人参皂甙Rg3诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

目的 研究人参皂甙Rg3抑制人肝癌细胞生长及诱导凋亡作用机制。方法 体外培养人癌细胞（SMMC-721），观察人参皂甙Rg3高剂量组（80μg／m1）、中剂量组（40μg／m1）、低剂量组（20μg／m1）、阳性顺铂对照组（DDP，80μg／m1）和空白对照组（P13S）于12h、24h、48h、72h培养后，肝癌细胞的形态学和生长情况。采用MTT法，分析人参皂甙Rg3对细胞生长抑制率的影响。通过电镜观察细胞凋亡的形态学特征。结果 应用人参皂甙Rg3后，普通光镜下发现细胞数随Rg3浓度增加而减少，呈剂量依赖性，人参皂甙R西高、中、低剂量组细胞生长的抑制率分别为34．6％、19．1％和6．1％，与未处理空白对照组的细胞生长抑制率（5．7％）相比，以人参皂甙Rg3高剂量组于作用72h后对细胞生长的抑制作用最明显（P〈0．001），中剂量组次之（P〈0．05），低剂量组及Rg32h，24h，48h组未见明显差别。阳性对照顺铂组的细胞生长抑制为22．2％。人参皂甙Rg3作用72h后的电镜分析显示，细胞出现典型的凋亡形态学改变。结论 人参皂甙Rg3具有抑制人肝癌细胞生长作用，与促进细胞凋亡机制有关。     

人参皂苷Rg3对宫颈癌U14细胞凋亡水平影响的实验研究

目的探讨人参皂苷Rg3对宫颈癌U14细胞凋亡水平的影响。方法 10%小牛血清的DMEM营养液培养宫颈癌U14细胞,待细胞铺满培养板底80%~90%时分为对照组、Rg3低剂量组(20μg/ml)、Rg3中剂量组(40μg/ml)、Rg3高剂量组(80μg/ml)和环磷酰胺阳性药组(50μg/ml)开始加药,培养24 h后终止培养。通过CCK-8法检测细胞增殖活性,倒置显微镜观察细胞生长状态及免疫细胞化学法检测细胞凋亡状况。结果倒置显微镜观察可见随剂量增大U14细胞排列逐渐松散、萎缩,细胞漂浮死亡数量增多;CCK-8法检测显示Rg3低、中、高剂量组及阳性药组对U14细胞的增殖活性均有抑制作用,免疫细胞化学法显示Rg3低、中、高剂量组均能促进细胞凋亡,组间差异均有统计学意义(P0.01),且阳性药组与高剂量组差异无统计学意义(P0.05)。结论 Rg3能明显抑制U14细胞生长,通过下调Survivin和Bcl-2基因、上调Caspase-3和Bax基因诱导其凋亡,从而发挥抑瘤作用。     

人参皂甙Rg3对小鼠肝癌H22腹水瘤抗血管生成作用的研究

目的 研究人参皂甙Rg3治疗小鼠恶性腹腔积液的抗血管生成作用.方法 50只雌、雄各半昆明种小鼠随机分为5组:Ⅰ组生理盐水组(0.9%NS);Ⅱ组顺铂组(DDP 0.5 mg/kg);Ⅲ组低剂量人参皂甙Rg3组(LPD 0.3 mg/kg);Ⅳ组中剂量人参皂甙RS3组(MPD 1.0 mg/ks);Ⅴ组高剂量人参皂甙Rg3组(HPD 3.0ms/ks).所有小鼠肝癌H22腹水瘤模型建立后24 h开始分别腹腔注射0.2 ml/只治疗,1次/d,共14 d.治疗结束后24 h,处死各组小鼠,应用酶联免疫吸附法检测腹水及血清中血管内皮生长因子(VEGF),免疫组织化学法计数腹膜瘤结节微血管密度(MVD),电镜观察人参皂甙Rg3中刺量组与生理盐水组腹腔内肿瘤细胞及腹膜瘤结节新生血管的形态学变化.结果 人参皂甙Rg3各剂量组随着用药剂量的加大,小鼠腹水及血清中VEGF值、腹膜瘤结节MVD下降(P＜0.05),且均较生理盐水组、DDP组下降(P＜0.05).电镜观察人参皂甙Rg3中剂量组较生理盐水组腹水中凋亡和坏死瘤细胞居多;腹膜瘤结节微血管基底膜平滑完整.结论 人参皂甙Rg3通过下调荷瘤小鼠体内VEGF,降低微血管的通透性和抑制腹膜微血管形成,从而抑制恶性腹腔积液的形成.这为临床应用提供了实验依据.     

特异性细胞毒性T淋巴细胞体外培养体系的建立与鉴定及对卵巢癌细胞的影响

目的探讨特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外培养体系的建立与鉴定及对卵巢癌细胞的影响,为开发一种高效、安全的抑制杀伤卵巢癌细胞的免疫疗法提供依据。方法提取人外周血单个核细胞(PBMC),加入Cp G模体的寡脱氧核苷酸序列(Cp GODN),人参皂苷Rg1药物浓度分别为3.75μg/ml、7.5μg/ml、15μg/ml、30μg/ml、60μg/ml与不加药物的对照组比较,采用单一变量控制法,验证Cp GODN,人参皂苷Rg1和人类表皮生长因子受体α(HER2/neu)抗原肽的最佳比例。用流式细胞仪检测Cp GODN,人参皂苷Rg1和HER2/neu混合物刺激的PBMC表面标记物CD3、CD4和CD8,并检测细胞核型。用人参皂苷Rg1和HER2/neu混合物刺激的PBMC形成的CTL作用到SKOV-3细胞中,培养一段时间观察CTL的抑制作用。结果随着Cp GODN/人参皂苷Rg1药物浓度的增加,CTL作用显著增强,差异有统计学意义(P0.05),当药物浓度达到30μg/ml时,抑制效果进入平台,药物浓度再增加,抑制效果不变。因此,以Cp GODN和人参皂苷Rg1有效浓度30μg/ml与HER2/neu抗原肽片段10μg/ml混合,加入到提取的PBMC中,培养34 d,建立CSR-CTL体系。流式细胞仪检测,随着培养时间增加CD3、CD4和CD8阳性细胞数量显著增多,差异有统计学意义(P0.05)。CSR-CTL对卵巢癌细胞SKOV-3生长有显著的抑制作用,观察组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论采用Cp GODN,人参皂苷Rg1和HER2/neu抗原肽混合物刺激PBMC可建立安全、特异性高的细胞毒性T淋巴细胞体外培养体系CSR-CTL,并且CTL可抑制人卵巢癌SKOV-3的生长。     

人参皂苷Rg1通过NF-κB阻断缺氧诱导卵巢癌SKOV3细胞EMT

目的 探讨人参皂苷Rg1对卵巢癌SKOV3细胞上皮间质转化的影响及机制.方法 确定人参皂苷Rg1对SKOV3细胞生长的影响,构建缺氧诱导上皮间质转化(EMT)模型,观察细胞形态变化,检测E-cadherin,vimentin及核因子KappaB(NF-κB)蛋白的表达.结果 不同浓度的人参皂苷Rg1处理SKOV3细胞,超过40μg/mL的Rg1培养24h时对细胞生长稍有抑制,培养48h和72h时对细胞生长无明显抑制.缺氧诱导48h,SKOV3细胞呈现纺锤形、松散排列的形态,E-cadherin蛋白表达消失,vimentin蛋白表达增强.40μg/mL人参皂苷Rg1处理缺氧诱导的SKOV3细胞48h,细胞形态变化被部分逆转.E-cadherin蛋白表达恢复,vimentin蛋白表达被抑制,同时,NF-κB蛋白的表达与E-cadherin呈相反的趋势.结论 人参皂苷Rg1可能通过调控NF-κB抑制缺氧诱导卵巢癌SKOV3细胞的EMT.     

紫杉醇联合顺铂对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的逆转作用

目的:探讨紫杉醇联合顺铂对人卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP耐药性的逆转作用。方法:取对数生长期SK-OV3/DDP细胞进行实验。实验分为顺铂组、紫杉醇组、联合组和空白对照组。顺铂组细胞给予顺铂15μg/ml;紫杉醇组细胞给予紫杉醇3.13μg/ml;联合组细胞给予顺铂15μg/ml+紫杉醇3.13μg/ml;空白对照组细胞不给予任何药品。所有细胞均培养48 h后进行实验。采用MTT法检测细胞的生长抑制率。采用流式细胞术检测各组细胞的细胞周期和凋亡率。结果:顺铂组细胞生长抑制率与空白对照组无明显增加(P<0.05),证实SKOV3/DDP对顺铂的耐药,紫杉醇组和联合组细胞生长抑制率较空白对照组和顺铂组明显增加(P﹤0.05),联合组细胞生长抑制率最高,较紫杉醇组增加更为明显(P﹤0.05)。顺铂组与空白对照组细胞多被阻滞于G1和S期,紫杉醇及联合组细胞多被阻滞于G2/M期,联合组作用较紫杉醇组更加明显(P﹤0.05)。顺铂组细胞凋亡率与空白对照组无明显差异(P>0.05),紫杉醇组和联合组细胞凋亡率较空白对照组和顺铂组明显增加(P﹤0.05),联合组细胞凋亡率最高,较紫杉醇组增加更为明显(P﹤0.05)。结论:紫杉醇联合顺铂可明显逆转卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP对顺铂的耐药性。     

用TK基因和HGPRT基因突变试验检测人参皂甙Rg1的抗诱变性

[目的]用TK基因和HGPRT基因突变试验评价人参皂甙Rg1的抗诱变性,为其进一步的开发利用提供资料.[方法]用人参皂甙Rg1 0.391、3.125、25、200μg/ml与阳性致突变物甲基磺酸甲酯(MMS)5μg/ml同时处理TK6细胞4h,采用微孔板法检测tk和hgprt两个位点突变频率.[结果]随受试物剂量的增加,人参皂甙Rg1拮抗MMS诱变性的作用增大,表现在tk和hgprt两个位点突变频率均较MMS组降低,差异有统计学意义(P<0.05).[结论]人参皂甙Rgl具有拮抗MMS诱导的tk基因和hgprt基因突变的作用;TK6细胞可用于TK基因和HGPRT基因突变的同时检测,但TK基因突变试验比HGPRT基因突变试验更为敏感.     

甘草提取物(Gc34)对MDA-MB-231乳腺癌细胞体外促凋亡作用研究

目的观察甘草提取物Gc34对MDA-MB-231细胞的体外促凋亡作用。方法 MTT法检测不同时间(24、48、72h),不同浓度(25、50、75、100μg/ml)Gc34对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;采用AO/EB染色、透射电镜实验判断凋亡;流式细胞仪检测其凋亡率。结果 MTT结果显示,随着Gc34作用浓度升高,细胞增殖能力随之下降,Gc34对MDA-MB-231细胞体外增殖抑制呈明显的剂量-时间依赖性,72h半数抑制浓度(IC50)为65.38μg/ml;AO/EB染色表明药物组细胞出现明显凋亡迹象,而阴性对照组中细胞形态完好;透射电镜结果显示,75μg/ml Gc34处理72h后细胞出现典型凋亡形态学改变;流式细胞仪分析结果显示,随Gc34剂量增加细胞凋亡率逐渐上升,呈明显的剂量依赖性。结论甘草提取物Gc34在体外能明显抑制MDA-MB-231细胞增殖并诱导其凋亡。     

咖啡酸苯乙酯对人结肠癌PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对人结肠癌Lovo细胞内PI3K/AKT信号通路的影响。方法以体外培养人结肠癌细胞Lovo为实验对象,随机分为5组:CAPE浓度分别为0、2.5、5.0、7.5、10.0μg/ml。运用MTT法检测CAPE对人结肠癌Lovo细胞的生长增殖的影响,并通过Western blotting检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白磷酸化AKT、caspase-3和caspase-9表达的情况。计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 CAPE以浓度和时间依赖的方式抑制人结肠癌Lovo细胞的增殖,10μg/ml的CAPE作用72 h后对Lovo细胞的抑制率达(61.28±5.15)%,明显高于2.5μg/ml作用72 h后(29.63±0.69)%的抑制率(P<0.05),也明显高于10μg/ml作用24 h后(37.84±3.05)%的抑制率(P<0.05);Western blot-ting结果显示CAPE以剂量依赖性的方式使人结肠癌Lovo细胞内磷酸化AKT的表达下降,10μg/ml组的p-AKT的蛋白相对表达量为(0.52±0.11),caspase-3、caspase-9的表达上升,10μg/ml组的caspase-3、caspase-9蛋白相对表达量分别为(1.58±0.07)、(1.23±0.12)。结论 CAPE可能通过调节PI3K/AKT信号通路中磷酸化AKT、caspase-3和caspase-9的表达以剂量依赖性的方式抑制人结肠癌Lovo细胞的增殖。     

温郁金二萜类化合物C通过miR-223-3p/NF-kB通路对幽门螺杆菌诱导的GES-1细胞的保护作用

目的 探索温郁金二萜类化合物C对幽门螺杆菌(Hp)诱导的GES-1细胞的保护作用及机制。方法 选取GES-1细胞(空白组),采用Hp感染(模型组),使用不同浓度温郁金二萜类化合物C(10μg/ml、20μg/ml及80μg/ml)处理细胞(低剂量组、中剂量组及高剂量组)。CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell检测细胞侵袭、迁移，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)基因mRNA及miR-223-3p水平，Western blot检测细胞E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、p-p65、p65及核因子κB抑制蛋白α(IKBα)蛋白水平。结果 与空白组比较，模型组24 h、48 h及72 h细胞A值升高，凋亡率降低，侵袭、迁移细胞数升高(P<0.05);与模型组比较，温郁金二萜类化合物C处理组24 h、48 h及72 h细胞A值降低，凋亡率升高，侵袭、迁移细胞数降低，且呈现浓度依赖性(P<0.05)。Hp诱导GES...     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

Correlates of stages of change of smoking among inhabitants of deprived neighbourhoods

BACKGROUND: This study examines the prevalence and correlates of stages of change of smoking, in terms of psychosocial, structural and sociodemographic factors, among inhabitants of deprived neighbourhoods. METHODS: Cross-sectional data were obtained from a survey on health related behaviour. Subjects were 2009 current and former smokers, aged 20-46, living in deprived neighbourhoods in Rotterdam, the second largest city in the Netherlands. Three groups of smokers were formed according to the stages of change-definitions of the Transtheoretical Model: smokers not planning to quit (precontemplators), smokers planning to quit (contemplators/preparators) and former smokers (actors/maintainers). Smokers planning to quit and smokers not planning to quit were compared regarding psychosocial factors (attitude, social norm, self-efficacy), structural factors (neighbourhood problems, material deprivation, financial problems, employment status) and sociodemographic factors (age, gender, marital status, cultural background, educational level). Former smokers were compared with smokers planning to quit regarding structural and sociodemographic factors. Logistic regression was used to assess correlates of stages of change. RESULTS: Smokers planning to quit (prevalence = 19%) reported a more positive attitude, stronger social norms and higher self-efficacy expectations in quitting smoking than smokers not planning to quit (prevalence = 57%). Smokers planning to quit less often were Dutch-born, more often had attended higher vocational schooling or university and more often reported experiencing two or more neighbourhood problems compared to smokers not planning to quit. Former smokers (prevalence = 24%) were older, more often Dutch-born, married, employed and higher educated, compared to smokers planning to quit. Furthermore, former smokers less often reported material deprivation and financial problems than smokers planning to quit. CONCLUSION: Among people living in deprived neighbourhoods, different factors correlate with different stages of change of smoking. Implications for health promotion are discussed.     

Choice of measures of vaccination and estimates of risk of pediatric pertussis

BackgroundVaccination uptake at the individual level can be assessed in a variety of ways, including traditional measures of being up-to-date (UTD), measures of UTD that consider dose timing, like age-appropriate vaccination, and risk reduction from individual doses. This analysis compared methods of operationalizing vaccination uptake and corresponding risk of pertussis infection.MethodsCity-wide case-control study of children in Philadelphia aged 3 months through 6 years, between 2001 and 2013. Multiple logistic regression was used to isolate the independent effects of each measure of vaccination uptake and the corresponding relative odds of pertussis.ResultsBeing UTD on vaccinations was associated with a 52% reduction in risk of pertussis (OR 0.48, 95% CI: 0.34, 0.69). Evaluation of delayed receipt of vaccine versus on-time UTD yielded similar results. There was a decrease in risk of pertussis for each additional dose received with the greatest reduction in pertussis infection observed from the first (OR 0.48, 95% CI: 0.28, 0.83) and second dose (OR 0.17, 95% CI: 0.08, 0.34). Additional doses conferred minimal additional protection in this age group.ConclusionExamining vaccination status by individual doses may offer improved predictive capacity for identifying children at risk for pertussis infection compared to the traditional UTD measure.     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。     

两种不同肌瘤剔除术治疗子宫肌瘤的临床疗效比较

目的:比较腹腔镜子宫肌瘤剔除术与腹式子宫肌瘤剔除术的临床疗效。方法:回顾分析63例腹腔镜子宫肌瘤剔除术与61例腹式子宫肌瘤剔除术的临床资料,比较2种手术方式的手术时间、术中出血量、肛门排气时间、使用抗生素时间、术后感染率、体温恢复正常时间、住院时间等情况。结果:两组患者接受子宫肌瘤剔除术顺利完成,腹腔镜组手术时间长于开腹组(P0.05),腹腔镜组术中出血量及剔除肌瘤个数均少于开腹组(P0.05),术后腹腔镜组体温恢复正常时间、肛门排气时间、抗生素使用及住院时间均短于开腹组,两组患者最多随访6个月,腹腔镜组平均康复时间较开腹组短(P0.05),两组随访B超均未发现明显肌瘤结节。结论:腹腔镜子宫肌瘤剔除术损伤小,恢复快,住院时间短,是值得推广的微创手术。     

尘肺病患者145例死因调查

目的分析汉中市尘肺病的发生、发展和死亡原因，以提高尘肺病患者的生存质量。方法对145例尘肺病患者的死因进行回顾性分析，计算其平均发病年龄、死亡年龄及患尘肺病后的存活年限。结果矽肺的平均发病年龄和死亡年龄均早于煤工尘肺和石棉肺，尘肺病的主要死因为患肺部疾患，患尘肺病后的平均存活年限为12a。结论加强职业健康体检工作，对尘肺病人做到早发现早治疗和预防并发症的发生。     

性发育异常发病机制的研究进展

正常的性腺分化可分为3个过程：原始性腺形成、性别决定和卵巢/睾丸发育。在任一环节中,基因表达或调控发生异常均有可能导致性发育异常疾病的发生。性发育异常是指染色体、性腺和解剖性别不典型。随着分子生物学技术的发展,不断地发现新的基因或信号通路参与性腺分化和发育,如SRY、SF1、WT1、Sox9等基因与睾丸发育密切相关,Wnt/Rspo1/B连环蛋白通路、Dax1、Foxl2等基因在卵巢分化中发挥着重要作用,一些非编码RNA和转化生长因子也有重要的调节功能,且睾丸和卵巢发育均为主动过程,即使在出生后因某些基因的改变两者间也可出现横向分化。这些为揭示性分化异常的发病机制提供了可能。     

One-year stability of the Measure of Processes of Care

BACKGROUND: The Measure of Processes of Care (MPOC) is a 56-item self-administered measure designed to examine what parents of a child with a chronic health problem think of the services they and their child receive, and to measure the extent to which these services are family-centred. Reliability and validity of the MPOC were established in prior studies. The aim of the present study was to assess the 1-year stability of the MPOC to justify its use as an evaluative tool. METHODS: Nine paediatric rehabilitation centres in the Netherlands participated in this short longitudinal survey study. Subjects were 205 parents (response rate 74.8%) of children aged 1-18 years who received care in one of the participating paediatric rehabilitation centres. All subjects filled out two MPOCs with a 1-year interval. RESULTS: All correlations between the scale scores of the MPOC at the first and second administration were relatively high and significant (range: 0.443-0.609, all P < 0.001), demonstrating high inter-individual stability. However, all mean scale scores, except for Providing General Information, significantly reduced after 1 year. CONCLUSIONS: The MPOC has a moderate 1-year stability. However, because of its tendency to score lower when repeated after 1 year, its use as an evaluative follow-up instrument to assess the effectiveness of a programme intervention is restricted.     

儿童皮质发育畸形的MRI诊断

目的探讨儿童皮质发育畸形(MCD)的MRI表现特点,为MCD的早期诊断提供依据。 方法选择2010年1月至2012年12月在四川省医学科学院·四川省人民医院放射科经MRI检查确诊为MCD的44例患儿为研究对象。回顾性分析及总结其MRI影像学特征。本研究遵循的程序符合四川省医学科学院·四川省人民医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,征得受试对象及其监护人知情同意,并与监护人签署临床研究知情同意书。 结果本组44例经MRI确诊为MCD患儿中,巨脑回-无脑回为17例,多小脑回为14例,灰质异位为9例,脑裂畸形为4例。MCD的MRI特点中,巨脑回表现为脑回增宽、皮质增厚及白质变薄;无脑回表现为正常脑沟、脑回消失,皮质增厚及白质变薄;多小脑回表现为脑回增多、细小;灰质异位表现为皮质下及侧脑室周围深部白质区结节状、团块状或带状病灶,信号与灰质信号相同;脑裂畸形表现为从侧脑室到脑表面贯穿大脑半球的裂隙,表面覆盖灰质。 结论MRI是诊断儿童MCD的可靠影像学方法。     

西林瓶装注射用水的装量检查分析

为了检查西林瓶装注射用水的实际分装量是否符合2005年版《药典》三部要求,按照2005年版《药典》三部中“生物制品分装和冻干规程”,分装规格为0．8ml的西林瓶装注射用水10000瓶,随机在分装过程的前、中、后阶段共抽取100瓶,轧盖、目检。分别用1ml标定注射器及1ml普通无菌注射器抽取每瓶注射用水的实际体积,以t检验法对实际抽取量与标示量的差值进行统计学分析,结果显示其与2005年版《药典》三部要求分装附加量为0．1ml相比有显著性差异（P〈0．001）。