鼠脑线粒体一氧化氮的生成

目前已知细胞产生一氧化氮(ＮＯ)主要由存在于胞浆的一氧化氮合酶(ＮＯＳ)催化Ｌ精氨酸(ＬＡｒｇ)生成。最近,Ｇｉｕｌｉｖｉ等[1]发现,分离的大鼠肝线粒体能独立合成ＮＯ,并提取和纯化出线粒体ＮＯＳ。Ｂａｔｅｓ等[2]用免疫组织化学技术发现大鼠脑的线粒体内膜存在ＮＯＳ或其抗原相关蛋白,而ＮＯＳ激活所必需的底物及辅助因子亦存在于脑神经元的线粒体内。由此我们推测脑线粒体存在有独立于胞浆的ＬＡｒｇ/ＮＯＳ/ＮＯ系统,该系统对线粒体的生理及病理生理活动可能具有重要意义。我们在分离和纯化的大鼠脑线粒体上用光谱技术直接检测脑线…     

脂蛋白a的分子生物学及其与脑梗死相关性的研究进展

自从Ｗｉｒｃｈｏｗ提出血浆脂质造成动脉粥样硬化(ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ)病变以来 ,大量研究证实脂质代谢障碍与ＡＳ有因果关系。近年来 ,控制血脂增高所得的益处已为人们所接受 ,血脂代谢过程中各组分异常对ＡＳ的作用研究也不断深入 ,尤其血浆脂蛋白ａ[Ｌｐ(ａ) ]的发现 ,其与ＬＤＬ类似 ,与其它血脂水平无相关性[1] ,其血浆浓度由载脂蛋白ａ[Ａｐｏ(ａ) ]基因的遗传多态性决定。血浆Ｌｐ(ａ)升高是ＡＳ的重要危险因素 ,与脑梗死有着直接重要的关系。现就近年来国内外在Ｌｐ(ａ)分子生物学及其与脑梗死的关系研究方面的进…     

蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ的分离方法研究

目的：探索蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ的分离和纯化方法：方法：蝎毒经预处理后,分别采用ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离子交换凝胶柱层析法和ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离子交换凝胶柱ｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶柱联合层析法,分离ＡＰ－Ⅲ,用ＨＰＬＣ仪检测２种方法分离出的ＡＰ－Ⅲ的纯度及产率。结果：单独用ｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离了交换凝胶柱分离,ＡＰ－Ⅲ产率为２．２４％,纯度为８９％。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶柱与Ｓｅｐ     

阿尔茨海默病患者的载脂蛋白E基因型对血浆载脂蛋白E、总胆固醇和三酰甘油水平的影响

载脂蛋白Ｅ(ＡｐｏＥ)在脂类代谢中起重要作用 ,它有 3种常见的等位基因ε2 、ε3 和ε4 ,其中ε4 是阿尔茨海默病(ＡＤ)的易感因子[1] 。ＡｐｏＥ基因型对血浆ＡｐｏＥ和血脂水平可能产生影响。有报道认为ε4 携带者的血浆总胆固醇(ＴＣ)和三酰甘油 (ＴＧ)水平升高[2 ] 。而在本研究中发现ＡＤ患者血浆ＴＣ和ＴＧ浓度的降低 ,受Ｒｏｍａｓ[3 ] 和Ｅｖａｎｓ表 1　ＡＤ组和对照组ＡｐｏＥ基因型和等位基因频率组别例数 ＡｐｏＥ基因型Ｅ2 / 2 Ｅ2 / 3 Ｅ3 / 3 Ｅ2 / 4 Ｅ3 / 4 Ｅ4/ 4ＡｐｏＥ等位基因频率ε2 ε3 ε4对照组　98114 731　8　…     

Efficacy and Mechanism of Intravenous Sotalol for Termination of Paroxysmal Supraventricular Tachycardia

ＳＶＴ ,ｉｎｃｌｕｄｉｎｇＡＶＲＴａｎｄＡＶＮＲＴ ,ｉｓａｋｉｎｄｏｆａｒｒｈｙｔｈｍｉａｏｆｔｅｎｓｅｅｎｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｐｒａｃ ｔｉｃｅ .Ｓｏｔａｌｏｌ,ａｃｌａｓｓⅢａｎｔｉ ａｒｒｈｙｔｈｍｉｃｄｒｕｇｗｉｔｈａｄｄｉｔｉｏｎａｌβ ｂｌｏｃｋｉｎｇａｇｅｎｔｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ,ｈａｓｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｔｏｔｒｅａｔｖａｒｉｏｕｓａｒｒｈｙｔｈｍｉａ(ｓｕｐｒａ ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒａｎｄｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ)ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙｉｎｗｅｓｔｅｒｎｃｏｕｎｔｒｉｅｓ[1 9]…     

低密度脂蛋白降调节新基因cDNA的克隆及结构分析

动脉粥样硬化 (ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ)是一种由多种环境因素与遗传因素相互作用所诱发的疾病。应用分子生物学技术 ,已经克隆了部分致ＡＳ和抗ＡＳ的基因[1] 。低密度脂蛋白(ｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｐｒｏｔｅｉｎ ,ＬＤＬ)与ＡＳ及冠心病的发生呈正相关[2 ] ,血管内皮细胞是ＡＳ斑块形成的始动环节 ,血浆高水平ＬＤＬ可引起内皮细胞收缩、胞膜损伤、乳酸脱氢酶释放增加和前列环素合成减少[3] ,为了克隆与ＡＳ相关的新基因 ,以ＬＤＬ诱导内皮细胞 ,采用差异显示逆转录ＰＣＲ技术[4 ] 获得全新表达标签序列 (ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ…     

同型半胱氨酸促平滑肌细胞增殖的内信号传递途径

同型半胱氨酸 (ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ ,Ｈｃｙ)是一种含硫氨基酸 ,是蛋氨酸代谢过程中的重要中间产物。实验研究和临床观察表明 ,血中Ｈｃｙ升高可引起动脉粥样硬化和血栓形成[1 3 ] 。Ｔｓａｉ等[4 ] 报道Ｈｃｙ可刺激大鼠血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)增殖 ,然而 ,Ｈｃｙ诱导ＶＳＭＣ增殖的机制至今尚不清楚。我们在培养的Ｗｉｓｔａｒ Ｋｙｏｔｏ(ＷＫＹ)大鼠ＶＳＭＣ上 ,观察Ｈｃｙ的促细胞增作者单位 :10 0 0 83北京医科大学心血管研究所殖效应及其与蛋白激酶Ｃ (ＰＫＣ)、丝裂素活化蛋白激酶(ＭＡＰＫ)、ｃＡＭＰ、Ｃａ2 等的关系…     

分支杆菌ESAT—6研究进展

ＥＳＡＴ - 6 (6ｋＤａｅａｒｌｙｓｅｃｒｅｔｏｒｙａｎｔｉｇｅｎｉｃｔａｒｇｅｔ) ,即分子量为 6ｋＤａ的早期分泌性抗原性靶 ,是从结核杆菌短期培养滤液 (ＳＴ -ＣＦ)中纯化分离出的一种低分子量分泌性蛋白[1,2 ] ,具有较强的细胞免疫活性。本文对其目前的研究现状作一综述。1　分　　布丹麦的Ｓｏｒｅｎｓｅｎ等[2 ] 采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析来自不同分支杆菌的一系列ＳＴ -ＣＦ ,发现ＥＳＡＴ - 6仅在结核杆菌群(包括人型结核杆菌、牛型结核杆菌和非洲分支杆菌 )以及少数几种其他的致病性分支杆菌 ,如Ｋａｎｓａｓｉｉ分支杆菌…     

溶栓药APSAC的制备和鉴定

重组链激酶（ｒ－ＳＫ）由工程菌提取液经Ｓｅｐｈａｃｒｙｌｓ－２００柱纯化，比活性达１０＾５ＴＵ／ｍｇ，十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）显示分子量为７８．０２４７×１０＾－＾２＾４ｋｇ的一条带。人新鲜血浆经Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤制备纤溶酶原（ｐｌｇ），比活性达２３．７ＴＵ／ｍｇ，活性加收率为１３．６％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示     

糖基化终产物—牛血清白蛋白的制备和纯化

目的 制备高纯度的糖基化终产物（ＡＧＥｓ）用作名单原或检测标准品。方法 牛血清白蛋折（ＢＳＡ）与葡萄糖在体外共同孵育制备ＡＧＥｓ－ＢＳＡ,经凝胶层析纯化后,应用荧光光谱和ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。结果 纯化后ＡＧＥｓ－ＢＳＡ与标准的ＡＧＥｓ－ＢＳＡ电泳图谱基本一致;激发和发射光谱均为单央,分别位于３６０ｎｍ和４４６ｎｍ。结论 应用凝胶层析纯化ＡＧＥｓ－ＢＳＡ效果满意。     

KAI1基因的肿瘤转移抑制作用

ＫＡＩ1(ＫａｎｇＡｉ 1)基因是最近发现的一个新的肿瘤转移抑制基因 ,1995年Ｄｏｎｇ等[1] 首先发现并分离了该基因。ＫＡＩ1基因位于人染色体 11ｐ11 2 ,编码一个由 2 6 7个氨基酸组成的蛋白质 ,研究发现ＫＡＩ1蛋白与ＣＤ82结构相同。ＣＤ82为一种白细胞膜糖蛋白[2 ] ,在不同的实验室 ,又称为Ｒ2 [3] 、Ｃ33[4 ] 、ＩＡ4 [5]和 4Ｆ9[6 ] 。ＫＡＩ1蛋白属于一个结构特殊的家族———ＴＭ4ＳＦ (ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ 4ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙｏｒｔｅｔｒａｓｐａｎｓｕｐｅｒ ｆａｍｉｌｙ) ,ＴＭ4ＳＦ蛋白具有 4个高度保守的疏水…     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂结构改造与活性关系

肾素 -血管紧张素 -醛固酮系统 (ｒｅｎｉｎ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ -ａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅｓｙｓｔｅｍ ,ＲＡＡＳ)是调节血压的重要内分泌系统 ,在高血压病因学中占重要地位。ＲＡＡＳ系统产生的最终生理活性物质为血管紧张素Ⅱ (ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｏｎⅡ ,ＡｎｇⅡ )。ＡｎｇⅡ受体分为ＡＴ1、ＡＴ2 等多种类型 ,其中ＡＴ1受体拮抗剂是一类新型的抗高血压药物 ,本文从结构改造和生物活性方面就国内外研究进展进行概述。1　基本骨架的确定沙拉新 (ｓａｒａｌａｓｉｎ)是第 1个药用的ＡＴ1受体拮抗剂 ,属于肽类 ,生物利用度低 ,作用…     

影响高密度脂蛋白代谢的基因与动脉粥样硬化的预防

动脉粥样硬化性心血管病 (ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅ,ＡＳＣＶＤ)是严重危害人类健康的疾病之一。当今以降低血浆胆固醇为主要目的的治疗方法还难以完全预防动脉粥样硬化 (ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ,ＡＳ)。高密度脂蛋白 (ｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ,ＨＤＬ)的复杂代谢途径是治疗ＡＳ的潜在靶标。ＨＤＬ由脂质 (主要是胆固醇和磷脂 )和脂蛋白 (主要成分是ＡｐｏＡＩ)组成[1] ,流行病学资料表明 :血浆中ＨＤＬ胆固醇及ＡｐｏＡＩ的水平与心血管疾病 (ｃａｒｄｉ…     

胆固醇酯转运蛋白基因型研究进展

胆固醇酯转蛋白 (ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｙｅｓｔｅｒｔｒａｎｓｆｏｒｐｒｏｔｅｉｎ ,ＣＥＴＰ)于1978年首先由Ｚｉｌｖｅｒｓｍｉｔ等从人血浆中分离纯化出来 ,主要负责血浆中中性脂质胆固醇酯 (ＣＥ)和甘油三酯 (ＴＧ)的转运。2 0多年来 ,人们对ＣＥＴＰ究竟是抗动脉粥样硬化 (ＡＳ)因子还是致ＡＳ因子一直争论不休 ,其基因表达特别是基因多态性和 (或 )基因突变引起的不同基因型在ＣＥＴＰ调节和活性中的作用及机制更是扑朔迷离 ,令许多希望揭示ＣＥＴＰ与ＡＳ的关系从而为ＡＳ的防治开辟新途径的科学家们进行了大量研究工作。随着分子生…     

抗hTSH抗独特型抗体的制备：——免疫原的分离纯化及鉴定

本文根据独特型－抗独特型理论探讨Ｇｒａｖｅｓ′病的发病机理，报道了对兔抗ｈＴＳＨＩｇＧ免疫原的分离，纯化及鉴定。首先用饱和硫酸铵粗提兔抗ｈＴＳＨ血清γ－球蛋白，继以葡萄球菌Ａ蛋白琼脂糖凝胶亲和层析柱（ＰｒｏｔｅｉｎＡｓｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ４Ｂ）纯化ＩｇＧ，经十二烷基硫酸钠—聚丙烯凝胶电泳（ＳＰＳ－ＰＡＧＥ）鉴定，证实为ＩｇＧ纯品。再经ＴＳＨ偶联的亲和层析柱为免疫吸附剂，进一步分离出抗ＴＳＨＩｇＧ，然后用放射免疫分析（ＲＩＡ）检测证实保持了较高的抗体活性。     

载脂蛋白E与阿尔茨海默病关系的研究

阿尔茨海默病 (Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ′ｓｄｉｓｅａｓｅ,ＡＤ)是以进行性痴呆为主要临床表现的中枢神经系统最常见的变性病 ,其病理特征为 :①老年斑 (ＳＰ) ,散在于病变部位 ,由退变的神经轴突围绕β 淀粉样蛋白 (β ＡＰ)组成。②神经原纤维缠结 (ＮＦＴ) ,存在于病变部位的神经元胞浆内 ,电子显微镜下呈双股螺旋状细丝扭曲。ＡＤ病因目前仍不清楚 ,近年来 ,大量的研究已经证实ＡＤ患者脑内载脂蛋白Ｅ(ＡｐｏＥ)可能参与ＳＰ和ＮＦＴ的形成[1 ] ,ＡｐｏＥ在ＳＰ和ＮＦＴ内积聚 ,提示ＡｐｏＥ直接与ＡＤ病程有关[2 ] 。现对ＡｐｏＥ与ＡＤ关…     

内毒素休克小鼠肺组织ICAM-1的表达及p38 MAPK的调控作用

脂多糖 (ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ,ＬＰＳ)是引发内毒素休克的关键因子 ,在内毒素休克病人血浆中可达 10 0～ 10 0 0ｎｇ/ｍｌ(正常人为 10ｎｇ/ｍｌ) [1] 。ＬＰＳ可诱导内皮细胞胞间粘附分子 1(ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ 1,ＩＣＡＭ 1)的表达 ,促进白细胞粘附到内皮细胞。研究表明ＩＣＡＭ 1在肺部炎症级联的激活中起重要作用 ,并导致白细胞的募集[2 ] 。已证实ｐ38丝裂原活化蛋白激酶 (ｐ38ｍｉｔｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ ,ｐ38ＭＡＰＫ)在ＬＰＳ激活或…     

血小板和T细胞活化抗原配体的初步鉴定

198 5年Ｂｕｒｎｓ等[1] 通过Ｌｅｏ Ａ1ｍＡｂ发现了一种人Ｔ细胞活化抗原ＴＬｉＳＡ1(Ｔｌｉｎｅａｇｅｓｐｅｃｉｆｉｃａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｔｉｇｅｎ 1,ＴＬｉＳＡ1)。由于该分子也高表达于血小板膜表面 ,遂于 1989年更名为血小板和Ｔ细胞活化抗原 1(ｐｌａｔｅｌｅｔａｎｄＴｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｔｉｇｅｎ 1,ＰＴＡ1) [2 ] ,1997年获得基因克隆[3 ] 。但到目前为止 ,ＰＴＡ1配体尚未被基因克隆 ,亦未见有关ＰＴＡ1配体的研究报道。作者拟通过ＰＴＡ1/Ｉｇ融合蛋白对ＰＴＡ1配体进行了初步的鉴定。一、材料和方法1 …     

食道调搏无跳跃现象的房室结折返性心动过速二例报道

食道调搏 (ＴＥＡＰ)诊断阵发性室上性心动过速(ＰＳＶＴ)是房室结折返性心动过速 (ＡＶＮＲＴ)还是房室折返性心动过速 (ＡＶＲＴ) ,主要根据有无房室结传导的跳跃现象 ,即Ｓ Ｒ间期≥ 6 0ｍｓ为ＡＶＮＲＴ ,Ｓ Ｒ间期 <6 0ｍｓ为ＡＶＲＴ[1] 。本文报道 2例经心内电生理检查及射频消融术治疗确诊为慢—快型ＡＶＮＲＴ ,而ＴＥＡＰ时无房室结传导的跳跃现象。1　病例介绍例 1,女患 ,35ａ ,阵发心悸 5ａ ,突发突止 ,持续时间 10ｍｉｎ～ 1ｈ左右。入院后经体格检查、心脏Ｂ超及Ｘ线胸片检查 ,心脏结构和功能正常。ＴＥＡＰ检查Ｓ1Ｓ2 刺激 ,…     

肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β_1和前胶原基因的表达

急性肺泡炎是肺纤维化病变基础 ,在肺泡炎形成过程中涉及炎性细胞、免疫效应细胞和细胞因子。体外试验证明肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ α)、转化生长因子 β1(ＴＧＦ β1)可上调人胚肺成纤维细胞前胶原ｍＲＮＡ的表达[1,2 ] ,提示急性肺泡炎时这些细胞因子与肺纤维化发生有一定的因果关系。我们用博莱霉素Ａ5诱发大鼠肺纤维化 ,并制成动物模型 ,对大鼠肺组织中ＴＧＦ β1,前胶原Ⅰ和前胶原Ⅲ的ｍＲＮＡ进行观察 ,以探讨它们与大鼠肺纤维化的关系。一、材料与方法1 动物与动物模型 :2 5只Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠 ,体重 140～170ｇ ,购自中国医学科…