埃他卡林对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织HIF-1α mRNA和蛋白表达的影响

目的 研究新型ATP敏感性钾通道开放剂(KATP CO)埃他卡林(IPT)对大鼠肺组织中低氧诱导凶子1α(HIF-1α)表达的影响.方法 36只清洁级SD大鼠随机分成对照组、低氧性肺动脉高压(HPH)模型组和IPT处理组,每组12只.HPH模型组及IPT处理组于(10.0±0.5)%氧浓度的常压低氧舱内饲养,每天8 h,每周6 d,共4周.IPT处理组给予IPT 1.5 mg·kg-1·d-1灌胃;对照组及HPH模型组给予0.9%氯化钠5 ml·kg-1·d-1灌胃.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织HIF-1α mRNA表达,用Western blot方法检测肺组织HIF-1α白的表达.结果 HPH模型组大鼠肺动脉平均压、右室/(左室+室间隔)重量比和HIF-1α mRNA和蛋白表达均高于对照组和IPT处理组(P＜0.01).IPT处理组与对照组的HIF-1α mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IPT降低肺动脉压可能与抑制HPH大鼠肺组织中的HIT-1α表达有关.     

乙酰唑胺对PC12细胞缺氧损伤的保护作用及其机制研究

目的研究乙酰唑胺对缺氧PC12细胞的保护作用及其机制。方法用三气培养箱建立缺氧模型培养PC12细胞,筛选乙酰唑胺作用于缺氧PC12细胞的最佳浓度,观察细胞形态,测定细胞活力、LDH的含量、细胞周期,实时荧光定量PCR法检测HIF-1α及Caspase-3 mRNA的表达。结果与缺氧模型组相比,乙酰唑胺可明显提高缺氧PC12细胞存活率、降低培养基中LDH的含量,降低G1期、提高S期细胞百分比、提高HIF-1αmRNA的表达、降低Caspase-3 mRNA的表达水平。结论乙酰唑胺具有保护PC12细胞缺氧损伤的作用。     

葛根素对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠肺血管低氧诱导因子1α的影响

目的：探讨葛根素降低大鼠慢性低氧(O_2)高二氧化碳(CO_2)性肺动脉高压的作用是否与抑制肺小动脉低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达有关。方法：清洁级SD雄性大鼠30只随机分为正常对照组(NC)、低O_2高CO_24 wk组(HH)、低O_2高CO_2加葛根素组(HP)。免疫组织化学法检测肺细小动脉HIF-1α蛋白的表达,核酸原位杂交法检测肺细小动脉HIF-1αmRNA表达。结果：HH组平均肺动脉压,右室/(左室+室间隔)重量比高于NC组(P＜0.01),HP组低于HH组(P＜0.01)。HH组血浆一氧化氮含量低于NC组(P＜0.01),HP组高于HH组(P＜0.01)。HH组肺细小动脉HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达高于NC组(P＜0.01),HP组肺细小动脉HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达低于HH组(P＜0.05)。结论：葛根素减轻大鼠慢性低O_2高CO_2性肺动脉高压的作用可能与其抑制肺血管HIF-1α表达有关。     

复原胶囊对脓毒症大鼠肾组织HIF-1α表达的影响

目的:研究复原胶囊对脓毒症大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术、模型及复原胶囊高、低剂量组,每组4只。复原胶囊组大鼠连续4d灌胃后行盲肠结扎穿孔(CLP)手术。各组复制模型后分别于3、6、12、24h行RT-PCR检测肾组织HIF-1α的表达;酶联免疫吸附法检测血清白介素-6(IL-6)水平;心脏取血检测血清肾功能;HE染色镜下观察肾组织病理学变化。结果:与假手术组比较,模型组HIF-1αmRNA表达3h时逐渐升高,24h达高峰(P<0.05);与模型组比较,复原胶囊高、低剂量组6、12、24h时HIF-1αmRNA表达显著降低(P<0.05);复原胶囊高、低剂量组BUN显著降低(P<0.05);HE染色显示复原胶囊组损伤较轻。结论:复原胶囊对脓毒症大鼠肾损伤的保护作用可能与调控HIF-1α的表达有关。     

黄芪多糖对慢性阻塞性肺病大鼠肺组织HO-1表达的影响

目的 探讨黄芪多糖(APS)对慢性阻塞性肺病(COPD)模型鼠肺组织中血红素氧合酶(HO)1表达的影响.方法 60只大鼠随机均分成5组,每组12只:A组为COPD模型,B1、B2、B3组分别用APS 10、20、40 mg/kg灌胃,另设C组为正常对照.采用香烟熏吸加气管内注人脂多糖(LPS)法建立大鼠COPD模型.RT-PCR与Western blot分别检测大鼠在APS干预前后肺组织HO-1 mRNA及蛋白的表达水平.结果 给药后1、15、30 d,A组大鼠肺组织HO-1 mRNA及蛋白水平高于C组(P<0.05).APS干预30 d后,B3组HO-1 mRNA及蛋白水平较A组明显增加(P<0.05).结论 在COPD模型鼠肺组织中HO-1表达增加;APS可以通过HO-1介导的抗氧化作用来改善COPD大鼠肺组织损伤程度.     

HIF-1α在七氟烷预处理减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤中的作用

目的 研究低氧诱导因子1α(HIF-1α)在七氟烷预处理减轻离体大鼠心脏缺血再灌注(I-R)损伤中的作用.方法 84只雄性SD大鼠随机均分为七组:假手术组(Sham组)、I-R组、七氟烷预处理组(S组)、七氟烷预处理十二甲氧乙二酰甘氨酸(DMOG)组(S+D组)、七氟烷预处理+3-(5 '-羟基甲基-2’-呋喃基)-1-苯基吲哚(YC-1)组(S+Y组)、DMOG组(D组)和YC-1组(Y组).应用Langendorff离体心脏灌流装置建立大鼠心肌I-R损伤模型,连续测定心功能指标,并取心肌测HIF-1α及半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平及HIF-1α目的基因的表达水平.结果 与I-R组相比,S组、S+D组和S+Y组I-R损伤心功能的各项指标明显改善(P＜0.05),HIF-1α表达水平显著升高(P＜0.05),Caspase-3蛋白表达水平显著下降(P＜0.05).结论 HIF-1α促进七氟烷预处理对离体大鼠心脏I-R损伤的保护作用.     

基于HIF-1α/NLRP3信号通路探讨大补肺汤对高原低氧大鼠急性肺损伤的干预作用

摘要：目的：探讨大补肺汤通过调控HIF-1α/NLRP3信号通路及相关分子的表达,从而对高原低氧大鼠急性肺损伤的干预作用。方法：60只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物组、大补肺汤低、中、高剂量组,每组10只。适应饲养3 d后给药,空白组和模型组大鼠灌胃给予等量生理盐水,大补肺汤低、中、高剂量组分别连续灌胃14 d。阳性药物组给予地塞米松,腹腔注射,进舱前连续给药3 d。除空白组外,第15 d起各组大鼠于实验动物低压模拟舱中进行低氧暴露,连续3 d。第18天实验结束后处死动物,检测大鼠肺组织湿干重比（wet to dry ratio,W/D）;HE染色法观察大鼠肺组织形态;ELISA法检测血清中IL-1β、IL-18的水平;蛋白质免疫印迹（Western blot,WB）与RT-qPCR法分别检测大鼠肺组织中HIF-1α、NLRP3、GSDMD、caspase-1蛋白和mRNA表达。结果：W/D值结果表明与空白组相比,模型组大鼠肺湿干重比显著升高（P < 0.01）;与模型组相比,阳性药物组及大补肺汤高、中、低剂量组大鼠肺湿干重比显著降低（P < 0.01或P < 0.05）。HE结果显示与空白组相比,模型组大鼠肺组织可见肺泡间隔增厚,肺间质充血、水肿,炎性细胞浸润,肺泡腔内可见少量渗出;与模型组相比,各给药组肺泡壁增厚减轻,肺间质充血、水肿及炎性细胞浸润明显减轻。ELISA结果显示大鼠血清中IL-1β、IL-18水平在模型组中均显著高于空白组（P < 0.05,P < 0.01）,与模型组相比,各药物组大鼠血清中IL-1β、IL-18水平均显著下降（P < 0.05）。此外,WB与RT-qPCR结果显示与空白组相比,模型组大鼠肺组织HIF-1α、NLRP3、GSDMD和caspase-1蛋白及mRNA相对表达显著升高（P < 0.01）;与模型组相比,大鼠肺组织药物组HIF-1α、NLRP3、GSDMD和caspase-1蛋白及mRNA相对表达显著降低（P < 0.05或P < 0.01）,以阳性药物组及大补肺汤高剂量组作用效果最显著。结论：大补肺汤可调控HIF-1α/NLRP3信号通路,抑制细胞焦亡、减轻炎症反应,对高原低氧大鼠急性肺损伤具有一定的保护作用。     

桂枝茯苓丸对子宫内膜异位症模型大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的采用皮下移植自体子宫内膜组织的方法建立大鼠子宫内膜异位症模型,观察桂枝茯苓丸对大鼠子宫内膜异位症模型血管内皮生长因子表达的影响。方法 50只大鼠随机分为空白对照、模型组、米非司酮组、桂枝茯苓丸A、B组,其中模型组、米非司酮组及桂枝茯苓丸A、B组均制作大鼠子宫内膜异位症模型。术后桂枝茯苓丸A、B组用桂枝茯苓丸灌胃治疗21 d,米非司酮组灌阳性药米非司酮,空白对照组及模型组灌等体积生理盐水。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定大鼠子宫内膜组织VEGF及mRNA、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及HIF-1 mRNA表达,测定血清雌二醇(E2)及白介素-8(IL-8)水平,免疫组织化学法检测细胞增殖核抗原(PCNA)、雌激素受体(ERα)。结果桂枝茯苓丸A、B组VEGF及mRNA、HIF-1α及HIF-1 mRNA在子宫内膜组织上表达下调,E2、IL-8水平及PCNA、ERα表达量均明显降低,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论桂枝茯苓丸可抑制模型大鼠异位内膜的生长与血管生成,减轻子宫内膜异位症血管内皮炎症反应,对实验性大鼠子宫内膜异位症有治疗作用。     

金丝桃苷改善脓毒症模型大鼠心肌损伤作用机制研究

目的探讨金丝桃苷经缺氧诱导因子-1α/血红素加氧酶-1(HIF-1α/HO-1)信号通路对脓毒症模型大鼠心肌细胞的改善作用。方法将120只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,等体积生理盐水)、模型组(B组,等体积生理盐水)、阳性药对照组(C组,地塞米松10 mg/kg)和金丝桃苷低、中、高剂量组(D_1组、D_2组、D_3组,10,20,40 mg/kg),各20只。腹腔注射10%水合氯醛(0.3 mL/kg)建立脓毒症大鼠模型。各组腹腔注射相应药物,给药1次,12 h后处死动物。检测大鼠的血流动力学指标;以酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中心肌肌钙蛋白I(cTnI)、脑钠肽(BNP)和心脏组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平;以苏木精-伊红(HE)染色切片观察心脏结构病理变化;以免疫组化染色法测定大鼠心脏HIF-1α和HO-1蛋白表达水平。结果与A组比较,B组左心室收缩压(LVSP)、左室压最大升高率(+dp/dt_max)、左室压最大降低率(-dp/dt_max)、HIF-1α和HO-1水平均显著降低,左心室舒张末压(LVEDP)、cTnI、BNP、TNF-α和IL-1β水平均显著升高(P<0.05);与B组比较,C组、D_1组、D_2组、D_3组的LVSP,+dp/dt_max,-dp/dt_max,HIF-1α和HO-1水平均显著升高,LVEDP,cTnI,BNP,TNF-α和IL-1β的水平均显著降低,且呈剂量依赖性(P <0.05)。与C组比较,D_1组、D_2组LVSP,+dp/dt_max,-dp/dt_max均显著降低,LVEDP,cTnI,BNP,TNF-α,IL-1β,HIF-1α,HO-1水平均显著升高(P <0.05),D_3组各指标无显著差异(P>0.05)。A组大鼠心脏组织结构无明显病理变化;B组大鼠心肌细胞边界模糊,可见大量炎性细胞浸润和坏死区域;D_1组、D_2组、D_3组大鼠心肌炎性细胞浸润数量减少,细胞结构及边界较B组明显好转。结论金丝桃苷对脓毒症模型大鼠的心肌损伤具有一定改善作用,其作用机制可能与金丝桃苷通过诱导HIF-1α/HO-1信号通路,激活脓毒症大鼠HIF-1α和HO-1蛋白的表达有关。     

二甲基乙二酰甘氨酸对大鼠肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨二甲基乙二酰甘氨酸(DMOG)对大鼠肺缺血-再灌注损伤(IRI)的保护作用。方法成年SD大鼠24只均分为三组。采用阻断左肺门60min、再灌注120min制备肺IRI模型(IRI组)。DMOG组予腹腔注射DMOG 60mg/kg后制备肺IRI模型,假手术组(S组)仅游离左肺门,但不阻断。处死大鼠,计算肺组织肺湿干重比(W/D),分光光度法检测肺组织中丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平,RT-PCR和Western blot检测肺组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA和蛋白表达量。结果与S组相比,IRI组肺组织W/D、MDA、MPO及TNF-α、IL-1β、IL-6、HIF-1α蛋白相对表达量均升高(P<0.05),而SOD降低(P<0.05)。与IRI组相比,DMOG组W/D、MDA、MPO及TNF-α、IL-1β、IL-6水平均降低(P<0.05),而SOD、HIF-1α蛋白相对表达量均升高(P<0.05)。结论 DMOG预处理可以减轻大鼠早期肺IRI,其调控作用主要发生在HIF-1α基因转录后的蛋白水平。     

人参皂苷Rg1对大鼠阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征引起的肺损伤及Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的探究人参皂苷Rg1对大鼠阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)引起的肺损伤及Nrf2/HO-1信号通路的影响及机制。方法60只SD大鼠分为对照组(control组)、慢性间歇性缺氧组(CIH组)、人参皂苷Rg1低剂量组(CIH+GRg1-L)和人参皂苷Rg1高剂量组(CIH+GRg1-H),每组15只。使用低氧舱建立CIH模型,并对CIH模型进行鉴定;动物肺功能分析系统测定各组大鼠的肺功能;试剂盒检测各组大鼠肺组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;ELISA检测各组大鼠肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的含量;HE染色观察各组大鼠肺组织的病理变化;qRT-PCR和Western blot检测各组大鼠肺组织中环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、核转录因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)的表达。结果造模组大鼠的生理特征接近OSAHS病理生理特点,因此CIH动物模型建立成功。CIH组大鼠的深吸气量(IC)、最大呼气流速(PEF)、第0.3秒用力呼气后的容积(FEV0.3)及每分钟呼气量(VE)明显降低(P<0.01),而人参皂苷Rg1使大鼠的IC、PEF、FEV0.3及VE升高(P<0.01);CIH组大鼠肺组织中MDA的含量明显增加(P<0.01),SOD的活性和GSH的含量明显降低(P<0.001,P<0.01),TNF-α、IL-1β和IL-6的含量显著增加(P<0.01),人参皂苷Rg1使大鼠肺组织中MDA的含量降低(P<0.05),SOD活性和GSH含量升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6的含量降低(P<0.05);CIH组大鼠肺组织严重受损,肺泡中可见炎性细胞浸润,而人参皂苷Rg1使大鼠肺组织受损减轻,炎性细胞浸润减少;CIH组大鼠肺组织中COX-2、iNOS、Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.001),人参皂苷Rg1使大鼠肺组织中COX-2、iNOS、Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达水平下调(P<0.05)。结论人参皂苷Rg1能改善大鼠肺功能,减轻氧化应激反应和炎症因子的表达,下调Nrf2和HO-1蛋白的表达。     

Effect and possible mechanism of desferrioxamine on microvascular formation of ischemic myocardium in rats

目的 探讨去铁胺(DFO)对大鼠缺血心肌微血管形成的作用及可能机制.方法 48只SD大鼠随机均分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、结扎组(C组)和DFO 200mg/kg组(D组).术后7d,处死大鼠,免疫组化法检测微血管密度(MVD)及低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达,RT-FCR检测HIF-1α mRNA表达.结果 与A、B组相比,C、D组MVD、HIF-1α蛋白和mRNA表达均增加(P＜0.05或P＜0.01),其中D组各指标增加更为显著(P＜0.01).结论 DFO 可以促进大鼠缺血心肌组织微血管形成;其作用机制可能与上调HIF-1α的表达有关.     

去铁胺对大鼠缺血心肌微血管形成的影响及可能机制

目的探讨去铁胺(DFO)对大鼠缺血心肌微血管形成的作用及可能机制。方法 48只SD大鼠随机均分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、结扎组(C组)和DFO 200mg/kg组(D组)。术后7d,处死大鼠,免疫组化法检测微血管密度(MVD)及低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达,RT-PCR检测HIF-1αmRNA表达。结果与A、B组相比,C、D组MVD、HIF-1α蛋白和mRNA表达均增加(P<0.05或P<0.01),其中D组各指标增加更为显著(P<0.01)。结论 DFO可以促进大鼠缺血心肌组织微血管形成;其作用机制可能与上调HIF-1α的表达有关。     

姜黄素对急性肺栓塞大鼠氧化损伤及血红素加氧酶-1表达的影响

目的观察姜黄素对急性肺栓塞大鼠氧化损伤的作用及对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。方法大鼠分为假手术组、模型组、姜黄素低、高剂量(50 mg/kg、150 mg/kg)组。制备急性自体血栓肺栓塞模型。进行血气分析。检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量;HE染色观察肺组织病理改变;RT-PCR方法和Western blot法检测肺组织HO-1的表达。结果与模型组比较,姜黄素低、高剂量组可不同程度的升高PO2、PCO2水平,升高SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA含量,减轻肺组织的氧化病理损伤。姜黄素低、高剂量组均能显著升高肺组织HO-1表达。结论姜黄素对急性肺栓塞大鼠有抗氧化损伤作用,并能上调肺组织HO-1表达。     

Effect of curcumin on oxidative injury induced by acute pulmonary embolism in rats and its influence on the expression of heme oxygenase-1

目的 观察姜黄素对急性肺栓塞大鼠氧化损伤的作用及对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响.方法 大鼠分为假手术组、模型组、姜黄素低、高剂量(50 mg/kg、150 mg/kg)组.制备急性自体血栓肺栓塞模型.进行血气分析.检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量;HE染色观察肺组织病理改变;RT-PCR方法和Western blot法检测肺组织HO-1的表达.结果 与模型组比较,姜黄素低、高剂量组可不同程度的升高PO2、PCO2水平,升高SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA含量,减轻肺组织的氧化病理损伤.姜黄素低、高剂量组均能显著升高肺组织HO-1表达.结论 姜黄素对急性肺栓塞大鼠有抗氧化损伤作用,并能上调肺组织HO-1表达.     

链霉素及H7对机械牵张离体心肌HIF-1α、VEGF的影响及机制探讨

目的研究链霉素及H7对机械牵张大鼠心肌组织低氧诱导分子-1α和血管内皮细胞生长因子表达的影响,并探讨二者在其中的作用机制。方法采用大鼠离体灌流心脏模型,膨胀左心室30min,RT-PCR法检测左室心肌细胞HIF-1α、VEGF mRNA的表达,免疫组化观察二者在心肌细胞中定位,Western blot检测HIF-1α蛋白的表达,利用链霉素作为牵张敏感离子通道(SACs)阻断剂研究SACs和PKC抑制剂H7在其中的可能作用。结果与不牵张组HIF-1α和VEGF mRNA无表达的比较,牵张可以明显增加HIF-1α和VEGF mRNA的表达(P<0·05或P<0·01);而链霉素、H7可以明显减少HIF-1α和VEGF mRNA的表达(P<0·05);但是二者不能完全抑制急性牵张刺激激活的HIF-1α和VEGF mRNA水平升高(P<0·05),HIF-1α和VEGF在胞质和胞核中均有表达,并检测到HIF-1α蛋白表达。结论链霉素、H7对膨胀左室致HIF-1α、VEGF表达有明显抑制作用,提示心室膨胀经SACs-PKC-激活胞内信号诱导HIF-1α、VEGF表达。同时链霉素并不能完全抑制HIF-1α、VEGF表达,提示膨胀心室致HIF-1α、VEGF表达进而引起心室肥厚尚有其他传导途径,仍需进一步研究。     

不同模式间歇低氧对大鼠血糖、血清胰岛素及胰腺组织Caspase-3活性及其表达的影响

目的 探讨两种模式间歇低氧对大鼠血糖、胰岛素及胰腺组织Caspase-3活性及其表达的影响。方法 将63只SD大鼠随机分为常氧对照组、间歇低氧1组(高频轻度)、间歇低氧2组(低频重度),3组又各自随机分为暴露1、2、4周组,每组7只。3个暴露4周组分别于0周及暴露1、2、4周检测空腹血糖;3组大鼠分别于暴露1、2、4周检测胰岛素水平,胰腺组织Caspase-3活性及其mRNA和蛋白表达水平。结果 间歇低氧1组暴露4周组血糖从暴露2周开始升高,暴露4周与暴露2周比较差异无统计学意义(P>0.05);间歇低氧2组暴露4周组血糖从暴露1周即出现升高,随着暴露时间的延长进行性增高,暴露4周较间歇低氧1组暴露4周增高(P<0.05)。间歇低氧1组血清胰岛素水平呈缓慢上升趋势,暴露4周高于常氧对照组(P<0.01);间歇低氧2组血清胰岛素从暴露1周即开始增高,暴露2周达高峰,暴露4周下降至常氧对照组水平。间歇低氧2组胰腺组织Caspase-3活性及其mRNA和蛋白表达水平随暴露时间的延长呈进行性增高(P<0.05,P<0.01)。结论 低频重度间歇低氧模式对胰腺组织的损害较高频轻度间歇低氧模式严重,且呈进行性加重。     

姜黄素预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时血红素加氧酶-1的影响

目的:探讨姜黄素预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时血红素加氧酶-1(HO-1)的影响。方法:建立大鼠肢体缺血2h再灌注3h肺损伤模型。60只大鼠随机等分为5组:假手术组(Sham)、姜黄素组(Cur)、缺血再灌注组(I/R)、姜黄素+缺血再灌注组(Cur-I/R)和锌原卟啉IX(ZnPP)+姜黄素+缺血再灌注组(ZnPP-Cur-I/R)。ZnPP-Cur-I/R组于缺血前24h经腹腔注射ZnPP 20mg/kg,Cur组、Cur-I/R组和ZnPP-Cur-I/R组分别于缺血前2h经腹腔注射姜黄素200mg/kg,其余各组给予等容量生理盐水。除Sham组和Cur组外,其余各组行肢体缺血再灌注。观察肺组织病理学变化,测定肺组织损伤评分、湿/干重比(W/D)、中性粒细胞(PMN)数目和HO-1mRNA及其蛋白表达的情况。结果:与Sham组比较,I/R组肺组织损伤较重,肺损伤评分、W/D及PMN计数升高,HO-1mRNA及其蛋白表达上调(P<0.01);与I/R组比较,Cur-I/R组肺组织损伤减轻,肺损伤评分、W/D及PMN计数降低,HO-1mRNA及其蛋白表达上调(P<0.01);与Cur-I/R组比较,ZnPP-Cur-I/R组肺组织损伤加重,肺损伤评分、W/D及PMN计数升高,HO-1mRNA及其蛋白表达下调(P<0.01)。结论:姜黄素预处理可通过上调肺组织HO-1的表达减轻大鼠肢体缺血再灌注肺损伤。     

氯沙坦对进展性肾炎模型大鼠肾小管-间质细胞低氧诱导因子及结缔组织生长因子的影响研究

目的:探讨氯沙坦对进展性肾炎模型大鼠肾小管-间质细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响及其肾保护作用机制。方法:将大鼠行右肾切除并注射鼠单克隆IgG(OX-7)抗Thy1.1抗体2次建立进展性肾炎大鼠模型,建模成功后取部分大鼠作为模型组,将剩余大鼠再分为对照组和氯沙坦高、低剂量组(80、20mg·kg-1·d-1);另取大鼠设立假手术组,每组5只,各组灌胃给予相应药物连续4周,观察各组大鼠24h尿蛋白、血肌酐、HIF-1α mRNA、CTGF mRNA水平及肾组织病理变化。结果:与假手术组比较,模型组血肌酐、24h尿蛋白和肾间质面积、HIF-1αmRNA、CTGF mRNA表达均明显增强(P<0.01或P<0.001);与模型组比较,氯沙坦高、低剂量组血肌酐、CTGF mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01),但在24h尿蛋白、肾间质面积比值、HIF-1αmRNA水平方面氯沙坦高剂量组均明显降低(P<0.01),低剂量组无明显变化。病理观察发现,模型组大鼠肾小管-间质炎症细胞浸润并出现纤维化,氯沙坦高、低剂量组肾小管-间质的损伤较对照组均有改善。结论:氯沙坦可能通过降低进展性肾炎模型大鼠HIF-1α mRNA和CTGF mRNA表达,减轻肾小管-间质纤维化而发挥肾脏保护作用。     

黑骨藤追风活络胶囊对类风湿关节炎大鼠PI3K/AKT/HIF-1α轴的影响

目的探讨黑骨藤追风活络胶囊对类风湿关节炎大鼠PI3K/AKT/HIF-1α轴的影响。方法本次试验选取雄性SD大鼠若干只,并随机分为空白组和造模组,其中造模成功的SD大鼠为造模组,将该组实验对象分为模型组、黑骨藤追风活络胶囊组以及黑骨藤追风活络胶囊联合PI3K抑制剂给药组,每组SD大鼠有8只。空白组大鼠按照其身体重量每日灌胃生理盐水,模型组、胶囊组、联合给药组每日灌胃给药羧甲基纤维素钠配制的混悬液,持续5周。对比对类风湿关节炎大鼠PI3K/AKT/HIF-1α轴的影响。结果治疗后1、2、3、4、5周,黑骨藤追风活络胶囊组、黑骨藤追风活络胶囊联合PI3K抑制剂给药组的足踢趾肿胀程度均低于本组治疗前,且均低于模型组,差异均具有统计学意义(P<0.05),但仍不及空白组。模型组大鼠的脾脏Caspase-1、Caspase-3、Cytochrome-C蛋白表达分别为(0.365±0.108)、(0.226±0.085)、(0.157±0.035)显著高于空白组的(0.049±0.032)、(0.029±0.033)、(0.079±0.054),差异具有统计学意义(P<0.05)。但是黑骨藤追风活络胶囊组和黑骨藤追风活络胶囊联合PI3K抑制剂给药组大鼠的脾脏Caspase-1、Caspase-3、Cytochrome-C蛋白表达低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠的滑膜组织p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、Bax、Bcl-2蛋白表达显著高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05)。黑骨藤追风活络胶囊组及黑骨藤追风活络胶囊联合PI3K抑制剂给药组大鼠的滑膜组织p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、Bcl-2蛋白表达明显低于模型组,而Bax蛋白表达明显高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论黑骨藤追风活络胶囊对类风湿关节炎中PI3K/AKT/HIF-1α信号通路的表达,引发多种细胞和蛋白调节。