急性炎症对黑色素瘤基质金属蛋白酶影响的研究

目的:研究急性炎症对黑色素瘤生长及肿瘤基质金属蛋白酶(MMP)-9和MMP-2的表达水平的影响.方法:采用C57BL小鼠,构建B16小鼠黑色素瘤动物模型,待肿瘤生长至0.5 cm2时构建伤口模型,分为单纯肿瘤组(对照组)和伤口+肿瘤组(实验组),比较肿瘤体积大小,免疫组织化学染色检测肿瘤组织MMP-2和MMP-9的表达,明胶酶谱法分析MMP-2和MMP-9活性.结果:(1)实验组肿瘤体积在5 d和7 d时明显小于对照组(P<0.05或P<0.01).(2)在造模后7 d实验组MMP-2的细胞阳性表达率低于对照组(P<0.01),11 d时2组比较差异无统计学意义(P>0.05);7 d和11 d实验组MMP-9阳性表达率均低于对照组(P<0.01).实验组MMP-2和MMP-9酶活性在7 d时低于对照组(P<0.01),11 d时2组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:急性炎症早期可影响肿瘤组织MMPs的表达,明显抑制黑色素瘤生长;而急性炎症晚期则对黑色素瘤生长和MMPs失去抑制作用.     

魟鱼软骨多糖对小鼠恶性黑色素移植瘤MMP-9表达的影响

目的:研究魟鱼软骨多糖(RCG)对小鼠恶性黑色素移植瘤基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:体外培养黑色素瘤细胞(B16),接种B16细胞于C57BL/6小鼠右侧腋下部位,复制小鼠黑色素瘤模型。实验分为生理盐水(等容生理盐水)、环磷酰胺(CTX,60mg·kg-1)和魟鱼软骨多糖高、中、低剂量(700、300、100mg·kg-1)组,灌胃给药,每天1次,连续21d。观察肿瘤生长情况,计算原发瘤抑制率;采用Westernblot方法检测肿瘤组织中MMP-9的蛋白表达情况;采用RT-PCR方法检测MMP-9的基因表达情况。结果:与生理盐水组比较,魟鱼软骨多糖高、中、低剂量组小鼠原发瘤抑制率显著升高(P<0.01);魟鱼软骨多糖高、中、低剂量组MMP-9蛋白表达、基因表达显著降低(P<0.01)。结论:魟鱼软骨多糖能明显抑制小鼠黑色素瘤原发瘤的生长,可能与其抑制肿瘤MMP-9的蛋白表达和MMP-9mRNA的表达有关。     

Caspase 8和9在肿瘤局部微环境形成早期与调控蛋白Twist1的关联性

目的:研究Caspase 8、9在肿瘤局部微环境早期线形程序性坏死(LPPCN)及血管生成拟态(VM)形成中对上皮-间充质转变(EMT)调控蛋白Twist1表达的影响。方法:将96只C57BL小鼠随机分为Caspase 8抑制剂组、Caspase 9抑制剂组、Caspase 8、9抑制剂联合用药组(联合组)和对照组,制备小鼠荷瘤模型。采用免疫组织化学法检测EMT调控蛋白Twist1在LPPCN和VM周围第1~4层肿瘤细胞的表达水平。结果:4组LPPCN周围第1~4层肿瘤细胞Twist1核阳性染色指数差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且呈递减趋势;对于同层肿瘤细胞,联合组和对照组的细胞核Twist1阳性染色指数比较差别有统计学意义(均P<0.01)。LPPCN、VM周围第1~4层肿瘤细胞、同一层不同组的肿瘤细胞浆Twist1阳性染色指数差异均无统计学意义(均P>0.05);VM周围第1~4层肿瘤细胞、同一层不同组的肿瘤细胞核Twist1阳性染色指数差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:Caspase 8、9介导的凋亡机制启动与EMT发生存在关联性。     

鲨鱼软骨提取物对C_(57)BL/6J小鼠B_(16)黑色素瘤肺转移的影响

目的：评价鲨鱼软骨提取物（SCAE）对C57BL／6J小鼠B16黑色素瘤肺转移的影响。方法：小鼠经尾静脉接种B16黑色素瘤细胞悬液（5×104／每鼠）后d21，观察SCAE低、中、高剂量及环磷酰胺、生理盐水对照组小鼠肺部转移瘤生长情况。结果：SCAE及环磷酰胺对C57BL／6J小鼠经血道B16黑色素瘤肺转移均有明显的抑制作用，其肺校重及肺转移灶数均低于对照组，但后者主要免疫器官胸腺呈现明显萎缩，而SCAE各剂量组无此毒副作用。     

沙利度胺对小鼠恶性黑色素瘤生长及血管生成模式的影响

目的:观察沙利度胺对恶性黑色素瘤(恶黑)生长及血管生成模式的影响,为对其治疗提供实验依据.方法:B16黑色素瘤移植瘤模型C57小鼠35只,随机分为实验组20只,对照组15只,分别给予沙利度胺及0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃.计数肿瘤组织中内皮依赖性血管、马赛克血管和血管生成拟态数目及肿瘤细胞坏死情况,并进行血管内皮细胞生长因子(VEGF)、核因子(NF)-κB、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫组化染色.结果:给药9d后.实验组小鼠的肿瘤体积明显小于对照组(P＜0.05).实验组内皮依赖性血管、马赛克血管和血管生成拟态数量显著低于对照组(P＜0.05),且实验组VEGF、NF-κB、PCNA、MMP-2及MMP-9的表达也明显低于对照组(P＜0.05).实验组肿瘤组织中坏死细胞数明显高于对照组(P＜0.05).结论:沙利度胺可以抑制恶黑血管生成.促进肿瘤细胞的坏死,抑制肿瘤的生长.     

GD1a对基质金属蛋白酶-9在不同细胞类型中表达的调控作用

目的在不同的细胞类型中,检测神经节苷脂GD1a是否抑制基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。方法采用逆转录PCR法和酶谱法检测MMP-9及MMP-2的表达。结果在鼠黑色素瘤B16细胞中,神经节苷脂GD1a促进MMP-9的表达,而在小鼠肺癌Lewis细胞、人单核细胞THP-1及人子宫颈癌HeLa细胞中,神经节苷脂GD1a降低MMP-9的表达。在上述细胞中,神经节苷脂GD1a不影响基质金属蛋白酶MMP-2的表达;肿瘤坏死因子TNF-α在这几种细胞中均能促进MMP-9的表达,但对MMP-2无影响;在B16细胞中,GD1a通过胞窖膜介导信号传递,并且主要通过ERK促进MMP-9的表达,而在Lewis细胞中,GD1a不通过胞窖膜介导信号传递,但部分通过p38、ERK和JNK抑制MMP-9表达。结论在不同的细胞类型中,神经节苷脂GD1a能够激活不同的信号转导途径。     

去乙酰化胃肠激素联合G-CSF及bFGF促进糖尿病大鼠缺血后肢血管新生的研究

目的:研究去乙酰化胃肠激素(UAG)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)联合碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)对糖尿病大鼠缺血后肢血管新生的促进作用及作用机制。方法:以120例Wistar大鼠为研究对象,随机将其划分为A、B、C三组,并将每组40例进一步划分出组1、组2,各组1均为正常后肢缺血模型、组2均为糖尿病后肢缺血模型。A1、A2组不予药物干预;B1、B2组予G-CSF联合b FGF干预;C1、C2组予UAG、G-CSF联合b FGF干预。术后1周,每组取10只大鼠,检测缺血区组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达;术后4周,余大鼠行激光多普勒检测后肢肌肉血流后,处死并检测缺血区组织毛细血管数量。结果:MMP-9及VEGF表达均呈现C组>B组>A组、各组1>各组2趋势,且C组与A组、B组与A组间差异有统计学意义,同时C2组MMP-9及VEGF表达均明显高于B2组(P<0.05);组内对比,A1、B1组分别明显高于A2、B2组(P<0.05)。肌肉血流及毛细血管数量亦呈现C组>B组>A组、各组1>各组2趋势,且C1组与A1组,B1组与A1组,C2、B2、A2间差异均有统计学意义(P<0.05);组内对比A1、B1组分别明显高于A2、B2组(P<0.05)。结论:UAG联合G-CSF与b FGF可有效促进糖尿病大鼠缺血后肢血管新生,其机制可能与促进MMP-9、VEGF的表达有关。     

rhIL-24对黑色素瘤B16细胞的体内外抑瘤作用

目的 研究重组人白细胞介素24（rhIL-24）及真核表达基因重组质粒pcDNA3．0-hIL-24对黑色素瘤B16细胞（B16细胞）及其荷瘤小鼠体内外抑肿瘤作用。方法 用rhIL-24蛋白作用于小鼠B16细胞，检测其对B16细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用，并用rhIL-24蛋白及pcDNA3．0-hIL-24治疗荷瘤小鼠。结果 rhIL-24蛋白对体外培养的B16细胞具有显著的抑制生长和诱导凋亡作用，rhIL-24蛋白及pcDNA3．0-hIL-24对C57／BL6小鼠体内形成的恶性黑色素瘤具有明显的抑瘤作用。结论 rhIL-24蛋白具有生物活性，他及真核表达重组质粒对B16细胞及其小鼠种植瘤生长有抑制作用，并能诱导肿瘤细胞凋亡及促进其分化。     

大黄素对CT26结肠癌小鼠的作用研究北大核心CSCD

目的研究大黄素对CT26结肠癌小鼠调节性T细胞(Treg cell)及对血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法从40只BALB/c小鼠中随机选取10只作为对照组,剩余30只小鼠右前肢腋窝皮下接种CT26细胞构建CT26结肠癌小鼠模型,28只建模成功,随机分为模型组10只、实验组9只及阳性对照组9只。实验组小鼠腹腔注射100mg·kg^(-1)大黄素,阳性对照组腹腔注射20 mg·kg^(-1)5-氟尿嘧啶(5-FU),模型组及对照组则腹腔注射等量生理盐水,每天1次,连续干预14 d。比较各组肿瘤体积及肿瘤抑制率;用流式细胞仪检测各组肿瘤局部Treg cell比例;用免疫组化法检测肿瘤组织中VEGF-C及MMP-9蛋白表达情况。结果与模型组比较,实验组及阳性对照组肿瘤体积显著缩小,肿瘤质量显著降低(P<0.01),且实验组及阳性对照组肿瘤抑制率分别为(45.43±9.58)%及(69.61±8.79)%;模型组、实验组和阳性对照组淋巴组织混悬液中Treg cell比例分别为(53.26±8.42)%,(46.22±7.95)%,(48.12±7.93)%;肿瘤组织混悬液中Treg cell比例分别为(18.56±6.21)%,(3.78±1.41)%,(2.17±1.01)%;VEGF-C蛋白表达评分分别为(2.11±0.45),(0.68±0.36),(0.31±0.12)分;MMP-9蛋白表达评分分别为(2.31±0.39),(1.11±0.41),(0.45±0.24)分。与模型组比较,实验组及阳性对照组淋巴组织混悬液及肿瘤组织中Treg cell比例及肿瘤组织中VEGF-C、MMP-9蛋白表达评分均显著降低(P<0.01)。结论大黄素可有效抑制Treg cell向CT26结肠癌小鼠肿瘤局部迁移,并降低肿瘤组织中VEGF-C及MMP-9蛋白表达,抗癌效果显著。     

共培养体系中小鼠囊胚对人卵巢癌细胞系HO-8910PM的影响

目的:观察两种具有侵袭特性的小鼠囊胚细胞与人卵巢癌细胞在相同的体外微环境下,动态的相互作用和整体生物学行为变化。方法:建立小鼠囊胚与人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM体外共培养模型,应用MTT法检测HO-8910PM细胞黏附率的改变;应用Transwell体外细胞侵袭实验观察HO-8910PM细胞体外侵袭及趋化性运动能力的变化;应用RT-PCR检测HO-8910PM细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1、TIMP-2mRNA的表达。结果:癌细胞与小鼠囊胚共培养24h后,大部分囊胚开始边脱带边黏附,推开底层的癌细胞,在囊胚与肿瘤细胞间形成了明显的界限。共培养组的HO-8910PM细胞的黏附率低于对照组。Transwell小室体外侵袭实验及体外趋化性运动实验显示,共培养组穿过滤膜的细胞数明显少于对照组。共培养组MMP-2、MMP-9mRNA的表达及MMP/TIMP较对照组明显下降,TIMP-1、TIMP-2mRNA的表达略有增加。结论:当人HO-8910PM细胞与小鼠囊胚共培养时,肿瘤细胞失去了特有的侵袭性;小鼠囊胚能显著降低HO-8910PM细胞的黏附、体外侵袭能...     

miR-21调控PTEN/AKT通路影响LPS诱导下足细胞中MMP-2和MMP-9表达

目的 研究microRNA-21（miRNA-21,miR-21）在同源性磷酸酶张力蛋白（PTEN）及磷酸化蛋白激酶B（pAKT）信号通路中对脂多糖（LPS）刺激下足细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9表达的影响及调控机制。方法取传3~8代足细胞,分为LPS组和对照组,LPS组给予10 mg/L LPS,对照组给予相同剂量磷酸盐缓冲液。24 h后采用实时荧光定量PCR法和ELISA法分别检测miR-21、MMP-2及MMP-9的表达,并分析miR-21和MMP-2、MMP-9的相关性。构建外源性miR-21干扰的LPS刺激下足细胞损伤模型,采用Western blot检测外源性miR-21对MMP-2、 MMP-9、PTEN和p-AKT表达的影响。结果 与对照组比较,miR-21与MMP-2、MMP-9在LPS刺激下足细胞中表达升高,两者呈正相关（P＜0.05）。外源性上调miR-21表达,MMP-2、MMP-9和p-AKT表达升高,PTEN表达降低（P＜0.05）;而外源性抑制miR-21表达,MMP-2、MMP-9和p-AKT表达降低,PTEN表达升高（P＜0.05）。结论 miR-21可通过调控PTEN/AKT通路促进LPS刺激下足细胞MMP-2和MMP-9表达。     

Survivin与MMP-9在子宫内膜异位症在位内膜中的表达

目的:检测子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜中survivin与MMP-9的表达情况并分析两者表达的相关性.方法:收集80例子宫内膜异位症患者子宫内膜标本为EMs在位内膜组(EMs组),其中临床分期Ⅰ期4例、Ⅱ期25例、Ⅲ期44例与Ⅳ期7例;增殖期47例,分泌期33例.以20例同期手术的单纯子宫肌瘤患者子宫内膜作为对照组,其中增殖期内膜7例,分泌期13例.采用免疫组化二步法检测2组标本中survivin与MMP-9的表达;并应用IPP专业图像分析系统进行定量分析.结果:survivin与MMP-9均在子宫内膜胞浆中表达.在EMs组中增殖期survivin和MMP-9及分泌期survivin表达均高于对照组(P＜0.01);其中,survivin表达与细胞周期无关,呈持续性高表达.EMs组不同临床分期间survivin表达,Ⅱ期明显高于Ⅲ期,其余各分期间表达差别无统计学意义(均P＞0.05);而MMP-9在各AFS分期中表达差别均无统计学意义(均P＞0.05).Pearson相关性分析表明survivin与MMP-9在子宫内膜异位症在位内膜中表达呈正相关(r=0.262,t=2.860,P＜0.05).结论:survivin与MMP-9在子宫内膜异位症形成及进展过程中均起关键的作用.     

多西环素对大鼠阿霉素心肌病的防治作用及其机制研究

目的研究基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂多西环素(doxycycline,DOX)能否防治阿霉素心肌病(ADRDCM)左室重构及其作用机制。方法♂Wistar大鼠分3组:①阿霉素心肌病组(ADRDCM,n=25),阿霉素2.5mg·kg-1,尾静脉注射,每周1次,连续10wk;②阿霉素心肌病+多西环素治疗组(DOX,n=25),DOX30mg·kg-1,每天1次,灌胃治疗;③正常对照组(CON,n=10)。12wk时进行超声和血流动力学检测评价心功能,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,逆转录聚合酶链反应检测MMP2、MMP9及TIMP1的表达,明胶酶谱法检测MMPs活性。结果DOX组较ADRDCM组死亡率明显降低(16%vs40%,P<0.01)。与CON组相比,ADRDCM组大鼠左室舒张末期内径及收缩末期内径增加,左室短轴缩短率、左室内压最大上升速率和最大下降速率明显降低(P均<0.01)。DOX组左室内径增加程度降低,心功能各项指标改善。ADRDCM组MDA含量较CON组增加(P<0.01),而DOX治疗对MDA含量的增加无影响。ADRDCM组左室心肌MMP2、MMP9mRNA表达较CON组明显升高(P<0.01),MMPs明胶酶活性增加(P<0.01),DOX组明显抑制MMP2、MMP9mRNA表达,明显降低升高的MMPs明胶酶活性,而TIMP1的表达在3组间差异均无显著性(P>0.05)。结论ADRDCM左室心肌MMPs表达及活性上调,MMPs抑制剂多西环素通过抑制MMPs表达及活性可部分逆转ADRDCM左室重构,改善心功能。     

皮肤恶性黑色素瘤患者瘤组织中MMP-9、Nm23-H1和MTA1蛋白表达水平及临床意义

目的 探讨皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中基质金属蛋白酶(MMP)-9、Nm23-H1和肿瘤转移相关基因蛋白1(MTA-1)表达水平及其临床意义.方法 收集2013年10月-2015年12月收治的CMM 64例存档的蜡块标本作为CMM组,选取同期外科切取的28例皮肤交界痣标本及18例正常皮肤分别作为皮肤交界痣组与正常对照组.检测3组MMP-9、Nm23-H1和MTA-1蛋白的表达水平.结果 MMP-9、MTA-1蛋白在CMM组中阳性表达率最高,在皮肤交界痣组及正常对照组中阳性表达率逐渐降低(P ＜0.05);CMM组Nm23-H1蛋白阳性率低于正常对照组及皮肤交界痣组(P＜0.05);MMP-9、MTA-1蛋白在CMM组中阳性表达率随Clark分级的增高逐渐升高,有淋巴结转移者阳性表达率高于无淋巴结转移者(P＜0.01);Nm23-H1在CMM组中阳性表达率随Clark分级的增高逐渐降低,有淋巴结转移者阳性表达率低于无淋巴结转移者(P＜0.01).结论 MMP-9、Nm23-H1和MTA1的表达水平在一定程度反映了CMM的病情,联合检测MMP-9、Nm23-H1和MTA1表达水平可为临床评估患者病情提供准确资料.     

阿托伐他汀对颅脑外伤后小胶质细胞激活的影响

摘要： 目的 观察阿托伐他汀对颅脑损伤 （TBI） 后小胶质细胞激活的影响。方法 将 60 只 C57/BL6 小鼠随机分为假手术组、 生理盐水组和阿托伐他汀组, 各 20 只。生理盐水组和阿托伐他汀组采用液压打击法制作 TBI 模型。假手术组不进行液压打击。阿托伐他汀组打击后 1 h 给予阿托伐他汀 （每天 1 mg/kg） 灌胃, 连续 7 d。生理盐水组给予等量生理盐水灌胃。采用免疫组化法检测造模后第 1、 3、 7 天创伤灶周围小胶质细胞特异性标志物 （Iba-1） 的数量及第 3 天基质金属蛋白酶 （MMP） -9 水平; Western blot 检测炎症因子肿瘤坏死因子 （TNF） -α水平。结果 造模后第 1、 3、 7 天, 阿托伐他汀组小鼠创伤灶周围 Iba-1 阳性表达量较生理盐水组均显著降低 （80.00±7.44 vs. 118.40± 6.65, 85.60±10.87 vs. 189.00±7.51, 69.40±5.54 vs. 102.40±10.89, P＜0.05）。TBI 后第 3 天, 阿托伐他汀组 MMP-9 阳性表达量与生理盐水组相比也显著下降 （86.80±8.40 vs. 133.80±8.46, P＜0.05）; Western blot 检测发现阿托伐他汀组与生理盐水组相比 TNF-α表达下降 （0.64±0.01 vs. 0.97±0.02, P＜0.05）。结论 阿托伐他汀能减少小鼠 TBI 后小胶质细胞的激活, 减少炎症因子的表达, 起到抗炎作用。     

贝那普利对糖尿病大鼠心肌细胞外基质重塑中基质金属蛋白酶及转化生长因子表达的影响

目的研究贝那普利对糖尿病大鼠心肌基质重塑的作用机制。方法 SD大鼠ip注射链脲佐菌素制备糖尿病模型。治疗组ig给予BZ 10 mg.kg-1,连续12周。光镜及电镜下观察左心室心肌组织改变,测定心脏质量指数;Western印迹法测定左心室心肌组织胶原Ⅰ型及Ⅲ型含量,基质金属蛋白酶2(MMP-2),金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP-2)表达及转化生子因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的变化。结果与正常对照组相比,糖尿病组大鼠心脏质量指数明显升高,胶原Ⅰ型及Ⅲ型表达明显增加(P<0.05),MMP-2表达减少、TIMP-2表达增加(P<0.01),TGF-β1和CTGF表达明显增强(P<0.05),心肌间质纤维增生。大鼠连续ig给予贝那普利12周后,心脏质量指数明显降低〔(4.13±0.18)vs(3.42±0.13)mg.g-1〕;胶原Ⅰ型及Ⅲ型表达明显减少(P<0.05),MMP-2表达增加,TIMP-2表达减少(P<0.05),TGF-β1及CTGF表达明显减弱(P<0.05),心肌间质纤维增生减轻。与正常对照组相比,贝那普利组大鼠心肌MMP-2表达减少,TIMP-2及CTGF表达仍增加。结论贝那普利可能通过抑制糖尿病大鼠心肌组织TGF-β1和CTGF表达以及增强基质金属蛋白酶表达,从而抑制糖尿病心肌间质纤维化,改善心肌细胞外基质重塑。     

甘草酸二铵干预兔基底动脉瘤形成的实验研究

目的 探讨甘草酸二铵 （DG） 干预兔基底动脉瘤发生的作用机制。方法 新西兰白兔 40 只, 按照随机数 字表法分为对照组、 动脉瘤 （IA） 组、 生理盐水 （NS） 组、 DG 组, 每组 10 只。其中对照组不做任何处理, 其余各组结扎 双侧颈总动脉建立基底动脉瘤形成模型。在造模后的第 1~7 天, IA 组不做处理, DG 组给予 DG ［20 mg/ （kg·d）］ 静脉 注射, NS 组注入等剂量生理盐水。使用免疫组化染色方法检测基底动脉尖核转录因子核因子 kappa B（NF-κB）、 基 质金属蛋白酶 9 （MMP-9） 表达情况, 使用免疫荧光染色方法检测基底动脉尖 α-平滑肌细胞肌动蛋白 （α-SMA） 表达 情况。结果 IA 组和 NS 组 NF-κB 和 MMP-9 表达均高于对照组, α-SMA 表达量低于对照组 （P＜0.05）; IA 组和 NS 组差异无统计学意义（P＞0.05）。DG 组 NF-κB 和 MMP-9 表达低于 IA 组和 NS 组（P＜0.05）, 而 α-SMA 表达量高 于 IA 组和 NS 组 （P＜0.05）。结论 DG 可抑制 NF-κB 和 MMP-9 的表达, 减轻血管壁内炎症反应, 抑制颅内动脉瘤 的形成。     

EM患者子宫内膜组织的ESCs中miR-539表达水平及其靶向MMP-9对ESCs侵袭和迁移的影响

目的 探究子宫内膜异位症（EM）患者子宫内膜组织的子宫内膜基质细胞（ESCs）中miR-539表达水平, 以及miR-539靶向基质金属蛋白酶9（MMP-9）对ESCs侵袭和迁移的影响。方法 收集60例EM患者子宫内膜异位 组织及47例正常子宫内膜组织,分离ESCs原代培养,实时荧光定量PCR检测miR-539和MMP-9 mRNA表达水平, 并采用双荧光素酶报告基因检测其靶向关系。利用Lipofectamine 3000试剂转染ESCs,并将其分为miR-539 mimics 组、mimics NC组、miR-539 inhibitors组和inhibitors NC组。CCK-8检测各组细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移; Transwell检测细胞侵袭;Western blot法检测各组细胞中MMP-9蛋白表达水平。结果 EM组miR-539 mRNA水平 显著低于对照组,MMP-9 mRNA水平显著高于对照组（P＜0.05）。双荧光素酶报告实验结果显示miR-539与MMP-9 具有明显的靶向关系（P＜0.05）。与mimics NC组相比,miR-539 mimics组ESCs细胞增殖、划痕愈合率、侵袭细胞数 量及MMP-9蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）;与inhibitors NC组相比,miR-539 inhibitors组ESCs细胞增殖、划痕 愈合率、侵袭细胞数量及MMP-9蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。结论 miR-539可靶向调节MMP-9表达水 平,影响ESCs的增殖、迁移和侵袭。     

红花提取物预防腹主动脉缩窄大鼠左室肥厚的实验研究

目的:研究红花提取物对腹主动脉缩窄术后大鼠左室心肌肥厚的作用,并探讨其作用机制。方法:取52只Wistar大鼠,行腹主动脉部分缩窄术制作左室心肌肥厚模型,其中12只大鼠行假手术。术后1周将手术组随机分为模型对照组、卡托普利组(100mg·kg-1)、红花组(40mg·kg-1),连续灌胃6周后,麻醉大鼠称量大鼠体重、左室心肌重量,计算左心室重量指数(LVMI);观察组织细胞结构改变;应用ELISA法测量血清MMP2、MMP9表达。结果:腹主动脉缩窄术后大鼠LVMI增加,MMP2、MMP9的表达增多,红花组、卡托普利组能显著降低LVMI,并且抑制MMP2、MMP9的表达。结论:红花提取物能有效预防因腹主动脉缩窄所致的左心室壁肥厚和LVMI增加,抑制MMP2、MMP9的表达,说明红花抑制左室肥厚的形成可能与之有关。     

NOD2、TNF-α、MMP-9及Caspase-3在胎膜早破 发病中的作用及意义

目的 探讨胎膜早破患者胎膜组织核苷酸结合寡聚化结构域受体 2（NOD2）与基质金属蛋白酶-9（MMP- 9）、活化型 Caspase-3蛋白及羊水中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平表达的相关性,为进一步了解胎膜早破的病因学 及治疗途径提供新思路。方法 选择足月胎膜早破、未足月胎膜早破、正常妊娠晚期妇女各 30例,应用免疫组织化 学染色法及蛋白印迹技术检测各组胎膜组织 NOD2、MMP-9及活化型 Caspase-3的蛋白表达部位及水平,ELISA法检 测羊水中 TNF-α水平,并分析四者表达的相关性。结果 胎膜早破组胎膜组织 NOD2、MMP-9、活化型 Caspase-3表 达及羊水 TNF-α水平高于正常妊娠晚期组（P＜0.05）,未足月胎膜早破组 NOD2表达及羊水 TNF-α水平高于足月胎 膜早破组（P＜0.05）,MMP-9及活化型 Caspase-3在足月胎膜早破组胎膜组织中的表达与未足月胎膜早破组相比差 异无统计学意义。胎膜组织中 NOD2表达水平与羊水 TNF-α水平、胎膜组织中 MMP-9及活化型 Caspase-3的表达呈 正相关（均 P＜0.01）。结论 NOD2、TNF-α、MMP-9、活化型 Caspase-3表达水平升高与胎膜早破的发生相关;四者 在胎膜早破发病机制中存在关联。