黏质沙雷菌中AmpC酶的检测及药敏率分析

目的了解安徽省临床分离的104株黏质沙雷菌中AmpC酶的产生情况及其对常用抗菌药物的耐药特征,以指导临床合理用药。方法采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并用酶粗提物进行三维试验确证产AmpC酶菌株。药敏试验采用琼脂稀释法,依据CLSI 2010年推荐的标准进行判读结果。结果 104株黏质沙雷菌在呼吸道痰标本中检出率最高,达59.6%;主要分布于呼吸内科、重症监护病房、老年病科等;头孢西丁纸片筛选法阳性率为39.4%,经三维试验确证产AmpC酶的有8株,阳性率为7.7%。产AmpC酶菌株除对亚胺培南、美罗培南全部敏感及对头孢吡肟、左氧氟沙星和加替沙星敏感率较高外,对其他大多数抗菌药物耐药率均高于非产酶株。结论产AmpC酶黏质沙雷菌对临床常用抗菌药物的耐药率均较高,对产酶株临床经验用药可选用碳青霉烯类、氟喹喏酮类及四代头孢菌素类抗菌药物。     

大肠埃希菌AmpC酶检测及2010年CLSI降低三代头孢菌素药敏折点对其药敏影响评估

目的 了解佛山市禅城区中心医院大肠埃希菌产AmpC酶情况及2010年美国临床实验室标准化委员会(CLSI)降低三代头孢菌素折点后对其药物敏感性的改变.方法 收集2010年6月至2011年1月大肠埃希菌814株,对于头孢西丁耐药者采用酶提取物三维试验方法检测AmpC酶,及用双纸片扩散试验检测ESBLs,药敏结果与2010年CLSI更新标准作比较,评估更新后对三代头孢菌素的耐药性改变.结果 814株大肠埃希菌中检出AmpC酶68株,产ESBLs共188株,检出率分别为8.4%和23.1%.814株大肠埃希菌在折点更新前对头孢他啶、头孢噻肟及头孢曲松的耐药率分别为24.1%、24.8%及25.3%,折点更新后耐药率为21.6%、24.1%、25.3%;产酶大肠埃希菌对抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株.结论 2010年三代头孢菌素折点改变后头孢他啶的耐药率有所下降,我院产AmpC酶的大肠埃希菌日益增多且呈多重耐药,为临床经验用药应首选.     

同时产ESBLs和AmpC酶革兰氏阴性杆菌基因型和耐药性分析

目的研究同时产ESBLs和AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药基因型及对常用抗菌药物的耐药特征,指导临床合理使用抗生素。方法采用德国西门子全自动细菌鉴定系统Walk away-40 plus鉴定细菌,双纸片确证试验检测ESBLs,硼酸双纸片增效试验检测AmpC酶,K-B法测定药敏结果,PCR技术分析基因型。结果 26珠同时产ESBLs和AmpC酶革兰阴性杆珠菌扩增出ESBLs基因型为TEM、CTX-M-1、CTX-M-9、SHV,未扩增出CTX-M-2;AmpC酶基因型为DHA-1;除亚胺培南全部敏感外,对常用抗生素均呈现高度耐药。结论同时产ESBLs和AmpC酶革兰阴性杆菌在不同地区存在不同耐药基因亚型,产酶珠对常用抗生素耐药率较高。     

三种检测AmpC酶方法的比较

目的采用三维试验、表型筛选法及头孢西丁纸片药敏法(K-B法)同时检测肠道G-杆菌的AmpC酶,并加以比较,找出一种适合临床常规应用的检测AmpC酶的方法。方法用头孢硝噻吩法检测出97株β-内酰胺酶阳性的肠道G-杆菌作为试验待测菌,用头孢西丁药敏法、表型筛选法测定细菌耐药情况,以判断产AmpC酶的情况。用三维分析法测定细菌粗提物中的AmpC酶情况。结果97株肠道杆菌头孢西丁药敏法结果显示产AmpC酶共有36株,占37.1%(36/97),与三维试验比较总符合率为74.2%。表型筛选法产AmpC酶的菌株有15株,占15.5%(15/97),与三维试验比较总符合率为91.8%。结论表型筛选法与三维试验法比较差异无显著性。表型筛选法可以作为一种临床快速、简便、可靠的检测AmpC酶的方法。     

45株大肠埃希菌产ESBLs和AmpC酶的调查及药敏结果分析

近年来,由于革兰阴性杆菌产生的超广谱β-内酰胺酶和高产AmpC酶引起的耐药问题在临床越来越受到重视.因此,作者对本院分离出的1000株大肠埃希菌进行ESBLs和高产AmpC酶的检测,并对产ESBLs同时高产AmpC酶的菌株进行药敏分析.现将结果报告如下:     

阴沟肠杆菌AmpC酶和金属酶的表达及其对耐药性的影响

目的:研究AmpC酶和金属酶在阴沟肠杆菌中的表达状况及这两种酶对阴沟肠杆菌耐药性的影响,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:采用三维试验,EDTA-亚胺培南纸片法测定AmpC酶和金属酶,用纸片扩散(K-B)法检测阴沟肠杆菌对13种抗生素的耐药性。结果:120株阴沟肠杆菌中,AmpC酶和金属酶检出率分别为32.5%(39/120)和5%(6/120)。AmpC酶阳性菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢西丁耐药率高于AmpC酶阴性菌株,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。金属酶阳性菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南耐药率明显高于阴性菌株,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:AmpC酶和金属酶在阴沟肠杆菌中流行分别是对第三代头孢菌素、头霉素类抗生素及碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生和流行。     

AmpC酶检测方法的探讨

目的:比较头孢西丁三相试验和双纸片协同试验检测AmpC酶的可靠性与临床应用。方法:采用头孢西丁三相试验、双纸片协同试验同时对268株革兰阴性杆菌进行AmpC酶检测,将两种检测方法的结果分别与三维试验的结果加以比较。结果:在268株革兰阴性杆菌中,3种方法的AmpC酶的检出率分别为22.0%、16.0%、14.9%。头孢西丁三相试验和双纸片协同试验与三维试验的总符合率分别为92.9%、98.9%。结论:头孢西丁三相试验可以作为AmpC酶的筛选试验。双纸片法协同试验具有操作简便、结果可靠等优点,与三维试验有较高的符合率,可作为AmpC酶检测常规试验。     

海南地区产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌基因型研究

目的 了解海南地区产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌基因型特点.方法 收集来自海南地区8所医院2009年度不重复临床分离的大肠埃希菌540株,分别采用纸片扩散法和三维试验进行表型筛选和AmpC酶检测,用接合试验证实酶基因型的转移性,通过PCR检测及序列分析进行质粒AmpC酶基因型确定,用E-Test法对产质粒AmpC酶株进行MIC测定.结果 540株大肠埃希菌中,头孢西丁抑菌环直径≤17mm的占22.8%(123/540),除五指山市菌株全部对头孢西丁敏感外,其他医院均有对头孢西丁的耐药株.酶提取物三维试验检测阳性的占1.90%(10/540),以PCR方法 对10株三维试验阳性大肠埃希菌进行基因检测,结果 6株在约462 bp处扩增出条带,经测序和比对结果 证实为CMY-2型质粒AmpC酶.10株产AmpC酶大肠埃希菌接合试验有2株接合阳性,接合子均扩增出CMY-2型条带.药敏结果 显示6株产质粒AmpC酶大肠埃希菌对3代头孢菌素、氨曲南和含酶抑制剂的敏感性极低,对亚胺培南和美罗培南均敏感.结论 海南地区存在产质粒介导的CMY-2型AmpC酶大肠埃希菌,药敏结果 显示对3代头孢菌素耐药率极高,但对亚胺培南和美罗培南均敏感.     

老年医院肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的探讨老年医院患者感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的状况及其耐药性,为临床合理用药提供参考。方法用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,药敏试验采用K-B纸片法,依据NCCLS2006判断标准分析结果。结果 182株肺炎克雷伯菌中检出产酶菌株117株,检出率为64.3%,其中单产ES-BLs63株,单产AmpC酶32株,一并产ESBLs和AmpC酶22株,检出率分别为34.6%、17.6%和12.1%。产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药,耐药率达74%~100%;头孢吡肟耐药率为43.2%、头孢哌酮/舒巴坦耐药率为29.9%,而阿米卡星、左氧氟沙星的耐药率仅为16.4%、10.1%;对亚胺培南、美罗培南均100%敏感。产ESBLs菌株除对亚胺培南、美罗培南100%敏感,阿米卡星、左氧氟沙星耐药率分别为30.7%、28.8%外,其他头孢菌素、酶抑制剂的抗菌药物均表现较高耐药性。结论老年医院患者感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况相当突出,产酶株对多种抗菌药物耐药,对碳青霉烯类敏感性最好。     

阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的:了解本地区阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行状况及其耐药性。方法:收集154株临床分离无重复阴沟肠杆菌,通过改良三维实验检测阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:在154株菌中,18.83%的菌株单产ESBLs,22.73%的菌株单产AmpC酶,5.19%的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,53.25%的菌株AmpC酶和ESBLs均不产生。产不同类型β-内酰胺酶其耐药性有所不同。结论:本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。高产AmpC酶菌株对一、二、三代头孢菌素、头孢西丁、酶抑制剂复合制剂等高度耐药,对头孢吡肟敏感,而产ESBLs菌株对三代头孢菌素、头孢吡肟均不同程度耐药,而对各种酶抑制剂复合制剂保持较高的敏感性,因此,产Ampc酶及ES-BLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

儿童感染肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据。方法采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18.5%;157株产ESBLs,阳性率为63.3%;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18.1%。产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药,耐药率达80%～100%;对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56.5%～93.5%之间;但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30%以下,对亚胺培南全部敏感。产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50%～91.7%之间,但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感。ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81.2%以上。产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高。结论广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出;产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和/或E...     

非发酵革兰阴性杆菌产AmpC酶的耐药性及ampC基因分布状况的研究

目的探讨83株非发酵革兰阴性杆菌对11种常用抗生素的耐药性、产AmpC酶的耐药情况及ampC结构基因在非发酵革兰阴性杆菌中的分布状况.方法对临床分离的83株非发酵革兰阴性杆菌(假单胞菌属57株和不动杆菌属26株)用microscan walkaway-4.0鉴定到种并鉴定其耐药性,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶,行PCR扩增了解AmpC耐药结构基因在83株非发酵革兰阴性杆菌中的分布情况.结果53株细菌ampC基因阳性(占63.9%),12株细菌产AmpC酶(占14.5%).83株菌对IPM、CIP、AK、TOB、FEP、CN、CAZ、SXT、PIP、CRO、ATM的药物敏感率从高到低依次为78.3%、74.7%、63.9%、62.7%、60.2%、51.8%、38.6%、32.5%、32.5%、24.1%、22.9%.结论非发酵革兰阴性杆菌的耐药状况严重,明确高产AmpC酶的菌株有助于临床抗菌药物的选用.     

超广谱β-内酰胺酶的监测及临床应用

目的监测产ESBLs菌株的现状,以期指导临床合理用药。方法对西安地区某医院2007年1月至2008年12月临床标本中2 206株革兰阴性杆菌中分离出来的343株产ESBLs菌,采用纸片扩散法、筛选法、确定法及双纸片协同法进行试验,以琼脂扩散法做药物敏感性试验。结果产ESBLs菌的总阳性率为15.5%。其中,大肠埃希菌占52.8%,肺炎克雷伯菌占14.9%,阴沟肠杆菌占12.3%,铜绿假单胞菌占9.0%,枸橼酸杆菌占5.8%,不动杆菌占5.2%。它们均对第三代头孢菌素和单环β-酰胺类抗生素呈现高度耐药性,对亚胺培南的耐药菌株极少见,但对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类抗生素存在着交叉耐药,对头孢西丁的敏感性可达75.0%。结论产ESBLs菌的产生是细菌对第三代头孢菌素、单环β-内酰胺类抗生素耐药的重要机制,应重视其监测及药物敏感性试验。治疗由产ESBLs菌所引起的感染,应选择亚胺培南、头孢西丁、含β-内酰胺酶抑制剂的复合制剂以及药敏试验敏感的药物才有效。     

某院肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶基因型及耐药性研究

目的调查该院临床分离肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶表型和基因型携带情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法采用Vitek2-compact全自动细菌鉴定药敏系统对临床分离菌株进行鉴定及药物敏感试验,采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶表型,采用多重PCR方法检测AmpC基因并经DNA测序确定其基因型别。结果 2010年7月至2011年6月共分离到116株肺炎克雷伯菌,产AmpC酶肺炎克雷伯菌占18.1%(21/116)。产AmpC酶肺炎克雷伯菌多重耐药情况严重,对氨基糖甙类、喹诺酮类及大多数头孢菌素类抗菌药物的耐药率在57.1%～100%,对加酶抑制剂复合药氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦及哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为90.5%、85.7%、42.9%、38.1%,所有菌株对碳青霉烯类抗生素亚安培南和美罗培南仍全部敏感。产AmpC酶菌株对头孢西丁、第3代头孢菌素及氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸等抗生素的耐药率明显高于不产酶株(P<0.05)。21株产酶菌株均携带DHA-1型AmpC酶基因。结论该院肺炎克雷伯菌产AmpC酶株检出率较高,产酶菌株多重耐药情况严重。临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生。     

碳青霉烯类抗生素对产酶革兰阴性杆菌药敏分析

目的：了解250抹G^-杆菌产ESBLs和AmpC酶的状况，比较产酶菌与非产酶菌对碳青霉烯类和其他11种抗生素的耐药率，为临床治疗产酶菌引起的感染提供理论依据。方法：应用纸片扩散确证法和头孢西丁三维试验分别检测ESBLs和AmpC酶。用K—B琼脂扩散法做药敏试验。结果：250株G^-杆菌中，53株(21．2％)产AmpC，98株(39．2％)产ESBLs，6株(2．4％)同时产AmpC ESBLs。碳青霉烯类抗生素对ESBLs菌株，AmpC菌株和AmpC ESBLs菌株的耐药率分别为3．1％，3．8％和0，较其它抗生素低。结论:对产酶菌引起的感染应首选碳青霉烯类抗生素。     

革兰氏阴性杆菌的AmpC酶检测与其药物敏感率分析

目的:探讨湘雅医院革兰氏阴性杆菌AmpC酶产生与其耐药性的关系,为临床提供选药参考.方法:应用Microscan微生物自动鉴定系统进行细菌鉴定与药敏试验,并应用纸片扩散法进行AmpC酶检测.结果:204株革兰氏阴性杆菌中AmpC酶阳性菌株40株,阳性率为19.61%;AmpC酶阳性菌株与AmpC酶阴性菌株药敏结果显示,前者大多对头孢曲松、哌拉西林、头孢他啶、头孢噻肟、头孢哌酮、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢呋肟、头孢他啶/棒酸、头孢噻肟/棒酸耐药,而后者大多对上述药物敏感,两者比较,差异有统计学意义(均P<0.05).而两者大多对头孢吡肟、亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦、左氟沙星及阿米卡星敏感.结论:AmpC酶检测有助于耐药菌株的检出,AmpC酶阳性菌株大多对第三代头孢菌素及酶抑制剂及氨曲南耐药,对亚胺培南、美洛培南、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、左氟沙星及阿米卡星敏感,可为临床经验治疗提供参考.     

EDTA纸片法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌高产AmpC酶的探讨木

目的 分析EDTA纸片法与头孢西丁三维试验检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌高产AmpC酶的符合程度,探讨应用EDTA纸片法检测高产AmpC酶在临床实验室应用的可行性.方法 从临床菌株中筛选出头孢西丁耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,应用EDTA纸片法和头孢西丁三维试验分别对头孢西丁耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是否高产AmpC酶进行检测,并进行方法学比较.结果 174株细菌中,用EDTA纸片法和三维试验检测为阳性的分别为16株和15株,两种方法阳性符合率为93.8%,阴性符合率为100%,总符合率为99.4%.结论 EDTA纸片法与头孢西丁三维试验的符合率很高,且EDTA纸片法操作简便、成本低廉且不需特殊仪器设备,适合于临床实验室推广应用.     

EDTA纸片法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌高产AmpC酶的探讨

目的 分析EDTA纸片法与头孢西丁三维试验检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌高产AmpC酶的符合程度,探讨应用EDTA纸片法检测高产AmpC酶在临床实验室应用的可行性。方法 从临床菌株中筛选出头孢西丁耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,应用EDTA纸片法和头孢西丁三维试验分别对头孢西丁耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是否高产AmpC酶进行检测,并进行方法学比较。结果 174株细菌中, 用EDTA纸片法和三维试验检测为阳性的分别为16株和15株,两种方法阳性率符合率为93.8%,阴性率符合率为100%,总符合率为99.4%。结论 EDTA纸片法与头孢西丁三维试验的符合率很高,且EDTA纸片法操作简便、成本低廉且不需特殊仪器设备,适合于临床实验室推广应用。     

产AmpC酶细菌的检测及耐药性分析

目的:了解我院产AmpC酶细菌的发生率及耐药性,指导临床合理用药。方法:收集G-杆菌848株,用头孢西丁纸片对产AmpC酶菌株进行初筛,用氟氯西林双纸片协同法进行确认,用K-B法测定18种抗菌药物的耐药性。结果:848株G-杆菌经头孢西丁纸片筛选产AmpC酶菌株阳性率为14.3%(121/848),经氟氯西林双纸片协同法试验确认为7.8%(66/848),标本来源以痰液为主,占89.4%(59/66);产AmpC酶菌与非产AmpC酶菌对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟的耐药率均较低(7.3%~34.8%),非产AmpC酶菌对头孢西丁、头孢他啶、氨曲南、阿米卡星、呋喃妥因的耐药率低于产AmpC酶菌的耐药率,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:产AmpC酶细菌呈多重耐药,应高度重视和控制,亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟对产AmpC酶细菌的敏感性较好。     

耐头孢西丁肠杆菌科细菌AmpC酶的检测及耐药性分析

目的:对耐头孢西丁肠杆菌科细菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行检测及其耐药性分析,提示其主要耐药机理,指导临床合理用药.方法:采用氯唑西林增效试验测定AmpC酶,采用双纸片确诊试验测定ESBLs,并采用最小抑菌浓度法(MIC法)检测12种常用抗生素对这些菌株的体外抗菌活性.结果:320株受检菌中共检出高产AmpC酶菌145株,产ESBLs菌160株,阳性率分别为45.3%、50%.单产AmpC酶菌对氨曲南、头孢曲松、哌拉西林、哌拉西林/三唑巴坦均存在不同程度的耐药(45.2%～68.5%),其耐药率明显高于非产酶菌,两者相比有统计学意义(P＜0.05).而单产AmpC酶菌和非产酶菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、头孢唑啉的耐药率均较高(57.7%～94.2%);对阿米卡星、头孢吡肟、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率均较低(0%～34.6%),两者相比无统计学意义(P＞0.05).结论:耐头孢西丁肠杆菌科细菌中高产AmpC酶的检出率较高,高产AmpC酶细菌多呈多重耐药.临床可采用碳青霉烯类抗生素或4代头孢菌素作为高产AmpC酶菌感染的经验治疗,也可根据药敏试验选用头孢哌酮/舒巴坦或阿米卡星等抗生素治疗.