SOD拟似剂Tempol改善间歇性低氧小鼠主动脉舒张功能

目的 探索超氧化物歧化酶(SOD)拟似剂四甲基哌啶(Tempol)对间歇性低氧小鼠血管舒张功能的影响。方法 将雄性C57小鼠随机分为正常氧(Control)组、间歇性低氧(IH)组、间歇性低氧Tempol干预(IH+Tempol)组。IH组和IH+Tempol组小鼠放入低氧仓进行间歇性低氧处理，每天8 h,连续4周。IH+Tempol组在间歇性低氧处理最后一周每天给予Tempol(100 mg/kg)灌胃。离体血管张力测定系统检测血管的功能，荧光探测针-二氢乙啶(DHE)染色法检测血管活性氧(ROS)含量，ELISA法测量一氧化氮(NO)浓度。结果 与Control组相比，间歇性低氧4周后，IH组小鼠胸主动脉对乙酰胆碱(ACh)引起的内皮依赖性舒张功能下降、心肌肥大，胸主动脉中ROS增加而NO水平降低；应用Tempol可使IH小鼠胸主动脉中ROS水平降低、NO浓度增加，改善间歇性低氧引起的内皮依赖性舒张功能受损和心肌肥大。结论 Tempol可能通过降低ROS,增加NO的生物利用度，改善间歇性低氧引起的心血管功能障碍。     

醋柳黄酮对大鼠离体主动脉环的舒张作用及机制研究

目的:探讨醋柳黄酮(TFH)对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用及其与内皮的关系.方法:采用离体血管环技术制备大鼠胸主动脉环,并置于灌流槽中.使用累积加药法,检测TFH对去甲肾上腺素(NE)预收缩的胸主动脉环张力的影响,并分为去内皮组及非去内皮组,对TFH扩血管作用对照研究.结果:TFH对离体大鼠内皮完整和去内皮的胸主动脉环均呈剂量(浓度为0.02g/L;0.04g/L;0.06g/L)依赖性扩血管作用,THF在0.02g/L;0.04g/L的浓度对内皮完整的主动脉环较去内皮主动脉环舒张血管作用更强,有统计学差异(P＜0.05),在0.06g/L的浓度两组均为完全舒张,最大舒张反应均为100%.结论:THF呈剂量依赖性扩血管作用,其舒张血管作用在小剂量呈内皮依赖性,而大剂量呈非内皮依赖性.     

中药黄芪可改善肥胖大鼠内皮依赖性血管舒张功能

目的研究黄芪对高脂饲料喂养的肥胖大鼠离体胸主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响。方法(1)在体研究,SD大鼠随机分为正常对照组、肥胖组、黄芪干预组(高脂饲料喂养同时每天灌胃黄芪液),6周后处死所有大鼠,留取并称量所有大鼠的腹腔内脂肪。采用离体血管环灌流方法,观察各组大鼠离体主动脉环对乙酰胆碱或硝普钠的舒张反应;(2)离体研究,正常对照组和肥胖组各5只,以黄芪液孵育离体血管环,并与空白对照比较,观察黄芪对离体血管环舒张功能的影响。结果肥胖组体脂比较正常组明显增加,黄芪液灌胃6周明显减少肥胖组动物腹部脂肪堆积。肥胖组内皮依赖性血管舒张功能较正常对照组明显下降,黄芪液灌胃6周可部分改善肥胖组动物内皮依赖性血管舒张功能,各组非内皮依赖性血管舒张功能无明显差别。肥胖组离体血管环经黄芪液孵育3h后,其受损的内皮依赖性血管舒张功能可明显改善。结论黄芪可改善高脂饲养喂养的肥胖大鼠受损的内皮依赖性血管舒张功能,其机制可能与缓解胰岛素抵抗以及直接促使内皮细胞NO产生增多有关。     

不同周龄ApoE-/-雄性小鼠离体胸主动脉内皮依赖性舒张作用研究

目的:研究不同周龄ApoE~(-/-)雄性小鼠离体胸主动脉内皮依赖性舒张功能的变化。方法:采用不同周龄(18~44周)ApoE~(-/-)雄性小鼠,分离其胸主动脉,以不同浓度的乙酰胆碱(Ach)分别评价其内皮的完整性,并绘制浓度-舒张曲线,观察不同周龄ApoE~(-/-)小鼠胸主动脉内皮的依赖性舒张作用;胸主动脉行油红O染色,以评价不同周龄ApoE~(-/-)小鼠胸主动脉脂质沉积、斑块面积大小。结果:不同周龄ApoE~(-/-)小鼠离体胸主动脉在浓度为10-5mol/L的Ach作用下,其舒张率均80%,且随着周龄的增加,舒张率呈逐渐降低趋势;与24周相比,48周ApoE~(-/-)雄性小鼠离体胸主动脉在不同浓度Ach下,其舒张率均显著降低;与24周和36周ApoE~(-/-)小鼠相比,48周ApoE~(-/-)小鼠其斑块面积/血管剖面面积显著增加。不同周龄ApoE~(-/-)小鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)差异均无统计学意义(P0.05)。ApoE~(-/-)雄性小鼠胸主动脉内皮完整性、血管舒张功能与周龄呈负相关关系(P0.05),同时与脂质沉积、斑块面积也呈负相关关系(P0.05)。结论:ApoE~(-/-)雄性小鼠血管内皮依赖性舒张率随着周龄及斑块面积/血管剖面面积的增加而降低,其胸主动脉血管内皮依赖性舒张功能与周龄、斑块面积/血管剖面面积呈负相关关系。     

槲皮素对高血压大鼠主动脉环的舒张作用及机制

目的 观察槲皮素(Que)对高血压大鼠离体胸主动脉的舒张作用,探讨其舒张机制.方法 采用腹主动脉缩窄法制备高血压大鼠模型,使用累积加药法,检测Que对去甲肾上腺素(NE)预收缩的高血压大鼠和假手术组胸离体主动脉环张力的影响.分别去除内皮、左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)阻断一氧化氮(NO)合成、吲哚美辛阻断前列环素合成、CHTX阻断钙激活钾通道(Kca),再观察Que对高血压大鼠离体胸主动脉环的舒张作用.结果 无论去内皮与否,Que对高血压大鼠组和假手术组血管环均为剂量依赖性扩张作用;但去内皮后,Que对两组血管环的舒张作用显著减弱(0.05).无论去内皮与否,Que舒张高血压动脉环的作用较假手术组强(0.05).L-NAME预处理后,Que对高血压大鼠血管环舒张作用明显减弱(0.05).用吲哚美辛、CHTX分别预处理高血压动脉环后,Que的舒张血管作用与不加阻滞剂比较无统计学意义(P>0.05).结论 槲皮素对高血压大鼠具有剂量依赖性和内皮依赖性的舒张血管作用.其舒张作用与前列腺素、钙激活钾通道无关,而与内皮一氧化氮有关.     

槲皮素对大鼠主动脉环的舒张作用及机制

目的:探讨槲皮素(Que)对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用及其舒张机制.方法:采用离体血管环技术制备大鼠胸主动脉环,使用累积加药法,检测Que对去甲肾上腺素预收缩的胸主动脉环张力的影响.结果:Que对离体大鼠内皮完整和去内皮的胸主动脉环均呈剂量依赖性扩血管作用.在小剂量Que(1×10-6,3×10-6,1×10-5mol/L)浓度,内皮完整和去内皮胸主动脉环的扩血管作用之间差异无显著统计学意义,但在较大剂量Que (3×10-5,6×10-5mol/L),去内皮后其舒血管作用显著性减弱(P<0.05).用环氧合酶抑制剂吲哚美辛,钙激活钾通道抑制剂CHTX分别预处理后,Que在各剂量组引起的舒张血管作用与不加阻滞剂比较无统计学意义(P>0.05).用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME预处理后,Que在较大剂量(3×10-5,6×10-5mol/L)引起的舒张血管作用明显减低,与不加阻滞剂比较,有统计学差异(P<0.05).结论:槲皮素具有剂量依赖性的舒张血管作用.其舒张作用与前列腺素、钙激活钾通道无关,而与内皮一氧化氮有关.     

桂枝乙醇提取物对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用

[目的]观察桂枝乙醇提取物对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用及其可能的机制.[方法]采用大鼠离体主动脉环灌流模型,观察桂枝乙醇提取物对苯肾上腺素(1.0 μmoL/L)预收缩内皮完整的血管环和去内皮血管环的舒张作用,并观察一氧化氮合酶抑制剂L-硝基精氨酸甲酯和鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝预处理对桂枝乙醇提取物舒张血管作用的影响.[结果]桂枝乙醇提取物对离体大鼠胸主动脉环具有非内皮依赖性的舒张作用,分别用L-硝基精氨酸甲酯和亚甲蓝预处理对桂枝乙醇提取物的舒张血管作用无明显影响.在无钙缓冲液中,桂枝乙醇提取物对血管收缩有抑制作用.[结论]桂枝乙醇提取物对大鼠离体胸主动脉环的舒张血管作用具有非内皮依赖性,其机制可能与抑制血管平滑肌细胞内质网储存钙的释放有关.     

不同方式低氧对大鼠离体主动脉环内皮依赖性舒张功能的影响

目的 比较不同方式低氧对大鼠离体主动脉血管环舒张功能的影响.方法 3组雄性wistar大鼠,分别经正常氧、慢性低氧及间断低氧30 d,取大鼠胸主动脉血管环,测定其对不同浓度(10-8 mol/L～10-5mol/L)乙酰胆碱(Ach)的舒张反应.结果 与常氧对照组比较,持续低氧组血管环对低浓度Ach(10-8,10-8×3mol/L)的舒张反应有所下降(P<0.05).而间断低氧组血管环对多数浓度Ach(10-8、10-8× 3、10-7、10-7×3、10-6mol/L)的舒张反应较常氧对照组和持续低氧组均明显降低(P<0.05或P<0.01).结论 间断低氧易导致大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张(EDVR)功能受损.     

复方丹参滴丸对离体大鼠主动脉环的舒张作用

目的 观察复方丹参滴丸(DSP)对离体大鼠胸主动脉环舒张作用. 方法 采用大鼠离体主动脉环灌流模型,观察累积浓度的DSP(2.7～21.6 g/L)对去甲肾上腺素(NE)、氯化钾(KC1)预收缩内皮完整和去内皮血管环的影响. 结果 DSP对NE预收缩的内皮完整血管环产生剂量依赖性舒张作用,DSP在21.6 g/L对NE预收缩的去内皮血管环产生舒张作用;对KC1预收缩的内皮完整和去内皮血管环产生剂量依赖性舒张作用. 结论 DSP通过内皮和非内皮作用舒张血管.     

脂联素改善肥胖大鼠离体主动脉内皮依赖性血管舒张功能的实验研究

目的 研究脂联素对食物诱导的肥胖大鼠内皮依赖性血管舒张功能的影响.方法 将10只SD雄性大鼠分为2组,正常对照组予普通饲料喂养;高脂饲料组予高脂饲料喂养.6周后处死动物,将3 mm长的主动脉环置于培养皿中,分别以脂联素及脂联素加内皮一氧化氮合成酶特异性抑制剂(L-NAME)孵育离体血管环,并与空白对照比较,在器官浴槽中观察离体胸主动脉环对乙酰胆碱或硝普钠的舒张反应.结果 高脂饲料喂养的大鼠内皮依赖性舒张功能明显受损,其最大舒张程度仅为对照组的29%.脂联素组内皮依赖性血管舒张功能较高脂饲料组增加102%,脂联素加L-NAME组内皮依赖性血管舒张功能接近丧失.结论 脂联素对肥胖动物受损的血管内皮细胞具有确切的直接保护作用.     

千层纸素A内皮依赖性舒张大鼠离体血管的作用

目的：研究千层纸素A对离体大鼠胸主动脉的血管舒张作用及其内皮依赖性作用机制。方法：分离wistar大鼠的胸主动脉,采用离体大鼠胸主动脉环张力测定法检测千层纸素A对1Mmol／L去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）或60mmol／L氯化钾预收缩的大鼠离体胸主动脉环的舒张效应,并观察去内皮或用一氧化氮合酶抑制剂N-硝基L-精氨酸甲酯（NG-nitro-Largininemethylester,LNAME）预处理后千层纸素A舒张血管作用的变化。结果：千层纸素A（10、100μmol／L）可以舒张NE（1μmol／L）和氯化钾（60mmol／L）预收缩的内皮完整的离体血管,10、100μmol／L药物浓度组与溶剂对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;对去内皮血管的舒张作用显著低于内皮完整的血管（P〈0．05,P〈0．01）;终浓度为100μmol／L的L—NAME可以显著降低100μmol／L千层纸素A的舒血管作用,加入L—NAME组-9不加入抑制剂组比较差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论：千层纸素A可通过内皮依赖的一氧化氮途径发挥舒张血管的作用。     

银杏叶水提取物对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用

[目的]探讨银杏叶水提取物对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用及其机制.[方法]建立大鼠离体主动脉环灌流模型,观察银杏叶水提取物对分别经1μmol/L苯肾上腺素及5-HT预收缩的内皮完整血管环和去内皮血管环的舒张作用,并观察左旋硝基精氨酸甲酯（L-NAME）及亚甲蓝预处理对银杏叶水提取物的舒张血管作用的影响.[结果]银杏叶水提取物对大鼠离体内皮完整的胸主动脉环具有浓度依赖性的舒张作用;L-NAME和亚甲蓝预处理可明显抑制银杏叶水提取物的舒张作用.[结论]银杏叶水提取物对大鼠离体胸主动脉环具有内皮依赖性舒张血管作用,其可能机制是通过血管内皮细胞鸟苷酸环化酶途径介导.     

间歇低氧促进大鼠动脉粥样硬化的机制的研究

 目的 观察间歇低氧时大鼠血管平滑肌屏氧酶1（PON1）和Rho激酶的表达,探讨间歇低氧与动脉粥样硬化（AS）之间关系的分子机制。方法 4组雄性Wistar大鼠,分为常氧（A）组、间歇低氧（B）组、间歇低氧+瑞舒伐他汀（C）组和间歇低氧+法舒地尔（D）组,并设立正常对照（E）组,30 d后行血脂、体质量、形态学检测,RT-PCR检测PON1和Rho激酶mRNA表达,并检测PON1和Rho GTPases活性。结果 与E组对比,A、B、C、D组大鼠血脂均显著增高,主动脉内膜增生明显,PON1表达水平及活性显著降低,Rho激酶表达及Rho GTPases活性显著增加;与A组对比,B组大鼠血脂无显著差异,主动脉内膜增生显著增加,PON1表达水平及活性显著降低,Rho激酶表达及Rho GTPases活性显著增加;与B组对比,C组大鼠血脂显著降低,D组大鼠血脂无显著差异,但主动脉内膜增生均明显改善,C组PON1表达及活性显著增加,D组PON1表达及活性无显著差异,但C、D组Rho激酶表达及Rho GTPases活性均显著降低,且2组间无差异。结论 间歇低氧可促进AS发生,PON1及Rho激酶激活与之密切相关。     

不同间歇低氧频率对大鼠血压以及血管内皮功能的影响

目的观察不同频率间歇低氧对大鼠血压的影响及其血管内皮功能的变化。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为常氧对照组(NC组)及4个间歇低氧组(IH1,IH2,IH3,IH4),其低氧频率分别为10次/h、20次/h、30次/h、40次/h。测定实验前后大鼠动脉收缩压、血清内皮素-1、一氧化氮水平。结果 (1)各组大鼠实验前SBP比较差异无统计学意义。6周实验结束后,各IH组SBP较实验前和NC组均显著升高(P0.05或P0.01);随着间歇低氧频率的增加,各IH组大鼠血压逐渐升高,但IH4组较IH3组比较差异无统计学意义。NC组SBP较实验前差异无统计学意义。(2)各IH组血清ET-1水平较NC组相比明显增高(P0.05),血清NO水平显著降低(P均0.01)。随着间歇低氧频率的增加,血清ET-1水平升高,NO水平显著降低(P0.05或P0.01)。IH4组与IH3组相比,各指标差异无统计学意义。结论血管内皮功能障碍在慢性间歇低氧致高血压过程中起着重要的作用。随着间歇低氧频率增高,血压升高及内皮损伤加重,但并非频率越高,损伤越重。     

不同间歇低氧暴露内皮细胞与多形核白细胞共培养下核转录因子KBp65表达水平的研究

目的 探讨不同间歇低氧暴露的内皮细胞和多形核白细胞（ PMN） 共培养后内皮细胞中核转录因子κB p65（ NF-κB p65） 的水平变化。方法 18 只雄性Wistar 大鼠随机分为常氧组和间歇低氧组（ IH 组） 。IH 组暴露于间歇低氧环境中, 氧浓度波动于5. 4% ～20. 7% , 低氧频率为30 次/h,8 h/d,6 周后处死大鼠, 腹主动脉取血, 分离纯化PMN。PMN分别与常氧暴露内皮细胞、IH 暴露内皮细胞（ 低氧频率12 次/h, 共4 h） 共培养4 h。细胞按暴露情况分为常氧内皮＋ 常氧PMN 组, IH 内皮＋常氧PMN组, 常氧内皮＋ IHPMN 组, IH 内皮＋ IHPMN 组。Western blotting 测定内皮细胞中NF-κB p65 浓度, GAPDH 为内参, 以NF-κB p65 /GAPDH 标准化NF-κB p65 的表达量。结果 IH 内皮＋常氧PMN组与常氧内皮＋IHPMN组NF-κB p65 表达量分别为2. 49 ±0. 39 和2. 14 ±0. 33, 两组间差异无统计学意义（ P 〉0. 05） , 但两组均较常氧内皮＋ 常氧PMN 组显著升高（ 0. 68 ±0. 20, P 〈0. 05） 。IH 内皮＋IHPMN组NF-κB p65 表达水平为4. 17 ±1. 48, 较其余三组显著升高（ P 〈 0. 05） 。结论 间歇低氧可分别致内皮细胞和PMN发生炎症反应, 而当两种细胞同时暴露于间歇低氧条件时炎症反应最为严重。上述两种细胞间的相互作用和引发的炎症反应可能是低氧内皮细胞损伤和睡眠呼吸暂停综合征并发心血管合并症的重要原因。     

雷米普利酸对内外源性自由基所致离体血管内皮依赖性舒张功能影响

目的:探讨雷米普利酸(Ramiprilat)对内外源性自由基所致家兔离体胸主动脉内皮依赖性舒张功能损伤的保护作用及其作用机制。方法:采用DPPH(0.25μmol/L)或通过次黄嘌呤(HX 0.06μmol/L)和黄嘌呤氧化酶(XO 2U/L)孵育家兔离体血管环10 min,诱导血管内皮依赖性舒张功能损伤。结果:DPPH和HX+XO诱导产生氧自由基超氧阴离子(O-.2),能明显抑制胸主动脉环对乙酰胆碱(Ach)诱导的血管内皮依赖性舒张反应。用雷米普利酸(5μmol/L)预孵育血管环20 min,可明显改善DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的抑制。而预先用选择性缓激肽B2受体阻断剂HOE140(10μmol/L)孵育血管10 min,可明显抑制雷米普利酸对DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的损伤保护作用。结论:雷米普利酸对DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的损伤具有保护作用,其机制至少部分是通过激活缓激肽B2受体所介导的。     

硝化应激参与衰老血管内皮功能障碍

目的 观察硝化应激对自然衰老大鼠血管内皮形态和功能的影响,探讨衰老时血管内皮功能障碍的机制。方法 3月龄和20月龄两个年龄段健康雄性SD大鼠各12只,分组如下:1 青年对照组(3月龄对照组);2 青年+过氧亚硝基(peroxynitrite,ONOO^-)清除剂内消旋-四(N-甲基-4-吡啶)卟啉五氯化钠(Ⅲ)〔Fe(III) meso-tetra(N-methyl-4-pyridyl) porphine pentachloride,FeTMPyP,3月龄〕;3 老年对照组(20月龄对照组);4 老年+过氧亚硝基清除剂组(FeTMPyP,20月龄)。为抑制过氧亚硝基,腹腔注射给予过氧亚硝基清除剂FeTMPyP(3 mg/kg,每3天1次,共5次)。蛋白印记法(Western blotting)检测肝脏组织衰老相关蛋白P53和P21表达情况;离体胸主动脉血管环灌流,观察血管环对不同浓度乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)的反应;HE染色观察胸主动脉血管结构改变;免疫组织化学法检测血管3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)、内皮标志物血管假性血友病因子(von willebrand factor,vWF)及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)。结果 20月龄衰老大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张功能较3月龄大鼠显著下降,采用过氧亚硝基的清除剂FeTMPyP干预可明显提高衰老血管内皮依赖性舒张功能;HE及免疫组织化学染色结果显示20月龄衰老大鼠胸主动脉较3月龄大鼠均出现较明显的损伤,采用过氧亚硝基的清除剂FeTMPyP干预可明显减轻衰老血管形态学损伤;免疫组织化学结果显示衰老大鼠胸主动脉3-NT升高,提示出现明显的硝化应激反应,采用过氧亚硝基的清除剂FeTMPyP干预可明显降低3-NT。结论 衰老时过氧亚硝基生成增多,硝化应激反应增强,参与血管形态学损伤和血管内皮依赖性舒张功能降低。     

缺氧复氧对家兔不同部位血管反应性的影响

目的：观察缺氧复氧时家兔主、肺和肾的动脉血管反应性的变化。方法：用生物测定法观察缺氧复氧时家兔主、肺和肾动脉的舒缩反应,用张力传感器记录血管环张力变化。结果：缺氧后,有内皮的各动脉环均产生短暂的缺氧性收缩,以肾动脉单位重量的收缩力最大;具有一定张力的各动脉环复氧后立即舒张,随着明显收缩。有内皮的各动脉环复氧后的舒张反应无明显差异。而收缩反应仍以肾动脉最明显,肺动脉其次。去除内皮后,各动脉环缺氧性收     

慢性间歇性低氧对大鼠胸主动脉内皮细胞的影响

目的 探讨慢性间歇性低氧对大鼠胸主动脉内皮细胞的损伤变化。方法 将12只10～12周龄的雄性SD大鼠采用抽签法分为对照组和实验组,每组各6只。实验组大鼠每天10点至18点置于间歇性低氧环境中暴露,对照组大鼠不做低氧处理,共4周。饲养时间结束后取大鼠胸主动脉标本行苏木精-伊红染色（hematoxylin and eosin staining,HE染色）及原位末端转移酶标记法（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay,TUNEL）染色观察细胞病变情况,并计算病变细胞、凋亡细胞在视野中所占比例。结果 HE染色光镜下实验组可见血管内皮细胞肥大,排列不规则,细胞核、胞质着色淡,平滑肌细胞核肿胀;对照组见血管内皮细胞和平滑肌细胞排列规则、细胞核形态及染色正常。TUNEL染色光镜下实验组可见多个凋亡细胞,对照组偶见凋亡细胞。实验组大鼠主动脉组织的细胞病变率及凋亡率均显著高于对照组（P<0.01）。结论 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征所产生的慢性间歇性低氧可损伤大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞并诱导血管内皮细胞凋亡。