突触可塑性在急性束缚应激所致内脏高敏感中的作用

目的研究突触可塑性在急性束缚应激所致内脏高敏感巾的作用。方法20只雄性SD大鼠均分为对照组和急性束缚应激模型组。急性束缚应激1h诱导内脏高敏感性。观察不同结、直肠扩张压力下腹壁肌电图改变，采用10S内放电次数评估内脏高敏感性。用透射电镜技术了解结肠突触超微结构的改变，采用逆转录（RT）-PCR和Western印迹法检测回盲部、近端结肠和远端结肠突触素mRNA和蛋白质水平的表达。结果①单位时间内腹壁放电次数与直、结肠扩张压力水平呈显著正相关（对照组r=0．992，P=0．008；模型组r=0．978，P=0．022）；模型组在40、60、80mmHg（1mmHg：0．133kPa）压力下行结直、肠扩张时，腹壁肌放电次数显著多于对照组（P值分别为0．043、0．024、0．038）。②与对照组比较，模型组突触前终末聚集有较多的突触囊泡，突触后膜电子致密物质增厚。③模型组近端结肠和远端结肠突触素mRNA（P值分别为0．015、0．010）和蛋白质（P值分别为0．033、0．045）表达水平均显著增加。结论急性束缚应激所致内脏高敏感性的形成与突触可塑性有关。     

TRPV1在一过性肠道感染大鼠模型内脏高敏感形成中的意义

[目的]研究TRPV1在SD大鼠一过性肠道感染旋毛虫后形成内脏高敏感中的作用。[方法]30只大鼠随机分为正常对照组、假手术组和内脏高敏感组。内脏高敏感组给予旋毛虫感染,假手术组给予同等量的PBS灌胃,正常对照组不作任何处理。8周后,观察各组结直肠不同扩张压力下(20mmHg、40mmHg、60mmHg、80mmHg)腹壁肌电活动变化;采用Western-blot检测远端结肠TRPV1蛋白质水平的表达。[结果]1正常对照组、假手术组和内脏高敏感组结直肠不同扩张压力与腹壁肌电活动之间有显著相关性,各组相关系数与P值分别为:正常对照组r=0.825、P=0.000,假手术组r=0.831、P=0.000,内脏高敏感组r=0.625、P=0.006。在20mmHg、40mmHg和60mmHg扩张压力下,3组间AUC均差异有统计学意义(P0.05);在80mmHg,3组间AUC差异无统计学意义(P0.05)。2正常对照组、假手术组、内脏高敏感组TRPV1光密度相对值分别为0.95±0.17、0.94±0.24、1.57±0.31,内脏高敏感组较正常对照组、假手术组均显著升高(P0.05)。[结论]内脏高敏感的形成与TRPV1高表达密切相关。     

N-甲基-D-天冬氨酸受体1在一过性肠道感染大鼠内脏高敏感形成中的意义

目的 研究N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDA-R1)在SD大鼠—过性肠道感染旋毛虫后形成的内脏高敏感中的作用.方法 40只SD大鼠均分为健康对照组、内脏高敏感组、0.9％氯化钠溶液组、MK-801组,其中内脏高敏感组、0.9％氯化钠溶液组和MK 801组分别予旋毛虫感染造模.8周后,0.9％氯化钠溶液组和MK-801组分别予0.9％氯化钠溶液和NMDA-R1拮抗剂MK-801.观察各组在20、40、60和80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)结直肠扩张压力下腹壁肌电活动反应.测定腹壁肌电活动后,取大鼠结肠标本,采用Western印迹检测NMDA-R1蛋白水平的表达.统计学处理采用Bivariate相关分析和LSD检验.结果 健康对照组、内脏高敏感组、0.9％氯化钠溶液组和MK-801组腹壁肌电图曲线下面积(AUC)与扩张压力之间均有相关性(r=0.823、0.618、0.913、0.889,均P＜0.01).在20、40、60和80 mm Hg扩张压力下,MK-801组与内脏高敏感组AUC间差异均有统计学意义(LSD检验,P值均＜0.05),MK-801组AUC均小于健康对照组,但只在80 mm Hg扩张压力下差异有统计学意义(LSD检验,P=0.029).MK-801组NMDA-R1蛋白积分吸光度相对值为1.238±0.210,较内脏高敏感组(2.231±0.450)和0.9％氯化钠溶液组(2.104±0.220)均显著降低(LSD检验,P=0.025和0.046),内脏高敏感组NMDA-R1蛋白积分吸光度相对值和0.9％氯化钠溶液组较健康对照组显著升高(1SD检验,P=0.007和0.014).结论 内脏高敏感的形成与突触后NMDA-R1的高表达密切相关,抑制肠道神经系统中NMDA-R1的表达可调节内脏高敏感性.     

肠易激综合征模型大鼠5-羟色胺7受体的表达及作用

目的 观察5-羟色胺7受体在肠易激综合征(IBS)不同亚型模型大鼠大脑和消化道组织中表达和分布的差异,探讨其在IBS发病中的作用.方法 45只成年SD大鼠分均为对照组、腹泻型IBS(IBS-D)组和便秘型IBS(IB-C)组.乙酸加束缚应激法制备IBS-D模型,冰水灌胃法制备IBS-C模型.免疫组化法和实时定量PCR法检测各组大鼠大脑、空肠、回肠、近端结肠、远端结肠中5-HT7受体的分布及表达差异.放射免疫法测定以上各组织中环磷酸腺苷(cAMP)含量.结果 免疫组化结果 显示,IBS-C组和IBS-D组海马及下丘脑、IBS-C组回肠、近端结肠、远端结肠5-HT7受体表达强于对照组(P＜0.05).实时定量PCR结果 显示,IBS-C和IBS-D组海马和下丘脑、IBS-C组回肠、近端结肠及远端结肠5-HT7受体mRNA明显高于对照组(P＜0.05).IBS-C和IBS-D组海马和下丘脑、IBS-C组近端结肠和远端结肠cAMP含量显著高于对照组(P＜0.05).结论 两组大鼠脑组织及IBS-C大鼠结肠5-HT7受体表达及cAMP水平明显增高,可能与IBS-C胃肠动力障碍和内脏感觉异常有关.     

感染后肠易激综合征模型小鼠肠道组织中Th1/Th2的漂移

目的 观察感染后肠易激综合征(PI-IBS)模型小鼠肠道组织中Th1细胞因子白细胞介素(IL)-12和Th2细胞因子IL-4表达的变化.方法 30只成年雄性NIH小鼠,分为对照组(8只)和模型组(22只).模型组予以旋毛虫幼虫囊胞感染,每周测量小鼠体重,于感染后8周通过腹壁回撤反应(AWR)评分评估小鼠对结直肠扩张的内脏敏感性.感染后8周处死所有小鼠,取空肠、末端回肠、近端结肠和远端结肠行病理切片,HE染色观察肠道炎症情况.应用RT-PCR和Western印迹法检测肠道各部位组织中IL-12和IL-4的mRNA和蛋白表达量.结果 模型组感染后2周体重增长率为-1.08%±1.08%,明显低于正常组(3.09%±1.35%,P<0.05),感染后8周体重变化与对照组差异无统计学意义(P>0.05).模型组感染后2周肠道炎症明显,感染后8周肠道无明显炎症表现.在结直肠扩张压力为30、45和60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)时,模型组AWR评分均高于正常组(P<0.05);模型组疼痛阈值低于正常对照组(P<0.05).模型组小鼠末端回肠和近端结肠组织中IL-12 mRNA及蛋白表达量均高于对照组(P<0.05);IL-4 mRNA及蛋白在各肠段中的表达均低于对照组(P<0.05).结论 PI-IBS小鼠肠道组织中存在Th1/Th2平衡漂移,为PI-IBS的治疗提供新的思路.     

大麻素1型受体在应激大鼠内脏敏感性调节中的作用

目的 研究大麻素1型受体(CB1R)对急性部分束缚应激大鼠内脏敏感性的调节作用.方法 将30只Sprague-Dawley大鼠均分成空白对照组(假性应激)、应激对照组和激动剂组.于实验第1、2、5、8天以测定结直肠气囊扩张(CRD)后腹壁肌电图(EMG)放电频率表示大鼠内脏感觉功能的变化.通过RT-PCR方法 检测实验第8天各组肠道CBIR mRNA表达水平.结果 实验第1天,三组大鼠腹壁肌电放电频率基础值差异均无统计学意义(P值均>0.05).实验第2天,激动剂组大鼠在40、60、80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)压力下的腹壁肌电放电频率[分别为(22.37±1.49)、(42.24±3.03)、(69.09±5.54)次/min]较应激对照组大鼠[分别为(39.71±1.84)、(84.45±8.85)、(112.56±11.66)次/min]显著降低(P<0.05).实验第5天,应激对照组大鼠在40、60、80 mm Hg压力下的腹壁肌电放电频率[分别为(104.12±6.77)、(158.07±18.68)、(193.58±25.69)次/min]较空白对照组[分别为(36.33±5.42)、(74.07±8.25)、(102.94±7.95)次/min]和激动剂组[分别为(74.66±6.44)、(140.10±4.68)、(160.39±5.60)次/min]增多,差异均有统计学意义(P值均<0.05).实验第8天各组大鼠同一压力下的腹壁肌电放电频率差异均无统计学意义(P值均>0.05).应激对照组大鼠回盲部、近端结肠和远端结肠CB1R mRNA表达水平(分别为2.53±0.52、2.29±0.42、2.54±0.29)均显著高于空白对照组(分别为0.56±0.15、0.73±0.12、0.82±0.09),差异均有统计学意义(P值均<0.05).CB1R激动剂干预对大鼠肠道CB1RmRNA表达无影响.结论 CB1R在束缚应激所致大鼠内脏高敏感中起重要的保护性调节作用.     

雷公藤内酯醇对慢性脑缺血模型大鼠海马突触素和突触后致密物95的影响

目的探讨雷公藤内酯醇对慢性脑缺血(CCI)模型大鼠海马神经元突触素(SYN)和突触后致密物95(PSD-95)表达的影响。方法取30只雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组、治疗组,每组10只。模型组和治疗组采用双侧颈总动脉永久性结扎法(2-VO)建立CCI模型。对照组大鼠只暴露双侧颈总动脉。治疗组大鼠每日腹腔注射雷公藤内酯醇0.4 mg/kg,连续注射28 d。采用免疫组织化学法和RT-PCR法检测各组大鼠海马SYN和PSD-95蛋白及mRNA的表达。结果免疫组织化学染色结果显示,治疗组大鼠海马CA1区分子层SYN阳性产物数量和平均光密度明显高于模型组;治疗组大鼠海马CA1区锥体层PSD-95阳性细胞数和平均光密度值明显高于模型组。RT-PCR结果显示,治疗组大鼠海马SYN和PSD-95 mRNA含量较模型组增加。结论雷公藤内酯醇能促进大鼠海马SYN和PSD-95蛋白及mRNA的表达。     

慢性饮酒及戒断对老年大鼠学习记忆的影响

目的探讨慢性饮酒及戒断对老年大鼠学习记忆的影响及其机制。方法 36只雄性老年SD大鼠随机分为对照组、乙醇组和戒断7 d组,每组12只。对照组大鼠正常饮水饲养;乙醇组大鼠以6%(V/V)酒精作为唯一饮水来源,持续30 d,建立慢性酒精依赖大鼠模型;戒断7 d组大鼠以6%(V/V)的酒精作为唯一饮水来源,持续30 d后,恢复正常饮水7 d。Morris水迷宫实验观察各组大鼠学习记忆成绩,电生理实验检测强直性高频刺激对海马长时程增强(LTP)的影响。免疫荧光实验检测海马CA1区和前额叶皮层突触可塑性蛋白(PSD-95)表达的变化。结果乙醇组较对照组大鼠逃避平台潜伏期时间连续3个实验日均显著延长(P0.01),与乙醇组比较,戒断7 d组大鼠逃避平台潜伏期时间连续3个实验日均显著变短(P0.05);强直性高频刺激可诱导3组大鼠海马CA1区电活动呈现LTP样变化,乙醇组LTP幅值较对照组显著降低(P0.05),戒断7 d组LTP幅值较乙醇组显著升高(P0.05);在海马和前额叶皮层,乙醇组PSD-95的表达较对照组显著减少(P0.01),戒断7 d组PSD-95表达较乙醇组显著增加(P0.05)。结论慢性饮酒导致老年大鼠空间记忆能力减退,可能与酒精对海马和前额叶皮层神经元的损伤使突触可塑性降低、PSD-95表达减少有关。     

结肠灵通过调节NLRP3炎性小体活化对感染后肠易激综合征大鼠内脏敏感性的机制研究

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症小体在结肠灵调节感染后肠易激综合征(PI-IBS)内脏高敏感性中的作用及分子机制。方法选取SPF级雄性SD大鼠40只随机分配到4组:正常对照组、模型组、结肠灵组和阳性对照组。HE染色检测大鼠结肠组织中性粒细胞等炎症细胞浸润情况及黏膜损伤状况;利用腹壁回缩反射(AWR)评分和粪便含水量评估大鼠的内脏敏感性。ELISA检测大鼠血清中IL-18和IL-1β表达;Western blotting检测NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β及NF-κB表达。结果正常对照组大鼠结肠黏膜完整,无炎症细胞浸润;模型组大鼠结肠黏膜受损,有大量炎症细胞(中性粒细胞等)浸润,AWR评分值显著升高(P0.01),粪便含水量也显著增加(P0.01);给予药物干预后黏膜组织完整性恢复,降低了炎症细胞浸润,AWR评分值和大鼠粪便含水量显著降低(P0.05)。结肠灵干预降低了大鼠血清中IL-18和IL-1β含量(P0.05),显著抑制NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β及NF-κB蛋白表达(P0.05)。结论结肠灵可能通过NF-κB通路抑制NLRP3炎症小体活化,降低大鼠结肠黏膜炎症,改善PI-IBS大鼠内脏敏感性。     

旋毛虫肠道急性感染后小鼠内脏敏感性的变化

目的观察旋毛虫肠道急性感染后不同造模时间点小鼠内脏敏感性的变化,以建立模拟人感染后肠易激综合征内脏高敏感的动物模型。方法旋毛虫幼虫囊胞（350-400条）感染成年NIH小鼠,分别于感染后2、4、8、12周后称量小鼠体质量的变化,通过腹壁回撤反应（AWR）评分评估感染前后不同造模点小鼠对结直肠扩张（CRD）的内脏敏感性,处死小鼠取空肠、末端回肠、近端结肠和远端结肠行HE染色观察肠道病理并对炎症情况进行评分。结果2、4周组体质量增长率低于正常组（P〈0.05）,8、12周组体质量增长率与正常对照组无差异（P〉0.05）;2、4周组肠道各部位炎症评分高于正常组,（Bonferroni校正P〈0.05／10）,8、12周组与正常组相比均无差异（Bonferroni校正P〉0.05／10）。在扩张压力为30、45、60mm Hg时,各模型组AWR评分均高于正常组（P〈0.05）;所有模型组疼痛阈值、容量阈值均低于同时间点正常对照组（P〈0.05）。结论小鼠旋毛虫急性感染后8周肠道炎症消退,但内脏敏感性维持增高,因此适合作为感染后肠易激综合征内脏高敏感动物模型。     

Synaptic Plasticity: The New Explanation of Visceral Hypersensitivity in Rats with <Emphasis Type="Italic">Trichinella spiralis</Emphasis> Infection?

Background and Aim Synaptic plasticity plays an important role in affecting the intensity of visceral reflex. It may also be involved in the development of visceral hypersensitivity. The aim of this study was to investigate the role of synaptic plasticity on visceral hypersensitivity of rats infected by Trichinella spiralis. Methods Thirty male Sprague–Dawley (SD) rats were randomly divided into control, acute, and chronic infection groups, and were investigated at 1 week after adaptive feeding and at 2 and 8 weeks post infection (PI) by oral administration of 1 ml phosphate-buffered saline (PBS) containing 8,000 Trichinella spiralis larvae. Visceral sensitivity was evaluated by electromyography (EMG) recording during colorectal distension. Intestinal inflammation was observed by hematoxylin-eosin (HE) staining. Synaptic ultrastructure parameters, such as postsynaptic density (PSD) length, synaptic cleft, and number of synaptic vesicles, were examined by transmission electron microscopy (TEM). The expression of protein associated with synaptic plasticity, including postsynaptic density-95 (PSD-95), synaptophysin, calbindin-28 K, N-methyl-D-aspartate receptor-1 (NMDA-R1), α-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid receptor (AMPA-R), and glial cell line-derived neurotrophic factor (GDNF), were analyzed by Western blot. Results (1) Visceral hypersensitivity was noted in the chronic infection group, although the inflammation was nearly eliminated (P < 0.05). Severe inflammation and downregulation of visceral sensitivity were observed in the acute infection group (P < 0.05). (2) There were many more synaptic vesicles and longer PSD in the chronic infection group than in the control group (P < 0.05, respectively). However, in comparison with control rats, disappearance of mitochondria cristae in the synapses, and decrease of synaptic vesicles and length of PSD were observed in the acute infection group. There was no significant difference in width of synaptic cleft among the three groups. (3) Compared with the control, the expression of proteins associated with synaptic plasticity was significantly upregulated during chronic infection phase (P < 0.05), and downregulated during acute infection phase. Conclusion Synaptic plasticity was observed in SD rats infected by Trichinella spiralis and was associated with visceral sensitivity, which suggests that it may play an important role in the formation of visceral hypersensitivity.     

内脏高敏感大鼠白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子α与5-羟色胺转运体的表达

目的 研究内脏高敏感大鼠结肠细胞因子和5-羟色胺(5-HT)转运体(SERT)的表达,为细胞因子和5-HT系统在内脏高敏感性产生机制中的作用提供依据.方法 16只胎龄小于8 d的新生SD大鼠被随机分为2组,每组8只.采用乳鼠醋酸灌肠法建立大鼠慢性内脏高敏感动物模型,以盐水灌肠作为对照组.待乳鼠成年后应用直肠内球囊扩张检测腹碓收缩阈值和弓背抬起阈值的方法评估其内脏敏感性;通过检测髓过氧化物酶(MPO)评价肠道黏膜炎症程度;采用免疫组化的方法检测大鼠结肠组织中IL-1β和TNFα的水平;采用Western blot方法检测大鼠结肠组织SERT的表达水平.结果 两组大鼠体重增长趋势基本一致,HE染色显示结肠黏膜未见明显急、慢性炎症改变;两组大鼠结肠组织MPO水平相比,差异无统计学意义[(0.497±0.570)U/g湿片比(0.623±0.739)U/g湿片,P=0.724];实验组大鼠腹壁收缩阈值和弓背抬起阈值分别为(0.19±0.06)ml和(0.47±0.13)ml,较对照组大鼠[(0.40±0.14)ml和(0.91±0.26)ml]显著减低,P＜0.01;实验组大鼠结肠IL-1β、TNFα的表达水平(0.196±0.002和0.194±0.001)均显著高于对照组(0.185±0.001和0.182±0.001),P＜0.01;实验组大鼠SERT蛋白相对表达水平(0.298±0.038)较对照组(0.634±0.200)显著减低,P＜0.05.结论 内脏高敏感大鼠IL-1β和TNFα的表达升高,SERT的表达水平减低,细胞因子与SERT可相互影响,IL-1β、TNFα和SERT可能在大鼠内脏高敏感性的发生机制中具有一定的作用.     

辣椒素敏感的感觉神经参与大鼠慢性应激所致的内脏高敏感

目的 探索慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)所致的大鼠内脏敏感性改变中神经源性炎症参与的证据.方法 给辣椒素去感觉神经支配模型大鼠行为期21d的CUS,以直肠扩张诱发的腹部撤回反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)分值评价内脏敏感性,以全结肠黏膜组织髓过氧化物酶(MPO)活性评价黏膜炎性改变,用甲苯胺蓝+曙红染色法行肥大细胞(MC)计数,电镜观察超微结构改变,以MC膜稳定剂doxantrazole干预效果推断MC的作用.结果 ①给予1周CUS即可明显增高大鼠对不同水平的直肠扩张的AWR分值,与对照组比较,在0.4 ml扩张水平(2.56±0.50比1.25±0.50,P=0.04),0.8 ml扩张水平(3.76±0.50比1.41±0.30,P=0.02)和1.2 ml扩张水平(3.89±0.40比1.74±0.40,P=0.03)差异均有统计学意义.辣椒素去神经支配可抑制CUS所致的AWR评分增高(P＜0.05).② CUS可明显增加大鼠结肠黏膜MPO活性(P＜0.01),辣椒素去神经支配和(或)MC膜稳定剂干预可降低CUS所致的结肠黏膜MPO活性增多(P＜0.05).③CUS可明显增加近端结肠MC数目,MC膜稳定剂doxantrazole可抑制此效应.④电镜观察CUS组多见MC与血管、神经呈聚集现象;血管内皮细胞病理性增生,管壁增厚,血管内出现血小板聚集现象;细胞凋亡多见.结论 MC参与的神经源性炎症是CUS所致的内脏高敏感的发病机制之一.     

拮抗或激活促肾上腺皮质激素释放因子受体对肠易激综合征大鼠内脏敏感性及结肠动力的影响

目的 探讨促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)及其受体对肠易激综合征大鼠内脏敏感性及结肠动力的影响.方法 SD大鼠60只,随机平均分入空白组(不做处理)、模型组(特殊气味条件刺激和肢体束缚直肠刺激非条件刺激轮替致敏)、干预对照组(造模前侧脑室注射0.9%NaC1)、干预一组(造模前侧脑室注射CRF-R1拮抗剂)和干预二组(造模前侧腑室注射CRF-R2激动剂).采用腹部收缩反射(AWR)评分标准评估各组大鼠肠道敏感性,记录各组大鼠结肠快、慢波波动率、最大振幅、收缩波数及振幅指数等电生理活动改变.采用SPSS16.0统计软件分析,计量资料采用方差分析,等级资料采用秩和检验.结果 以AWR=3分时所需的直肠注水量作为评价指标,模型组大鼠[(0.90±0.11)ml]较空白组[(1.23±0.07)ml]内脏敏感性增高(F＝82.586,P＜0.01);结肠电生理活动增强,造模成功.干预对照组直肠注水量为(0.81±0.11)ml,与模型组[(0.90±0.11)ml]差异无统计学意义(F＝3.734,P＞0.05),干预一组[(1.28±0.07)ml,F＝161.878,P＜0.01]和干预二组[(1.22±0.05)ml,F＝121.564,P＜0.01]较干预对照组内脏敏感性降低.干预对照组大鼠结肠快、慢波波动率、最大振幅、收缩波数及振幅指数等电生理活动与模型组无明显差异(P均＞0.05);干预一组和干预二组大鼠结肠电生理活动均较干预对照组明显减弱(均P＜0.05).结论 CRF在IBS发病中起重要作用,抑制CRF-R1或激活CRF-R2可降低1BS大鼠内脏敏感性并抑制结肠运动.

Abstract：

Objective To explore the effect of corticotropin releasing factor (CRF) and its receptor on visceral sensitivity and colon motility of irritable bowel syndrome (IBS) rats. Methods sixty SD rats were divided randomly and equally into control group (without treatment),model group (sensitized in turn with camphor odor as conditional stimulation and physical restraint in combination with rectal distention pressure as non-conditional stimulation),treatment control group (injected physiological saline into lateral ventricles before treatment),treatment group 1 (injected CRF-R1antagonist into lateral ventricles before treatment),treatment group 2 (injected CRF-R2 agonist into lateral ventricles before treatment). Then the rats' visceral sensitivity were assessed by AWR,and colonic electricity activities such as volatility,maximum amplitude of fast wave and slow wave,interdigestive number of contraction wave and index of contraction were recorded. The data was analyzed with SPSS 16. 0 software. Results By the amount of ractal water injection to reach AWR=3 as the evaluation index,model group [(0. 90±0. 11) ml] showed higher visceral sensitivity than that of control group [(1. 23±0. 07) ml,F=82. 586,P＜0. 01],and colonic electricity activity increased (P＜0. 05),model was successfully set up. There was no significant difference of the amount of ractal water injection between model group [(0. 90±0. 11) ml] and treatment control group [(0. 81±0. 11) ml,F=3. 734,P＞0. 05]. Compared with treatment control group,the visceral sensitivity decreased in treatment group 1 [(1. 28±0. 07) ml,F=161. 878,P＜0. 01] and treatment group 2 [(1. 22±0.05) ml,F=121. 564,P＜0. 01]. There was no significant difference between treatment control group and model group in electricity activities such as volatility,maximum amplitude of fast wave and slow wave,interdigestive number of contraction wave and index of contraction (all P＞0. 05). While the electricity activities was weakened in treatment group 1 and 2 compared with the treatment control group (all P＜0. 05). Conclusions CRF plays an important role in the pathogenesis of IBS. Inhibition of CRF-R1 or activation of CRF-R2 may lower visceral hypersensitivity and decrease colon motility of rats.     

2型糖尿病大鼠肺组织内皮素-1、降钙素基因相关肽及P物质水平变化及其对肺动脉高压的影响

目的 探讨2型糖尿病大鼠肺组织内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)的变化.方法 3个月龄健康雄性Wistar大鼠10只,采用高脂饲料喂养联合30μg/g链脲佐菌素尾静脉注射制备2型糖尿病大鼠模型.另设正常对照组(n=8),给予普通饮食.造模成功后12周末股动脉放血处死大鼠,取右下肺组织行Weigert来复红弹力纤维染色,计算与呼吸性细支气管、肺泡管伴行的肺小动脉管壁厚度占血管外径百分比(WT%)以及管壁面积占血管总面积百分比(WA%).应用免疫组织化学方法观察肺组织ET-1、CGRP、SP表达水平.数据统计采用独立样本t检验.结果 与正常对照组比较,糖尿病组大鼠肺泡隔面积与视场总面积比(0.42±0.10 vs 0.29±0.06,t=5.842,P＜0.05)、肺动脉WT%(26%±8%vs 19%±9%,t=3.023,P＜0.05)和WA%(42%±8% vs 36%±9%,t=2.526,P＜0.05)均显著增加,ET-1、SP平均吸光度(ET-1:86±5 vs 83±4,t=2.402,P＜0.05;SP:101±4 vs 100±3,t=2.530,P＜0.05)和阳性面积/视场总面积比(ET-1:0.016±0.017 vs0.010±0.008,t=2.501,P＜0.05;SP:0.014±0.014 vs 0.009±0.009,t=2.127,P＜0.05)显著增加,CGRP平均吸光度和阳性面积/视场总面积比差异无统计学意义.结论 糖尿病大鼠存在肺动脉高压的病理结构改变,可能与其肺组织ET-1表达增加有关.     

腹部内脏脂肪沉积的老年非代谢综合征患者脂联素瘦素比值的变化

目的 观察体质指数正常、腹部内脏脂肪沉积的非代谢综合征老年男性患者血清脂联素、瘦素水平及脂联素瘦素比值的变化.方法 将入选的老年非代谢综合征男性患者109例分为2组,内脏无脂肪沉积组67例,内脏脂肪沉积组42例.采用CT方法测定内脏脂肪面积,当腹部内脏脂肪面积≥100cm2,为内脏脂肪沉积;采用LINCO公司提供的放射免疫试剂盒测定空腹血脂联素、瘦素水平;代谢综合征的诊断采用2004年中国糖尿病学会制定的标准.结果 (1)脂肪沉积组与无脂肪沉积组比较,体质指数、内脏脂肪面积均显著升高,体质指数分别为(22.94±1.35)kg/m2对(21.38±2.55)kg/m2(P＜O.001),内脏脂肪面积(135.6±31.7)cm2对(68.6±22.6)cm2(P＜O.001);脂联素瘦素比值降低.分别为2.17±1.77对4.54±7.00(P=0.031);而脂联素、瘦素水平在两者间差异无统计学意义;(2)脂联素瘦素比值与体质指数(r=-0.552,P＜0.001)、腰围(r=-0.390,P＜0.001)、腹部内脏脂肪面积(r=-0.311,P＜0.001)呈负相关.结论 体质指数正常有内脏脂肪沉积与无内脏脂肪沉积的老年男性比较.脂联素瘦素比值明显下降.并与腹部脂肪面积显著负相关.提示血清脂联素瘦素比值可能可用于筛选体质指数正常有腹部内脏脂肪肪沉积的患者.     

Variability of cell proliferation in the proximal and distal colon of normal rats and rats with dimethylhydrazine induced carcinogenesis

AIM: To investigate the patterns of cell proliferation inproximal and distal colons in normal rats and rats with 1,2-dimethylhydrazine (DMH) induced carcinogenesis using thethymidine analogue bromodeoxyuridine.METHODS: Colonic crypt cell proliferation wasimmunohistochemically detected using the anti-bromodeoxyuridine Bu20a monoclonal antibody.RESULTS: Marked regional differences were found in bothgroups. Total labelling index (LI) and proliferative zone sizein both normal (8.65±0.34 vs 7.2±0.45, 27.74±1.07 vs16.75±1.45) and DMH groups (13.13±0.46 vs 11.55±0.45,39.60±1.32 vs35.52±1.58) were significantly higher in distalthan in proximal colon (P＜0.05), although the number ofcells per proximal crypt was greater (31.45±0.20 vs34.45±0.39, 42.68±0.53 vs49.09±0.65, P＜0.0001). Crypt length,total LI and proliferative zone size all increased in both proximaland distal regions of DMH rats compared to normal controls(P＜0.0001). In DMH-treated rat colon a shift of labelled cellsto higher crypt cell positions was demonstrated distally whilsta bi-directional shift was evident proximally (P＜0.05).CONCLUSION: Our results show that changes in cellproliferation patterns, as assessed by bromodeoxyuridineuptake, can act as a reliable intermediate marker of coloniccancer formation. Observed differences between proliferationpatterns in distal and proximal colon may be associated withthe higher incidence of tumors in the distal colon.     

粪便microRNAs检测用于胰腺癌筛查诊断的价值评价

目的 检测胰腺癌患者粪便microRNAs,评价其诊断价值.方法 收集29例胰腺癌患者、22例慢性胰腺炎(CP)患者以及13例健康志愿者的粪便标本,抽提粪便总RNA,应用实时定量PCR法检测各组样本miR-21、miR-155、miR-181a、miR-181b、miR-196a、miR-210的表达量,以miR-16作为内参基因.应用接受者操作特征(ROC)曲线(AUC)评估microRNAs对胰腺癌的诊断价值.结果 粪便总RNA抽提及microRNAs检测方法具有稳定及可重复性.胰腺癌组miR-181b、miR-196a、miR-210的表达量分别为2.22±0.64、2.78±0.14、5.55±0.38;CP组为1.42±0.39、3.88±0.85、5.39±0.69;对照组为0.32±0.40、1.14±0.98、4.23±0.99.胰腺癌组和CP组均较对照组显著增加(P值均＜0.05);而胰腺癌组与CP组间无显著差异.胰腺癌组对对照组的miR-181b AUC为0.745(95%CI 0.597～0.894),诊断胰腺癌的敏感性和特异性分别为84.6%和51.7%;miR-210的AUC为0.772(95%CI 0.629～0.914),对胰腺癌的诊断敏感性和特异性分别为84.6%和65.5%.两组比较差异均有统计学意义(P值均＜0.05).miR-196a对胰腺癌无诊断意义,但胰腺癌患者粪便miR-196a的表达与肿瘤直径相关(r=0.516,P=0.041).结论 粪便RNA的抽提和microRNAs检测为无创性,且具有可重复性.miR-181b和miR-210在胰腺癌患者粪便中的表达增高,有可能是胰腺癌潜在的分子标志物.     

慢性重度心力衰竭患者血B型利钠肽浓度正常的临床意义探讨

目的 探讨慢性重度心力衰竭(心衰)患者出现血B型利钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)浓度正常的临床意义.方法 采用前瞻性对照研究的方法观察心功能Ⅲ～Ⅳ级的慢性重度心衰患者57例.血BNP浓度正常的13例患者为研究组(A组),血BNP浓度明显升高的44例为对照组(B组),分析两组患者的临床特点,判定血BNP浓度正常对于慢性重度心衰患者的意义.结果 两组患者的基线情况差异无统计学意义.A组的左室舒张末期内径大于B组[(70.56±4.33)mm与(63.73±3.75)mm,P＜0.05];A组的左室射血分数小于B组[(24.16±2.50)%与(28.49±2.63)%,P＜0.05].A组中能耐受美托洛尔的人数比例少于B组[(7/13)与(39/44),P＜0.05],耐受剂量低于B组[(12.5±6.25)mg/d与(24.20±11.22)mg/d,P＜0.05].两组血BNP浓度在稳定期各时间段无明显改变,但在慢性心衰急性发作与缓解后,A组无显著性改变[(74.03±11.18)ng/L与(71.38±11.68)ng/L,P＞0.05],而B组改变明显[(962.73±165.00)ng/L与(876.24±167.70)ng/L,P＜0.05].随访中,A组病死率高于B组(11/13与6/44,P＜0.05).Logistic多因素回归分析显示:血BNP降低为预测重度慢性心衰患者心原性死亡的独立危险因素(OR值45.488,95%可信区间5.322～388.791),P＜0.05.结论 慢性重度心衰患者出现血BNP浓度正常提示BNP分泌机制的耗竭和心脏功能的进一步恶化.     

辅助性T淋巴细胞1、2、17在慢性乙型肝炎病毒感染状态中的变化

目的 了解慢性HBV感染中辅助性T淋巴细胞(Th)1、Th2、Thl7产生的主要细胞因子的表达,以反映这3种细胞的功能状态.方法 ELISA测定34例慢性乙型肝炎、31例肝硬化、26例原发性肝癌、22例慢性重型乙型肝炎患者及15例健康对照者m清中的1FN-γ、IL-4和IL-17水平,对数据进行t检验和Pearson相关分析.结果 IFN-γ/IL-4在慢性乙型肝炎患者(1.08±0.66)比健康对照者(2.60±0.60)降低(P＜0.01),在慢性重型乙型肝炎患者(4.81±0.87)比健康对照者升高(P＜0.01);IFN-γ/IL-17在慢性乙型肝炎(1.13±0.85,P＜0.01)、肝硬化(1.69±0.92,P=0.010)、肝癌(1.76±0.84,P=0.011)患者比健康对照者(2.66±0.70)降低,在慢性重型乙型肝炎患者(3.68±0.42)比健康对照者升高(P=0.004);IL-4/IL-17在肝硬化(0.72±0.38,P=0.026)、肝癌(0.63±0.19,P＜0.01)患者比健康对照者(1.04±0.23)降低.结论 慢性乙型肝炎患者IL-4的表达占优势;肝硬化、肝癌患者IL-17的表达占优势;慢性重型乙型肝炎患者IFN-γ的表达占优势.