｒ大鼠,用ＡＢＣ法检测照射后第０．５,１,２,４,６,８,１２,２４,４８小时大脑皮质内ｉＮＯＳ的表达。结果;照射组各时间点均有不同程度的ｉＮＯＳ表达,第６小时达峰值。各对照组未见ｉＮＯＳ表达。     

脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶基因表达变化的实验研究

目的　探讨大鼠脊髓损伤后诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）基因表达变化规律。方法参考Ｎｙｓｔｒｏｍ方法建立的大鼠脊髓压 迫伤模型,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法测定伤段脊髓组织ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ的表达情况。结果正常脊髓组织内未 见ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ表达,脊髓压迫伤后ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ开始表达并逐渐增强,伤后２４ｈ达到高峰。结论ｉＮＯＳ未参与脊髓 组织正常生理调节,脊髓损伤后ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ开始表达并逐渐增强,提示ｉＮＯＳ参与了继发性脊髓损伤过程。     

凉血化瘀剂对内毒素性DIC家兔模型LPO SOD影响的研究

本研究应用凉血化瘀剂──丹地合剂，旨在观察其对内毒素性ＤＩＣ家兔实验前后血清ＬＰＯ含量、红细胞ＳＯＤ活力的影响。结果表明：丹地合剂组造模后ＬＰＯ含量显著降低，ＳＯＤ活力明显提高，与造模前及同期模型组、肝素组比较，具有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。提示抗脂质过氧化物损伤作用为凉血化瘀剂治疗内毒素性ＤＩＣ的机制之一。     

一种外周血白细胞原位杂交实验新技术

用原位杂交技术检测组织细胞中ｍＲＮＡ的表达 ,实验条件要求较高 ,同时原位杂交实验也受到组织取材难的限制 ,因此检测组织细胞ｍＲＮＡ的原位杂交实验很难广泛应用于临床研究。外周血是了解疾病的窗口 ,取材容易 ,我们针对特定信息分子ｍＲＮＡ的表达 ,进行了外周血白细胞原位杂交实验方法的探索。通过反复实验 ,改良了原位杂交流程 ,使检测方法取得了成功。1　材料与方法1.1　材料　探针由武汉博士德公司提供 ,为地高辛标记的人内皮源一氧化氮合酶 (ｅｃＮＯＳ)和诱导型一氧化氮合酶 (ｉＮ ＯＳ) 35个碱基的寡核苷酸 3项探针 ;抗体由美国…     

内毒素对大鼠肝线粒体损害的生化机制研究膜──结构损害及脂质过氧化

本文观察了大鼠腹腔注射较低剂量Ｅ．Ｃｏｌ；内毒素纯制剂（ＬＰＳ，２ｍｇ／ｋｇ体重）后不同时间肝线粒体膜结构损害、自由基代谢，以及脂质过氧化物（ＬＰＯ）水平的变化。琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）活性在注射内毒素后１４小时下降至对照组酶活性的７６．２％（Ｐ＜０．０１），２４小时后酶活性趋于回升。ＬＰＯ４小时增高，２４小时达对照组的１７３．２％（Ｐ＜０．０１），４８小时明显恢复。ＳＯＤ和ＧＳＨ－ｐｘ活性分别于４小时和２４小时下降，此后趋于增高并超过对照组水中。电镜观察肝细胞线粒体在１４和２４小时损害较严重。上述结果提示：实验选用剂量的内毒素引起肝细胞可逆性损害并出现膜的脂质过氧化，ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性可于降低后出现诱导性增高。本文结合前期工作讨论了磷脂酶Ａ的激活与膜脂质过氧化是导致膜磷脂组分改变的两个主要起始点，它们在肝细胞损害发展中具有重要作用。     

一氧化氮与血吸虫病肝损伤发病机制的关系研究

为了研究一氧化氮在血吸虫病肝损伤发病中的作用，采用Ｓ－Ｐ免疫组织化学法，观察家兔经皮肤感染血吸虫尾蚴后８，１２，１６，２０，２４周家兔肝诱导型一氧化氮合成酶和巨噬细胞的免疫组织化学表达与定位。结果显示，血吸虫病家兔肝的虫卵肉芽周围，门静脉分支管壁，肝窦壁，中央静脉壁有ｉＮＯＳ和ＣＤ６８阳性免疫反应物，肝细胞内有ｉＮＯＳ阳性免疫反应物。     

过氧亚硝基阴离子参与介导内毒素所致急性肺损伤的研究

目的 探讨过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ＾－）在脂多糖（ＬＰＳ）所致急性肺损伤中的作用。方法 用免疫组织化学技术检测内毒素休克时ＯＮＯＯ＾－生成的标志物硝基酷氨酸在大鼠肺脏内的定位与分布。将不同剂量的外源性ＯＮＯＯ＾－经气管快速推注入健康大鼠肺脏，定量检测肺系数、肺湿干重比、肺水含量和伊文思蓝含量，光镜观察单层蓝标记肺微血管数量及病理变化。结果 ＬＰＳ静脉注射２ｈ和６ｈ后，肺脏有明显损伤及硝基酷氨酸产     

免疫抑制豚鼠肺部炎症反应中TNF—α的表达

目的 探讨免疫抑制宿主（ＩＣＨ）肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）介导的肺部炎症机制。方法 采用醋酸可的松联合环磷酰胺建立ＩＣＨ动物模型，ＩＣＨ活体肺经气管给予内毒素（ＬＰＳ）诱导ＩＣＨ肺部炎症反应，刺激前及刺激后１、３、５、８、２４ｈ行支气管肺泡灌洗（ＢＡＬ），异硫氰酸胍一步法抽提肺组织总ＲＮＡ。随机引物ＤＮＡ标记方法制备ＴＮＦ－α ｃＤＮＡ探针，点杂交测定ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ。结果 ＬＰＳ刺激后肺     

VC,VE联用对被动吸烟小鼠脂质过氧化物的影响

目的：研究小鼠被动吸因对脂质过氧化物（ＬＰＯ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的影响和ＶＣ，ＶＥ联合拮抗作用。方法：各处理组小鼠预先喂不同剂量ＶＣ，ＶＥ后再连续被动吸烟６ｈ／ｄ，３０ｄ后与对照组一同处死，测血清ＳＯＤ活力，肺，脑组织中１ＬＰ含量。结果：被动吸烟可致小鼠肺脑组织中ＬＰＯ含量增高，ＳＯＤ活性下降，当预先给予ＶＣ可使肺组织中ＬＰＯ含量下降，脑组织中较大剂量（４０ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１）可发