MHC—Ⅰ类分子在肿瘤浸润性淋巴细胞识别人黑色素瘤细胞中的…

应用人白细胞抗原－Ａ２阳笥黑色素瘤病人的瘤块中分离得到的肿瘤浸润性淋巴细胞，进行ＨＬＡ－Ａ２限制性ＴＩＬ抗人黑色素瘤细胞作用的研究。在实验中发现，ＴＩＬ对自身和同种本的ＨＬＡ－Ａ＾＋２黑色素瘤细胞具有杀伤作用，而对ＨＬＡ－Ａ＾－２黑色素瘤细胞及ＨＬＡ－Ａ＾＋２非黑色素瘤细胞无作用。     

TIL识别的人黑色素瘤HLA-A2相关多肽的初步研究

从黑色素瘤病人的瘤块和淋巴结中制备黑色素瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）系,通过流式细胞仪对黑色素瘤细胞表型分析。经去垢剂处理、免疫沉淀和亲和层析法从ＨＬＡ Ａ２阳性患者黑色素瘤细胞中分离纯化ＨＬＡ Ａ２蛋白,其纯度通过４％～２０％梯度ＳＤＳ ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ鉴定。１００℃沸水浴和弱酸处理ＨＬＡ Ａ２蛋白经反相 高压液相色谱层析（ＲＰ ＨＰＬＣ）得到不同组份多肽,将其与抗原加工缺陷的ＨＬＡ Ａ２阳性Ｔ２细胞反应,进行重建瘤细胞特异性表位测定。ＴＩＬ杀伤活性结果表明,来源于６２４ 黑色素瘤细胞的不同组份多肽中有三个活性峰值,而来源于Ｃｈａｐ 黑色素瘤细胞的不同组份多肽中仅一个与上述细胞组份位置相同的单一活性峰值。提示具有活性组份的多肽与ＨＬＡ Ａ２限制性ＴＩＬ识别的人黑色素瘤细胞抗原肽有关。     

体外培养中黑色素瘤细胞表面HLAI类分子丢失的鉴定

应用流式细胞术,从ＨＬＡ Ａ２阳性人黑色素瘤细胞系（６２４ Ｍｅｌ）中选择培养,鉴定出一株丢失ＨＬＡ—Ａ２分子的黑色素瘤细胞（６２４—ｎＭｅｌ）,它具有抵抗ＨＬＡ Ａ２限制的、黑色素瘤抗原肽特异性ＴＩＬ杀伤作用。经ｒＩＦＮ γ诱导,能提高６２４－ＭｅｌＨＬＡ－Ａ２分子表达,而不能增强６２４ ｎＭｅｌＨＬＡ－Ａ２分子表达和其对ＴＩＬ的敏感性。结果提示,ＴＩＬ对瘤细胞抗原的识别依赖于ＨＬＡⅠ类分子,而瘤细胞ＨＬＡⅠ类分子的缺失可能是肿瘤逃逸机体免疫监视的一个重要因素。     

瘤体内注射IL－2基因后肿瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞的功能分析

将脂质体包裹的ＩＬ－２基因直接注射至Ｂ１６Ｆ１０黑色素瘤瘤体内，研究肿瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）的功能变化。１０ｄ后，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定显示瘤体内注射ＩＬ－２基因后肿瘤细胞及ＴＩＬ中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达阳性；经Ｇ４１８筛选后的肿瘤细胞培养上清中可检测出ＩＬ－２；肿瘤细胞表面表达了较高水平的ＭＨＣⅠ类抗原（Ｈ－２Ｋ￣ｂＤ￣ｂ）；ＴＩＬ表面粘附分子ＬＡＦ－１表达也明显高于对照组，其杀伤Ｂ１６细胞的活性明显增强。结果表明瘤体内注射脂质体包裹的ＩＬ－２基因后，可在肿瘤原位将基因转移至肿瘤细胞及ＴＩＬ中，提高肿瘤细胞的ＭＨＣⅠ类抗原的表达，增强肿瘤细胞的免疫原性，并通过提高ＴＩＬ粘附分子的表达，共同促进ＴＩＬ的肿瘤特异性杀伤功能。     

恶性肿瘤胸腹水中TIL生物学活性研究

从卵巢癌腹水和肺癌胸水中分离出肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ），用ｒＩＬ－２诱导培养，观察其增殖活性。同时观察了ＰＪ－ＣＷ、ＰＯＧＰ、ＰＨＡ等对其杀伤活性的调节作用。结果表明，在培养５～１０天时ＴＩＬ增殖较快，其表面产生的ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、Ｔａｃ等抗原，随培养时间的延长，表达量增加，尤以ＣＤ８增加较明显，ＣＤ４／ＣＤ８比值逐降。其表面产生的ＨＬＡ－ＤＲ、ＨＬＡ－ＡＢＣ抗原，在培养１５天内有增加表现，以后下降。其杀伤活性在培养５～１０天较高，其后活性下降。在培养系统中加入ＰＪ－ＣＷ、ＰＯＧＰ、ＰＨＡ等后，培养５天时，ＴＩＬ杀伤活性分别为８２．７０％，８５．５０％，８４．３５％（对照组为内保持较高的杀伤活性。     

白癜风患者外周血T淋巴细胞异常活化

本文以人类白细胞抗原ＤＲ位点（ＨＬＡ－ＤＲ）及白细胞介素２受体亚单位Ｐ５５和Ｐ７５（ＩＬ－２Ｒ，Ｐ５５和ＩＬ－２Ｒ，Ｐ７５）的表达为Ｔ淋巴细胞活化的指标，用双色免疫标记流式细胞法对白癜风患者外周血Ｔ淋巴细胞（ＶＰＢＴＬ）进行分析。实验发现：ＨＬＡ－ＤＲ在ＶＰＢＴＬ及其亚群Ｔ辅助细胞（Ｔｈ，ＣＤ４＾＋细胞）和Ｔ抑制细胞（Ｔｓ，ＣＤ８＾＋细胞）的表达均明显高于正常人，分别为：４９．６２％比１４．５４％     

肿瘤浸润性淋巴细胞和肿瘤坏死因子α协同抗肿瘤作用的研究

利用体外消化结合不连续密度梯度离心的方法，由肿瘤组织内分离出肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ），并在重组人类白细胞介素２（ｒＩＬ－２）和／或重组肿瘤坏死因子α（ｒＴＮＦα）存在下进行体外培养。结果表明，低浓度ｒＴＮＦａ可以促进ＴＩＬ体外增殖、增加处于Ｓ期及Ｇ＿２＋Ｍ期的ＴＩＬ比例、增加细胞毒Ｔ细胞比例、上调ＴＩＬＩＬ－２Ｒ表达，并能明显增强ＴＩＬ体内外对自体及同种异体肿瘤的杀伤活性。     

逆转录病毒载体介导的IL-4基因修饰对HL-60细胞增殖及T细胞功能的影响

目的观察ＩＬ－４基因转染对ＨＬ－６０增殖及Ｔ细胞功能的影响及其可能机制。方法采用逆转录病毒载体介导基因转染法将人ＩＬ－４基因导入髓系白血病细胞ＨＬ－６０,观察高表达外源性ＩＬ－４基因ＨＬ－６０株的增殖反应及其诱导的正常人ＰＢＭＣ增殖,ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ基因表达及肿瘤特异性ＣＴＬ杀伤活性。结果ｒＩＬ－４或瘤细胞产生的ＩＬ－４早期促进ＨＬ－６０细胞增殖,培养５天后则明显抑制其增殖;与ｒＩＬ－４处理的ＨＬ－６０细胞比较,ＩＬ－４基因修饰的ＨＬ－６０细胞明显促进正常人ＰＢＭＣ增殖并合成ＩＬ－２、ＩＬ－６及ＩＦＮ－γｍＲＮＡ,其诱导的特异性ＣＴＬ杀伤活性明显高于野生型ＨＬ－６０、仅导入载体的ＨＬ－６０和加入ｒＩＬ－４共育的ＨＬ－６０细胞诱导者。结论ＩＬ－４基因转染在影响ＨＬ－６０细胞增殖和分化过程的同时,可能促进某些抗原（如ＭＨＣⅠ类抗原）的抗原性,从而有利于机体建立有效的抗肿瘤免疫反应。     

脑肿瘤细胞HLA—Dr表达及肿瘤中浸润单个核细胞亚…

对４４例原发性脑肿瘤的免疫组化研究发现，２９例（６７．２％）的肿瘤细胞表达ＨＬＡ－Ｄｒ。ＨＬＡ－Ｄｒ阳性细胞含量和阳性率均与肿瘤的组织学类型有关，并随恶性程度增加而升高。肿瘤中浸润的单个核细胞（ＭＮＣ）主要是ＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ细胞和单核巨噬细胞，前者主要包括ＣＤ４和ＣＤ８个亚群。ＨＬＡ－Ｄｒ＋，＋＋，＋＋＋组ＣＤ４５ＲＯ＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞密度均低于ＨＬＡ－Ｄｒ－组。ＣＤ４亚群和单核巨噬细胞密度不受Ｈ     

PAF对细胞免疫功能调节的研究进展

血小板激活因子是由机体多种细胞在各种致炎因子刺激下合成的一种磷脂类化合化，具有广泛的生物学作用，ＰＡＦ激活免疫细胞，对免疫功能的调节主要涉及到Ｔ细胞亚类ＣＤ４＾＋，ＣＤ８＾＋的激活，表现不同的效应但总体上仍呈抑制状态，对ＮＫ细胞的调节可增强杀伤瘤细胞作用，对白细胞介素－２受体（ＩＬ－２Ｒ）和呈下行性调节，对肿瘤坏死因子，ａ（ＴＮＦ－ａ）和白细胞介素－１（ＩＬ－１）呈上行性调节，所有这些ＰＡＦ的生物     

IL－4对多发性骨髓瘤患者外周血细胞CD20及HLA－DR表达的影响

本文报道用流式细胞分析技术，检测了２８例多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者和２０名健康对照者外周血Ｂ细胞（ＣＤ２０＋）以及Ｂ、Ｔ和单核细胞中ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞比率。结果发现，ＭＭ患者ＣＤ２０＋以及Ｂ、Ｔ及单核细胞中ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞比率与正常对照组差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。加入重组ＩＬ－４，可使８名ＭＭ患者ＣＤ２０＋、ＨＬＡ－ＤＲ＋ＣＤ２０＋、ＨＬＡ－ＤＲ＋单核细胞比率提高非常显著（Ｐ＜０．０１）。而在Ｔ细胞，Ｐ值则＞０．０５。我们认为由于ＩＬ－４分泌减少，一方面使多克隆Ｂ细胞激活及增殖受抑，另一方面使单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达减少，抗原提呈能力下降可能是ＭＭ发生多克隆免疫球蛋白抑制的重要原因。     

北方汉族群HLA—A2亚型分布及p53的合成肽体外诱导C …

目的 研究北方汉族人群中ＨＬＡ－Ａ２亚型的分布及树突状细胞提呈基于ｐ５３基因合成肽体外诱导特异性Ｔ杀伤细胞（ＣＴＬ）反应的影响。方法 利用ＰＣＲ－ＳＳＰ技术分析北方汉族人群中ＨＬ－Ａ２基因型及其亚型的分布,并在适当Ａ２亚型背景下,选择与ＨＬＡ－Ａ２０１分子具有高亲和性的２个来自ｐ５３蛋白及１个来自ＨＢＶ核心抗原的蛋白合成多肽,将其分别负载到经体外ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－４刺激增殖的人脐带血树突状细胞（     

rIL-2对大肠癌TIL体外培养的影响

将大肠癌ＴＩＬ在含有ｒＩＬ-２浓度为６０、６００和６００Ｕ／ｍｌ的培养基中分别培养扩增，观察不同浓度ｒＩＬ-２对ＴＩＬ增殖力、杀伤活性、表型的影响。结果表明：低浓度ｒＩＬ-２组较中、高浓度组增殖力减弱，但对自身肿瘤细胞的杀伤活性较中、高浓度组增高。三组ＴＩＬ培养后ＣＤ３＋细胞比例显著增加，ＣＤ４＋细胞比例无明显变化，低、中浓度组ＣＤ８＋细胞比例显著增加，低浓度组ＣＤ２５＋细胞比例显著增加。说明低浓度ｒＩＬ-２可选择性刺激ＣＤ８＋、ＣＤ２５＋Ｔ细胞克隆增殖，使大肠癌ＴＩＬ对自身肿瘤杀伤活性提高。     

CD4^＋T细胞的抗瘤作用

ＣＤ４＾＋Ｔ细胞在机体抗瘤免疫反应中的作用来越来越受到重视，ＣＤ４＾＋Ｔ细胞不仅可以分泌大量的细胞因子和辅助ＣＤ８＾＋Ｔ细胞杀伤肿瘤细胞，而且ＣＤ４＾＋Ｔ细胞在肿瘤免疫中具有免疫记忆和直接杀伤肿瘤细胞的功能，因而机体的抗瘤免疫反应中起重要作用。过继转输ＣＤ４＾＋Ｔ细胞是肿瘤过继免疫治疗的一个新方案。     

T—AK细胞的形态学和免疫表型研究

Ｔ－ＡＫ（Ｔ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｌｌｅｒ，Ｔ－ＡＫ）细胞是由抗ＣＤ３单克隆抗体和ｒＩＬ－２共同激活诱生的具有高度溶细胞活性的肿瘤杀伤效应细胞。为探讨Ｔ－ＡＫ细胞的免疫生物学特征，研究了Ｔ－ＡＫ细胞的形态学和细胞表型。结果表明，Ｔ－ＡＫ细胞体积较大，核／浆比例小，胞浆内含有大量颗粒，具有活化淋巴母细胞的形态学特征；９０％以上的Ｔ－ＡＫ细胞表达Ｔ淋巴细胞表型（ＣＤ３＾＋，ＣＤ８＾＋），２０％￣５     

非小细胞肺癌病人TILs中的HLA-A位点限制性和肿瘤特异性的CTLs

非小细胞肺癌病人ＴＩＬｓ中的ＨＬＡ－Ａ位点限制性和肿瘤特异性的ＣＴＬｓ［英］／ＳＥＫＩＮ．．．／／ＣｅｌｌＩｍｍｕｎｏｌ．－１９９７，１７５．－１０１～１１０文章作者研究了１６例非小细胞肺癌病人的ＩＬ－２活化的ＴＩＬｓ的杀伤活性。取患者的肿瘤或癌性胸...     

肺鳞癌肿瘤浸润淋巴细胞的体外扩增,抗瘤活性及表型分析

对８例人原发性肺鳞癌的肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）进行分离培养并检测了ＴＩＬ的抗瘤活性及细胞表型，结果表明８例ＴＩＬ的平均扩增倍数为４３０；ＴＩＬ在１０～３０天之间显示出高水平的非特异性杀伤活性；１０天～时对Ａ１及Ｄａｕｄｉ细胞的杀伤百分率分别为７９．２％和４３．４％，２０天～时分别为５１．７％和２７．９％。非特异杀伤活性在３０天以后降至较低水平，所进行的几次实验表明肺鳞癌ＴＩＬ对自体癌细胞的杀伤活     

食管癌患者五项细胞免疫学指标的测定及其意义

对３５例食管癌（ＥＣ）患者和３０例正常人（ＮＣ）的外周血自然杀伤（ＮＫ）细胞活性、Ｔ细胞亚群、血浆可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）以及外周血诱生γ干扰素（ＩＦＮ－γ）的水平进行了检测。结果显示，ＥＣ患者ＮＫ细胞活性明显降低（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ８＋细胞增多（Ｐ＜０．０６），ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞比值降低（Ｐ＜０．０５）；ｓＩＬ－２Ｒ明显增高（Ｐ＜０．０１）；外周血诱生ＩＦＮ－γ降低（Ｐ＜０．０５）；血浆ＴＮＦ－α升高。表明，上述指标对判断、分析ＥＣ患者细胞免疫功能状况及病变程度有较大的意义。     

鉴别HCV C蛋白上HLA—A2限制的CTL识别表位的研究

本文先用计算机预测，后用＾５１Ｃｒ４ｈ释放分析证实的方法，对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区蛋白（Ｃ蛋白）上，ＨＬＡ－Ａ２限制性ＣＴＬ识别表位进行了鉴别。结果发现，２名感染ＨＣＶ和ＨＬＡ－Ａ２阳性供血员的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）对ＡＬＡＨＧＶＲＡＬ（ｃｏｒｅ１５０－１５８）肽段标记的自体靶细胞有溶解作用，杀伤率分别为３７．５％和１５．８％，用抗ＣＤ４ｍＡｂ阻断后杀伤率无明显变化，而用抗ＣＤ８ｍＡｂ     

瘤体内注射IL—2基因后肿瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞的功能分析

将脂质体包裹的ＩＬ－２基因直接注射至Ｂ１６Ｆ１０黑色素瘤瘤体内，研究肿瘤细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）的功能变化。１０ｄ后，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定显示瘤体内注射ＩＬ－２基因后肿瘤细胞及ＴＩＬ中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达阳性；经Ｇ４１８筛选后的肿瘤细胞培养上清中可检测出ＩＬ－２；肿瘤细胞表面表达了较高水平的ＭＨＣＩ类抗原（Ｈ２Ｋ＾ｂＤ＾ｂ）；ＴＩＬ表面粘附分子ＬＡＦ－１表达也明显高于对照组，其