RUNX3、p21CIP1/WAF1、cyclinD1在肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨RUNX3、p21CIP1/WAF1、cyclinD1蛋白在肝细胞性肝癌(HCC)和癌旁组织中的表达,以及三者在HCC组织中表达的相关性,三者的表达与临床病理因素之间的关系.方法 采用回顾性分析方法,收集43例HCC新鲜标本及其癌旁组织,用免疫印迹(Western Blot)技术检测癌及癌旁组织中RUNX3、p21CIP1/WAF1、cyclinD1蛋白的表达.结果 RUNX3、p21CIP1/WAF1蛋白在HCC组织中的相对表达值低于癌旁组织,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);cyclinD1蛋白在肝癌组织中的相对表达值高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);RUNX3、p21CIP1/WAF1、cyclinD1蛋白相对表达值均与TNM分期及组织分化程度有关(P<0.05);HCC组织中RUNX3蛋白与p21CIP1/WAF1蛋白表达呈正相关(r=0.696,P<0.05),RUNX3蛋白与cyclinD1蛋白表达呈负相关性(r=-0.435,P<0.05).结论 RUNX3蛋白可能通过影响p21CIP1/WAF1和cyclinD1蛋白的表达影响肝细胞性肝癌的发生发展;联合检测RUNX3、p21CIP1/WAF1和cyclinD1蛋白的表达可能对HCC的诊断及预后判断有一定参考价值.     

p21WAF1基因与肝细胞癌临床病理特征的相关性分析

目的探讨p21WAF1基因与肝细胞癌（HCC）临床病理特征（组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成）的相关性。方法随机选择45例肝细胞癌患者的癌和癌旁肝组织标本，SP法检测其p21WAF1蛋白表达，分析p21WAF1基因与HCC临床病理特征（组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成）的相关性。结果p21WAF1在癌和癌旁肝组织中阳性表达率分别为68.9％和15．6％，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；HCC组织学分级、有无转移、肿块大小、有无包膜形成者p21WAF1蛋白阳性表达率比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论p21WAF1基因表达阳性率在HCC的临床病理特征（组织学分级、转移、肿块大小和包膜形成）间无差异，p21WAF1尚不能作为HCC分化不良及预后的指标。     

RUNX3在人类原发性肝细胞癌中的表达

目的探讨RUNX3基因在人类肝细胞性肝癌中的表达差异。方法采用免疫组化法和蛋白免疫印迹（WesternBlot）及逆转录-多聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对临床肝细胞性肝癌50例石蜡标本和43例新鲜标本及其癌旁组织中RUNX3基因的表达进行检测。结果免疫组化结果表明RUNX3在肝细胞性肝癌组织中的表达率显著低于癌旁组织,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;WesternBlot结果显示RUNX3蛋白在肝癌组织标本中的光密度值明显低于在癌旁组织中的光密度值,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;RT-PCR结果显示RUNX3mRNA在肝癌组织表达率低于癌旁组织表达率,两者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。RUNX3蛋白及mRNA的表达与肿瘤分化程度有关（P〈0.05）,而与患者性别、年龄、HBsAg、AFP均无明显关系（P〉0.05）。结论 RUNX3的表达下调与HCC的发生密切相关,可能作为抑癌基因在肝癌的发生发展中起作用。     

原发性肝细胞癌中p16和cyclinD1蛋白表达及p16突变研究

目的：研究p16和cyclinD1蛋白表达及p16基因第2外显子突变与原发性肝细胞癌（HCC）发生的关系。方法：利用SP免疫组织化学方法与多聚酶链反应－单链构象多态性（PCR－SSCP）分析技术分别检测44例HCC及癌旁肝组织p16和cyclinD1蛋白表达和12例新鲜手术肝癌组织的p16基因突变。结果：HCC中p16蛋白阳性率和阳性信号强度明显低于癌旁肝组织（P＜0．01）,而cyclinD1蛋白阳性率和阳性信号强度明显高于癌旁肝组织,12例新鲜HCC标本中p16基因第2 子突变率为16．7％（2／12）,癌旁组织未发现p16基因第2外显子突变;有p16基因突变的HCCp16蛋白表达呈阴性。结论：P16蛋白失活或／和缺乏可能是肝细胞增殖失控的重要因素之一;HCC存在P16基因第2外显子突变,但不是频发事件;在HCC形成过程中,P16基因异常与cyclinD1过度表达可能存在协同作用。     

胃肠道类癌中MMP-2和p21WAF1/CIP1蛋白表达的意义

目的 探讨MMP-2和p21WAF1/CIP1蛋白阳性表达与胃肠道类癌组织分化、浸润和转移的关系.方法 采用免疫组化S-P法对36例胃肠道类癌组织MMP-2和p21WAF1/CIP1蛋白的表达进行检测.结果 36例类癌组织中,MMP-2蛋白在低分化类癌组高表达,MMP-2和p21WAF1/CIP1蛋白在高分化类癌组高表达(P＜0.05),随着肿瘤的浸润和淋巴结转移MMP-2阳性表达率显著增加(P＜0.01),MMP-2和p21WAF1/CIP1阳性表达降低(P＜0.05).结论 MMP-2和MMP-2和p21WAF1/CIP1在类癌组织中的表达与组织分化、浸润和淋巴结转移关系密切,可用于临床对病人进行预后判断.     

p21WAF1/CIP1、细胞周期素D1、p53在结肠癌的表达

目的探讨p21WAF1/CIP1、细胞周期素D1(cyclin D1)及p53在结肠癌的表达及三个基因产物间的相关性.方法应用原位杂交技术及免疫组织化学技术检测p21WAF1/CIP1、cyclin D1的mRNA及p53蛋白在结肠癌中的表达.结果 p21WAF1/CIP1 mRNA在癌组织的表达率为84.13%,明显高于癌旁组织61.90%(P<0.05).cyclin D1 mRNA在癌组织表达率为63.49%,明显高于癌旁组织44.44%(P<0.05).p53蛋白在结肠癌的阳性表达率为38.09%,p53过表达组p21WAF1/CIP1 mRNA表达较p53阴性组为低,二者存在显著差异(P<0.05),p53过表达组cyclin D1 mRNA表达较p53阴性组为高,差异具有显著性(P<0.05).p21WAF1/CIP1 mRNA与cyclin D1 mRNA表达存在相关性(P<0.05).结论 p21WAF1/CIP1、cyclin D1、p53的异常表达及它们之间可能存在的相互作用,可能在结肠癌的癌变过程中发挥重要作用.     

子宫内膜样腺癌中Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及mRNA的表达

目的 探讨分化抑制因子-1(Id-1)、DPC4/Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及其mRNA在正常子宫内膜、子宫内膜增殖症和子宫内膜样腺癌(EA)组织中的表达及其临床病理学意义.方法 采用免疫组织化学和原位分子杂交方法,检测30例正常子宫内膜组织、30例单纯性增生过长、30例复杂性增生伴不典型增生、72例EA组织中Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及其mRNA的表达.结果 Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及三者mRNA在EA中的表达率分别为86.1%(62/72)、44.4%(32/72)、63.9%(46/72)、73.6%(53/72)、41.7%(30/72)和61.1%(44/72),Id-1和p21WAF1/CIP1阳性率明显高于正常和各型增生内膜;而Smad4则相反;Id-1蛋白及mRNA过表达与组织学分级、临床分期、浸润程度和淋巴结转移有关(P值均<0.05);Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及mRNA阳性表达与组织学分级、临床分期和浸润程度有关(P值均<0.05);Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白与相对应的mRNA呈正相关;Id-1与Smad4表达呈负相关.结论 Id-1、Smad4和p21WAF1/CIP1蛋白及mRNA表达异常与EA的发生发展有关,有可能成为判断子宫内膜组织癌变和转移的重要指标.     

原发性肝细胞癌中p16和cyclin D1蛋白表达及p16突变研究

目的 :研究p1 6和cyclinD1蛋白表达及p1 6基因第 2外显子突变与原发性肝细胞癌 (HCC)发生的关系。方法 :利用SP免疫组织化学方法与多聚酶链反应———单链构象多态性 (PCR SSCP)分析技术分别检测 44例HCC及癌旁肝组织p1 6和cyclinD1蛋白表达和 1 2例新鲜手术肝癌组织的p1 6基因突变。结果 :HCC中p1 6蛋白阳性率和阳性信号强度明显低于癌旁肝组织 (P <0 .0 1 ) ,而cyclinD1蛋白阳性率和阳性信号强度明显高于癌旁肝组织。 1 2例新鲜HCC标本中p1 6基因第 2外显子突变率为 1 6 .7% (2 /1 2 ) ,癌旁组织未发现p1 6基因第 2外显子突变 ;有p1 6基因突变的HCCp1 6蛋白表达呈阴性。结论 :p1 6蛋白失活或 /和缺乏可能是肝细胞增殖失控的重要因素之一 ;HCC存在p1 6基因第 2外显子突变 ,但不是频发事件 ;在HCC形成过程中 ,p1 6基因异常与cyclinD1过度表达可能存在协同作用     

肝细胞癌中Thr157磷酸化p27^kip1的表达和意义

目的研究肝细胞肝癌（HCC）组织中157号位苏氨酸磷酸化的p27kip1（p-27kip1Thr157）和增殖细胞核抗原（PCNA、Ki67）的表达,探讨其间相互关系及与临床病理的关系,并分析其与临床预后的关系。方法免疫组化方法检测51例HCC及其癌旁组织、10例肝血管瘤旁肝组织中P-p27^kip1Thr157和Ki67蛋白的表达。免疫印迹技术检测8例HCC及其癌旁肝新鲜组织中P-p27^kip1Thr157和PCNA的表达情况。结果 （1）P-p27^kip1Thr157在HCC组织对应的癌旁组织和血管瘤旁肝组织低或缺失表达,PCNA在HCC中显著高表达（P〈0.001）。（2）在HCC中,P-p27^kip1Thr157的表达强度与肿瘤病理分级明显相关（P〈0.05）,Ki67的表达强度与HCC的分化程度、有无坏死和AFP值均明显相关（均P〈0.05）;HCC中P-p27^kip1Thr157与Ki67表达成显著正相关（r=0.604,P〈0.001）。（3）Kaplan-Meier和多因素COX回归分析,显示P-p27^kip1Thr157可作为HCC患者显著的一个独立的预后指标（P〈0.05）。结论 P-p27^kip1Thr157可能在HCC的发生发展中发挥重要的作用并有一定的预后评估价值。     

原发性肝细胞癌中WAF1/CIP1基因的表达及其临床病理意义

目的 :探讨原发性肝细胞癌 (HCC)中 WAF1/ CIP1基因 m RNA的表达与临床病理学指标的关系和意义。方法 :采用半定量 RT- PCR方法 ,检测 WAF1/ CIP1基因在 30例 HCC及其癌旁肝组织中的表达。结果 :肝癌组织 WAF1/ CIP1m RNA表达相对值低于其相应癌旁肝组织 [(1.10± 0 .43) U对 (1.31± 0 .41) U,P<0 .0 5 ],有卫星灶形成的肝癌低于无卫星灶形成的肝癌[(0 .86± 0 .2 9) U对 (1.32± 0 .44 ) U,P<0 .0 1],但其在 HCC的其他病理学指标中差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :WAF1/CIP1基因的表达异常可能参与 HCC的发生、发…     

增殖细胞核抗原和细胞周期依赖性激酶抑制剂p21WAF1/CIP1蛋白在大鼠肾上腺细胞体外原代培养中的表达及其意义

目的：探讨增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期依赖性激酶抑制剂p21 WAF1/CIP1蛋白在大鼠肾上腺细胞体外原代培养中的表达及其意义。方法：用SP免疫组化法检测大鼠肾上腺细胞培养第3、5、7、9、11 d的PCNA和p21蛋白表达强度。结果：在肾上腺细胞体外培养中,第3 d（（18±3）%）、5 d（（38±5）%）、7 d（（70±65）%）PCNA蛋白表达逐渐增强,第9（（50±3）%）、11 d（（39±2）%）与第7 d比减弱（P〈0.05）。第3 d（（43±5）%）、5 d（（35±2）%）、7 d（（21±3）%）p21 WAF1/CIP1蛋白表达逐渐减弱,第9 d（（39±3）%）、11 d（（52±4）%）与第7 d比重新增强（P〈0.05）。结论：肾上腺细胞体外原代培养在第7 d PCNA蛋白表达最强,p21 WAF1/CIP1蛋白表达最弱,肾上腺细胞增殖也最旺盛。     

Cyclin D1与p21WAF1在鼻咽癌中的表达

目的 探讨鼻咽上皮癌变过程中周期蛋白Cyclin D1与抑癌基因p21 (wild- type p53 activated fragment 1,p21 WAF1)蛋白的表达及其意义.方法 应用免疫组化方法检测47例鼻咽癌组织、21例癌旁上皮组织和14例正常鼻咽粘膜中Cyclin D1与p21WAF1蛋白表达.结果 从鼻咽正常粘膜、癌旁粘膜上皮组织到癌组织,Cyclin D1表达阳性率逐渐增加,并且差异有显著意义(均为P ＜0.05).p21WAF1蛋白在以上组织中阳性率较高,且各组间差异无显著性.结论 Cyclin D1、p21WAF1蛋白与鼻咽部上皮细胞恶性增生密切相关,p21WAF1蛋白表达可能与细胞周期调控的反馈机制有关.     

新木脂素VB-1对人卵巢癌CoC1细胞生长的影响

目的研究新木脂素（VB-1）对人卵巢癌CoC1细胞生长的影响。方法 MTT还原法测定细胞活性;琼脂培养集落形成法检测细胞集落形成能力;碘化丙啶（PI）染色、流式细胞术分析细胞周期;Western Blotting法分析CDK2、CDK4和p21WAF1/CIP1蛋白表达。结果 VB-1显著抑制CoC1细胞活性（P〈0.01）,呈浓度依赖性,VB-1以浓度依赖方式抑制CoC1细胞集落形成能力（P〈0.01）,VB-1阻滞CoC1细胞周期于G1期（P〈0.05）。VB-1下调CDK2和CDK4蛋白表达（P〈0.05）,同时上调p21WAF1/CIP1蛋白表达P〈0.05）。结论 VB-1具有抑制CoC1细胞生长作用,其作用机制可能与阻滞细胞周期进展相关。     

p14ARF、ARF-BP1、c-myc在肝细胞癌中的表达及意义

目的:探讨肝细胞癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)组织及其癌旁肝组织中p14ARF、ARF-BP1、c-myc的表达及意义.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术、免疫组化技术对45例HCC组织及其癌旁肝组织中p14ARF、ARF-BP1、c-myc的mRNA表达和p14ARF、c-myc蛋白表达情况进行检测.结果:p14ARF、ARF-BP1、c-myc的mRNA在HCC组织中阳性表达分别为80.00%、86.67%、84.44%,在癌旁肝组织中分别为11.11%、20.00%、53.33%,三者的mRNA在癌组织中呈过表达,明显高于癌旁肝组织(P＜0.01).p14ARF、c-myc蛋白在HCC组织中表达分别为78.38%、75.68%,明显高于癌旁肝组织的13.51%(P＜0.01)和51.35%(P＜0.05).结论:p14ARF、ARF-BP1、c-myc在HCC组织中高表达,这种高表达可能与HCC的发生有相关性.     

骨肉瘤p73、p21WAF1/CIP1蛋白的表达及临床病理分析

目的检测p73蛋白、p21WAF1/CIP1蛋白在骨肉瘤的表达并探讨二者在骨肉瘤发生发展中的作用.方法利用免疫组织化学和图像分析的方法检测和分析58例骨肉瘤中p73蛋白、p21WAF1/CIP1蛋白的表达.结果 (1)58例骨肉瘤中p73蛋白、p21WAF1/CIP1蛋白的表达明显高于正常骨组织(P<0.01);(2)二者的过表达与患者的性别、年龄、肿瘤直径及病理类型无关,而与有无侵袭转移和组织分化程度有关,差异具有显著性(P<0.05);(3)根据临床Enneking分期,Ⅰ与ⅡA期病例p73、p21WAF1/CIP1蛋白的表达差异无显著性,但明显低于ⅡB期,差异具有显著性(P<0.05);(4)骨肉瘤中p73和p21WAF1/CIP1蛋白的表达呈显著正相关(P<0.05).结论骨肉瘤组织中p73、p21WAF1/CIP1蛋白呈高表达,且与组织的增殖状态和恶性程度相关联;p73基因在一定程度上可能会诱导p21WAF1/CIP1蛋白的表达.     

细胞周期素D1和P21^WAF1／CIP1蛋白在肺癌组织中的表达

目的 研究细胞周期素（Cyclin)D1和P21^WAF1/CIP1在肺癌组织中的表达及其与肺癌临床分期，组织类型，分化程度及转移和预后的关系。方法 用免疫组化法检测癌旁组织及肺癌组织中CyclinD1和P21^WAF1/CIP1蛋白的表达。结果 （1）CyclinD1和P21^WAF1/CIP1在癌旁肺组织中不表达或很少表达，而在癌组织中有较高的表达率，其阳性表达率分别为60．4％（29／48）和27．08％（13／48）。（2）CyclinD1和P21^WAF1/CIP1蛋白表达与肿瘤的病理类型作临床TNM分期无关；与肺癌组织分化程度有关，其中CyclinD1阳性率越高，肺癌的分化程度越低（P＜0．05），P21^WAF1/CIP1蛋白阳性率越高，肺癌的分化程度越高（P＜0．05）。（3）P21蛋白阳性表达者转移率低于阴性表达关（P＜0．05），并且其存活期长（P＜0．05）。（4）CyclinD1和P21^WAF1/CIP1蛋白的表达呈显著负相关（P＜0．05）。结论 （1）CyclinD1和P21^WAF1/CIP1蛋白的与肿瘤的组织分化有关；（2）P21蛋白表达和肿瘤的转移及预后有关。     

survivin、p27和cyclin D1在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨survivin、p27和cyclinD1在胃腺癌组织中的表达及其与肿瘤临床病理特征之间的关系。方法：用免疫组织化学S-P法检测73例胃腺癌及20例正常胃黏膜组织中survivin、p27和cyclinD1的表达情况。结果：①胃腺癌组织中survivin和cyclin D1蛋白表达阳性率分别为46.6%（34/73）和60.3%（44/73）,明显高于它们在正常胃黏膜组织中的表达率0%（0/20）和25%（5/20）（P〈0.01,P〈0.01）;p27在胃腺癌组织中蛋白表达阳性率为41.1%（30/73）,明显低于它在正常胃黏膜组织中的阳性表达率95.0%（19/20）（P〈0.01）。②survivin、p27和cyclinD1均与胃腺癌组织分化程度无明显相关性（均P〉0.05）;survivin与胃腺癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期呈正相关（均P〈0.05）;p27与胃腺癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期呈负相关（均P〈0.01）;cyclinD1仅与胃腺癌的浸润深度相关（P〈0.05）。③胃腺癌中survivin的阳性表达率与p27呈负相关（P〈0.05）,而与cyclinD1的阳性表达率呈正相关（P〈0.01）;p27的阳性表达率与cyclinD1无明显相关性（P〉0.05）。结论：survivin、p27和cyclinD1基因在胃腺癌的发生、发展中起着不同程度的作用;联合检测survivin、p27和cyclinD1可能对胃腺癌恶性程度的判定及胃腺癌的预后评估提供帮助,并对进一步治疗提供一定的依据。     

P21^wafl、MDM2和P53蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨P21waf1、MDM2、P53蛋白在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其对于HCC诊断的意义.方法应用免疫组织化学SP法检测61例原发性肝细胞癌及59例相应癌旁肝组织中P21waf1、MDM2和P53蛋白的表达,并对它们之间的关系及其与肝癌的临床病理特征的关系进行统计学分析.结果P21waf1、MDM2和P53蛋白在HCC中的阳性表达率分别为31.15%(19/61)、26.23% (16/61)和57.38% (35/61),明显高于癌旁肝组织(P＜0.001).HCC中P21waf1与MDM、P53蛋白表达无明显相关性(P＞0.05).这三种蛋白的表达与肝硬化及不典型增生无关(P＞0.05).结论 P21waf1、MDM2和P53高表达均在HCC的发生中起作用,但不是早期事件;HCC中存在不依赖wt-P53途径的P21waf1的表达,HCC 中P21waf1的表达不能反映p53的基因状态.     

Gli2在原发性肝细胞癌中的表达及与Cyclin D1、p21的关系

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中 Gli2、Cyclin D1 和 p21 的表达及其意义.方法 采用组织芯片和免疫组织化学方法以及 RT-PCR 检测了 44 对 HCC 和相应癌旁肝组织中 Gli2 蛋白和 mRNA 的表达情况,应用 Western blot检测了 Cyclin D1、p21 蛋白在两种组织中的表达差异.结果 免疫组化染色与 RT-PCR 示 Gli2 在 HCC 组织中的阳性表达率为 68.2%,而癌旁肝组织为38.6%,两者差异具有极显著性意义(P<0.01),且 Gli2 与 HCC 的组织分化和门静脉转移相关.Cyclin D1 蛋白在 HCC 中的表达显著高于癌旁肝组织(P<0.05).且与 Gli2 的表达呈正相关;而 p21 蛋白在癌旁肝组织中的表达显著高于 HCC,但与 Gli2 无明显相关性.结论 Gli2 过度激活可能通过上调 Cyelin D1 的表达而使肝癌细胞异常增殖,参与 HCC 的发生和发展.     

Survivin与p21waf-1在大鼠肝细胞癌变过程中的动态表达及其相关性的研究

目的:动态观察黄曲霉毒素B1(AFB1)在诱发大鼠肝细胞癌(HCC)过程中survivin 及p21waf-1表达的变化及它们在HCC发生发展中的关系.方法:用免疫组化及RT-PCR检测24只用AFB1诱发出的大鼠肝癌及癌旁肝组织、6只未诱发出肝癌的大鼠及11只对照大鼠不同时期肝活检组织中的survivin与p21waf-1基因和蛋白表达.结果:①HCC组织中survivin阳性率41.67%、癌旁肝组织54.17%;未发生肝癌及对照组大鼠活检肝组织,均未检出survivin蛋白(P<0.01);②HCC及癌旁肝组织中survivin mRNA的表达水平显著上调(P<0.01);③HCC及癌旁肝组织p21waf-1蛋白阳性率明显低于58周未出癌及对照组大鼠肝组织(P<0.01);④出癌大鼠p21waf-1 mRNA表达水平在HCC形成过程逐渐下调(P<0.01);⑤在HCC形成中,survivin与p21waf-1表达呈负相关.结论:在HCC形成的早期p21waf-1mRNA表达的下调逐渐失去抑制细胞增殖、促进细胞分化功能,使细胞增殖,而survivin mRNA表达上调,抑制细胞凋亡,两者在HCC形成过程中可能发挥协同作用.