养阴抗毒胶囊2号对阴虚大鼠糖皮质激素受体mRNA水平的影响

目的:利用氢化可的松法建立阴虚大鼠模型,观察养阴抗毒胶囊2号对阴虚大鼠模型肝组织糖皮质激素受体(GR)mRNA水平的影响,探讨其减轻激素副作用的机理。方法:SD大鼠40只,随机分为空白对照组、阴虚模型组、养阴抗毒胶囊2号组、六味地黄丸组和桂附地黄丸组。在中药预处理及造模给药9天后处死,放射免疫方法检测各组血浆皮质醇(CORT)含量,RT-PCR半定量测定肝组织GR mRNA水平,并进行图像分析和数据处理。结果:与模型组相比,养阴抗毒胶囊2号组和六味地黄丸组大鼠血浆CORT含量均显著降低(P<0.05),同时肝组织GR mRNA水平均明显升高(P<0.05),并且养阴抗毒胶囊2号组优于六味地黄丸组(P<0.05);而桂附地黄丸组大鼠的血浆CORT含量和肝组织GR mR-NA水平均与模型组没有差别(P>0.05)。结论:养阴抗毒胶囊2号能明显降低阴虚大鼠模型血浆CORT水平,提高肝组织GR mRNA水平,提示它可能改善HPA轴功能亢进状态,从而减轻激素副作用。     

养阴抗毒胶囊及拆方对阴虚大鼠皮质醇,超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的:探讨养阴抗毒胶囊及拆方对氢化可的松所致阴虚大鼠血清中氧化与抗氧化平衡的影响作用.方法:SD大鼠40只,随机分为对照组、阴虚模型组(YD)、养阴抗毒胶囊组(YC)和拆方抗毒组(大小蓟、槐花).大鼠在中药预处理及造模给药9 d后处死,以大鼠血清中皮质醇(CORT),超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量为指标进行实验观察.结果:与对照组相比,YD组大鼠血清CORT,MDA含量分别为(9.10±1.70)μg/L,(27.16±8.54)Nu/mL,明显升高,SOD含量(520.75±126.87)μmol/L,明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与YD组相比,YC组大鼠血清SOD含量(801.10±41.57)μmol/L,明显升高,(P<0.05),CORT,MDA含量分别为(6.01±2.11)μg/L,(10±1.40)μmol/L,明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);而拆方抗毒组无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05),符合方剂的"整体取性"原理.结论:YC通过改变大鼠血清中SOD活性和降低MDA含量,对阴虚大鼠的抗氧化能力产生一定的影响.     

逍遥散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴调控作用机制的初步研究

目的 观测逍遥散对慢性应激损伤大鼠海马对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴调控的变化,探讨逍遥散抗应激损伤的神经内分泌变化.方法 以慢性多相性应激大鼠为研究对象,动物分组采用随机数字表法;RU-38486为工具药;酶联免疫吸附法检测大鼠血清皮质酮(CORT);荧光免疫组化方法 检测大鼠海马神经元内糖皮质激素受体(GR).结果 与空白对照组(1.09±0.11;0.57±0.10)相比较,模型组大鼠海马神经元内GR表达明显减少(0.65±0.10;P＜0.01),促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA表达明显升高(1.12±0.11;P＜0.01),RU-38486组大鼠海马神经元内GR表达明显增加(1.59±0.11;P＜0.01),CRH mRNA表达明显减少(0.48±0.10;P＜0.05).而逍遥散组大鼠海马神经元内GR及下丘脑CRH mRNA表达均无统计学差异(0.62±0.08;0.97±0.13;P＞0.05);与模型组比较,RU-38486及逍遥散干预大鼠海马神经元内GR表达均明显增加(P＜0.01),下丘脑CRH mRNA表达均明显降低(P＜0.01).结论 慢性应激可导致大鼠海马神经元内GR表达减少,下丘脑CRH mRNA表达升高,而逍遥散能抑制这种因慢性应激所致的海马神经元内GR及下丘脑神经元内CRH mRNA的表达变化,这可能是逍遥散调控慢性应激状态下HPA轴的兴奋性以达到抗应激损伤的关键机制.     

养阴抗毒胶囊对氢化可的松致阴虚大鼠胸腺的影响

目的 探讨养阴抗毒胶囊（YC）对阴虚证免疫功能的影响。方法 SD大鼠32只，随机分为正常对照组、阴虚模型组（YD）、YC组、桂附地黄丸（GFB）组。在中药预处理及造模给药9d后，取血，用放射免疫方法检测各组血清皮质醇（OORT）含量，重要脏器称重并计算胸腺指数、脾指数，采用光镜及透射电镜观察胸腺超微结构的变化。结果 YD组OORT含量高于正常对照组（P〈0．05），YC可使OORT含量降低（P〈0．05），而GFB却使OORT含量更高（P〈0．01）。与正常对照组相比，各组胸腺指数明显下降（P〈0．01）；YC组比YD组胸腺指数增高，GFB组却下降，但差别无统计学意义（P〉0．05）；脾指数不同程度也下降，其中YD组和GFB组下降明显（P〈0．05）；睾丸重量除YC组重量增加（P〈0．05）外，其余各组变化不明显；心、肾重量各组无明显差异。组织学检查表明YD组胸腺皮质变薄，淋巴细胞固缩、碎裂。电镜观察显示淋巴细胞胞质和胞核浓缩，异染色质增多，凋亡小体形成并被吞噬和降解等改变。YC有改善作用，电镜下胸腺皮质凋亡细胞少。核分裂多见，核固缩少，并有增生，GFB改善不明显。结论 YC明显改善HC作用下HPAT轴功能亢进的状态，减轻胸腺皮质萎缩。调节免疫功能，可能是其预防和治疗GC副作用的机制之一。     

养阴抗毒胶囊对糖皮质激素致阴虚大鼠血浆ACTH、CORT的影响

目的:探讨养阴抗毒胶囊2号(YC2)防治糖皮质激素(GC)不良反应的机制。方法:SD大鼠60只,随机分为空白对照组,阴虚模型组,YC2(高)、(中)、(低)组,六味地黄丸组。在中药预处理及模型复制给药9 d后,取血,用放射免疫方法检测各组血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)及皮质醇(CORT)的含量。结果:阴虚模型组ACTH及CORT含量明显高于空白对照组,各中药组血浆ACTH及CORT含量均不同程度低于阴虚模型组。结论:GC所致“阴虚”证与下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)功能亢进密切相关,YC2明显改善GC作用下HPA轴功能亢进的状态,可能是其预防和治疗GC不良反应的机制之一。     

香烟烟雾对气道糖皮质激素受体表达及黏液分泌的影响

目的：探讨香烟烟雾及提取物对大鼠肺及A549细胞糖皮质激素受体（ GR）表达和黏液分泌的影响。方法采用香烟和香烟提取物（CSE）分别诱导大鼠动物模型和A549细胞模型。运用HE染色观察正常大鼠（正常对照组）和熏烟大鼠（模型组）肺组织病理改变,运用Western blot 法检测大鼠肺组织细胞核和细胞质内GR及HDAC2的表达情况,运用MTT法观察CSE对A549细胞存活率的影响,荧光定量PCR检测细胞内MUC5AC和HDAC2的mRNA含量,免疫荧光法观察细胞内GR的分布和表达。结果 HE染色提示模型组较正常对照组肺泡壁毛细血管扩张、充血,泡腔内充盈大量浆液性渗出物;模型组肺组织细胞核和细胞质中GR表达量明显减少（ P＜0.05）,HDAC2表达明显减少（P＜0.05）。 CSE对A549细胞活性的影响呈时间－浓度依赖的趋势,且10％CSE作用24 h可显著降低A549细胞存活率（P＜0.01）;5％CSE作用A549细胞8 h可明显减少HDAC2和MUC5AC的mRNA表达量（ P＜0.01）。免疫荧光结果提示5％CSE可导致A549细胞GR表达减少,且细胞核中变化更加明显。结论香烟烟雾可减少肺组织及肺上皮细胞内GR的表达,并增加黏蛋白MUC5AC的分泌,其机制可能与香烟烟雾减少GR对MUC5AC的转录抑制机制有关。     

溃疡性结肠炎鼠糖皮质激素受体改变的意义

目的:探讨鼠溃疡性结肠炎时糖皮质激素(GC)和糖皮质激素受体(GR)的相应改变.方法:Wistar大鼠和C57/L6小鼠共30只,随机分成3组(n=8)进行灌注实验.超速离心鼠肝、胃、结肠组织,取上清液,以3H地塞米松(Dex)为配体,测定动物肝、胃、结肠组织血浆皮质醇及肝、胃、结肠组织GR结合量改变.结果:动物实验组血浆皮质醇明显升高(P＜0.05 ,P＜0.01),氢化可的松治疗组血浆皮质醇未继续升高;实验组肝、胃、结肠3H-Dex特异结合位点测定明显降低,治疗组则有所回升(P＜0.05 ,P＜0.01).结论:溃疡结肠炎鼠血浆皮质醇明显升高,提示溃疡结肠炎属应激状态.肝、胃、结肠组织3H-Dex结合量降低,经氢化可的松治疗后肝、胃、结肠组织3H-Dex结合量明显回升,提示血浆皮质醇对GR之作用是正相关作用,为临床合理应用糖皮质激素治疗提供依据.     

Leydig肿瘤细胞中GR表达量改变与皮质酮诱导的细胞凋亡的相关性

目的以小鼠Leydig肿瘤细胞(MLTC)为细胞模型,探讨细胞中糖皮质激素受体(GR)表达量改变与应激水平皮质酮(CORT)诱导的细胞凋亡的相关性。方法 GR过表达实验分为GR质粒组、空载质粒组和空白对照1组,采用基因克隆技术使GR质粒组MLTC中的GR呈过表达状态,Western blotting检测验证;GR低表达实验分为空白对照2组、脂质体对照组、GRsiRNA组和对照siRNA组,采用RNA干扰技术使GR siRNA组MLTC中的GR呈低表达状态,Western blotting检测验证。以应激水平的CORT(终浓度200 nmol/L)处理两种实验分组的MLTC(GR过表达+CORT组、空载质粒+CORT组、空白对照1组和GR低表达+CORT组、对照siRNA+CORT组、空白对照2组),分别以CORT处理的空白对照1、2组MLTC作为单纯CORT处理1、2组;流式细胞术检测各组MLTC细胞凋亡率,分析GR表达与细胞凋亡率的相关性。结果 GR过表达+CORT组、空载质粒+CORT组、单纯CORT处理1组和空白对照1组的细胞凋亡率分别为(36.6±0.6)%、(23.8±0.8)%、(24.3±0.6...     

养阴抗毒胶囊对阴虚大鼠外周血T细胞亚群及IL-1β,TNF-α的影响

目的:探讨养阴抗毒胶囊(YC)对氢化可的松(HC)所致阴虚大鼠外周血T细胞亚群及IL-1β和TNF-α的影响. 方法:SD大鼠32只,随机分为正常对照组、阴虚模型组、YC组、六味地黄丸(LD)组各8只. 最后一次给药后1 d取血,用放射免疫方法检测各组血清皮质醇(CORT),细胞因子IL-1β和TNF-α的水平;用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群的变化. 结果:阴虚模型组CORT升高, 而YC和LD组可使其下降(P<0.05); YC和LD组可使阴虚模型组升高的IL-1β和TNF-α下降(P<0.05),其中YC更接近于正常对照组. 阴虚模型组外周血T细胞亚群比例CD4 (与空白组比较P<0.05),CD8 升高,CD4 /CD8 各组变化不明显. 结论:HC所致"阴虚"证外周血T细胞亚群无明显下降; IL-1β,TNF-α升高与HC所致"阴虚"证有关,YC可明显降低IL-1β,TNF-α水平,可能是其预防和治疗糖皮质激素副作用的机理之一.     

外源性核酸对肝纤维化大鼠血浆中去甲肾上腺素和多巴胺的影响

目的 探讨外源性核酸对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型血浆中去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)的影响及其抗肝纤维化的可能机制.方法 将30只Wistar大鼠随机分为正常组、肝纤维化模型组、外源性核酸处理组.苏木精-伊红染色,光镜下观察肝组织病理学改变,Van Gieson(VG)染色分析肝纤维化程度,同时用高压液相色谱-电化学(HPLC-ECD)法检测大鼠血浆中NE和DA水平.结果 核酸组大鼠肝组织病理学改变较模型组有明显改善.模型组大鼠血浆DA含量[(0.39±0.19) ng/ml]显著低于正常组[(0.92±0.53) ng/ml](P<0.05),核酸组大鼠血浆DA的含量[(0.87±0.55) ng/ml]高于模型组(P<0.05).大鼠血浆NE含量模型组[(1.13±0.77) ng/ml]和核酸组[(1.38±0.71) ng/ml]低于正常组[(4.38±2.77) ng/ml] (P<0.05),核酸组与模型组NE的含量无明显差异(P>0.05).结论 外源性核酸对慢性肝损伤有一定的保护作用,可显著改善CCl4诱导的大鼠肝纤维化损伤.其可能的作用机制之一是通过调节肝纤维化大鼠血浆中NE的前体物质DA的含量,增加了交感神经的活性而起到抗纤维化的作用.     

阴火刍探

阴火理论源于李东垣,但对于阴火的认识,至今尚未有定论。关于阴火学说的起源,有阴虚内热说和壮火散气说两种。关于阴火学说的内涵,有阴火即心火说、阴火即肾火说、阴火即脾胃火说、阴火即脉中伏火说、阴火即三焦火说、阴火即相火说几种观点。心火,有心阴虚火旺、离位之心火、代君之火之分;肾火,有肾阴虚火旺、肾中真阳外越、肾气郁火之分;脾胃之火,有脾胃郁火、血虚之火、脾胃虚火之分;脉中伏火,有心火煎熬血脉、气郁血脉、火邪下陷血脉、卫气下陷血脉之分;三焦火,有三焦气郁化火、三焦流行之火之分;相火,有妄行相火、离位相火、病理相火之分。     

试论脾阴

从概念、生理功能、病理及治疗4个方面对脾阴进行了浅析,认为脾阴是客观存在的,而且它是对脾脏的濡养、成形和制约阳热等生理功能的一个概称,其病理状态主要表现为脾阴虚证,并从病因病机、临床表现和甘淡实脾的治疗法则3个方面对脾阴虚证进行了讨论,冀使脾阴学说进一步完善和提高.     

从"气分阴阳"辨析阴虚发热证

从"气分阴阳"理论辨析阴虚发热证,并讨论相关问题.纠正把阴虚发热阐释为"血虚发热"、"津液虚发热"的不正确说法,分析其实质,从而立足于阴阳二气的作用关系理论,规范化阴虚发热证的病机,并提出其实际意义.力图抛砖引玉,巩固"气分阴阳"理论在中医学理论与临床应用中的指导作用.     

略论阴黄理论的形成

通过对古代文献的整理，提出阴黄理论的形成发展经历了3个历史阶段。汉代以前虽无阴黄之名，但《黄帝内经》、《伤寒论》论黄疸都隐含了阴黄的一面，属阴黄理论奠基阶段；隋唐及宋代，虽有阴黄病名，但对其含义所述不一，为阴黄理论的提出、探索阶段；宋代以后至明清，阴黄理论则渐趋完善，进入成熟阶段。     

中医胃阴理论探微

胃阴是胃阳功能活动的物质基础,二者相辅相承,共同完成胃主受纳、腐熟、通降的生理功能。随着慢性胃炎、糖尿病等疾病发病率的升高,中医胃阴理论被更加广泛的应用于临床。进一步探讨胃阴理论,对于指导临床实践,具有重要意义。     

“阴中求阳 阳中求阴”探析

"阴中求阳"是在补阳药中佐以滋阴药,目的是补阴生阳,适用于阳损及阴。"阳中求阴"是在补阴药中,佐以温阳药,适用于阴损及阳。     

中医胃阴理论探微

胃阴是胃阳功能活动的物质基础,二者相辅相承,共同完成胃主受纳、腐熟、通降的生理功能。随着慢性胃炎、糖尿病等疾病发病率的升高,中医胃阴理论被更加广泛的应用于临床。进一步探讨胃阴理论,对于指导临床实践,具有重要意义。     

试论阴虚血瘀及滋阴活血法

从《内经》理论出发,通过分析津液与血液的关系,瘀血形成的机理,研究阴虚与血瘀的内在联系,发现阴虚和血瘀可互为因果,阴虚血瘀证治疗上采用滋阴活血法,综合运用滋阴药和活血化瘀药,可以达到滋阴活血,阻断微观血瘀证和阴虚证内在联系的目的。     

阴阳与二阴二阳、三阴三阳关系浅析

阴阳是对立统一的思维法则,更是中医理论体系的核心概念。二阴二阳和三阴三阳同样根植于阴阳,来自于同一生命本源—气。二阴二阳是根据"一分为二"在阴阳的基础上分出的四象,适合于诠释自然界的客观事物,应用于传统文化的各个领域;而三阴三阳,则是根据"一分为三"演化出来的对阴阳更加精细的量化,更适合于诠释人体生理病理的变化,符合中医学理论体系的需要。无论"一分为二"还是"一分为三",都只是一种量化阴阳的方式,构建出天人合一的整体观,以阐述人体复杂的生理病理现象。阴阳的二分和三分要在理论和实践中结合起来才能更好地指导对疾病的诊断和治疗,而"阴阳"根本上的对立统一属性是永远不变的,以不变求万变,方是自然之道。