加味四逆散对大鼠恶劣心境障碍模型额叶单胺类神经递质的影响

目的:观察加味四逆散对大鼠恶劣心境障碍模型额叶单胺类神经递质的影响.方法:选择OPEN-FIELD法评分相近的50只成年SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组和加味四逆散大小剂量组,每组各10只.应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成大鼠恶劣心境障碍模型.以HPLC-EC法对照研究恶劣心境障碍大鼠额叶单胺类神经递质的改变.结果:(1)与对照组比,模型组大鼠额叶NE、5-HIAA和5-HT的含量下降.(2)与模型组比,氟西汀组MHPG降低,5-HT和5-HIAA升高,加味四逆散大小剂量组NE、5-HT和5-HIAA升高.结论:结果提示恶劣心境障碍大鼠额叶单胺类神经递质含量降低,加味四逆散对恶劣心境障碍的治疗作用机理可能与改变额叶单胺能神经的功能状态有关.     

交泰丸对利血平诱导小鼠抑郁模型的影响

[目的] 探讨交泰丸对利血平诱导小鼠抑郁模型的影响。[方法] 采用小鼠强迫游泳实验（FST）、小鼠悬尾实验（TST）和小鼠利血平拮抗实验,通过高效液相色谱（HPLC）测定小鼠海马和皮质组织中单胺类神经递质[去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）]含量的变化,探讨交泰丸的抗抑郁作用。[结果] 交泰丸组方各剂量组均能明显减少FST和TST的不动时间,并且均能拮抗利血平诱导的小鼠眼睑下垂和体温下降,而且可以逆转NE和5-HT的减少以及降低5-HIAA的含量。[结论] 交泰丸具有明显的抗抑郁作用,并且可以通过调节海马组织和皮质中NE和5-HT的含量而发挥抗抑郁作用。     

脑清灵汤治疗抽动秽语综合征的作用及机理研究

[目的]探讨脑清灵汤对抽动秽语综合征(TS)的治疗作用及作用机制。[方法]采用苯丙胺诱发小鼠拟TS模型,观察各组小鼠定型活动和自主活动情况,测定脑内单胺类神经递质如多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。[结果]脑清灵汤能对抗苯丙胺诱发的定型活动;能明显减少TS模型小鼠的自主活动;能显著降低TS模型小鼠纹状体中DA、NE、5-HT及5-HIAA的含量。[结论]脑清灵汤对TS动物模型有治疗作用,作用机制可能是其影响脑内单胺类神经递质的分泌代谢。     

泻肝安神法对睡眠剥夺大鼠单胺类神经递质影响的研究

[目的] 探讨泻肝安神法对睡眠剥夺大鼠脑干及海马脑区单胺类神经递质含量的干预效应。[方法] 采用水平台睡眠剥夺法造模后,给予泻肝安神法干预7 d后取材,高效液相色谱法检测脑干及海马脑区7种单胺类神经递质的含量。[结果] 大鼠剥夺睡眠后脑干单胺类神经递质5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、5-羟色胺(5-HT)明显下降,多马胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、3-甲氧基4-羟基苯乙酸(HVA)明显升高,二羟苯乙酸(DOPAC)无明显变化。而在海马区域各单胺类神经递质含量变化不显着。采取泻肝安神法治疗后大鼠脑干5-HT、5-HIAA含量显着升高,DA含量明显下降;而在双侧海马5-HT、5-HIAA、DA、HVA升高,NE下降。采用地西泮片治疗后大鼠在海马区的单胺类神经递质变化与中药组结果一致,但在脑干仅有5-HIAA升高,而5-HT、DA则没有明显变化。[结论] 泻肝安神法可调节睡眠剥夺大鼠的单胺类神经递质,且影响靶点要多于地西泮片,机制可能与综合的调节单胺类神经递质水平,纠正其紊乱相关。     

一次力竭运动小鼠中枢单胺类神经递质的代谢特点

目的:探讨力竭运动中枢单胺类神经递质的代谢变化特点,以期为运动疲劳的中枢机制提供一定实验室依据。方法:4月龄C57/BL小鼠,随机分为安静对照组(SC组)和一次性游泳力竭组(SE组)。力竭游泳即刻取材(皮层、下丘脑、纹状体、海马、脑干和小脑)六个脑区,高功率微波灭活脑组织相关酶类;HPLC测定去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)及其代谢产物多巴克(DOPAC)、5羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量。结果:力竭时皮层、海马和脑干NE含量较安静时明显增加(P0.05),而下丘脑、纹状体和小脑NE含量有降低趋势。海马、脑干组织DA含量力竭时极显著增加(P0.01),皮层、纹状体区仅有增加趋势,而下丘脑DA含量较安静时有降低趋势;DA的代谢产物DOPAC仅在脑干有明显增加。各脑区力竭时5-HT均较安静时明显增加(P0.05),其代谢产物5-HIAA在皮层、下丘脑及小脑也增加显著(P0.05)。结论:运动至力竭过程中各脑区单胺类神经元激活程度不相同,其中5-HT和NE可以作为中枢皮层疲劳的一个标志。     

针刺五脏俞穴调五脏神针法对失眠大鼠单胺类神经递质的影响

目的:观察针刺五脏俞穴对大鼠失眠单胺类神经递质的影响.方法:将Wistar大鼠40只随机分为4组.空白组:空白对照;模型组:腹腔注射PCPA;针刺组:腹腔注射PCPA后,连续5 d给予针刺治疗,安定组:腹腔注射PCPA后,连续5 d给予安定灌胃治疗.分别观察大鼠脑内5-HT、5-HIAA、NE含量的变化.结果:模型组脑内5-HT、5-HIAA含量明显降低,与空白组比较有显著性差异(P＜0.05).安定组脑内5-HT、5-HIAA含量均有明显升高,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).针刺组脑内5-HT、5-HIAA含量有明显升高,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:针刺五脏俞穴对失眠大鼠单氨类神经递质紊乱的影响显著,针刺五脏俞是治疗失眠症的一种有效方法.     

沙棘汁对铅所致小鼠脑组织生物化学指标的影响

[目的]研究沙棘汁对醋酸铅所致小鼠脑脂质过氧化及胆碱酯酶和单胺类神经递质含量改变的影响．[方法]制作铅中毒小鼠模型，灌胃给予不同剂量的沙棘汁，利用硫代巴比妥酸比色法、碱性羟胺法及荧光法分别测定小鼠脑组织内过氧化脂质、胆碱酯酶及单胺类神经递质含量．[结果]铅组小鼠脑组织内MDA含量明显升高，200，400g/L沙棘汁降低铅致MDA含量升高，且呈剂量．效应关系；铅组小鼠脑组织内胆碱酯酶活性明显升高，单胺类神经递质中除DA外NE，5-HT，5-HIAA含量均明显下降，400g九沙棘汁抑制铅致脑组织内多种神经递质含量的变化．[结论]沙棘汁可拮抗铅所致小鼠脑组织内脂质过氧化及胆碱酯酶和单胺类神经递质含量的改变．     

穴位埋线对更年期雌性大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

[目的]通过观察穴位埋线对更年期大鼠下丘脑去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)等单胺类神经递质的影响,探讨其对更年期综合征防治作用的机理.[方法]选用60只SD雌性大鼠,随机分为治疗组、模型组和假手术组各20只:除假手术组外,其他组均采用手术摘除大鼠双侧卵巢复制去势更年期大鼠模型,治疗组选取肾俞、三阴交、子宫穴进行穴位埋线,1次/周,连续4周;采用放射免疫法检测下丘脑组织NE、DA、5-HT、5-HJAA含量.[结果]模型组较假手术组的NE、DA水平显著降低(P<0.05或P<0.01),5-HT、5-HIAA水平显著上升(P<0.01或P<0.001),5-HT/NE比值显著升高(P<0.001);穴位埋线组与模型组比较,可显著升高衰退的NE水平(P<0.05),降低5-HT、5-HIAA水平(P<0.05或P<0.01),且埋线组的5-HT/NE比值亦较模型组显著降低(P<0.01).[结论]穴位埋线治疗更年期综合征的作用可能与其能调整去势雌性大鼠下丘脑单胺类神经递质,纠正下丘脑紊乱的植物神经功能有关.     

逍遥散对产后抑郁大鼠海马中单胺类神经递质含量的影响

目的：研究逍遥散对产后抑郁大鼠海马中单胺类神经递质含量的影响。方法：将48只卵巢切除的雌性大鼠分为4组：对照组,模型组,氟西汀组（阳性对照组）和逍遥散组。前23 d,除对照组外,其余大鼠每天皮下注射雌激素模拟大鼠的怀孕状态;接下来的30 d,各组大鼠分别灌胃给予受试物。实验结束后,观察大鼠的行为学指标;取出海马组织,用酶联免疫法测定海马组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素（noradrenaline,NE）、多巴胺（dopamine,DA）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）和5-羟吲哚乙酸（5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA）的含量。结果：与对照组相比,模型组行为学表现明显处于产后抑郁状态,海马中5-HT、NE和DA显著降低（P〈0.01）,5-HIAA显著增加（P〈0.01）;而中药逍遥散可显著改善行为学指标,并增加海马组织中5-HT、NE和DA的含量,降低5-HIAA的含量（P〈0.01）。逍遥散的效果与氟西汀类似。结论：逍遥散可显著调节大鼠海马中单胺类神经递质的含量,发挥抗抑郁作用。     

脾虚大鼠中枢单胺类神经递质含量及四君子汤干预的研究

目的 研究脾虚大鼠中枢单胺类神经递质含量的变化和四君子汤干预的途径.方法 将60只大鼠分为空白对照组、脾虚组、四君子汤组,每组各20只,使用高效液相检测大鼠纹状体中5-HT、DA、5-HIAA、DOPAC和HVA的含量.结果 与对照组比较,脾虚组大鼠纹状体内5-HT(2.25±0.78)ng/mg水平显著升高,DA(26.06±9.01)ng/mg水平显著下降(P<0.01);脾虚大鼠使用四君子汤干预后,纹状体内5-HT(1.86±0.53)ng/mg和DA(38.95±10.86)ng/mg水平基本恢复正常,与对照组差异无显著性,而DA水平与脾虚组大鼠差异有显著性(P<0.05).结论 脾虚证大鼠纹状体中的单胺类神经递质的含量异常,脾虚证存在有中枢机制,健脾名方四君子汤可以调节脾虚大鼠中枢单胺类神经递质含量.     

5''''-脱氧氟尿苷和5-氟尿嘧啶对6株大肠癌细胞的抑制作用

目的:测定大肠癌细胞的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量,探讨dThdPase与5’-脱氧氟尿苷(5’-DFUR)、5-氟尿嘧啶(5-FU)对大肠癌细胞的生长抑制作用的相互关系。方法:采用ELISA法对6株大肠癌细胞系LS174T、CloneA、Col0320、CX-1、Lovo和MIP101进行dThdPase蛋白定量分析,然后进行5’-DFUR、5-FU对6株大肠癌细胞的生长抑制实验。把大肠癌细胞分别接种于96孔培养板的每孔中培养24 h,分别加入2倍梯度稀释的5’-DFUR和5-FU.继续培养96 h后应用MTT分析分别测定5’-DFUR和5-FU对6株大肠癌细胞的半数有效剂量(IC50)。结果:除LS174T检出0.5 u/mg、Lovo检出8.9 u/mg的dThdPase蛋白外,其它4株癌细胞未检出。6株大肠癌细胞均对5-FU高度敏感,其半数有效浓度(IC50)分别为1.52～13.68μmol/L,而5’-DFUR对6株大肠癌细胞的IC50则分别为68.71～528.15μmoL/L,是5-FU的15倍-94倍,差异有显著性(P<0.01)。结论:6株大肠癌细胞很少有dThadPase蛋白表达;每一株大肠癌细胞对5’-DFUR的敏感性均明显低于5-FU。     

Rabex-5及其激活物Rab5的研究进展

细胞的吞噬作用是细胞维持正常生理功能的关键,小分子GTP激酶在其中扮演了至关重要的角色。在Ras超家族中,已证实有超过50种小分子GTP激酶,其中Rab家族在调控细胞吞噬和囊泡运输中的作用,近年备受关注。     

5′-脱氧氟尿苷和5-氟尿嘧啶对6株大肠癌细胞的抑制作用

目的测定大肠癌细胞的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量,探讨dThdPase与5′-脱氧氟尿苷(5′-DFUR)、5-氟尿嘧啶(5-FU)对大肠癌细胞的生长抑制作用的相互关系.方法采用ELISA法对6株大肠癌细胞系LS174T、CloneA、Colo320、CX-1、Lovo和MIP101进行dThdPase蛋白定量分析,然后进行5′-DFUR、5-FU对6株大肠癌细胞的生长抑制实验.把大肠癌细胞分别接种于96孔培养板的每孔中培养24 h,分别加入2倍梯度稀释的5′-DFUR和5-FU,继续培养96 h后应用MTT分析分别测定5′-DFUR和5-FU对6株大肠癌细胞的半数有效剂量(IC50).结果除LS174T检出0.5 u/mg、Lovo检出8.9u/mg的dThdPase蛋白外,其它4株癌细胞未检出.6株大肠癌细胞均对5-FU高度敏感,其半数有效浓度(IC50)分别为1.52～13.68 μmol/L,而5′-DFUR对6株大肠癌细胞的IC50则分别为68.71～528.15 μmol/L,是5-FU的15倍～94倍,差异有显著性(P＜0.01).结论6株大肠癌细胞很少有dThdPase蛋白表达;每一株大肠癌细胞对5′-DFUR的敏感性均明显低于5-FU.     

弓形虫病淋巴结炎组织中5-HT及5-HT1AR的表达

目的探讨弓形虫病淋巴结炎组织中神经内分泌免疫网络系统共用的生物学语言：5-HT与5HT1AR表达的意义。方法应用免疫组化Picture^TM二步法检测淋巴结炎组织中的弓形虫、5-HT及5-HT1AR。将弓形虫检测结果分为阳性组与阴性组，分析两组5-HT与5-HT1AR的检测结果。结果50例淋巴结炎组织中有16例弓形虫阳性。5-HT与5-HT1AR阳性标志物在两组淋巴结炎组织中分布大致相似，主要位于副皮质区的T淋巴细胞、淋巴滤泡生发中心B淋巴细胞及巨噬细胞等部位。5-HT在两组的表达强度有显著性差异（P〈0．005），而5-HT1AR在两组的表达强度无差异（P〉0．05）。结论弓形虫可引起神经内分泌免疫网络中的5-HT与5-HT1AR表达强度的变化，可能与弓形虫病淋巴结炎的发生与病情发展有一定的关系。     

丙型肝炎病毒NS5区部分基因的克隆和表达及其抗体动态研究

分析丙型肝炎病毒ＮＳ５蛋白的抗原性,研究抗－ＮＳ５抗体的性质,动态变化规律及临床诊断意义。方法 用Ｇｏｌｄｋｅｙ程序对ＮＳ５蛋白的抗原决定簇进行预测分析,以ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ方法扩增ＮＳ５基因片段,并进行核酸序列分析。通过基因体外重组技术克隆表达目的的基因。     

RABEX-5和RAB5在乳腺癌中的表达及意义

目的 初步探讨RABEX-5和RAB5与乳腺癌的关系.方法 采用免疫组织化学法、RT-PCR和Western blot法检测RABEX-5及RAB5 mRNA和蛋白在60例乳腺癌、15例乳腺纤维腺瘤和15例乳腺正常组织中的表达,并检测相关临床病理指标与RABEX-5及RAB5表达的关系.结果 RABEX-5和RAB5 ...     

内源性siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用

目的 研究内源性的siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用.方法 利用siRNA表达载体 pSilencerTM 2.1U6-neo对RAB5A和RABEX5基因分别构建3个特异的siRNA表达载体,并将表达载体分别转染人卵巢癌高转移细胞HO-8910PM.应用逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测转染前后HO-8910PM细胞中RAB5A和RABEX5的表达情况,并用荧光免疫细胞化学技术对干扰效率最好的载体进行验证.结果 在构建的6个siRNA表达载体中, pSilencer/siRAB5A-1和pSilencer/siRAB5A-2对RAB5A表达的抑制率分别为90%和70%,pSilencer/siRAB5A-3对RAB5A表达没有抑制作用.pSilencer/siRABEX5-1、pSilencer/siRABEX5-2和pSilencer/siRABEX5-3对RABEX5表达的抑制率分别为30%、50%和90%.结论 成功构建了对RAB5A和RABEX5表达具有抑制作用的siRNA表达载体,为进一步研究RAB5A和RABEX5的生物学功能提供了实验工具.     

内源性siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用

目的研究内源性的siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用。方法利用siRNA表达载体pS ilencerTM2.1U6-neo对RAB5A和RABEX5基因分别构建3个特异的siRNA表达载体,并将表达载体分别转染人卵巢癌高转移细胞HO-8910PM。应用逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测转染前后HO-8910PM细胞中RAB5A和RABEX5的表达情况,并用荧光免疫细胞化学技术对干扰效率最好的载体进行验证。结果在构建的6个siRNA表达载体中,pS ilencer/siRAB5A-1和pS ilencer/siRAB5A-2对RAB5A表达的抑制率分别为90%和70%,pS ilencer/siRAB5A-3对RAB5A表达没有抑制作用。pS ilencer/siRABEX5-1、pS ilencer/siRABEX5-2和pS ilencer/siRABEX5-3对RABEX5表达的抑制率分别为30%、50%和90%。结论成功构建了对RAB5A和RABEX5表达具有抑制作用的siRNA表达载体,为进一步研究RAB5A和RABEX5的生物学功能提供了实验工具。     

哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5和黏蛋5AC的表达变化及其相关性研究

目的 探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC基因和蛋白的表达变化及其两者的相关性.方法 制作小鼠哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液细胞分类及肺组织湿干重比值,应用Real-time PCR法测定哮喘组(OVA组)和对照组肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定AQP5在肺组织中的分布,免疫印记法、ELISA法测定AQP5和MUC5AC蛋白在肺组织中的表达.结果 小鼠哮喘组肺组织中AQP5表达较对照组明显减低(P＜0.01),而MUC5AC表达显著升高(P＜0.01),两者呈负相关(r=0.901,P＜0.01).结论 哮喘时肺组织中AQP5表达的减低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌.