酶保护剂对提高酶稳定性的作用

目的 观察酶保护剂对提高酶稳定性的作用。方法 研制出一种酶保护剂,并在酶溶液中加入酶保护剂,在一年中,对丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)和肌酸激酶(CK)的活性进行长期监测。结果 加入保护剂后,几种酶在室温下可以稳定2 w,在-10℃±5℃条件下可以保持稳定达一年。结论 酶保护剂可以提高ALT、AST、ALP、CK的稳定性和保存时间。保护剂对酶类的测定没有影响,所以加入酶保护剂的方法可以用来保存酶提取物和制备生化酶类质控物。     

热稳定CHOD—CE—POD三合酶测定血清胆固醇试剂的研制与应用

用海藻糖作生化工具酶的常温干燥稳定剂,研制出热稳定良好的ＣＨＯＤ－ＣＥ－ＰＯＤ三合酶试剂,用于血清胆固醇的测定。此酶试剂热稳定性高,分别在７０℃、５５℃、３７℃三种温度下放４０ｄ,１５０ｄ、２１０ｄ后再测酶活,三种酶的活性均保持在９０％以上。酶试剂的线性范围为０￣１５．６７ｍｍｏｌ／Ｌ,批内ＣＶ〈１．５％,日间ＣＶ〈３．１％,回收率９７．８％￣１００．５％,与中生公司酶法试剂盒（Ｘ）相关显著,ｒ＝     

过氧化氢酶与过氧化物酶

过氧化氢酶与过氧化物酶朱忠勇（南京军区福州总医院，福州３５００２５）过氧化氢酶和过氧化物酶，是两种广泛存在于动植物体内、含血红素（铁卟啉）辅基的氧化还原酶。由于它们作用的底物都有过氧化氢，所以在一些医学检验杂志或教科书上，往往将它们混淆，甚至对其作用...     

评价三种检测AmpC酶的方法及临床应用

AmpC酶是一类既可由染色体介导 ,又可由质粒介导的头孢菌素酶 ,它与质粒介导的超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)是导致革兰阴性杆菌耐药的最重要的两类酶。ESBLs的检测方法有多种[1] ,并日趋成熟 ,而检测AmpC酶缺乏足够的流行病学资料 ,尚无统一标准的方法。本研究采用酶提取物三维试验、头孢西丁三相试验及氯唑西林双纸片协同法同时检测阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌的AmpC酶 ,并加以比较 ,以找出一种适合临床常规应用的检测AmpC酶的方法。同时了解本院临床分离的菌株AmpC酶的流行情况。一、材料与方法1.菌株 :75株阴沟肠杆菌和 5 5株鲍曼不…     

酶电极法与酶比色法测定血糖和尿素的比较

目的 评价酶电极法和酶比色测定血糖、尿素的可靠性和临床应用价值。方法 在CX3分析仪上用酶电极法测定血糖和尿素，在HITACHI 7060分析仪上用氧化酶法和已糖激酶法测定血糖及酶偶联法测定尿素。进行方法学比较。结果 酶电极法测定血糖、尿素的线性、重复性、准确度均优于酶比色法；酶电极法测定血糖、尿素的线性范围大于酶比色法；酶电极法、酶比色法的抗干扰能力差异不大；几种方法测定血糖、尿素的结果相关性好。结论 酶电极法是一种准确、快速的检测方法，适合临床快速检验；酶比色法稳定，干扰因素少，适合常规批量检测。     

NAG,GAL在高血压病血压波动期的变化

NAG和GAL是目前诊断肾功能衰竭最敏感的指标。高血压病伴肾功能损害已肯定,高血压病血压波动期NAG,GAL的变化未见报道。作者对11例高血压病Ⅰ期患者于血压波动期,每日测定NAG、GAL,并与高血压病血压稳定期相对照,得出结论:高血压病Ⅰ期。虽然没有肾功能损害的生化指标,但肾血流量的变化对肾小管有损害,NAG和GAL可作为早期高血压病肾损害的监测指标。     

酶校准品在血清酶测定结果标准化中的应用

目的研究酶校准品用于校准不同的“仪器 /试剂”测定系统时 ,能否增加各系统间血清酶测定结果的可比性。方法在日立 7170 A和 CX9全自动生化分析仪上用 4种不同的试剂分别测定 15 0份不同浓度分布的新鲜血清中的丙氨酸转氨酶 (AL T) ,天门冬氨酸转氨酶 (AST) ,碱性磷酸酶〔(AL P) ,10 0份〕,肌酸激酶 (CK) ,γ-谷氨酰转肽酶 (GGT) ,乳酸脱氢酶 (L D)等 6种酶的活性。同 1份标本用 4种不同的“仪器 /试剂”测定系统进行校准前和校准后测定 ,比较各测定系统测定前后的均值。结果发现不同的“仪器 /试剂”系统间的测定结果存在一定差异 (各系统间均值的 CV值≥ 7.0 % ,其中 AL P为 2 7.0 % ,GGT为 17.4% ) ,用统一的酶校准品校准后 ,各系统间测定结果的差异明显减小 (除 AL P和 GGT的 CV值分别为 6 .6 %和 5 .1%外 ,其余各项目的 CV值均 <5 % )。结论统一的某些酶校准品能增加不同的测定系统间结果的可比性。     

60例糖尿病患者8种血清酶测定分析

为探讨糖尿病患者血清乳酸脱氢酶(LD)、肌酸磷酸激酶(CK)、a—羟丁酸脱氢酶(HBH)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、谷氨酰转肽酶(GGT)、淀粉酶(AMS)的变化及其与血糖的关系,我们对50例正常人及60例糖尿病患者的8种血清酶进行了对照分析。1 对象与方法1.1 对象1.1.1 对照组:健康体检者50例,其中男20例,女30例,平均年龄37.7岁(19～60岁)。1.1.2 糖尿病组:根据WHO标准确诊的糖尿病患者60例,男31例,女29例,平均年龄55.9岁(17～94岁)。其中糖尿病合并急性并发症组10例(高渗性昏迷4例,酮症酸中毒4例,急性肺部感染1例,泌尿道感     

磁性脂质体固酶

综述了磁性脂质体固酶的研究现状，介绍了比利时这方面的实验研究工作，讨论了有关技术关键，并说明了磁性脂质体固酶的发展前景。     

地高辛间接酶标方法的研究

由于辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）上可用于键合的氨基数量极少，因而用ＨＲＰ直接标记小分子地高辛（ＤＩＧ），标记率很低，但当其用人血清白蛋白（ＨＳＡ）修饰后，再间接标记ＤＩＧ，可使酶结合物的产率和免疫反就生分别上８．７％和９．３％提高至８４．２％和９２．０％。酶结合物中的ＤＩＧ与ＨＲＰ的摩尔比率也由约０．５提高至约３．６。这种由间接标记得到的酶结合物可很好地用于ＤＩＧ的ＥＬＩＳＡ测定。     

血清核糖核酸酶胰型同工酶测定及其临床意义

血清核糖核酸酶胰型同工酶对聚胞嘧啶核苷酸(poly C)有特异水解活性,因此,用以poly C为底物的酶法测定该酶活性,显示出良好的重复性(CV 5.5%)和线性关系(r=0.99)。作者将该法应用于临床胰腺癌诊断,表明该酶诊断胰腺癌的敏感性为79%,特异性达到90.26%。而且该酶对胰腺癌的早期诊断及对其疗效和预后的监测均有良好价值。本法在国内首次建立。它经济、简便,便于在临床筛选诊断胰腺癌中推广应用。     

酶法测定血清胆固醇的研究进展

流行病学和临床证明 ,血清中低密度脂蛋白胆固醇(ＬＤＬ Ｃ)浓度和冠心病的发病率呈正比关系 ,因而测定血清中胆固醇的含量就成了临床诊断中一个重要的参考指标。测定方法有多种 ,如化学法 ,酶法 ,同位素稀释 质谱分析法等等。酶法测定具有操作简便 ,特异性好 ,结果稳定等扰点 ,因而成为临床检测常规方法。从七十年代到现在 ,随着新方法和新技术的不断应用 ,酶法分析技术得以不断提高和改进 ,现已将酶法与电极技术与自动控制技术等结合在一起制成分析仪器 ,使分析时所用试剂量更少 ,测量速度更快 ,结果更准确。电子化、自动化、微型化已成…     

神经元特异烯醇化酶的纯化方法

从牛脑制备ＮＳＥ纯品。纯化步骤依次为硫酸铵分级沉淀，ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｃｅｌ离子交换层析，Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ－ｓ－３００凝胶过滤层析和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－５０离子交换层析。所得ＮＳＥ纯品，ＰＡＧＥ呈单一区带，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ亚基分子量４６ＫＤ，ＩＥＦ－ＰＡＧＥ ｐＩ４．７～４．９，同工酶电泳仅显示γγ酶活性区带，酶比活性３０．１Ｕ／ｍｇ蛋白，得率３８．６％。     

同工酶的免疫测定研究进展

酶的免疫测定方法主要是：（１）免疫抑制酶活性测定；（２）免疫捕获酶活性测定；（３）酶蛋白浓度测定。与通常的工酶测定方法相比，免疫测定方法具有特异、灵敏、简便、高效的特点，而且提示了某些酶学指标新的临床意义。本文介绍了上述免疫测定方法在各种同工酶测定的临床应用研究进展。     

血清酶测定标准化的实验研究

目的　通过酶校 (标 )准品在临床实验室中的应用 ,探讨血清酶测定标准化的新途径。方法　向参加实验室 (15 0家 )发放酶校准品 1支和血清样本 3支 ,各实验室用现行方法分别测定校准品和血清样本 ,记录检验结果 ;用校准品定标后再测定血清样本 1次 ,记录检验结果 ;计算校准品测定结果总体均值与标示值间的偏倚和校准前后血清样本测定结果精密度的变化。结果　丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)、淀粉酶 (AMY)和乳酸脱氢酶 (LD)的测定结果均值与标准品标示值的相对偏倚≤± 6 % ,分别为 3 8% ,- 1 8% ,2 3%和 - 5 2 % ;碱性磷酸酶 (ALP)、γ 谷氨酰基转移酶 (GGT)和肌酶激酶 (CK)的实验室检测结果与标准品标示值间的相对偏倚小于 2 0 % ;分别为13 7% ,- 13 9%和 - 19 2 %。在应用校准品后 ,多数项目测定结果的变异系数 (CV % )得到不同程度的改善 ,ALT由 10 %～ 4 4 %下降至 8%～ 4 2 % ,LD由 16 %～ 39%下降至 8%～ 11%。结论　我国临床实验室对血清ALT、AST、AMY和LD的测定结果有较好的向国际标准溯源性 ;使用酶校准品可改善不同分析系统间测定结果的一致性。     

CEDIA法测定血清地高辛的实验观察与临床应用

目的克隆酶供体免疫分析技术（CEDIA）与放免法（RIA）测定血清地高辛的两种实验方法的观察比较。方法采用CEDIA对206例心脏疾病患者的血清地高辛浓度进行测定。结果经统计学分析，151例非中毒组和55例中毒组血清地高辛浓度分别为1．23±0．46ng／ml和2．59±0．62ng／ml。结论实验结果与国外报道接近，与放射免疫分析进行相关实验，结果r=0．9263，相关良好。     

冠心病患者红细胞GSH—Px活力测定

应用酶偶联法，对28例冠心病患者和30名健康人进行红细胞谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）活力测定，结果表明冠心病患者红细胞GSH－Px活力（6．76±0．98μmolNADPH被氧化／分／gHb）显著低于健康对照（12．47±1．21μmolNADPH被氧化／分／gHb）。