重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因的克隆与表达

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因的克隆与表达颜真，韩苇，李芳梅，赵宁，张英起（生物技术中心）关键词粒细胞巨噬细胞集落刺激因子；基因克隆；基因表达中图法分类号　Ｒ３３４粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）是一功能很强的造血生长因子，人ＧＭ－Ｃ...     

用WEHI_3－条件培养液代替肺－条件培养液培养CFU－GM

用ＷＥＨＩ＿３－条件培养液（ＷＥＨＩ＿３－ＣＭ）代替个条件培养液（Ｌ－ＣＭ）对小鼠粒单系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）生长的影响进行研究。结果表明，ＷＥＨＩ＿３－ＣＭ对体外小鼠ＣＦＵ－ＧＭ的形成具有明显的刺激作用；ＷＥＨＩ＿３－ＣＭ与Ｌ－ＣＭ均主要刺激混合型集落生长。提示ＷＥＨＩ＿３－ＣＭ内可能含粒单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）活性。     

G-CSF和GM-CSF对髓系白血病细胞增殖的影响

目的 了解粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对髓系白血病细胞增殖的影响。方法 采用甲基纤维素半固体培养法培养白血病细胞集落（ＣＦＵ－Ｌ）,观察Ｇ－ＣＳＦ和ＧＭ－ＣＳＦ对１１例ＡＭＬ和ＣＭＬ患者外周血ＣＦＵ－Ｌ形成的影响。结果 ＣＭ－ＣＳＦ对ＣＦＵ－Ｌ的促进作用明显高于Ｇ－ＣＳＦ（Ｐ＝０．０１２）,而Ｇ－ＣＳＦ对ＣＦＵ－Ｌ形成影响与对照组没有显著性差别（Ｐ＝０．４９５）。结论 Ｇ－ＣＳＦ对髓系白血病细胞体外增殖无明显影响,作为髓系白血病大剂量化疗的支持治疗可能更为安全。     

G—CSF酶联免疫检测试剂盒在发热性疾病鉴别诊断中的应用

用两种抗粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）单克隆抗体，本院自制了Ｇ－ＣＳＦ酶联免疫检测试剂盒。经国内７家大医院试用，对临床标本测定的结果表明：细菌培养阳性发热患者（ｎ＝３１），Ｇ－ＣＳＦ阳性检出率为１００％。未做细菌培养临床诊断为细菌感染发热患者（ｎ＝２６９），Ｇ－ＣＳＦ阳性率为８９．２％；非细菌感染发热患者（ｎ＝１５３），Ｇ－ＣＳＦ阳性率只有６．５％；正常人（ｎ＝１５７），Ｇ－ＣＳＦ检测全部为阴性     

血清粒细胞集落刺激因子对新生儿急性感染诊断价值探讨

采用双抗体夹心酶联免疫法测定６２例急性感染新生儿血清粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ），其阳性率显著高于血培养（Ｐ〈０．０５）；患儿感染控制后，Ｇ－ＣＳＦ全部转阴提示Ｇ－ＣＳＦ可作为新生儿急性感染诊断指标之一，优于血培养及白细胞计数。     

人类粒─—巨噬细胞集落刺激因子的临床研究进展

人类粒─—巨噬细胞集落刺激因子的临床研究进展青海医学院附属医院李湛全综述贾乃镛审校粒─—巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）是一种多向性造血生长因子，近年来对ＧＭ－ＣＳＦ的临床应用作了大量研究，并取得了引人注目的成就。现在重组人类ＧＭ－ＣＳＦ（ｒｈＧ...     

基因重组人集落刺激因子对环磷酰胺处理小鼠造血干细胞的动员作用

基因重组人集落刺激因子对环磷酰胺处理小鼠造血干细胞的动员作用徐志中，周黎明，王浴生等。华西医科大学临床药理研究所。中国抗生素杂志１９９６；２１（１）∶５７国产基因重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）和进口人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ...     

用WEHI3—条件培养液代替肺—条件培养液培养CFU—GM

用ＷＥＨＩ３－条件培养液（ＷＥＨＩ３－ＣＭ）代替肺－条件培养液（Ｌ－ＣＭ）对小鼠粒单系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）生长的影响进行研究，结果表明，ＷＥＨＩ３－ＣＭ对体外小鼠ＣＦＵ－ＧＭ的形成具有明显的刺激作用，ＷＥＨＩ３－ＣＭ与Ｌ－ＣＭ均订刺激混合型集落生长，提示ＷＥＨＩ３－ＣＭ内可能含粒单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）活性。     

G－CSF酶联免疫检测试剂盒在发热性疾病鉴别诊断中的应用

用两种抗粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）单克隆抗体，本院自制了Ｇ－ＣＳＦ酶联免疫检测试剂盒。经国内７家大医院试用，对临床标本测定的结果表明：细菌培养阳性发热患者（ｎ＝３１），Ｇ－ＣＳＦ阳性检出率为１００％。未做细菌培养临床诊断为细菌感染发热患者（ｎ＝２６９），Ｇ－ＣＳＦ阳性率为８９．２％；非细菌感染发热患者（ｎ＝１５３），Ｇ－ＣＳＦ阳性率只有６．５％；正常人（ｎ＝１５７），Ｇ－ＣＳＦ检测全部为阴性。证实本方法可用于发热性疾病的诊断、鉴别诊断，并可指导临床抗生素的合理使用。     

粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子治疗重型再生障碍性贫血2例

粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子治疗重型再生障碍性贫血２例北京医科大学第三医院血液病科（１０００８３）窦焕福，韩祥，王良绪，王丽粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）治疗重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）国内尚未见报告。我院用重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺...     

人尿集落刺激因子对受照小鼠外周血粒细胞存活和吞噬功能的影响

应用ＭＴＴ活细胞测定法和＾３Ｈ－ＴｄＲ细菌掺入法，观察人尿集落刺激因子（ＣＳＦ）体外加入对受照小鼠外周血成熟粒细胞存活以及体内注射对外周血吞噬功能的影响。结果表明：体内加入一定浓度的ＣＳＦ能提高外周血粒细胞的存活，且有良好的剂量效应关系。同时人尿ＣＳＦ能增强受照鼠外周血的吞噬功能。提示人ＣＳＦ具有辐射保护作用可能与之有关。     

肺泡巨噬细胞培养上清液对小鼠粒—单系造血祖细胞和造血干细胞的…

目的：观察肺泡巨噬细胞培养上清液（ＡＭψＳ）对粒－单系造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）和造血干细胞的影响。方法：采用脾集落形成和造血祖细胞体外培养技术。结果：ＡＭψＳ对ＣＦＵ－ＧＭ的增殖具有双向调控作用，即低浓度有促进作用，高浓度有抑制作用，但它对ＣＦＵ－Ｓ无明显影响。结论：ＡＭψＳ中含有粒－单系集落刺激因子（ＣＳＦ－ＧＭ）和前列腺素样活性物质，这些物质浓度的变化可以调控ＣＦＵ－ＧＭ的增殖，大肠杆菌脂多     

急,慢性肾功能衰竭患者粒系,粒单系集落刺激因子水平的观察

为探讨慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）患者常伴有继发感染的原因,对急、慢性肾功能衰竭患者透析前后粒系、粒单系集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ）水平进行了观察比较。结果表明,ＣＲＦ患者透析前后Ｇ－ＣＳＦ水平均较正常对照明显升高,透析后Ｇ－ＣＳＦ水平较透析前有升高,但无统计学差异,ＧＭ－ＣＳＦ水平透析前后与正常对照无统计学差异;急性肾功能衰竭（ＡＲＦ）患者透析前后Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ水平比正常对照组明显升高,其中ＧＭ－ＣＳＦ水平ＡＲＦ患者透析前后均比ＡＲＦ患者明显为高。认为ＣＲＦ可影响血清集落刺激因子（ＣＳＦｓ）的产生,主要是ＧＭ－ＣＳＦ的产生,可能与慢性肾功能衰竭患者常伴有继发感染有关     

腺病毒介导的细胞因子基因转染对小鼠巨噬细胞功能的影响

探讨重组腺病毒介导的细胞因子基因转染对巨噬细胞体外抗肿瘤免疫功能的影响。方法通过重组腺病毒的介导，将白细胞介素４（ＩＬ－４）及巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）基因转染至小鼠腹腔内巨噬细胞，并检测其上清中ＩＬ－４及Ｍ－ＣＳＦ的水平；同时检测基因转染后巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤活性，及其分泌的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、ＩＬ－１、一氧化氮（ＮＯ）水平与主要组织相容性抗原复合物（ＭＨＣ）Ⅱ类分子的表达情况。结果基因转染后４小时，巨噬细胞即可表达较高水平的ＩＬ－４和（或）Ｍ－ＣＳＦ，转染后１８小时，巨噬细胞上清中ＩＬ－４水平为９５Ｕ／ｍｌ，Ｍ－ＣＳＦ为３５Ｕ／ｍｌ；转染后巨噬细胞杀伤活性明显升高，两者联合应用并以内毒素脂多糖（ＬＰＳ）协同刺激时，这一升高更为明显；其上清中ＴＮＦ、ＩＬ－１及ＮＯ水平均有不同程度的升高；ＭＨＣⅡ类分子的表达在ＩＬ－４及Ｍ－ＣＳＦ联合转染组有所增强。结论巨噬细胞中ＩＬ－４及Ｍ－ＣＳＦ基因的表达可以增强其抗肿瘤免疫功能。     

人参总皂甙对人血细胞生成的研究

从人参中提取有效成份人参总皂甙（ＴＳＰＧ），测定它对人骨髓粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ），红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ，ＢＦＵ－Ｅ）和多向祖细胞（ＣＦＵ－ＧＥＭＭ）的刺激增殖作用。结果显示：在培养中加入不同浓度的ＴＳＰＧ５．２５，５０，７５，１００ｍｇ／Ｌ，可促进造血细胞增殖，在体外形成集落。在ＴＳＰＧ５－７５ｍｇ／Ｌ时，ＣＦＵ－ＧＭ集落产率均明显高于不加ＴＳＰＧ的对照组浓度的ＴＳＰＧ使集落产率明显高于对     

外周血干细胞的变化与化疗因素的影响

为探讨外周血干细胞移植（ＰＢＳＣＴ）时采取干细胞的最适条件，以粒一巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）为指标，对１２例造血系恶性肿瘤化疗后ＰＢＳＣ的变化进行了观察。结果表明：化疗结束约２周后，白细胞数２×１０￣９／Ｌ、中性粒细胞数０．８×１０￣９／Ｌ、血小板数１１０×１０￣９／Ｌ左右时采取于细胞是最适宜的；化疗强度使外周血白细胞数抑制得越低，血象恢复期出现的ＣＦＵ－ＧＭ就越多，外周血象最低时的白细胞数与ＣＦＵ－ＧＭ数之间呈负相关（Ｐ＜０．０５）；随化疗次数的增多，ＣＦＵ－ＧＭ数逐渐减少；两者之间呈负相关（Ｐ＜０．０５）；粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）可增加ＣＦＵ－ＧＭ数量；化疗后血象恢复期出现的ＣＤ３４阳性细胞与ＤＦＵ－ＧＭ之间呈大致相同的变化趋势。ＣＤ３４阳性细胞与ＣＦＵ－ＧＭ之间的确切关系有待于进一步探讨。     

3种细胞因子在体外对阿糖胞苷细胞毒性的影响

采用对碘硝基四唑（ＩＮＴ）比色法,观察了１７例急性髓性白血病（ＡＭＬ）患者和８例正常人的骨髓,在体外对阿糖胞苷的敏感性,同时分别观察了粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）,粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）,白细胞介素－３（ＩＬ－３）３种细胞因子对其敏感性影响。结果显示ＡＭＬ细胞与正常细胞对Ａｒａ－Ｃ敏感性存在显著差异;Ｇ－ＣＳＦ,ＧＭ－ＣＳＦ,ＩＬ－３此３种因子均能增加Ａｒａ－Ｃ对ＡＭＬ细胞的     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的研究

目的 进行重组人粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）的临床前研究和Ⅰ期临床试验。方法在动物模型上进行ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的药理、毒理、药代和药效研究，并在人体上进行安全性评价和初步疗效观察。结果体外实验证明ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对骨髓造血祖细胞有促增殖作用；在６０Ｃｏｒ射线照射造成的白细胞低下动物（狗和猴），显示了明显的升白细胞作用；急性毒性试验显示，ＬＤ５０大于５０００μｇ／ｋｇ；小鼠的药代动力学研究表明，注入的ＧＭ－ＣＳＦ主要从尿中排出，并不在体内蓄积；狗的慢性毒性试验表明在高于临床用量３倍时，无明显毒性反应。Ⅰ期临床试验证明，每天在２．５－７．５μｇ／ｋｇ的剂量下使用是安全的，并能升高白细胞。结论ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可用于治疗放疗与化疗引起的白细胞减少症。     

IFN—γ和M—CSF对U937细胞表面分子表达的影响

为了研究Ｍ－ＣＳＦ（巨噬细胞集落刺激因子）和ＩＦＮ－γ（γ干扰素）对人原单核细胞系Ｕ９３７细胞表达ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡⅠ类和Ⅱ类抗原的影响，采用ＡＰＡＡＰ法半定量检测。结果表明：ＩＦＮ－γ和Ｍ－ＣＳＦ都能不同程度地提高４种表面分子的表达，且随刺激培养时间的延长而更加明显。两种细胞因子相比，ＩＦＮ－γ比Ｍ－ＣＳＦ刺激作用强     

人纤维母细胞条件培养液对CFU－GM生长的影响

采用单个集落、亚融合和全融合的人类纤维母细胞条件培养液（ＨＦ－ＣＭ）对人骨髓细胞ＣＦＵ－ＧＭ生长的影响进行了研究。结果表明，加入同样浓度的ＨＦ－ＣＭ时，亚融合纤维母细胞条件培养液所刺激的ＣＦＵ－ＧＭ产率明显高于全融合及单个集落ＨＦ－ＣＭ所刺激的ＣＦＵ－ＧＭ产率（Ｐ＜０．０５）；在加入不同浓度的亚融合ＨＦ－ＣＭ时，以１０％亚融合ＨＦ－ＣＭ对ＣＦＵ－ＧＭ产率表现出最大的刺激活性。