辐射增敏剂AK2123和辐射防护剂WR2721对受照人肝癌细胞DNA双链断裂与修复的影响

目的：探讨辐射增敏剂ＡＫ２１２３和辐射防护剂ＷＲ２７２１对肝癌细胞ＤＮＡ损伤与修复的影响．方法：用脉冲交变电泳法（ＰＦＧＥ）和￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，测定上述两药物对受照人肝癌细胞ＤＮＡ双链断裂（ｄｓｂ）与修复及ＤＮＡ合成的影响．结果：在０～８０Ｇｙ剂量范围内，随着照射剂量增加，肝癌细胞ＤＮＡ残留率逐渐降低（１００％～５７．０％），ＤＮＡｄｓｂ量亦逐渐增多，照前给ＡＫ２１２３或ＷＲ２７２１，均能显著地降低ＤＮＡ残留率，使ＤＮＡｄｓｂ量增多，加重ＤＮＡ损伤（Ｐ＜０．０５）；２０Ｇｙ受照细胞保温０～１２０ｍｉｎ，在６０ｍｉｎ时ＤＮＡｄｓｂ开始被修复（Ｐ＜０．０５），而ＡＫ２１２３组为１２０ｍｉｎ（Ｐ＜０．０５），ＷＲ２７２１在３０ｍｉｎ后有修复的趋势；ＡＫ２１２３在６２．５～５００μｇ／ｍｌ内其参入率显著升高（Ｐ＜０．０５），呈促进ＤＮＡ合成作用，ＷＲ２７２１则随药物浓度增加其参入率降低（Ｐ＜０．０５），抑制ＤＮＡ合成．结论：ＡＫ２１２３和ＷＲ２７２１显著加重受照肝癌细胞的辐射损伤，促进ＤＮＡｄｓｂ量增加，抑制其修复过程．     

WR—2721对放烧复合伤小鼠腹腔巨噬细胞的辐射防护

本文以糖原激活腹腔巨噬细胞（ＭФ）及ＭФ在腹腔内吞噬鸡红细胞的方法，观察ＷＲ－２７２１［Ｓ－２（３－氨基丙胺基）乙基硫代硫酸］对放烧复合伤小鼠腹腔ＭФ吞噬功能的辐射防护。结果表明：８Ｇｙ复合１０％Ⅲ度烧伤小鼠腹腔ＭФ成熟加快，吞噬率升高（Ｐ＜０．０１），但消化率和吞噬指数趋于降低，消化能力的降低，即杀菌力的降低，在放烧复合伤感染加重中起重要作用。ＷＲ－２７２１（１０ｍｇ／鼠）对８Ｇｙ复合１０％Ⅲ度     

WR－2721对放烧复合伤小鼠腹腔巨噬细胞的辐射防护

本文以糖原激活腹腔巨噬细胞（ＭΦ）及ＭΦ在腹腔内吞噬鸡红细胞的方法，观察ＷＲ－２７２１［Ｓ－２（３－氨基丙胺基）乙基硫代硫酸］对放烧复合伤小鼠腹腔ＭΦ吞噬功能的辐射防护。结果表明：８Ｇｙ复合１０％Ⅲ度烧伤小鼠腹腔ＭΦ成熟加快，吞噬率升高（Ｐ＜０．０１），但消化率和吞噬指数趋于降低，消化能力的降低，即杀菌力的降低，在放烧复合伤感染加重中起着重要作用。ＷＲ－２７２１（１０ｍｇ／鼠）对８Ｇｙ复合１０％Ⅲ度烧伤小鼠１０ｄ活存率能提高６５％（Ｐ＜０．００１），还能提高ＭΦ消化功能（Ｐ＜０．０５）和促进ＭΦ吞噬指数的恢复。     

WR2721对放烧复合伤小鼠骨髓和脾脏MDA,SOD变化及DNA含量的影响

ＷＲ_（２７２１）对放烧复合伤小鼠骨髓和脾脏ＭＤＡ、ＳＯＤ变化及ＤＮＡ含量的影响刘晓宏，施炎（第三军医大学预防医学系复合伤研究室）６３００３８多种抗放药物对放烧复合伤具有防治作用，其中ＷＲ２７２１［Ｓ一２（３一氨基丙胺基）乙基硫代磷酸］是效价较好的一?..     

局部分泌的血管抑素K（1—3）蛋白抑制人脑胶质瘤生长的实验研究

目的 探讨局部分泌血管抑素Ｋ（１￣３）蛋白〔ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ Ｋ（１￣３）,ＡＫ（１￣３）〕治疗人脑胶质瘤的可行性。方法 构建ＡＫ（１￣３０基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ－ＳＡＫ（１￣３）,经脂质体法将该载体转染入人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４、行Ｇ４１８筛选。用电镜和流式细胞仪测定转染细胞的生物学性状,以内皮细胞抑制实验和免疫荧光实验检测该细胞表达的ＡＫ（１￣３）蛋白。应用裸鼠皮下致瘤性实验,结合     

延迟整流性K+通道在人肝癌细胞增殖中的作用

目的：研究延迟整流性Ｋ＋通道在人肝癌细胞增殖中的作用。方法：采用膜片钳技术的全细胞记录方式记录人肝癌细胞在不同浓度ＥＧＦ中延迟整流性Ｋ＋通道的跨膜电流。利用氚标记的胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）掺入技术观察ＥＧＦ和Ｋ＋通道阻断剂（ＴＥＡ）对人肝癌细胞ＤＮＡ合成的影响。结果：发现表皮生长因子（ＥＧＦ）促进肝癌细胞增殖的同时使肝癌细胞膜离子通道的跨膜Ｋ＋电流增加。Ｋ＋通道阻断剂四乙胺（ＴＥＡ）能显著抑制ＥＧＦ促进ＤＮＡ合成的作用,具有明显的量效关系和时间依赖性,但对细胞的活力无明显影响。结论：人肝癌细胞的增殖活动需要延迟整流性Ｋ＋通道参与。     

延迟整流性K^＋通道在人肝癌细胞增殖中的作用

目的：研究延迟整流性Ｋ＾＋通道在人肝癌细胞增殖中的作用。方法：采用膜片钳技术的全细胞记录方式记录入肝癌细胞在不同浓度ＥＧＦ中延迟整流性Ｋ＾＋通道的跨膜电流。利用氚标记的胸腺嘧啶核苷掺入技术观察ＥＧＦ和Ｋ＾＋通道阻断剂（ＴＥＡ）对人肝癌细胞ＤＮＡ合成的影响。结果：发现表皮生长因子（ＥＧＦ）促进肝癌细胞增殖的同时使肝癌细胞膜离子通道的跨膜Ｋ＾＋电流增加。Ｋ＾＋通道阻断剂四乙胺（ＴＥＡ）能显著抑制ＥＧＦ     

LAK和TIL细胞的表型测定

应用多种抗人淋巴细胞的单克隆抗体和流式细胞仪，分析用ＩＬ－２诱生患者淋巴细胞２周形成的ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞的表型。结果：ＬＡＫ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（８５．０±２．５３）％，ＣＤ＿（１６）细胞为（８．３±１．０）％，证实ＬＡＫ细胞是以Ｔ细胞为主，包括有ＮＫ细胞的混合群体。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占８１．４８％，因而推测ＬＡＫ细细胞中，抗原特异性和ＭＨＣ限制性的ＣＴＬ细胞占有很大比例。ＴＩＬ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（６４．７±９．７）％，ＣＤ＿（１６）￣＋细胞为（１．６±０．２）％，Ｌｅｕ７￣＋细胞为（６．８±１．１）％。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占ＣＤ＿８￣＋细胞的８６．７６％，证实ＴＩＬ细胞主要是Ｔ细胞，ＮＫ细胞极少。     

电离辐射对淋巴细胞DNA合成的影响及适应性反应

目的：探讨淋巴细胞预先接受低剂量电离辐射后，对大剂量照射的适应性反应。方法：用０．０４８Ｇｙγ－射线照射后接受０．５￣８．０Ｇｙ攻击剂量照射，以＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察淋巴细胞ＤＮＡ合成能力的变化。结果：淋巴细胞接受低剂量照射时能提高被大剂量的ＤＮＡ合成４．０Ｇｙ的照射时适应性反应最充分。结论：低剂量辐射能诱导淋巴细胞对大剂量辐射的适应性反应。     

肝癌患者外周血NK和LAK活性及T细胞亚群的变化

采用３ＨＴｄＲ释放法测定了２０例肝癌患者的外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性及淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）活性，同时用ＡＢＣ法检测其外周血Ｔ细胞亚群变化。结果显示，肝癌患者的外周血ＮＫ和ＬＡＫ活性显著低于正常人（Ｐ＜０．０１），Ｔ细胞亚群ＣＤ３及ＣＤ４细胞减少（Ｐ＜０．０１），ＣＤ８细胞增多（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８比值显著降低（Ｐ＜０．０１）且出现倒置。上述结果提示肝癌患者细胞免疫功能出现紊乱及免疫活性细胞功能有缺陷。     

肿瘤细胞诱导分化剂NADAH的固定化及其与K562细胞DNA作用的研究

目的：探讨肿瘤细胞诱导分化剂六亚甲基二乙酰胺（ＨＭＢＡ）和Ｎ－乙酰－１，６－二胺基己烷（ＮＡＤＡＨ）与人红白血病Ｋ５６２细胞ＤＮＡ的相互作用和诱导肿瘤细胞分化的机理．方法：通过两步合成，将ＮＡＤＡＨ偶联到对甲基苯磺酰氯活化的异丙基甘油硅胶上，制备高效液相色谱柱，研究人红白血病Ｋ５６２细胞ＤＮＡ在ＮＡＤＡＨ柱上的行为及ＮＡＤＡＨ及ＨＭＢＡ与人红白血病Ｋ５６２细胞ＤＮＡ的相互作用．结果：以２ｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４ｐＨ７．４的磷酸缓冲液做降盐梯度洗脱时，Ｋ５６２细胞ＤＮＡ大部分很快被洗脱流出，另有一小部分ＤＮＡ在（ＮＨ４）２ＳＯ４浓度降至最低时才流出，ＮＡＤＡＨ柱对这部分ＤＮＡ的保留能力极强，即有很强的疏水作用；不同的ＤＮＡ与ＮＡＤＡＨ具有不同的疏水亲和力．ＮＡＤＡＨ柱对ＤＮＡ的离子效应很弱．结论：ＨＭＢＡ和ＮＡＤＡＨ在诱导肿瘤细胞的分化过程还对ＤＮＡ有疏水作用．     

912和AK—2123对辐射荷瘤小鼠的内分泌效应

昆明小鼠移植Ｓ１８０肉瘤后５天，行肿瘤局部Ｘ线照射，单次剂量５Ｇｙ，连续５天，照前４０ｍｉｎ腹腔注射９１２（和ＡＫ－２１２３）。结果显示，于照射后７天，注射９１２小鼠血清皮质酮水平即开始降低，照后１７天降低最为明显；而血清睾丸酮水平和睾丸ｃＡＭＰ含量趋于升高。另外，９１２与ＡＫ－２１２３联合应用时，与单独给予９１２的变化一致。提示，９１２具有抑制皮质酮分泌和某种程度的促进睾丸ｃＡＭＰ产生和睾丸酮分     

苯乙酸对胶质瘤细胞C_6DNA合成的抑制作用

目的：观察诱导分化剂苯乙酸对胶质瘤细胞Ｃ６的诱导分化作用,并在分子水平上探讨其作用机理。方法：细胞计数和〔３Ｈ〕－ＴｄＲ掺入法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期。结果：苯乙酸对细胞增殖存在剂量（２５ｍｍｏｌ／Ｌ,５０ｍｍｏｌ／Ｌ）依赖性抑制;免疫细胞化学检测ＣＰＭ值降低,肿瘤细胞ＤＮＡ合成减少;细胞周期分析Ｇ０／Ｇ１期所占比例下降,Ｓ期相对升高。结论：苯乙酸可阻抑细胞增殖周期,使细胞周期增殖循环中止于Ｓ期中ＤＮＡ合成准备期Ｓ０期,ＤＮＡ合成减少,抑制细胞增殖。其作用机理为抑制细胞周期中Ｇ１期的ＲＮＡ和蛋白质合成     

野生型P53对胃癌细胞系的生长抑制作用

目的；观察野生型Ｐ５３对胃癌细胞系的生长抑制作用，方法，以逆转录病毒为载体将野生型Ｐ５３基因导入胃癌细胞系ＭＫＮ２８和ＢＧＣ８２３，检测Ｐ５６３对肿瘤细胞的影响。结果：Ｐ５３在转染细胞中表达水平提高，外源性Ｐ５３的导入使肿瘤细胞增殖细胞抗原（ＰＣＮＡ）水平明显降低；Ｇ０／Ｇ１期细胞数增加，Ｓ期降低。转染Ｐ５３基因的ＭＫＮ２８细胞裸鼠体内成瘤能力明显下降。结论野生型Ｐ５３基因在与调节ＤＮＡ复制及细胞     

乙肝病毒在转染细胞（z7－4）中复制的探讨

用ＨＢＶ　ＤＮＡ二聚体转染高度分化的人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２），筛选出具有分泌病毒抗原、核酸以及释放４２ｎｍ　Ｄａｎｅ颗粒能力的ｚ７－４细胞株。本实验结果支持３．５ＫｂｍＲＮＡ是前病毒基因，以它作模板可逆转录成１．６Ｋｂ（－）ｓｓＤＮＡ，再合成（＋）ｓｓＤＮＡ，最后装配成４．０Ｋｂ和３．２ＫｂｄｓＤＮＡ。在ＤＮＡ印迹法中位于４．０Ｋｂ（Ｄ１）和３．２Ｋｂ（Ｄ２）处是病毒的松驰环状双股ＤＮＡ（ＲＣＤＮＡ），而１．６Ｋｂ和１．２Ｋｂ处的２条ＤＮＡ带（Ｓ１和Ｓ２）均为单股ＤＮＡ，这些不同位置的ＤＮＡ带与病毒复制过程中ＤＮＡ的构型和片断大小不同有关。本实验未能发现２．０ＫｂｃｃｃＤＮＡ，但提示了负股ＤＮＡ５’端连接有蛋白质引物。     

DNA聚合酶β对DNAγ线辐射损伤的修复作用

采用ＤＮＡ聚合酶专一性抑制剂，观察ＤＮＡ聚合酶β对ＤＮＡｒ线损伤的修复作用。结果表明：在重组大鼠ＤＮＡ聚合酶β作用下，［＾３Ｈ］－ＴＴＰ掺入率明显高于未照组（Ｐ＜０．０１）；在一定剂量范围内（肝细胞小于２０ｇｙ，ＳＭＭＣ－ＬＴＮＭ肝癌细胞小于５Ｇｙ），［＾３Ｈ－ＴＩＰ掺入率随照射剂量增加而升高， 继续增加照射剂量时，［＾３］－ＴＴＰ掺入率反而下降；在同一剂量下，不同剂量率照射线这间ＤＮＡ聚合酶β的     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR1mRNA表达的动态变化

目的：探讨红藻氨酸（ＫＡ）诱导大鼠癫痫发作时海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达变化的时空特征．方法：采用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针原位杂交法检测海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达,通过图像分析系统进行定量处理．同时观察大鼠行为学及脑电变化．结果：ＫＡ注射后大鼠均出现严重边缘性惊厥,脑电图表现为持续性癫痫样放电．海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达在注射ＫＡ后１ｈ开始增高,４ｈ￣８ｈ达高峰,之后逐渐回落,７２ｈ降至     

CD3AK细胞治疗对原发性肝癌患者免疫功能影响的研究

为了观察ＣＤ３ＡＫ细胞对原发性肝癌（简称肝癌）患者免疫功能的影响。采用ＣＤ３ＡＫ细胞治疗６５例不能切除的肝癌患者，分别于治疗前后测定患者Ｔ细胞亚群（ＡＰＡＡＰ法）和血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平（ＦＬＩＳＡ法）。结果ＣＤ３ＡＫ细胞治疗后肝癌患者Ｔ细胞亚群ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋升高，ｓＩＬ－２Ｒ水平下降，统计学有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。提示ＣＤ３ＡＫ细胞治疗肝癌对提高     

AFP在肝细胞性肝癌手术前后对NK细胞活性的影响及意义

对３７例肝细胞性肝癌患者手术前、后ＮＫ细胞活性进行动态观察。结果表明，肝细胞性肝癌患者的ＮＫ细胞活性低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），ＡＦＰ阳性者低于ＡＦＰ阴性者（Ｐ＜０．０１）。术后他们的ＮＫ细胞活性进一步降低，且ＡＦＰ阳性者恢复较慢。提示ＡＦＰ对ＮＫ细胞活性有抑制作用，对肝细胞性肝癌患者（特别是ＡＦＰ阳性者），迅速提高术后机体ＮＫ细胞活性将有助于提高疗效。     

LAK细胞治疗慢性活动型乙型肝炎的疗效与机理研究

目的观察淋巴因子激活杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）治疗慢性活动型乙型肝炎（ＣＡＨ）的疗效，探讨治疗机理。方法ＬＡＫ细胞治疗４０例患者，治疗前、疗程结束时，分别检测ＨＢＶＭ，ＡＬＴ，Ｔ细胞亚群，Ｂ细胞，ＩＬ－２，ｍＩＬ－２Ｒ，ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性。疗程结束１ａ复查ＨＢＶＭ。对照组４０例。结果ＬＡＫ治疗组疗程结束时，ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ转阴率分别为２２．５％和４０．０％，与对照组相比差异显著（Ｐ均＜０．００１）。疗程结束１ａ复查ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ转阴率分别达４０．０％和６８．６％。治疗后患者ＣＤ＋４细胞数及ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值，ＩＬ－２水平及ｍＩＬ－２Ｒ表达，ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞活性均较治疗前明显升高（Ｐ均＜０．０１）。尤以ＨＢｅＡｇ转阴者，ＩＬ－２升高更显著（Ｐ均＜０．００５）。结论ＬＡＫ细胞疗法有增强免疫功能、调节免疫紊乱和清除乙肝病毒的效用，但主要不是ＬＡＫ细胞的溶细胞作用。