克林霉素磷酸酯注射液热稳定性研究及其降解产物的LC-MS初步鉴定

 目的对不同厂家生产的克林霉素磷酸酯注射液的热稳定性进行了研究并对其主要降解产物进行LC-MS鉴定。方法在水浴条件下对样品进行热降解,分别在5,10min取样进行HPLC检测。采用欧洲药典(EP5.0)克林霉素磷酸酯HPLC色谱条件进行热稳定性研究。色谱柱为Thermo BDS HYPERSIL C₁₈(4.6mm×150mm,5μm),流动相为13.6g·L^-1磷酸二氢钾(磷酸调节pH值为2.5)-乙腈(80∶20);流速,1.0mL·min^-1,检测波长,210nm。同时对其主要降解产物进行LC-MS鉴定。结果经过热降解实验,不同厂家样品中3个主要杂质的含量及杂质总量均增加,除克林霉素已知外,其他两个主要杂质采用LC-MS进行了鉴定。结论克林霉素磷酸酯注射液受热易降解不适于采用湿热灭菌法进行灭菌,并且不同厂家样品中所含主要杂质均相同,通过对杂质结构的鉴定,从而为克林霉素磷酸酯生产工艺的优化以及如何更好的减少杂质的生成提供了理论基础。     

硫酸核糖霉素在缓冲液和常用注射液溶媒中的稳定性

 本文用经典恒温加速试验法，考察了硫酸核糖霉素在pH6.68磷酸缓冲液中的稳定性，通过微生物效价测定，结果表明：分解活化能E=7.622kcal·mol^-1，K_25C=5.368×10^-4h^-1。当60C时，5%葡萄糖输液中的核糖霉素效价在6h内迅速下降，而在生理盐水和灭菌注射用水中的核糖霉素效价经144h无明显下降。     

高效液相色谱法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素和氢化可的松的含量

 目的：用HPLC法同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素氢化可的松的含量。方法：采用C₁₈色谱柱，流动相为甲醇-0.05 mol·L^-1KH₂PO₄-三乙胺（50∶50∶0.2），用磷酸调pH3.7，检测波长257 nm。结果：盐酸麻黄素在360～600 μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r=0.9999），回收率101.3%，RSD为1.0%。氢化可的松在36～60μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9998)，回收率101.5%，RSD为1.0%。结论：该方法可同时测定滴鼻剂中盐酸麻黄素氢化可的松含量。     

四种大宗常用中药饮片中黄曲霉毒素污染状况分布比较研究

目的 测定不同来源的4种大宗常用中药饮片中黄曲霉毒素（AFB₁、AFB₂、AFG₁和AFG₂）的含量，比较不同基质中药饮片中黄曲霉毒素的分布状况。方法 基于免疫亲和柱净化-高效液相色谱分离-荧光检测器（IAC-HPLC-FLD）方法，分析不同产地共75批中药样品。结果 柏子仁、薏苡仁、决明子及党参共计75批中药饮片中，阳性检出：26批柏子仁（AFs 1.22-46.67 μg·kg^-1，AFB₁ 1.22-31.40 μg·kg^-1）、4批薏苡仁（AFs 1.97-41.13 μg·kg^-1，AFB₁ 1.97-36.40 μg·kg^-1）、1批决明子（AFs 13.65 μg·kg^-1，AFB₁ 12.60 μg·kg^-1），阳性率41%，超标率15%。阳性样品经 LC-MS/MS确证，排除假阳性。4种大宗常用中药饮片柏子仁、薏苡仁、决明子、党参中黄曲霉毒素的污染水平依次降低，阳性检出率分别为77%、29%、7%、0%，表明中药材中黄曲霉毒素的污染状况与药材基质密切相关。结论 针对易污染AFs的中药品种，需进一步加强其污染状况的全面检测分析，为黄曲霉毒素的有效防控以及完善中药的质量标准提供科学依据，从而保障中药用药安全。     

离子对高效液相色谱法测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B6含量

 目的：建立同时测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B₆含量的离子对HPLC法。方法：采用ODS色谱柱,磷酸二氢钾、庚烷磺酸钠溶液（取磷酸二氢钾13.6 g与庚烷磺酸钠1.0 g,加水溶解并稀释成1000 ml）-甲醇-三乙胺（85∶15∶0.4）,用磷酸调pH至2.8为流动相;检测波长290 nm,峰面积外标法。结果：甲硝唑和维生素B₆线性范围分别为100～300 μg·ml^-1 （r=0.9999）,5～50 μ·ml^-1（r=0.9999）;平均回收率分别为100.2% (RSD=0.93%),100.4% （RSD=0.44%）,n=6。结论：离子对HPLC法测定复方甲硝唑片中甲硝唑和维生素B₆含量,方法准确,操作简便,回收率高。     

反相高效液相色谱法测定血浆中文拉法辛浓度

 目的：建立高效液相色谱法检测人血浆中文拉法辛浓度。方法：血浆样品经石油醚-乙醚（2∶1）提取后，有机相再用50 mmol·L^-1盐酸反萃取并浓缩进样。色谱柱为氰基柱（250×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.1 mol·L^-1NH₄H₂PO₄ (25∶75) 为流动相，UV检测波长229 nm。结果：文拉法辛血浆最低检测浓度10 μg·L^-1，线性范围25～800 μg·L^-1，萃取回收率75.5%～79.3%，加样回收率97.4%～101.2%, 日内RSD 4.87%～6.39%，日间RSD 7.55%～10.80%。结论：该法准确可靠，已用于临床患者文拉法辛血药浓度测定。     

迭代二步法估算妥布霉素的群体药动学参数

 目的用迭代二步法估算肌注妥布霉素的群体药动学参数。方法收集56例呼吸科感染患者肌注妥布霉素的临床血药浓度监测数据（n＝154）,用荧光偏振免疫法测定妥布霉素的血清浓度,用迭代二步法估算妥布霉素的群体药动学参数,比较性别、年龄、体重、肌酐清除率（CLcr）等因素对药动学参数的影响。结果56例的CL为(75.65±16.88) mL·h^-1·kg^-1,V_d为(0.2613±0.0438) L·kg^-1,t_1/2为(2.46±0.51) h。性别对药动学参数没有影响,年龄＞50岁时CL下降,V_d与体重呈正相关,CL与CLcr呈正相关。结论迭代二步法能较好地估算出有代表性的妥布霉素的群体药动学参数,可用于优化个体化给药方案及预测血药浓度。     

多波长HPLC法同时测定过敏性鼻炎颗粒中7种有效成分

建立多波长HPLC法同时测定过敏性鼻炎颗粒中绿原酸、甘草苷、迷迭香酸、牛蒡苷、甘草酸、五味子醇甲、胡薄荷酮的方法。色谱柱为 Waters Symmetry C₁₈（ 4.6 mm×250 mm, 5 μm）;以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,绿原酸、迷迭香酸检测波长为327 nm,甘草苷、牛蒡苷检测波长为280 nm,甘草酸、五味子醇甲、胡薄荷酮检测波长为250 nm;柱温25℃,进样量10 μL。绿原酸在1.19-59.50 μg?mL^-1范围内呈良好线性关系（r=0.999 8）,平均回收率为100.95%;甘草苷在1.51-150.70 μg?mL^-1范围内呈良好线性关系（r=0.999 1）,平均回收率为100.38%;迷迭香酸在3.40-68.08 μg?mL^-1范围内呈良好线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为101.02%;牛蒡苷在56.15-1123.00 μg?mL^-1范围内呈良好线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为100.39 %;甘草酸在21.54-430.80 μg?mL^-1范围内呈良好线性关系（r=0.999 8）,平均回收率为97.09 %;五味子醇甲在2.57-51.34 μg?mL^-1范围内呈良好线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为99.19 %;胡薄荷酮在0.50-10.00 μg?mL^-1范围内呈良好线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为100.35 %。所建方法简便可靠,重复性好,可作为过敏性鼻炎颗粒中有效成分的测定方法。     

HPLC-MS/MS研究阿奇霉素片人体药动学

 目的建立HPLC-MS/MS检测体内阿奇霉素血药浓度,并用于研究阿奇霉素片人体药动学。方法应用建立的HPLC-MS/MS方法测定人血清中阿奇霉素的浓度,并通过PKs软件进行房室模型拟合,计算主要药动学参数。结果阿奇霉素的线性范围为3.33～833μg·L^-1,方法回收率为100%～115%,日内、日间RSD值均小于6%,人po阿奇霉素500 mg后的药-时曲线均符合二房室开放模型,其主要药动学参数t_1/2α为(2.93±3.38)h,t_1/2β为(36.24±8.34)h,t_1/2ka为(0.61±0.34)h,ρ_max为(415.9±114.4)μg·L^-1,t_max为(1.812±0.650)h,AUC_0-t为(6 937±1 626)μg·h·L^-1,CL/F为(0.076±0.018 2)L·h^-1,Vd/F为(3.976±1.413)L,t_lag为(0.349±0.173)h,k₁₀为(0.110±0.039)h^-1,k₂₁为(0.067±0.025)h^-1,k₁₂为(0.223±0.109)h^-1。结论该法简便、灵敏、特异,适用于阿奇霉素片人体药动学研究。     

LC-ESI-MS/MS 快速测定人血浆中奥氮平的浓度及临床应用

 目的 建立快速测定人血浆中奥氮平浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾检测法 (LC-ESI-MS/MS) 。 方法 以 Dikma diamonsil^TM C₁₈ 反相柱（ 4.6 mm × 150 mm ， 5 μm ）为色谱柱，流动相为甲醇 -5 mmol·L^-1 甲酸铵（ 90 ∶ 10 ），流速为 1 mL·min^-1 ，柱温： 25 ℃ ，以乙酸乙酯 - 二氯甲烷（ 4 ∶ 1 ）为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后，通过三重四级杆串联质谱仪，采用选择反应监测（ SRM ）对奥氮平（ <> m/z 313 → 256 ）和内标替米沙坦（ <> m/z 515.3 → 497.3 ）进行测定，并用此法测定 36 例患者稳态血药浓度。 结果 奥氮平的高（ 50 μg · L^-1 ）、中（ 25 μg · L^-1 ）、低（ 1 μg·L^-1 ） 3 个浓度的平均回收率分别为 100.14% 、 100.33% 和 100.21% ，日内（ <> n =5 ）、日间（ <> n =3 ） RSD 均小于 15% ；分析方法的最低定量限为 0.5 μg · L^-1 。线性范围为： 0.5~100 μg · L^-1 ，回归方程为 <> F =1.529 5 <> ρ - 0.014 3 ， <> r =0.999 （ <> n =8 ），权重系数为 1/ <> ρ 。 结论 该方法灵敏、准确、简单、快速，可用于临床血浓监测和药动学研究。     

反相高效液相色谱法测定血浆中盐酸西替利嗪的浓度

 目的 建立适合盐酸西替利嗪血浆浓度测定的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。方法 选择离子对反相高效液相色谱法,以乙腈-0.02 mol·L^-1磷酸二氢钠-三乙胺(50∶50∶0.15,内含十二烷基磺酸钠0.007 mol·L^-1)为流动相,在波长229 nm处检测。结果 在10～400 ng·ml^-1的浓度范围内血浆中西替利嗪具有良好的线性关系,平均萃取回收率大于70%,日内日间精密度均小于5%。结论 本法适用于测定血浆中西替利嗪的浓度,并进一步用于研究西替利嗪在人体内药代动力学过程。     

HPLC同时测定双青咽喉片中3种活性成分的含量

 目的建立HPLC同时测定双青咽喉片中枸橼酸、没食子酸和绿原酸含量的方法。方法色谱柱:Dikma Kromasil C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;分段变波长测定;柱温:30℃;流速:0.8mL·min^-1。结果枸橼酸、没食子酸和绿原酸的线性范围分别为:0.6024～6.024μg(r=0.9999),0.0312～0.312μg(r=0.9999),0.2016～2.016μg(r=0.9999),平均回收率分别为98.56%,99.13%,98.26%,RSD为0.95%,0.78%,1.37%。结论该方法简便、快速、灵敏、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为该制剂的质量控制标准。     

人血浆中霉酚酸浓度测定方法研究及药物监测应用

 目的建立用高效液相色谱快速测定人血浆中霉酚酸浓度的方法,对我院肾移植病人霉酚酸血药浓度进行监测。方法血浆样品加20μLH₃PO₄酸化,乙醚提取,萘啶酸为内标,采用Kromasil 100-5C₈(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.05 mol·L^-1 KH₂PO₄(用磷酸调pH2.8)(12∶38∶50)为流动相,流速0.5 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长254 nm。结果霉酚酸在0.191～24.45 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.191 mg·L^-1(S/N=10)。高、中、低3个质控样品的平均方法学回收率为89.7%～101.5%,提取回收率大于85%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。监测肾移植患者环孢霉素或他克莫司的谷浓度同时,测定其MPA血药浓度,82.3%的患者MPA浓度小于2 mg·L^-1,低于有效治疗谷浓度。结论本法简便、灵敏、重现性好,可用于肾移植病人服用霉酚酸酯后霉酚酸血药浓度监测和霉酚酸酯药动学研究。     

HPLC-MS/MS研究国产磷酸奥司他韦胶囊在健康人体的生物等效性

 目的 建立测定血浆中国产磷酸奥司他韦胶囊（商品名：军科奥韦胶囊）活性代谢产物浓度的LC-MS/MS方法,研究军科奥韦胶囊在中国健康男性志愿者的主要药动学参数以及与参比制剂的生物等效性。方法 采用2制剂双周期交叉试验设计,24名受试者分别单剂量口服受试制剂军科奥韦胶囊和达菲参比制剂,用LC-MS/MS测定其活性代谢产物的含量,所得参数经BAPP2.0软件计算药动学参数并考察生物等效性。结果 口服参比制剂及受试制剂后,其活性代谢产物的ρ_max分别为（625.17±147.76）和（633.57±115.28）μg·L^-1;t_max分别为（4.5±1.0）和（4.5±1.2）h;t_1/2分别为（8.13±1.13）和（7.79±0.89）h;MRT分别为（12.09±1.38）和（11.95±1.03）h; AUC_0-τ分别为（7 247.02±1 720.33）和（7 506.16±1 454.36）μg·h·L^-1;AUC_0-∞分别为（7 428.75±1 793.94）和（7 659.99±1 477.83）μg·h·L^-1;受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为（105.8±17.7）%。结论 利用方差分析及双单侧t检验分别对受试和参比制剂进行生物等效性评价,军科奥韦胶囊和已上市的达菲胶囊制剂具有生物等效性。     

高效液相色谱法测定山楂中枸橼酸的含量

 目的建立山楂中枸橼酸的高效液相含量测定方法。方法 高效液相色谱法,Zorbax-sb C₁₈柱,磷酸二氢铵-磷酸缓冲液为流动相,流速1.0 mL·min^-1;检测波长为210nm;柱温25℃。结果枸橼酸回归方程Y=3510.8+56992.3X,r=0.999 9,线性范围0.79～15.96μg。生山楂中枸橼酸平均回收率为103.4％,RSD=0.9％;焦山楂中枸橼酸平均回收率为98.8％,RSD=2.8％(n=5)。结论该方法简便易行,可用于山楂饮片中枸橼酸的含量测定。     

高效液相色谱法同时测定复方苯甲酸软膏中的苯甲酸和水杨酸含量

 目的：建立一种快速、准确的高效液相色谱法同时测定苯甲酸和水杨酸的含量。方法：使用阴离子交换色谱柱，流动相为甲醇-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾（30∶70），检测波长为244 nm。结果：样品测定在8 min内完成，苯甲酸在60～480 mg·L^-1范围内，r=0.9995, RSD=0.72%,平均回收率为99.5%；水杨酸在30～240 mg·L^-1范围内，r=0.9995, RSD=0.67%，平均回收率为100.7%。结论：本方法可快速准确地检测复方苯甲酸软膏中的苯甲酸和水杨酸含量。     

液相色谱-质谱联用测定鼠血浆中的23-羟基白桦酸

 目的建立测定小鼠血浆中23-羟基白桦酸的液相色谱-质谱联用法(LC-MS)。方法取血浆,加入内标物枸橼苦素,经二氯甲烷-水(6∶1)提取后,40℃水浴中氮气吹干,残渣用甲醇溶解,进行LC-MS测定。色谱柱为Intersil C₈(2.1mm×250mm,3.5μm);体积分数为70%乙腈为流动相(其中三乙胺为体积分数0.05%);流速0.2mL·min^-1;柱温30℃;电喷雾离子源(ESI),负离子检测(23-HBA,m/z 471;柠檬苦素,m/z 469)。结果23-羟基白桦酸的线性范围为10～1000μg·L^-1(r=0.9998),最低定量限为10μg·L^-1,方法平均回收率>88%,日内、日间精密度(RSD)均小于8%。小鼠血浆样品-20℃放置至少3周内稳定。结论本方法专属性强,灵敏度高,线性范围宽,操作简便,适用于药动学研究。     

RP-HPLC测定正常人口服复方川芎汤剂后血清中游离的阿魏酸

 目的：建立一种测定正常人po复方川芎汤剂后血清中游离阿魏酸（FA）浓度的方法。方法：采用高效液相色谱法，以香豆素为内标（42μg·ml^－1），甲醇 醋酸 水（38∶0．3∶61．7）为流动相，Lichrosorb RP₁₈（150mm×4．6mm，5μm）为分析柱，紫外检测波长为320nm。取500μl血清，加入内标，水浴（90℃）5min，超微搅拌器搅拌15s，离心（3000r·min^－1）15min取上清液进样分析。结果：FA的检测限为6ng·ml^－1（S／N＝3．5），最低检出血清浓度为8．8ng·ml^－1，线性范围为17．6ng·ml^－1～1408．0ng·ml^－1，r＝0．9995，方法平均回收率为（99．04±2．26）％，日内精密度RSD≤4．10％，日间精密度RSD≤5．82％。结论：本法简便、快速、灵敏，内源性物质及复方各组分药物不干扰测定。另还测定了正常人应用本口服液后的药动学参数。     

HPLC-MS/MS快速同时测定全血中3种免疫抑制剂的浓度

 目的建立液质联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人全血中环孢素A、他克莫司、西罗莫司的方法。方法采用Symmetry C₁₈色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相:10 mmol·L^-1醋酸铵-0.1%甲酸溶液和0.1%甲酸甲醇溶液为90∶10,流速0.25 mL·min^-1,采用多反应监测进行定量。结果环孢素A在人全血中50～1 500μg·L^-1内线性良好,他克莫司、西罗莫司在人全血中1～30μg·L^-1内线性良好,相对回收率在98.67%～103.56%之间,日内及日间精密度(RSD%)均小于10%。结论本方法能满足同时测定人全血中环孢素A、他克莫司、西罗莫司的要求,用于临床血药浓度的监测。     

反相高效液相色谱法同时测定人血浆中磷苯妥英、苯妥英及其主要代谢产物4'-羟苯妥英的浓度

 目的建立同时测定人血浆中抗癫痫药物磷苯妥英(FOS)、苯妥英(PHT)及其主要代谢产物4′-羟苯妥英(4′-HPPH)浓度的高效液相色谱法。方法以盐酸普萘洛尔为内标,血浆样品100μL经20%磷酸酸化后以乙酸乙酯1 mL萃取,提取后氮气吹干,加入流动相100μL复溶,取20μL进样测定。色谱柱采用Agilent RX-C₈柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温:40℃;流动相为甲醇-乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液(23∶17∶60),流速为1.5 mL·min^-1,紫外检测波长210nm。结果血浆内源性杂质和常用合并用药对样品测定无干扰,色谱峰分离良好。FOS、PHT、4′-HPPH的线性范围分别是1～400,0.5～50和0.5～10 mg·L^-1,相关系数(r)均大于0.999 1。平均方法回收率为92.79%～107.90%。各组分的日内、日间RSD均小于8%。结论该方法具有良好的准确性、精密性和灵敏性,且操作快速、简便,各组分之间分离良好,适用于临床血药浓度的监测。