儿童患者嗜血杆菌的感染源分布与耐药性调查

嗜血杆菌(Haemophilus)可引起多种儿童感染性疾病,除常见的呼吸道感染外,还可引起阴道炎、中耳炎、脓肿及外科感染等.嗜血杆菌生长条件要求较高,需要X和/或V因子,而且临床标本通常含有大量杂菌,传统的巧克力培养基影响嗜血杆菌生长.我们在巧克力培养基中加入了杆菌肽,提高了嗜血杆菌的分离率.为了了解近年我院儿童患者嗜血杆菌的感染情况及其耐药性,我们对2004～2005年从各类临床标本中分离出来的嗜血杆菌进行分析,总结如下.     

UriSed全自动尿沉渣分析仪的应用与评价

UriSed全自动尿沉渣分析仪是匈牙利77 Elektronika公司产品,它采用全自动智能显微镜,对特制沉渣板中的有形成分在几个不同的高倍镜视野下进行摄影,然后采用计算机图像识别技术进行形态判别并定量报告,该仪器采用自动进样和混匀系统,     

C反应蛋白、白细胞和中性粒细胞在新生儿感染中的临床意义

目的探讨新生儿感染性疾病中C反应蛋白、白细胞和中性粒细胞的变化及临床意义。方法 352例感染患儿中分为细菌感染组(195例)和病毒感染组(157例),另外选取健康足月儿140例作为正常对照组。所有患儿入院时检测CRP、WBC和GRAN。感染组经过治疗后,于72 h、168 h复查CRP、WBC和GRAN,观察三者的动态变化。结果入院时新生儿细菌感染组CRP、WBC和GRAN均较正常对照组和病毒感染组显著升高(P0.01)。治疗72和168 h后,细菌感染组CRP、WBC和GRAN明显下降(P0.01),而病毒感染组各指标变化不明显(P0.05)。结论新生儿感染中CRP、WBC和GRAN是很好的鉴别细菌与病毒感染的诊断指标,对判断病情变化与疗效具有一定价值。     

CML细胞eIF4E和Trib2基因mRNA表达分析

目的:为了探索慢性粒细胞白血病(Chronic myelogenous leukemia,CML)急变机理,寻求新的治疗靶标,我们对获得的9例CML病人骨髓标本以及CML急性红系变细胞株中K562细胞株中eIF4E基因和Trib2基因的表达水平进行初步检测,为进一步的研究奠定基础.方法:分离骨髓单个核细胞,用Trizol裂解提取RNA,RT-PCR检测eIF4E基因和trib2基因mRNA的表达水平.结果:初步分析显示部分CML病人eIF4E基因mRNA表达水平很高,为CML疾病进展机制进一步研究奠定了基础.结论:部分CML病人骨髓标本中eIF4E和TRIB2基因mRNA表达水平较高,eIF4E和trib2有可能成为CML病人新的治疗靶点.     

广州地区儿童感染A群链球菌87株的emm基因分型

目的了解广州地区儿童感染A群链球菌(GAS)emm基因型的分布状况。方法收集本院门诊和住院的呼吸道感染、皮肤化脓感染、猩红热患儿咽拭子和皮肤感染伤口分泌物进行培养,并采用PCR法扩增GAS的M蛋白N末端,进行测序,确定GAS的emm基因分型。结果共分离鉴定出GAS87株,GAS感染引起的咽炎、扁桃体炎、脓皮病在婴幼儿和学龄前儿童中发病率较高;87株GAS的emm基因型以emm1(37.9%)、emm18(13.8%)、emm12(11.5%)多见。结论3岁以下婴幼儿和学龄前儿童感染GAS发病率无年龄差异,87株广州地区儿童感染GAS的emm基因型主要为emm1、emm18,选择主要流行菌株,可以作为本地合适的基因疫苗的基础。     

小儿肾病综合征血管紧张素I转换酶基因多态性研究

目的：探讨ACE基因第16内含子插入／缺失多态性与肾病综合征、血清ACE活性的关系。方法：采用聚合酶链式反应（PCR）检测82例肾病综合征患儿和38例正常儿童ACE基因并同时用酶偶联法测血清ACE活性。结果：①82例肾病综合征患儿中ACE基因Ⅱ型，ID型和DD型频率分别为47．6％（39／82），24．4％（20／82）和28％（23／82）。对照组分别为47．3％（18／38），23．7％（9／38）和29％（11／38），肾病综合征患儿和正常儿童之间ACE基因I／D多态性频率差异无显著性意义（P＞0．05）。②38例正常儿童和82例肾病综合征患儿血清ACE活性比较差异无显著性意义（P＞0．05），ACE各基因型中血清ACE活性差异有显著性意义（P＜0．01），DD型＞ID型＞Ⅱ型。结论：①小儿肾病综合征ACE基因Ⅱ型，ID型和DD型频率分布和正常儿童差异无显著性意义（P＞0．05）。②ACE基因多态性与血清ACE活性密切相关。     

1998～2002年广州地区儿童B型流感病毒亚型监测

目的了解1998～2002年广州地区儿童B型流感病毒的亚型流行分布和特点.方法对疑似流感样症状的儿童取咽分泌物,接种到MDCK放33℃温箱培养48～72小时.MDCK细胞上清液进行血凝试验.结果 2848例中117例分出B型流感病毒,总阳性率为4.1%.1998年为5%,1999年B型流感病毒阳性率为1.9%,2000年为4.3%,2001年为3.3%,2002年为6.1%.1998～2001年广州地区儿童B型流感病毒流行为Yamagata型,2002年为Victoria型.结论 1998～2002年广州地区儿童B型流感病毒存在两个亚型感染,但没有发现2个亚型在同一流行时间同时出现.2002年广州地区儿童发生B Victoria型大流行.     

1998～2001年广州市婴幼儿腹泻中轮状病毒感染检出率及血清型分布

轮状病毒(HRV)是引起婴幼儿非细菌性腹泻最常见的原因之一。过去称为“秋季腹泻”。为了解近年来广州市婴幼儿轮状病毒感染的分子生物学特征，我们在1998年开始收集腹泻病的大便标本，现将结果报道如下。     

广州市EB病毒VCA－IgG抗体的年龄分布

本文采用免疫酶染法检测了广州地区３６４份不同年龄组正常人血清中ＶＣＡ－ＩｇＧ／ＥＢＶ抗体水平，结果显示ＥｎＶ－ｌｇＧ／ＶＣＡ正常滴度为１：１６０以下。故建议以此作为广州地区滴度正常界线。滴度若超过１：１６０时应加作ＥＢＶ－ＩｇＧ／ＥＡ，亦阳性时应结合临床症状考虑为慢性持续性ＥＢ病毒感染。     

小干扰RNA对川崎病血清诱导血管内皮细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响

Objective To investigate the matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) expression in vascular endothelial cells stimulated by the serum obtained from children with Kawasaki disease (KD) during the acute phase in the absence and presence of MMP-9 small interfering RNA (siRNA). Methods MMP-9 siRNA plasmids were constructed and transduced into vascular endothelial cells (ECV-304) by liposomal transfection. ECV-304 were cultured in 6 different conditional media: KD serum + siRNA negative control, normal serum, KD serum + MMP-9 siRNA1 (pSilencer3.1-MMP1), KD serum + MMP-9 siRNA2 (pSilencer3.1-MMP2), KD serum + γ-globulin, and KD serum. RT-PCR and Western blot were used to detect MMP-9 expression at mRNA and protein levels in ECV-304. Results The mRNA and protein expression of MMP-9 in ECV-304 cultured with 10% serum from KD patients (2.49±0.03, 1.20±0.04) and KD serum + siRNA negative control plasmid (2.45±0.03, 1.15±0.03)were significantly higher than those cultured with 10% serum from normal control children (1.21±0.03, 0.52±0.03, respectively; all P<0.01) and the increased MMP-9 expression could be significantly inhibited by MMP-9 siRNA1, MMP-9 siRNA2 and γ-globulin (100 mg/ml, all P < 0.01) . Conclusions The increase of MMP-9 expression in vascular endothelial cells induced by the serum from KD patients might take part in the formation of coronary artery lesions. Two customized MMP-9 siRNA plasmids (pSilencer3.1-MMP1 and pSilencer3.1-MMP2) can significantly inhibit both MMP-9 mRNA and protein expression.