Sa抗原的提取及抗Sa抗体的检测

目的制备Ｓａ抗原，建立抗Ｓａ抗体的检测方法，测定自身免疫性结缔组织疾病中抗Ｓａ抗体的阳性率。方法从人胎盘中提取Ｓａ抗原，用阴离子交换法进一步纯化，采用免疫印迹法，检测抗Ｓａ抗体。结果抗Ｓａ抗体与类风湿因子、抗ＲＡ３３、抗Ｒｏ（ＳＳＡ）、抗Ｌａ（ＳＳｂ）、抗ＲＮＰ、抗Ｓｍ、抗Ｊｏ－１和抗Ｓｃｌ－７０抗体等自身抗体无交叉反应。抗Ｓａ抗体在各组患者中的阳性率分别为：类风湿性关节炎（ＲＡ）３１．９％（６１／１９１），干燥综合征３．０％（２／６７），系统性红斑狼疮４．３％（２／４６），而白塞病（６６例）、多发性肌炎／皮肌炎（６０例）、其他自身免疫性结缔组织病（６６例）与正常人（４０例）中均为０。抗Ｓａ抗体对ＲＡ的特异性为９８．６％。结论抗Ｓａ抗体是一种对ＲＡ诊断较为特异的新型自身抗体     

抗组蛋白 Ｈ２ Ａ 抗体间接 ＥＬＩＳＡ 法的建立和临床初步 应用

目的 建立检测血清抗 Ｈ２Ａ 抗体的间接 ＥＬＩＳＡ 技术，探讨抗 Ｈ２Ａ 抗体对类风湿关节炎（ ＲＡ） 的临床意义。 方法 ＲＴ?ＰＣＲ扩增 Ｈ２Ａ 基因，将其克隆到原核表达载体 ｐＥＴ２８ａ，对重组质粒 Ｈ２Ａ ／ ｐＥＴ２８ａ 进行原核表达，经 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测后，利 用 Ｈ２Ａ 重组蛋白建立检测人血清中抗 Ｈ２Ａ 抗体的间接 ＥＬＩＳＡ 方法。 用建立的间接 ＥＬＩＳＡ 方法检测 ５０ 例 ＲＡ 患者和 ５０ 例健 康人对照组血清抗 Ｈ２Ａ 抗体水平。 结果 表达的 Ｈ２Ａ 蛋白相对分子量约为 １５ ０００，与预期大小相符，ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 结果表明组 蛋白 Ｈ２Ａ 与抗 Ｈ２Ａ 抗体阳性血清具有良好的反应原性。 经方法学评估，建立的 ＥＬＩＳＡ 法在特异性、可重复性方面均达到检 测要求。 ＲＡ 组抗 Ｈ２Ａ 抗体水平高于健康人对照组（Ｐ＜０．０１）。 当 ｃｕｔ?ｏｆｆ 值设为 ０．４９４ 时，ＲＡ 患者血清抗 Ｈ２Ａ 抗体的阳性率 为 ８４％（４２ ／ ５０），明显高于健康人对照组 ２０％（１０ ／ ５０），差异具有统计学意义（χ２ ＝ ４１．０２６， Ｐ＜０．０１）。 结论 成功建立了检测 血清抗 Ｈ２Ａ 抗体的间接 ＥＬＩＳＡ 技术。 ＲＡ 患者血清中抗 Ｈ２Ａ 抗体水平明显高于健康人对照组。 抗 Ｈ２Ａ 抗体在 ＲＡ 患者血清 中出现可能具有重要的致病意义。     

Raji细胞免疫酶抑制法检测血清抗HLA－DR抗体

本研究利用Ｒａｊｉ细胞表面具有表达组织相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ一ＤＲ）特点，以及被检血清中抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体与抗人ＨＬＡ一ＤＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）竞争结合Ｒａｊｉ细胞表面ＨＬＡ一ＤＲ抗原的特征，建立检测血清抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体的Ｒａｊｉ细胞免疫酶抑制法。对７２例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１１３例健康者血清检测结果表明：ＳＬＥ患者和健康各血清中抗ＨＬＡ一ＤＲ抗体阳性率分别为３９．０％和１．８％。此法特异性强、重复性好（阳性血清ＣＶ为４．７％，阴性血清ＣＶ为０％），抗体涌度范围１：５～１：４０。     

血清抗Sa抗体检测及临床意义

目的　检测类风湿性关节炎 (RA)患者血清抗Sa抗体 ,并探讨Sa抗体对RA的诊断意义。方法　Western blot方法。结果　抗Sa抗体诊断RA的敏感度为 42 .7% ,特异度为 1 0 0 % ,阳性确诊率为 1 0 0 % ,阴性确诊率为71 1 %。结论　血清抗Sa抗体对RA诊断的特异度和阳性确诊率均高于类风湿因子 (RF) ,因此具有临床实用价值。     

捕获ELISA法用于肾综合征出血热早期诊断的研究

目的 探讨肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）早期诊断方法。方法 用ＭａｃＥＬＩＳＡ、ＩＦＡＴ二种方法同时检测ＨＦＲＳ病人血清４０份;非出血热血清２０份;正常人血清２０份进行对比研究。而且,阳性血清用２－巯基乙醇破坏特异性ＩｇＭ试验,阴性血清加类风湿因子阳性血清干扰试验。结果 用ＭａｃＥＬＩＳＡ法检测ＨＦＲＳ于病程第２日即可出现特异性ＩｇＭ阳性,３～４病日阳性率达８９％;５～７病日阳性率达１００％,而ＩＦＡ     

类风湿性关节炎患者抗天然Ⅱ型胶原抗体的测定及临床意义

以本科提纯的天然Ⅱ型胶原（ＮａｔⅡ）为抗原，以新鲜羊血清平衡液为封闭液，用酶联免疫方法检测８８例类风湿性关节炎（ＲＡ）病人和８２例健康对照者血清中抗ＮａｔⅡ抗体水平。结果：ＲＡ病人血清抗ＮａｔⅡ抗体阳性率为：ＩｇＧ３６．３６％、ＩｇＭ１９．３２％；健康对照者分别为：４．８８％及１．２％。抗ＮａｔⅡ抗体ＩｇＧ阳性的ＲＡ患者血小板升高，类风湿因子阳性及关节Ｘ线分期较高者均多于阴性的ＲＡ患者（Ｐ＜０．０５）。在抗ＮａｔⅡ抗体ＩｇＭ阳性组仅血小板升高者多于阴性组（Ｐ＜０．０１）。ＲＡ病人的抗ＮａｔⅡ抗体阳性率高于健康对照者，提示对ＮａｔⅡ的自身免疫在ＲＡ的发病机制中可能起一定作用。     

酶联免疫吸附试验检测肺螨病螨虫抗体

目的建立一种特异、敏感的诊断肺螨病的新方法。方法采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测血清中尘螨性抗体。结果在５８例已确诊的肺螨病患者中，若以吸光度０．３作为阈值，肺螨病患者的阳性符合率为８３％，非肺螨病呼吸系统疾病患者的阴性符合率为９０％，正常人的阴性符合率为９５％。结论ＥＬＩＳＡ检测肺螨病患者血清抗体具有敏感性高、特异性强的优点，可用于肺螨病的诊断和重点人群的流行病学调查     

HEP-2细胞为靶细胞的ELISA检测血清抗核抗体

以ＨＥＰ－２细胞株为靶细胞包被塑料微孔扳，运用ＨＲＰ羊抗入ＩｇＧ为二抗对８例活动期ＳＬＥ，１例混合结缔组织病（ＭＣＴＤ），８例类风湿性关节炎，７例风湿性关节炎和３０例健康者做了血清抗核抗体的的ＥＬＩＳＡ检测，同时以间接免疫荧光法作对照。并对高滴度阳性血清作了稀释度与吸光度值的直线回归分析。结果表明，ＥＬＩＳＡ检测血清抗核抗体特异性为９８．５％，敏感性为１００％，值得推广应用     

抗心磷脂抗体与反复自然流产关系的探讨

应用间接ＥＬＩＳＡ法检测１０５例反复自然流产患者血清中的抗心磷脂抗体，同时对ＡＮＡ、扩ｄｓ－ＤＮＡ、抗－Ｓｍ，抗－ＲＮＰ、ＲＦ进行了测定。结果表明：ＲＳＡ组ＡＣＡ阳性率为２８．６％，明显高于其他自身抗体及对照组（Ｐ＜０．０１），ＡＣＡ与ＲＳＡ患者的孕龄及流产次数无相关性（Ｐ＞０．０５），三种类别Ｉｇ中，以ＩｇＧ、ＩｇＧ、ＩｇＭ型ＡＣＡ检出率较高，中等或高水平的阳性结果占３３．３％（１０／３０），其     

Raji细胞免疫酶抑制法检测血清抗HLA—DR抗体

本研究利用Ｒａｊｉ细胞表面具有表达组织相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ－ＤＲ）特点，以及被检血清中抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体与抗人ＨＬＡ－ＤＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）竞争结合Ｒａｊｉ细胞表面ＨＬＡ－ＤＲ抗原的特征，建立检测血清抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体的Ｒａｊｉ细胞免疫酶抑制法。对７２例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１１３例健康者血清检测结果表明：ＳＬＥ患者和健康者血清中抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体阳性率分别为３９．０％和１．８％。此     

酶联免疫吸附试验检测肺螨病螨虫抗体

目的建立一种特异，敏感的论断肺螨病的新方法。方法采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测血清中尘螨性抗体。结果在５８例已确诊的肺病患者中，若以吸光度０．３作为阈值，肺螨病患乾的阳性一符合率为８３％，非肺螨病呼吸系统疾病患者的阴怀符合率为９０％。正常人的阴性符合率为９５％。结论ＥＬＩＳＡ检测肺螨病患者血清抗体具有敏感性高、特异性强的优点，可用于肺螨的诊断和重点人群的流行学调查。     

免疫斑点法测抗钙调素自身抗体及其与其他8种自身抗体的关系

目的 探讨抗钙调素（ＣａＭ）自身抗体与自身免疫病及其他自身抗体的相互关系。方法 采用ＳＰＡ－免疫斑点法（ＳＰＡ－ＩＤＡ）对３４０例自身免疫病患者，４８例肿瘤患者，５２例正常人血清进行抗ＣａＭ抗体测定，并随机取自身免疫病患者血清同时检测其他８种自身抗体。结果 各类延寿央免疫病患者体内不同程度地存在着抗ＣａＭ自身抗体，４８例肿瘤患者血清中仅１例阳性，５２例正常人血清中无１例阳性。经统计学分析，抗ＣａＭ     

固相间接血凝法检测伤塞杆菌O抗体及其临床初步应用

建立了固相间接血凝法（ＳＰ－ＰＨＡ）用于检测伤寒杆菌Ｏ抗并与间接血凝法（ＬＰＳ－ＰＨＡ），酶联ＡＳ蛋白ＥＬＩＳＡ法及经典的肥达氏试验作了比较，ＳＰ－ＰＨＡ法敏感性优于ＬＰＳ－ＰＨＡ《肥达氏试验（Ｗｉｄａｌ‘ｓ）与酶联Ａ蛋白ＥＬＩＳＡ法（ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ）相近。伤寒患者血清Ｏ抗全阳性纺为８８．２％（１５／１７），发热待查阳性纺为３．６％（２／５５），３０例献血员血清Ｏ抗体均为阴性。该法敏感、特异、     

钙调素自身抗体的临床研究

建立了测定钙调素（ＣａＭ）自身抗体（抗ＣａＭ）的间接ＥＬＩＳＡ法，发现全身性红斑狼疮（ＳＬＥ）、类风湿性关节炎（ＲＡ）、甲状腺功能亢进、桥本甲状腺炎（ＨＴ）、慢性活动性乙型肝炎（ＣＡＨ）患者血清抗ＣａＭ水平与检出率均显著高于正常对照及冠心病、风湿热等其他内科疾病患者。在甲亢与ＨＴ患者中，抗ＣａＭ与抗甲状腺球蛋白（抗ＴＧ）、抗甲状腺过氧化物酶（抗ＴＰＯ）抗体不相关，而在ＳＬＥ与ＲＡ患者，抗ＣａＭ与抗核抗体（ＡＮＡ）有同步性。抗ＣａＭ的出现无疾病特异性，可能在自身免疫病患者的免疫功能紊乱中起一定作用。     

抗IL—2与抗TNF—α自身抗体的测定及临床初步观察

用ｒＩＬ－２和ＴＮＦ－ａ建立检测抗ＩＬ－２和抗ＴＮＦ－ａ自身抗体的间接ＥＬＩＳＡ。在１０．２％的ＳＬＥ患者血清中可检出自然的抗ＩＬ－２抗体，１８．８％－４０．０％的慢性肾炎、ＳＬＥ、ＲＡ、桥本甲状腺炎患者可检出抗ＴＮＦ－ａ自身抗体，其免疫病理意义，尚待进一步研究。     

抗CCP抗体对类风湿关节炎诊断的临床价值

【目的]探讨抗血清抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体对类风湿关节炎（RA）诊断的价值。【方法】采用ELISA法和乳胶增强比浊法分别测定155例RA、178例非RA和100例正常人的血清抗CCP抗体和类风湿因子（RF）,并比较抗CCP和RF对RA诊断的灵敏度、特异度、阳性预期值（PV＋）和阴性预期值（PV-）．【结果】抗CCP抗体和RF对RA诊断的灵敏度分别为63．2％和59．1％,特异度分别为95．0％和81．6％,PV＋分别为87．5％和64．3％,PV-分别为82．2％和58．2％。抗CCP抗体阳性率在RF阴性的RA患者中为34．9％,抗CCP抗体阳性的RA患者有较高的CRP浓度和较多的关节肿胀数,并且抗CCP抗体显示与患者的关节损伤率有一定的相关性,但是抗CCP抗体与DAS28评分之间无相关性。【结论】与RF相比,抗CCP抗体对诊断RA有着较好的临床价值,抗CCP抗体检测用于早期诊断RA具有非常重要的临床意义。     

多重聚合酶链反应检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的应用一种敏感快速的多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）,检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）和凝固酶阴性葡萄球菌（ＭＲＣＮＳ）。方法临床分离的北京地区金黄色葡萄球菌１２３株,ＭＲＣＮＳ１２２株,用溶壁素和蛋白酶Ｋ制备模板ＤＮＡ,设计葡萄球菌甲氧西林耐药的决定基因,金黄色葡萄球菌独有的一个辅助基因和细菌中均有的１６ＳｒＲＮＡ基因引物,通过多重ＰＣＲ技术对标本进行扩增。结果１２３株金黄色葡萄球菌的ｆｅｍＡ基因１００％（１２３／１２３）阳性,ｍｅｃＡ基因阳性的占１８．７％（２３／１２３）,１２２株ＭＲＣＮＳ的ｆｅｍＡ１００％（１２２／１２２）阴性,ｍｅｃＡ阳性的占２４．６％（３０／１２２）。１６ＳｒＲＮＡ基因片断在多重ＰＣＲ中作为内部参照避免了假阴性结果的出现。结论建立的多重ＰＣＲ技术检测ＭＲＳＡ和ＭＲＣＮＳ具有敏感、快速、特异的特点,是一种可靠的实验诊断手段。     

乙酰胆碱受体的初步纯化及其抗体测定方法的建立

用Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００提取，抗人全血清－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱免疫吸附和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０凝胶过滤的方法，自人骨骼肌提取得乙酰胆碱受体（ＡｃｈＲ），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ呈一条４４ｋＤ的主带，用此ＡｃｈＲ作包被抗原，建立了检测ＡｃｈＲ－Ａｂ的间接ＥＬＩＳＡ法。若以对照组吸光度均值加２倍标准差为正常上限，则重症肌无力（ＭＧ）患者中，５０％抗ＡｃｈＲ自身抗体（ＡｃｈＲ－Ａｂ）阳性，其他自身免疫病（ＳＬＥ，ＲＡ等）者检出率极低。     

血清稀释度对捕捉法ELISA检测抗HAV IgM影响的探讨

在捕捉法ＥＬＩＳＡ检测抗ＨＡＶＩｇＭ时,分别使用了单克隆和多克隆抗ＨＡＶ－ＨＲＰ以确定血清标本的最适稀释度。发现抗ＨＡＶＩｇＭ阳性血清Ａ值均随稀释度增高而上升,绝大多数在１０－３达高峰。部分阳性血清原倍（１００）的Ａ＜临界值（假阴性）。部分抗ＨＡＶＩｇＭ阴性血清在低稀释度时不论加入ＨＡＡｇ与否,能与两种酶抗体结合物之一或同时反应呈假阳性,Ａ值随稀释度增高而下降。结果表明最适血清稀释度为１０－３,既能防止阳性漏检,也可防止因原倍血清所致的假阳性。本文还提示使用单克隆抗ＨＡＶ－ＨＲＰ能防止ＲＦ等因素对结果的干扰。     

SLE患者血清抗亲环素A自身抗体及其特异免疫复合物的测定与意义

用离子交换色谱和凝胶过滤技术从小牛胸腺中提取、纯化亲环素 Ａ（ＣｙＰ Ａ）。 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析为单一条带，分子量为 １７．８ＫＤ，与 ＣｙＰ Ａ标准品一致。用此 ＣｙＰ Ａ建立了检测抗 ＣｙＰＡ自身抗体（ＡＣＡ）的ＥＬＩＳＡ法。在免疫豚鼠获得抗血清基础上，又建工了ＥＬＩＳＡ法检测ＣｙＰＡ特异免疫复合物（ＣｙＰ Ａ－ＩＣ）。正常对照（ｎ＝１００） ＡＣＡ和 ＣｙＰ Ａ－ＩＣ阳性率均仅 １．０％． ＳＬＥ患者（ｎ＝１０１） ＡＣＡ阳性率为 ５０．５％， ＣｙＰ Ａ－ＩＣ为 ７４．２％。结果提示，血清 ＡＣＡ和 ＣｙＰ Ａ－ＩＣ测定对ＳＬＥ的诊断有较高的敏感性和特异性。