秦皇岛市136例慢性乙型肝炎患者拉米夫定的疗效及其与HBV基因型的关系

目的:探讨秦皇岛市慢性乙型肝炎(CHB)患者拉米夫定治疗疗效与基因型的关系。方法:136例CHB患者口服拉米夫定,100mg/次,1次/d,疗程48周,用药前采用PCR方法测定乙型肝炎病毒(HBV)A～D基因型。结果:秦皇岛市CHB患者基因型以C型为主,占75.74%,其次为B基因型占16.91%,B/C混合型占7.35%,B基因型在拉米夫定抗病毒治疗48周时显示HBV DNA阴转率、HBeAg血清转换率、ALT复常率、治疗有效率4方面均高于C型及B/C基因型(P0.05),B基因型HBV感染者有较低的YMDD变异发生率。结论:拉米夫定抗病毒疗效与基因型有关,HBV基因型测定可作为预测拉米夫定抗病毒疗效的指标。     

拉米夫定治疗乙型肝炎病毒B、C基因型疗效比较

目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)基因型对拉米夫定抗病毒疗效的影响。 方法 回顾调查235例拉米夫定治疗组和对照组患者的临床资料。 结果 135例患者接受拉米夫定抗病毒治疗,对照组100例。HBV优势基因型是B型和C型,拉米夫定治疗组有效率分别为92.9％和75.9％(x2=6.628,P<0.05),对照组有效率分别为9.8％和8.5％(P>0.05);YMDD变异发生率治疗组为3.6％和16.5％(x2=5.508.P<0.01)。结果发现,B基因型、丙氨酸氨基转移酶升高、HBV DNA低水平是抗病毒应答预测因素。 结论B基因氆HBV对拉米夫定的应答率优于C型,YMDD变异发生率低于C型,基因型是影响拉米夫定疗效和决定变异的重要因素之一。     

乙型肝炎病毒基因型与YMDD变异的关系

目的:了解乙型肝炎病毒(HBV)基因型与YMDD变异之间的关系.方法:多对型特异性引物PCR扩增法对238例经拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者进行HBV基因分型,直接序列分析;采用基因芯片检测YMDD及前C/BCP区变异.结果:238例患者中,检测出B基因型190例(79.8%),C基因型41例(17.2%),BC混合型7例(3.0%);发生YMDD变异44例,变异率为18.5%,其中B基因型33例,变异率为17.4%,C基因型8例,变异率为19.5%,BC混合型3例,变异率为42.4%,C基因型YMDD变异的发生率与B基因型相比,差异无显著性意义(P＞0.05).44例YMDD变异者中,30例同时存在L528M变异,7例联合前C区(nt 1 896)变异,13例联合BCP区(nt 1 762/1 764)双重突变.结论:本地区慢性乙型肝炎患者中,优势基因型为B型和C型,经拉米夫定治疗后YMDD变异的发生率在B型和C型差异无显著性意义,同时伴有L528M及前C/BCP区多重变异.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者3年疗效观察

目的初步探讨LAM长期治疗HBeAg阳性和HBeAg阴性的两组慢性乙型肝炎(CHB)患者生化学、病毒学指标的变化及临床转归的差异。方法对63例诊断为CHB的患者均给予拉米夫定100mg,每日一次,进行3年的随访观察,动态检测患者的HBV血清标志物,HBV DNA,ALT、AFP、YMDD变异、B超等指标。结果拉米夫定治疗HBeAg阳性和HBeAg阴性的CHB患者3年时,HBeAg阳性组ALT复常率、HBV DNA阴转率、肝细胞癌发生率及HBsAg阴转率分别为64.7%、64.7%、0%、0%;HBeAg阴性组ALT复常率、HBV DNA阴转率、肝细胞癌发生率及HBsAg阴转率分别为70.4%、77.8%、0%、0%。两组间ALT复常率、HBV DNA阴转率、肝细胞癌发生率及HBsAg阴转率两组差异均无统计学意义(P0.05);HBeAg阳性组YMDD变异率(43.3%)显著高于HBeAg阴性组(18.2%),x2=4.720,P0.05;HBeAg阴性组肝硬化患者(37.0%)显著高于HBeAg阳性组(5.9%),x2=3.866,P0.05。结论拉米夫定治疗HBeAg阳性CHB患者较HBeAg阴性患者更容易发生YMDD变异,HBeAg阴性CHB患者较HBeAg阳性患者更易发生肝硬化。     

慢性乙型肝炎病毒基因型与拉米夫定疗效关系的研究

目的：研究乙型肝炎病毒(HBV)基因型对拉米夫定抗病毒疗效的影响。方法：回顾性调查286例拉米夫定治疗组和对照组患者的临床资料。结果：HBV优势基因型是B(34％)和C(48％)型，共235例。135例患者接受拉米夫定抗病毒治疗，对照组100例。拉米夫定有效率在B、C两基因型中分别为92．9％和75．9％(P=0．02)，而对照组分别为9．8％和8．5％(P=0．59)；YMDD变异发生率为8．9％和22．8％(P=0．028)。Multivariate分析发现，B基因型、ALT升高、HBV DNA低水平是影响抗病毒应答的预测因素。在ALT升高患者中，B、C基因型拉米夫定有效率分别为93％和77％(P=0．01)，对照组为13％和8％(P=0．45)。Multivariate分析发现，B基因型、HBV DNA低水平是预测较好疗效的独立因素。结论：B基因型HBV对拉米夫定的应答率高于C型，而变异YMDD发生率低于C型，基因型是影响拉米夫定疗效和诱导变异的重要因素之一。     

乙肝患者拉米夫定治疗过程中YMDD耐药突变株的变化

目的探讨乙肝患者拉米夫定治疗过程中YMDD变异与HBV基因型、HBV DNA含量及治疗时间的关系。方法采用实时PCR法和基因测序法分别对107例拉米夫定治疗的慢乙肝患者进行HBV DNA含量和HBV基因分型、YMDD变异检测。结果 107例慢乙肝患者中,B型19例（17.8%）,C型81例（75.7%）,B、C混合型7例（6.5%）,未发现A、D、E、F、G、H等其他基因型;共25例（23.4%）发生YMDD变异,其中B型、C型和B、C混合型YMDD变异的发生率分别为26.3%、22.2%、28.6%。各基因型患者YMDD变异的发生率及Y IDD、YVDD的变异类型均无统计学差异（P〉0.05）。血清HBV定量水平低、中、高度组产生YMDD变异株的时间有统计学差异（P〈0.05）。结论 YMDD变异与HBV基因型无明显相关性;治疗前血清HBV DNA含量越高,拉米夫定治疗期间发生YMDD变异的时间越早;出现YMDD变异患者肝组织内处于不同的炎症及纤维化状态。     

拉米夫定对湖北地区乙型肝炎病毒基因型的影响

目的研究拉米夫定对湖北地区乙型肝炎病毒基因型的影响及其临床意义。方法采用多对型特异性引物-聚合酶链反应检测160例慢性乙型肝炎患者血清HBV基因型;采用基因芯片技术对86例拉米夫定治疗18个月的慢性乙型肝炎患者进行酪氨酸—蛋氨酸—天冬氨酸—天冬氨酸(YMDD)基序、G1896A、A1814C、A1792T和G1764A单碱基变异检测。结果160例慢性乙型肝炎患者,B基因型127例(79%),C基因型24例(15%),BC混合型9例(6%),未发现A、D和E基因型。拉米夫定治疗的86例患者中,17例(19.7%)发生YMDD变异,B型14例,C型2例,BC混合基因型1例,其中6例发生多重变异,包括B型4例,C型2例;HBeAg/HBeAb血清转换率B型41例(68.3%)高于C型8例(40%)(P<0.05)。另外17例患者,经拉米夫定治疗后,HBVDNA仍阳性,亦未发现YMDD变异株。结论湖北地区HBV存在B、C和BC混合基因型,B型为本地区优势基因型,B型在拉米夫定治疗中更易发生YMDD变异;未变异者,血清HBeAg/HBeAb转换率高。     

拉米夫定治疗无良好应答患者乙型肝炎病毒P区突变与基因型的关系

目的 观察拉米夫定治疗后无良好应答的慢性乙型肝炎患者HBV P区变异情况与基因型的关系.方法 对631例拉米夫定治疗后无良好应答的慢性乙型肝炎患者进行研究.通过荧光定量PCR或核酸测序确定HBV基因型,直接测序观察P区突变,实时荧光定量PCR方法检测患者病毒载量,比较不同基因型患者的HBV DNA水平及HBV P区变异情况.计量资料采用成组设计资料t检验,计数资料采用x~2检验或Fisher精确检验.结果 631例慢性乙型肝炎患者中,B基因型HBV感染者272例,C基因型感染者359例,C基因型感染者患者年龄为(39.1±11.4)岁,明显大于B基因型感染患者的(33.7±9.7)岁(t=-6.55,P<0.01).C基因患者病毒载量为(5.96±1.22)log_(10)拷贝/ml,高于B基因型患者的(5.58±1.21)log_(10)拷贝/ml,t=-2.01,P<0.05.A181V/T变异在C基因型的发生率高于B基因型(0.4%比5.3%,χ~2=12.23,P<0.01),M204I/V,L180M、T184A/G/I/S、S202G/I和V173L变异发生率在B、C基因型之间差异无统计学意义(P值均>0.05).M204I在B基因型的发生率为20.6%,高于C基因型的13.9%(χ~2=4.91,P<0.05);M204V和M201Ⅳ变异在B、C基因型中的发生率差异无统计学意义(χ~2值分别为1.70和2.21,P值均>0.05).拉米夫定耐药发生率在B、C基因型间差异无统计学意义(χ~2=0.00,P>0.05).结论 拉米夫定常见耐药位点在B、C基因型之间无明显差异,但是C基因HBV感染患者病毒载量高于B基因型HBV感染患者;M204I变异在B基因型中出现频率高于C基因型,拉米夫定加用或改用阿德福韦酯后可能会使A181V/T变异在C基因型出现的概率高于B基因型;年龄、免疫因素和非常见位点的变异或许是影响拉米夫定疗效的重要因素.     

YMDD自然变异毒株流行病学调查

目的 了解YMDD自然变异的发生情况及影响YMDD自然变异的因素.方法 依托国家食品药品监督管理局注册药物临床试验"阿德福韦酯片治疗成人慢性乙型肝炎的多中心、随机、双盲、对照临床研究(Ⅲ期)"开展.采用乙型肝炎病毒(HBV)拉米夫定耐药荧光PCR检测试剂盒及实时荧光PCR基因型分型试剂盒,对该临床研究筛选期183例半年内未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清标本进行检测,并通过Logistic逐步回归对影响YMDD自然变异检出率的可能因素进行多因素分析.结果 183例CHB患者中,检出YMDD自然变异毒株者40例(21.86%),其中YVDD阳性36例,YIDD阳性3例,YVDD和YIDD同时阳性者1例;变异毒株占总病毒量50%以上者6例,占25%～50%者9例,占9%～25%者25例.B基因型CHB患者中YMDD自然变异检测阳性的比例高于C基因型(31.67%对17.65%,P=0.038 2),患者性别、年龄、HBeAg状态、血清HBV DNA载量及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平对YMDD自然变异检出率无显著影响(P＞0.05).结论 在CHB患者中存在YMDD自然变异毒株;YMDD自然变异的发生率与患者性别、年龄、HBeAg状态、HBV DNA水平、ALT水平无关.B基因型较C基因型更易出现YMDD自然变异.     

拉米夫定治疗前后乙型肝炎病毒YMDD变异的相关因素分析

目的 了解遵义地区HBV基因型以及拉米夫定治疗前后发生YMDD变异的相关因素,及早进行拉米夫定疗效及耐药的预测. 方法 53例慢性乙型肝炎患者分别在口服拉米夫定前及治疗后3、6、12、18、24个月进行血清HBV DNA定量、乙型肝炎标志物、ALT、AST、总胆红素,白蛋白的检测.同时在接受拉米夫定治疗前采用基因测序法检测HBV基因型及YMDD变异株,治疗后HBV DNA定量下降又反弹升高,且血清HBV DNA＞1×104拷贝/ml时,再次进行YMDD变异株检测.率的比较用卡方检验及确切概率法,两组均数之间比较采用独立样本t检验,有序变量之间的比较采用秩和检验.结果 遵义地区的HBV基因型由B、C及B+C基因型构成.拉米夫定治疗后18例检出YMDD变异株,用药1年和2年的变异率分别为15.1%和34.0%.HBV突变类型有rtL180M/M204V、rtL180M/M204I、rtM204I和rtL180M四种,其中C区rtM204V全部合并rtL180M突变(100%),C基因型中rtL180M/M204V联合突变及rtL180M/M204I联合突变明显高于B基因型(77.8%比25.0%及22.2%比12.5%);C基因型中未见点突变,而rtM204I、rtL180M的点突变仅见于B基因型.YMDD变异与未变异组性别、民族、乙型肝炎家族史及HBeAg情况差异无统计学意义(P＞0.05),病程≥2年组和年龄＜35岁组变异率明显升高(X2值分别为4.707和5.853,P值均＜0.05).不同HBV DNA滴度患者YMDD变异率差异无统计学意义(X2=0.801,P＞0.05),但HBV DNA＜105拷贝/ml者未发现YMDD变异.结论 拉米夫定治疗后YMDD变异可能与HBV基因型及P基因突变类型有关,并随治疗时间的延长而增加.为了减少YMDD变异的发生,应选用病程短、HBV DNA水平较低、肝损害较重的患者进行拉米夫定治疗,有条件的应检测HBV基因型.     

YMDD mutations and genotypes of hepatitis B virus in northern China

The objective of this research was to determine the relationship between YMDD mutations and the genotypes of hepatitis B virus (HBV) during lamivudine treatment. HBV genotypes were determined by nested PCR with 6 pairs of HBV genotype-specific primers (A to F) in serum specimens from 142 hepatitis B patients receiving lamivudine antiviral therapy. YMDD mutations were detected by fluorescent hybridization bioprobe PCR and melting curve assay (FH-PCR-MC). Among 142 serum specimens, 13 samples were genotype B (9.2%), 125 samples were genotype C (88%), 4 samples were genotype D (2.8%), and 80 YMDD mutations were found. The YMDD mutation rates were 69.2 and 54.4% in genotype B and genotype C, respectively. There was no significant difference in the YMDD mutation rate between genotypes B and C. Nine genotype B sera with YMDD mutations were found, including 2 YIDD mutations and 7 YVDD (M + V) mutations. Sixty-eight genotype C sera with YMDD mutations were found, including 34 mutations I (M + I) and 17 mutations V (M + V). There was a significant difference in the YMDD mutation types between genotypes B and C. Our results suggested that the YMDD mutation rate was 56.3% in patients treated with lamivudine for 2-4 years. YIDD was the main mutation type. The YMDD mutation rate showed no significant difference between HBV types B and C (P > 0.05), while the YMDD mutation types showed a significant difference between HBV types B and C in Northern China (chi2 test = 4.6, P < 0.05).     

A case-control study of response to lamivudine therapy for 2 years in Japanese and Chinese patients chronically infected with hepatitis B virus of genotypes Bj, Ba and C.

BACKGROUND/AIMS: In eastern Asian countries, hepatitis B virus (HBV) genotype Ba (HBV/Ba), HBV/Bj and HBV/C are prevalent. The aim was to investigate the response or resistance to lamivudine therapy among patients with different HBV genotypes. METHODS: Of 67 Japanese and Chinese patients with chronic hepatitis B, 18 patients with HBV/Bj, 15 with HBV/Ba and 34 with HBV/C were selected for a case-control study matched according to gender and age. All the patients were treated with lamivudine for 2 years and evaluated the response or emergence of the YMDD mutation at year 2 during the treatment. HBV genotypes were detected by the restriction fragment length polymorphism. The YMDD mutation was detected by the direct sequencing after amplification by PCR. RESULTS: At year 2 during therapy, 44.8% of the patients showed normalization of ALT and undetectable HBV DNA (favorable response), 35.8% developed the YMDD mutation. There was no significant difference of response to the therapy among the three genotype groups. The emergence of the YMDD mutation was associated with HBV/C. By the multiple logistic regression analysis, however, the significant factor of a favorable response was a higher pretreatment ALT level and negative HBeAg status and the significant factor of the emergence of the YMDD mutation was HBV/C. CONCLUSIONS: Higher pretreatment ALT level, HBeAg status or HBV genotype may affect the response or resistance to lamivudine therapy.     

乙型肝炎病毒基因型、YMDD变异与拉米夫定治疗后HBV DNA反弹关系的研究

目的探讨HBV基因型、YMDD变异与拉米夫定抗病毒治疗后HBV DNA反弹的关系。方法应用多引物对巢式PCR法、PCR-序列分析法检测拉米夫定治疗的27例乙型肝炎患者和19例从未用过抗病毒治疗的患者HBV基因型和P区（YMDD）的突变位点。结果在27例HBV DNA反弹的患者中，13例（48．15％）检出YMDD变异，而对照人群无YMDD变异（P〈0．05）。YMDD变异的位点为rtM204V／I（C区）±rtL180M（B区）；在治疗组YMDD变异的患者中，B、C基因型构成比（46．15％和59．26％）与对照组（53．85％和68．42％）比较无显著性差异（P〉0．05）。结论YMDD变异是拉米夫定治疗后出现耐药导致HBV DNA反弹的主要原因；YMDD变异的常见位点依然为rtM204V／I（C区）±rtL180M（B区）；YMDD变异在B、C基因型病人中无差别。     

慢性乙型肝炎拉米夫定耐药患者HBV基因型及ALT变化的观察

观察慢性乙型肝炎患者用拉米夫定治疗后HBVP基因变异与不同HBV基因型感染及HBV DNA复升水平和转氨酶变化.收集51例慢性乙型肝炎患者用拉米夫定治疗52-78周后发生YMDD变异的血清标本,对照组128例未用拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者血清标本,应用聚合酶链反应方法,测定HBV DNA基因型;用限制性片段长度多态性分析方法(PCR RELP)测定HBV DNA YMDD变异;同时进行HBV DNA定量分析.结果显示51例拉米夫定治疗后HBV DNA基因变异患者以B型和C型为主,分别为10例(19.6%)和39例(76.47%),B C混和型2例(3.92%),未见其它基因型.拉米夫定治疗引起HBVDNAYMDD变异可以发生在不同HBV基因型感染的慢性乙型肝炎患者中,与对照组比较二者没有显著性差异.     

The influence of hepatitis B virus genotype on the development of lamivudine resistance during long-term treatment

BACKGROUND/AIMS: Genotype-dependent development of lamivudine resistance in hepatitis B virus (HBV) has not been reported. METHODS: We determined the cumulative rate of emergence of YMDD motif mutant in 213 Japanese patients with chronic hepatitis B infected with genotype A, B, or C and treated with lamivudine for more than 1 year. RESULTS: The emergence rate of lamivudine resistance was independent of the genotype (A, B, and C). In contrast, the emergence rate was significantly higher in the Ba ("a" stands for Asia) subgroup of HBV than in Bj ("j" for Japan) subgroup (P<0.05). For genotype C (HBV/C), the emergence rate in hepatitis B e antigen (HBeAg)-positive was significantly higher than in HBV/C-HBeAg-negative (P<0.05), but the rate in HBV/B-HBeAg-positive was similar to HBV/B-HBeAg-negative. Only four patients with HBV/C developed severe acute exacerbation of hepatitis accompanied by emergence of YMDD mutant, but none of the patients with other genotypes developed such complication. CONCLUSIONS: Our results suggest that lamivudine resistance in HBV does not seem to depend on the genotype but rather on the subgroup of HBV/B. The results also suggest that lamivudine resistance according to HBeAg state might be different between HBV/B and HBV/C. Large-scale prospective studies of each genotype should be conducted in the future to confirm these findings.     

乙型肝炎病毒基因型与干扰素α1b疗效关系的研究

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)基因型与干扰素α1b治疗慢性乙型肝炎疗效的关系。方法　采用PCR、核酸杂交和酶联显色技术对慢性乙型肝炎患者进行HBV基因分型 ,随机观察 10 5例 (B型 5 3例和C型 5 2例 )慢性乙型肝炎患者干扰素α1b治疗 6个月和随访半年后肝功能和病毒学指标的变化。结果　干扰素α1b治疗 6个月和随访半年后 ,B基因型患者的HBeAg阴转率、HBVDNA阴转率和HBeAg/抗 HBe的血清转换率均显著高于C基因型 (P <0 . 0 1) ,B基因型患者的有效应答率为 5 2 . 83 %,显著高于C基因型的 2 5 . 0 0 %(P <0 . 0 1)。B基因型的持续应答率高于C型 ,复发率低于C型 ,但两组差异无显著性 (P >0 . 0 5 )。结论　B基因型对干扰素α1b的抗病毒疗效显著高于C型 ,HBV基因型是影响干扰素α1b疗效的重要因素之一。