老鸦瓣芽茎组织培养初步研究

目的 建立老鸦瓣芽茎愈伤组织诱导及丛生芽增殖体系。方法 以老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎为外植体,MS为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤诱导、分化及丛生芽增殖的影响。结果 芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 2.0 mg/L,愈伤诱导率78.54%,诱导出的愈伤组织在原培养基上继代培养增殖后即可进行芽分化;愈伤分化不定芽最佳培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,芽诱导率为66.21%;丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数2.48。结论 筛选出芽茎诱导愈伤、分化不定芽及丛生芽增殖的培养基,初步建立了老鸦瓣芽茎组织培养体系。     

丹参无菌培养体系构建及有效成分含量的HPLC分析

目的 构建丹参无菌培养体系并进行无菌材料有效成分含量测定,为丹参快繁及次生代谢调控研究提供基础。方法 利用正交实验筛选丹参叶片诱导愈伤组织的激素配比,并进行芽、根的诱导,建立组织培养体系;HPLC法分析有效成分含量。结果 丹参愈伤组织诱导最佳培养基为MS＋6-BA（2.0 mg/L）＋NAA（1.0 mg/L）＋2,4-D（0.5 mg/L）,最适生芽培养基为MS＋6-BA（2.0 mg/L）＋NAA（1.0 mg/L）,生根培养基为1/2 MS＋NAA（0.5 mg/L）。丹参7种有效成分在无菌苗、愈伤组织和再生苗中均可检测到,含量有显著差异（P<0.05）,其中迷迭香酸与丹酚酸B含量较高。结论 成功建立了丹参愈伤组织培养体系并获得生长旺盛的再生苗;3种无菌材料有效成分积累存在差异,为丹参进一步研究奠定基础。     

波棱瓜愈伤组织诱导及植株再生研究

目的研究波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的条件,探讨波棱瓜快速繁殖新途径,为波棱瓜组织培养与离体植株再生奠定基础。方法以波棱瓜幼嫩茎段和叶片为材料,比较不同外植体、基本培养基及植物生长调节剂对波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果幼嫩茎段作为外植体时,其出愈率较叶片高,愈伤量大;MS基本培养基能够产生明显的愈伤组织,出愈率较高;幼嫩茎段愈伤组织诱导适宜的培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.5 mg/L,出愈率达93.3%。愈伤组织的最佳分化培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.1 mg/L+KT 3.0 mg/L,分化率达87.2%。生根培养的适宜培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg/L,生根率达95%。结论波棱瓜幼嫩茎段在适宜的培养基中可通过愈伤组织途径分化不定芽,且极易生根,能够得到正常生长发育的再生植株。     

羌活植物离体培养及植株再生研究

目的:建立羌活植物的离体培养方法及植株再生体系,为保护羌活野生植物资源和发展人工育种技术提供新的途径。方法:通过组织培养方法,对羌活根茎、幼叶、幼芽及芽鞘进行研究,并研究不同植物激素对最佳外植体形成愈伤组织、分化不定芽和诱导不定芽生根形成完整植株的影响,筛选出最佳培养基配方。结果:羌活芽鞘是诱导愈伤组织的最适外植体,芽鞘愈伤组织诱导最佳培养基为MS+2,4-D 1.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+NAA 0.4mg/L,30 d后诱导率为73.33%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,30 d后诱导率为65.54%;诱导无根苗生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.3 mg/L,30 d后生根率为81.11%;选取根系生长良好的组培苗,先在沙砾基质中栽培1周,再移栽到有机质土壤中,30 d后成活率100%。结论:在筛选出最佳外植体的基础上,通过诱导出愈伤组织,并进一步完成对不定芽的诱导及无根苗生根培养,筛选出培育羌活组培苗的最佳条件。     

云南珍稀民族药黑蒴茎芽组织培养快繁体系研究

目的建立黑蒴茎芽愈伤组织诱导、分化及生根组织培养快繁体系。方法以黑蒴带节嫩茎芽为外植体,以MS(1/2MS)为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤组织诱导、分化及茎芽生根的影响。结果芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,愈伤诱导率71.2%;愈伤分化不定芽最佳培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,芽诱导率为84.2%;茎芽生根培养基为1/2MS+NAA 0.1~0.3 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,生根率超过87.2%。结论筛选出茎芽诱导愈伤、分化不定芽、生根的培养基,建立了黑蒴嫩茎芽组织培养快繁体系。     

箭根薯愈伤组织诱导及无性系的建立

目的 诱导箭根薯愈伤组织及建立无性系.方法 以箭根薯野生种为材料,采用不同激素组合对不同部位(根茎、叶片、叶柄)进行诱导,对比诱导效果,筛选出最佳部位及各个生长阶段的最佳激素组合.结果 外植体的消毒以0.1％ HgC12溶液处理8 min的效果最佳;诱导愈伤组织最佳外植体为叶柄;愈伤组织诱导的最佳培养基是MS +6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,在此培养基上使用叶柄诱导愈伤组织的诱导率达到100％;不定芽诱导分化的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,分化率高达90％;生根诱导的最佳培养基为含1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,生根率高达100％.结论 筛选出诱导箭根薯愈伤组织最佳诱导外植体及激素组合.     

防风愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

目的建立防风Saposhnikovia divaricate再生体系。方法研究不同外植体、温度、培养基、光照条件对诱导防风愈伤组织的影响,采用响应面试验设计,优化愈伤组织诱导及增殖的激素配比。结果以防风的叶片为外植体,诱导愈伤组织最适培养基为MS+6-BA 0.90 mg/L+2,4-D 1.05 mg/L+KT 0.96 mg/L,25℃恒温12 h/d光照培养;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.56 mg/L+2,4-D 0.48 mg/L+KT 0.40 mg/L,继代周期为35 d;诱导丛生芽最适培养基为MS+NAA 0.6 mg/L+6-BA 1.0 mg/L;最适生根培养基为MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 0.1 mg/L。结论成功诱导防风愈伤组织并建立稳定高效的植株再生体系。     

白术组培快繁技术

白术外植体诱导及植株再生试验结果表明:NAA为白术叶片、叶柄愈伤组织诱导和芽分化的主导因子;MS BA 1.0 mg/L NAA 0.3 mg/L GA30.2 mg/L为白术叶片、叶柄愈伤组织诱导、芽分化的最佳培养基;腋芽增殖的培养基以MS BA 0.3 mg/L IBA 0.5 mg/L较为理想,诱导率达95%;1/2MS IBA 0.1~0.5 mg/L为白术试管苗生根的最佳培养基,生根率在90%以上;试管苗移栽成活率达90%以上。     

北柴胡愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件研究

目的研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件,探讨快速繁殖的新途径。方法选择优良的北柴胡类型,在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中,进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果附加2,4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导,其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

天门冬组培快繁体系研究

目的 建立天门冬组培快速繁殖体系,保护和合理利用天门冬资源.方法 采用不同基本培养基和不同种类及质量浓度的植物生长调节剂对天门冬不同外植体进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及生根培养研究.结果 愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,pH 5.8;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+ 1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L LAA,pH 5.8;生根的适宜培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,其中培养基中铁盐的质量浓度降低到6.95 mg/L,蔗糖的质量浓度降低至20 g/L,pH值为5.8.结论 天门冬不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中嫩芽诱导愈伤率最高,为天门冬最适组织培养的外植体;利用组织培养技术能够实现天门冬快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.     

滇龙胆丛芽高效诱导与植株再生体系的建立

目的以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体,建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系,筛选出适宜的植株再生途径。方法以MS为基本培养基,在单因素实验的基础上,通过L16(45)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10 d、节上腋芽开始萌发后,基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织,得愈率为97.73%;15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽,分化率100%;30 d后不定芽分化系数达18.65,增殖系数可达63.58。带叶茎尖为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5mg/L中培养30 d后,增殖系数亦可达44.36。2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱,不利于生根培养,试管苗在MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP333 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗。复壮苗生根则在1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。再生苗移栽成活率达95%以上。结论建立的滇龙胆无性快速繁殖体系,为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了实验基础。     

珊瑚樱丛芽高效诱导体系及植株再生研究

目的以珊瑚樱Solanum pseudo-capsicum种子为实验材料,建立珊瑚樱高效、稳定的丛芽诱导体系,优化组织培养条件,筛选出适宜的植株再生途径。方法将消毒后的种子接种于空白MS、OM和WPM培养基中,培养45 d后获得无菌苗;在此基础上,选取茎尖、带芽茎段和叶片为外植体材料,通过正交试验研究不同基本培养基和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果适宜珊瑚樱生长的基本培养基为WPM;3种外植体中叶片是最适宜诱导愈伤组织的材料,在WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L中可在7d内诱导出分化能力极强的愈伤组织,得愈率为100%,10d内即分化为大量绿色丛芽,愈伤组织丛芽分化率亦达100%;带芽茎段在上述培养基中亦能诱导出愈伤组织,得愈率为81.7%,20 d后开始分化出丛芽;而茎尖可以诱导出愈伤组织,但无再分化能力。适宜丛芽增殖培养基为WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,30d增殖系数6.0以上。无菌苗生根则在1/2WPM+NAA0.01 mg/L中进行,30 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。生根苗移栽至排水良好的沙土中,保温保湿培养25 d后,成活率90%以上。结论为保持珊瑚樱优良品种特性、种苗繁殖提供了有效途径,也为其优良品种的培育和遗传转化研发奠定了良好基础。     

铁皮石斛原球茎高效再生体系的研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale实生种子为外植体,研究铁皮石斛原球茎的增殖、分化、诱导生根等条件,筛选出适宜铁皮石斛原球茎高效再生的诱导条件,建立高效的再生体系。方法以铁皮石斛种子为外植体,在培养基上诱导产生原球茎,经过增殖培养后,转移到分化培养基中诱导芽苗分化,待分化的芽苗长到1~2 cm时,转移到生根培养基诱导生根,最终长成完整的再生植株。结果适宜铁皮石斛生长的基本培养基为1/2 MS;原球茎诱导的培养基为1/2 MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+50 g/L土豆泥;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高增殖系数达23;最佳分化培养基为1/2 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,平均分化率最高达95%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L NAA+50 g/L土豆泥,生根率达100%。结论铁皮石斛实生种子是铁皮石斛离体繁殖的优良外植体来源。以铁皮石斛种子诱导获得的高效再生技术体系可以为铁皮石斛快速繁殖和工厂化生产提供理论基础。     

北细辛叶柄愈伤组织的增殖培养及器官分化研究

目的研究北细辛Asarum heterotropoides叶柄愈伤组织增殖培养、再生芽分化及不定根诱导的最适条件,建立高效的愈伤组织培养和再生体系。方法以北细辛幼嫩叶柄诱导出愈伤组织,于含不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)的增殖培养基中扩大培养,选取嫩绿致密的愈伤组织接种在不同激素浓度配比的分化培养基上诱导再生芽及不定根,经驯化后移栽。结果愈伤组织增殖较适培养基为1/2 MS+0.40 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,在含0.40 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA的1/2 MS培养基中再生芽分化率最高,无激素添加的1/2 MS培养基适于壮苗培养,不定根诱导最适培养基为1/4 MS+0.25 mg/L IBA。结论确定北细辛愈伤组织增殖及分化的最适培养基及激素水平,建立了完善的北细辛再生体系,成功获得再生植株。     

五指毛桃组织培养获得再生植株的研究

目的采用组织培养快繁技术培养五指毛桃种苗,为人工种植提供种源。方法采用五指毛桃叶片作外植体,以MS和1/2 MS为基本培养基,采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、2,4-D、IAA、KT和IBA)对五指毛桃初代诱导、不定芽分化和诱导生根的影响。结果不定芽最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,外植体经20 d诱导培养,可分化形成不定芽72个;MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L KT最利于不定芽继代增殖,增殖倍数6.67;1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA最适于诱导生根获得再生植株,生根率100%;宜移栽于泥炭-珍珠岩(1︰1)的基质上,成活率为93%。结论此途径繁殖速度快、再生率高,能为栽培五指毛桃提供大量种苗。     

白芨愈伤组织诱导、增殖与分化研究

目的 建立白芨愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系.方法 以MS为基本培养基,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究不同外植体及植物生长调节剂对白芨愈伤组织形成、增殖和分化的影响.结果 白芨假鳞茎为诱导愈伤组织形成的最佳外植体;1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)与2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)组合不仅可诱导白芨愈伤组织形成,还有利于愈伤组织分化成芽.1.0 mg/L 6-BA与3.0 mg/L 2,4-D的组合促进愈伤组织增殖,增殖系数为7.8;在分化培养基中附加0.5 mg/L噻二唑苯基脲(TDZ),可提高愈伤组织分化率.结论 白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;分化最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L.     

黑果枸杞基茎丛生芽诱导及植株高效再生体系的建立

目的优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件,探索有效增殖方式,筛选适宜的植株再生途径,建立其人工高效繁殖技术体系。方法以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料,采用MS、改良的MS1以及改良的MS2为基本培养基,通过单因素、完全组合及L_9(3~4)正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响。结果在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L培养基中,可诱导出大量愈伤组织,但其再分化能力较弱,培养35 d后最高增殖系数仅为4.36;而在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养,随着腋芽萌发,茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点,萌发出基茎丛生芽,发生率达100%,培养45 d增殖系数最高可达到42.84;试管苗生根的适宜培养基为改良的MS1+NAA 1.0 mg/L,培养40 d后生根率达98.9%;试管苗经炼苗后移栽成活率90%以上。结论研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径,成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系,不仅大大提高了试管苗的产量及品质,也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路。