脆弱拟杆菌PSA对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用

目的探讨脆弱拟杆菌多糖A(PSA)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗作用。方法将24只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、葡聚糖硫酸钠(DSS)组、DSS+PSA组,每组各8只。正常对照组不进行处理,其余两组均采用2%DSS制作慢性UC小鼠模型。DSS组单纯建立模型,DSS+PSA组在模型基础上分别每天给予0.5 ml PSA(浓度为100μg/ml)灌胃。通过疾病活动指数(DAI)、结肠大体形态损伤、结肠黏膜损伤指数(CMDI)、组织病理学表现、ELISA法检测小鼠血清核因子(NF)-κB表达水平等比较脆弱拟杆菌PSA对UC小鼠的治疗作用。结果小鼠无死亡。DSS组、DSS+PSA组DAI评分、CMDI评分及血清NF-κB表达水平均明显高于正常对照组(P 0.01)。DSS组DAI评分、CMDI评分及血清NF-κB表达水平明显高于DSS+PSA组(P 0.05)。DSS组、DSS+PSA组小鼠结肠大体形态及组织病理学损伤均明显高于正常对照组,其中以DSS组损伤尤为明显。结论脆弱拟杆菌PSA能明显改善UC小鼠的精神状态及肠道损伤,抑制NF-κB的表达,而发挥治疗UC的作用。     

复方蜚蠊提取物PB对异体抗原联合醋酸诱导大鼠慢性溃疡性结肠炎的作用机制

目的研究复方蜚蠊提取物PB对慢性溃疡性结肠炎(UC)大鼠的作用,并初步探讨其作用机制。方法采用异体抗原联合醋酸建立慢性UC模型,正常组及模型组灌肠给予氯化钠溶液,其余各组分别给予柳氮磺胺吡啶(SASP)、肠炎宁和PB低、中、高剂量药物。评价疾病活动指数(DAI)和病理组织学评分(HS);测定脏器指数和结肠黏膜指数(CMDI);ELISA法检测血清中IL-4、IL-8、IL-17、INF-γ、CRP、IgG,以及结肠黏膜中TNF-α、MPO、EGF的含量。结果与正常组比较,模型组IL-8、IL-17、INF-γ、CRP、IgG、TNF-α、MPO含量均明显升高,IL-4、EGF含量明显降低(P<0.01,P<0.05);PB各剂量组DAI、CMDI、HS、IL-8、IL-17、INF-γ、CRP、IgG、TNF-α、MPO含量均明显降低,IL-4含量明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论复方蜚蠊提取物PB灌肠给药后能够有效缓解异体抗原联合醋酸诱导的大鼠慢性UC,其作用机制可能与促进Th2细胞亚群活化,使倾向于Th1的Th1/Th2平衡向Th2移动,发挥细胞免疫和体液免疫调节作用,达到免疫平衡稳态有关。     

小檗碱对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型的治疗作用及其对肠黏膜闭合蛋白的影响

目的观察小檗碱对于葡聚糖硫酸钠( DSS)诱导的溃疡性结肠炎( UC)小鼠模型的治疗作用及其对肠黏膜闭合蛋白(occludin)表达的影响。方法于 2021年 6—12月建立 DSS诱导的小鼠 UC模型进行基础性研究。将 30只 BALB/c小鼠采用抽签法随机平均分为对照组、模型组和治疗组，除对照组(不造模、不干预)外，其余两组小鼠自由饮用 3%DSS溶液 7d建立急性 UC模型。治疗组每只小鼠每日予小檗碱( 20 mg/kg)灌胃，其余两组则每日予双蒸水 0.2 mL灌胃。使用疾病活动系数( DAI)评估小鼠临床症状的严重程度，结肠黏膜损伤评分(CMDI)、组织病理评分及结肠组织髓过氧化物酶( MPO)对结肠炎症程度进行评估。用蛋白质印迹法及免疫组织化学染色观察结肠黏膜中 occludin的表达情况。结果对照组、模型组及治疗组第 7日 DAI评分分别为( 0.00±0.00)、(3.23±0.94)、(1.87±0.67)分( P<0.001)；对照组、模型组及治疗组病理组织学评分分别为( 0.40±0.84)、(8.20±1.70)、(4.85±0.97)分( P<0.001)；对照组、模型组及治疗组 MPO分别为( 1.94±0.58)、(4.46±1.13)、(3.11±1.05)U/g(P<0.001)。与对照组相比，模型组小鼠的 DAI、CMDI及组织病理评分及 MPO升高，而 occludin蛋白水平降低；而与模型组相比，治疗组小鼠的临床症状及肠道的炎症程度明显减轻。结论小檗碱可能通过上调 occludin蛋白的表达保护肠黏膜屏障，进而改善 DSS诱导小鼠 UC模型的炎症程度。     

环孢素A对DSS结肠炎小鼠肠黏膜通透性影响及其机制的研究

目的探讨环孢素A(CsA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响及作用机制。方法 C57BL/6J小鼠(6～8周龄、体质量20 g±2 g、♂),实验分为正常对照组(饮用无菌蒸馏水+腹腔注射0.9%NS)、DSS模型组(DSS溶液+腹腔注射0.9%NS)、环孢素A组(DSS溶液+腹腔注射CsA)。小鼠自由饮用5%DSS溶液1周制备结肠炎模型,环孢素A(0.025 mg.g-1)腹腔注射给药,每天1次,共7 d。每日行DAI评分,实验结束后取结肠进行HE染色评分,结肠匀浆检测MPO活性、TNF-α、IFN-γ、IL-13和IL-17水平,另取小鼠小肠黏膜进行透射电镜检查和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)活性测定,采用Evans blue和异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-D)方法检测小肠黏膜通透性。结果与正常对照组比较,模型对照组小鼠1周后出现明显体重减轻、便血和腹泻,DAI评分和HI评分增高,同时结肠黏膜MPO活性明显增高。电镜检查小鼠回肠黏膜上皮绒毛萎缩、排列不规则,细胞间连接复合体缩短、变宽,细胞间隙扩大,小肠黏膜通透性增高。小鼠结肠匀浆中TNF-α、IFN-γ、IL-13和IL-17水平均有不同程度增高,小肠黏膜中MLCK活性明显增高。与DSS模型组比较,环孢素A组小鼠DAI评分和HI评分明显降低,结肠黏膜MPO活性减低,回肠黏膜上皮细胞绒毛排列整齐,小肠黏膜通透性降低,小肠黏膜MLCK活性和结肠匀浆中TNF-α、IFN-γ、IL-13和IL-17水平均有不同程度降低。结论环孢素A具有明显的抗DSS小鼠结肠炎作用,机制可能与通过调控MLCK表达,改善肠黏膜通透性有关。     

盐酸小檗碱对溃疡性结肠炎小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β和IL-10表达的影响

目的 观察盐酸小檗碱（berberine hydrochloride,BBR）对溃疡性结肠炎模型小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β和IL-10表达的影响,探讨其治疗UC的可能作用机制。方法 BALB/c小鼠随机分为模型对照组、BBR低、高剂量组、柳氮磺吡啶阳性对照组和空白对照组。采用右旋葡聚糖硫酸钠法复制UC小鼠模型后,每日灌胃给药1次,连续7 d。实验期间每天观察小鼠一般情况并评估疾病活动指数（DAI）;末次给药后解剖观察并评估结肠大体形态损伤指数（CMDI）;组织切片染色,光镜下观察结肠组织的病理学变化并评估组织损伤指数（TDI）;ELISA酶联法检测结肠组织中细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-10的含量。结果 与模型对照组比较,BBR治疗组小鼠的结肠炎临床表现明显改善,其DAI、CMDI和TDI评分显著下降,小鼠结肠组织中TNF-α、IL-1β水平均明显降低,IL-10水平升高（P<0.05）。结论 BBR能有效治疗UC小鼠的结肠炎症,其机制可能与其抑制结肠组织中TNF-α和IL-1β、提高IL-10的表达有关。     

美洲大蠊提取物Ento-A对湿热型溃疡性结肠炎模型大鼠的改善作用研究

目的:研究美洲大蠊提取物Ento-A对湿热型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠的改善作用。方法:将70只大鼠随机分为正常对照组(n=8)和造模组(n=62),造模组大鼠采用高糖高脂、辛辣饮食联合2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠法复制湿热型UC动物模型。将造模成功的48只大鼠随机分为模型对照组、美沙拉嗪组(300 mg/kg)、肠炎宁(300 mg/kg)和Ento-A低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg,以提取物计),每组8只。正常对照组和模型对照组大鼠灌胃生理盐水,其余各组大鼠灌胃相应药物,每天1次,连续给药14 d。末次给药后,对大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)及病理组织学(HS)进行评分,测定大鼠脾指数、肝指数和结肠指数,并采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中白细胞介素8(IL-8)、IL-17、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和结肠组织中IL-2、前列腺素E2(PGE2)、髓过氧化物酶(MPO)水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠DAI评分、CMDI评分、HS评分、结肠指数以及血清中IL-8、IL-17、MDA水平和结肠组织中MPO、PGE2水平显著升高(P<0.01),血清中SOD水平和结肠组织中IL-2水平显著降低(P<0.01)。与模型对照组比较,Ento-A高剂量组大鼠DAI评分、CMDI评分及血清中IL-17、MDA水平和结肠组织中PGE2水平显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中SOD水平和结肠组织中IL-2水平显著升高(P<0.01);Ento-A中剂量组大鼠CMDI评分、HS评分以及血清中IL-8、IL-17、MDA水平和结肠组织中PGE2、MPO水平显著降低(P<0.05或P<0.01),结肠组织中IL-2水平显著升高(P<0.01);Ento-A低剂量组大鼠HS评分以及血清中IL-17、MDA水平和结肠组织中MPO、PGE2水平显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中IL-2水平显著升高(P<0.01)。结论:美洲大蠊提取物Ento-A可能通过调节免疫系统平衡、减少炎症损伤,发挥其对湿热型UC模型大鼠的改善作用。     

白及多糖对溃疡性结肠炎的作用研究

目的:研究白及多糖(BSPS)对溃疡性结肠炎(UC)的作用。方法:小鼠均分为6组,即对照(等容生理盐水)、模型(等容生理盐水)、柳氮磺胺吡啶(SASP,370mg.kg-1)和BSPS高、中、低剂量(320、160、80mg.kg-1)组,ig给药,每天1次,连续10d。恶唑酮诱导复制UC模型后观察小鼠疾病活动指数(DAI)、结肠指数、结肠组织大体评分和病理评分,并检测结肠组织白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α和核因子(NF)-κB的水平。结果:与模型组比较,BSPS高、中剂量组小鼠DAI、结肠指数、结肠组织大体评分、病理评分和TNF-α、NF-κB水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),IL-10显著升高(P<0.05)。结论:BSPS具有促进UC模型小鼠肠黏膜修复、抑制机体炎症和恢复免疫平衡的作用,其作用机制可能与抑制TNF-α和NF-κB,上调IL-10水平有关。     

康复新液缓解三硝基苯磺酸致大鼠溃疡性结肠炎及其机制研究

目的研究康复新液对三硝基苯磺酸诱导大鼠溃疡性结肠炎的作用,并初步探讨其作用机制。方法将♂SD大鼠分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组和康复新液低、中、高剂量组,以三硝基苯磺酸灌肠诱导大鼠溃疡性结肠炎模型。评估疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)和病理组织学评分(HS),测定脏器指数、血清IL-4、IL-17,结肠黏膜MPO、EGF、TGF-β1的表达水平等。结果 DAI结果提示造模成功,与正常组比较,模型组IL-4、IL-17、EGF、TGF-β1均明显降低,而CMDI、HS、结肠指数及结肠黏膜MPO均明显升高。康复新液各组DAI、CMDI、HS、结肠黏膜MPO均降低(P<0.05或P<0.01),IL-4、IL-17、EGF、TGF-β1水平明显升高(P<0.01)。结论康复新液灌肠能够有效缓解三硝基苯磺酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎,其作用机制可能与下调MPO表达,上调IL-4、IL-17、EGF和TGF-β1水平有关。     

化浊解毒愈溃方对溃疡性结肠炎大鼠黏膜损伤的修复作用

目的:探讨化浊解毒愈溃方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠黏膜损伤的修复作用及机制。方法:将72只大鼠随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(阳性对照,0.3 g/kg)和化浊解毒愈溃方低、中、高剂量组(5、10、20 g/kg),各12只。除空白组外,其余各组大鼠均复制UC模型。造模4 d后,各给药组大鼠ig相应药物,空白组和模型组大鼠ig生理盐水,每天1次,连续2周。给药结束后,观察大鼠疾病活动指数(DAI)与黏膜损伤指数(CMDI);检测血清中白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量及结肠组织中环氧合酶2(COX-2)表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠DAI和CMDI评分升高,血清中IL-8、TNF-α含量增加,结肠组织中COX-2表达增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠DAI和CMDI评分降低,血清中IL-8、TNF-α含量减少,结肠组织中COX-2表达减弱,差异均有统计学意义(P<0.05);与美沙拉嗪组比较,化浊解毒愈溃方中、高剂量组大鼠上述指标变化更为明显(P<0.05),且化浊解毒愈溃方的作用呈明显的量效关系。结论:化浊解毒愈溃方可改善UC大鼠的疾病活动状态、减轻结肠黏膜损伤,且中、高剂量作用优于美沙拉嗪。其作用机制可能与减轻炎症反应、抑制结肠组织中COX-2表达有关。     

Protect dextran sulfate sodium-induced ulcerative colitis in mice by neferine,a natural product from Nelumbo nucifera Gaertn

OBJECTIVE Ulcerative colitis(UC) is a long lasting inflammatory disease of the colon. Epidemiological studies showed that the prevalence and incidence of UC is increasing worldwide in recent years. Neferine is a natural alkaloid isolated from Nelumbo nucifera Gaertn with a variety of biological activities. This study is designed to evaluate the protective effect of neferine on dextran sulfate sodium(DSS)-induced experimental UC in mice.METHODS In this experimental study, 4% DSS was used to induced the UC mice model. Neferine(5 and10 mg · kg-1) was administrated by intraperitoneal injection(ip). The clinical symptoms and disease activity index(DAI) scores were recorded and calculated. The pathological changes of colon tissues were detected by H&E staining. The levels of inflammatory mediators were detected by ELISA kits. Western blotting and immunohistochemistry were used for protein expressions. RESULTS Neferine treatment significantly alleviated DSS-induced UC by inhibiting weight loss, decreasing DAI scores, and alleviating the pathological changes in colon tissues.Furthermore, neferine significantly decreased the serum levels of pro-inflammatory cytokines including TNF-α,IL-1β, and IL-6 and increased anti-inflammatory cytokine IL-10. The increased myeloperoxidase(MPO) activity and nitric oxide(NO) in colon tissues were also inhibited.In addition, neferine significantly down-regulated inducible nitric oxide synthase(i NOS), cyclooxygenase-2(COX-2), and intercellular cell adhesion molecule 1(ICAM-1) expression in colon tissues. CONCLUSION These results provide evidence that neferine could protect DSS-induced UC symptoms in experimental mice model.The underlying mechanisms might be through inhibition of inflammation.     

Development of an XBP1 agonist,HLJ2,as a potential therapeutic agent for ulcerative colitis

OBJECTIVE To identify the valid targets and new drugs of ulcerative colitis(UC),a recurrent and intractable inflammatory bowel disease.METHODS and RESULTS In an in vivo mouse model of DSS-induced colitis,HLJ2 decreased weight loss,colon contracture,disease activity index(DAI),colon mucosa damage index(CMDI)and histopathological index(HI).HLJ2 also decreased myeloperoxidase(MPO)activity and reduced production of the inflammatory cytokines TNF-α,IL~(-1)β,and IL-6.HLJ2 improved intestinal mucosa damage induced by dextran sodium sulfate(DSS)and increased the expression of ZO-1 and claudin-1.Fecal 16s rRNA high-throughput sequencing demonstrated a significant improvement in UC intestinal dysbacteriosis in mice treated with HLJ2,including increased abundance of probiotics such as Lachnospiraceae,Prevotellaceae,and Lactobacillaceae.At the same time there was a reduction in the abundance of pathogenic or conditional pathogenic microorganisms such as Bacteroidaceae,Porphyromonadaceae,Deferribacteraceae,and Pseudomonadaceae in HLJ2-treated mice compared with untreated mice.CONCLUSION Our results demonstrated that the XBP1 agonist HLJ2 inhibits inflammation,regulates the intestinal flora,and protects the intestinal mucosa.It is thus a potential therapeutic agent for ulcerative colitis.     

美沙拉嗪、柳氮磺胺吡啶对葡聚糖硫酸钠诱导的Balb/c小鼠急性溃疡性结肠炎的治疗和免疫影响

目的：探讨美沙拉嗪和柳氮磺胺吡啶对葡聚糖硫酸钠（DSS）致Balb/c小鼠急性溃疡性结肠炎的作用效果和对急性溃疡性结肠炎免疫功能的影响。方法：Balb/c小鼠给予3.5% DSS水溶液自由饮用7 d建立溃疡性结肠炎模型,通过测定小鼠DAI指数、脏器指数、血清IL-4、结肠组织匀浆液IL-8的表达水平和小鼠体内CD4⁺细胞、CD8⁺细胞、CD4⁺CD25⁺细胞的变化,来评价两种药物对小鼠急性溃疡性结肠炎的作用。结果：给药治疗后,美沙拉嗪组和柳氮磺胺吡啶组的DAI评分和CMDI评分均降低（P<0.01或者P<0.05）,小鼠症状缓解。结肠黏膜充血水肿减轻,且两种药物均能\\有效抑制病灶部位炎细胞的浸润。与模型组相比,美沙拉嗪组和SASP组CD3⁺细胞数增加,CD8⁺细胞数明显上升,CD4⁺CD25⁺细胞占CD4⁺细胞比例增加,血清中IL-4含量显著上升（P<0.01）,组织中IL-8含量显著下降（P<0.01）;而美沙拉嗪组CD4⁺细胞数目略有增加,SASP组CD4⁺细胞数增加比较明显。结论：美沙拉嗪和柳氮磺胺吡啶可减轻DSS诱导的UC小鼠稀便、血便症状;两种药物对UC疾病的治疗可能与提高CD4⁺细胞水平和IL-4含量及上调CD8⁺细胞水平有关。     

IL-21／STAT3通路在溃疡性结肠炎小鼠发病中的表达及其意义

目的探讨IL-21／STAT3通路在溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis,UC）小鼠肠道中的表达及其作用。方法20只BALB／C小鼠随机分为正常组和DSS模型组各10只。小鼠UC模型用葡聚糖硫酸钠dextransodiumsulphate,DSS）诱导,观察小鼠疾病活动指数（DAI）评分、病变结肠常规病理切片,采用ELISA法检测血清IL-6、IL-21含量,免疫组化检测结肠STAT3表达。结果模型组小鼠DAI评分、血清IL-6和IL-21含量、结肠病理评分、黏膜STAT3表达水平均较正常组高,差异有显著性（P〈0．05）。结论溃疡性结肠炎小鼠血清炎症介质及肠道STAT3表达水平明显升高,推测IL-21／STAT3通路可能参与UC小鼠肠道炎症损伤,阻断病变肠道IL-21／STAT3通路,减少STAT3蛋白表达或许是治疗UC的作用靶点。     

基于1H-NMR代谢组学技术研究火麻仁油干预溃疡性结肠炎的作用

目的:利用经典指标结合核磁共振氢谱(¹H-NMR)代谢组学技术对火麻仁油干预大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用进行研究。方法:将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、火麻仁油组和柳氮磺胺吡啶组,通过饮用4%葡聚糖硫酸钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)水溶液建立UC模型;进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分和结肠组织病理学检测;采用¹H-NMR代谢组学技术探讨火麻仁油对与UC相关的生物标志物及代谢通路的干预作用。结果:火麻仁油能显著降低DAI评分并改善结肠细胞损伤;火麻仁油对UC大鼠的血清和尿液代谢紊乱产生有效干预,并分别有效回调14种和9种与UC相关的潜在生物标志物。结论:火麻仁油干预大鼠UC的作用机制可能与调节氨基酸代谢、能量代谢、肠道菌群代谢、一碳代谢和嘧啶代谢有关,本研究为火麻仁油治疗UC的进一步药物开发奠定了基础。     

栀子有效部位的溃疡性结肠炎活性及其化学成分研究

目的研究栀子浸膏35%和70%乙醇洗脱部位对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇诱导的大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用,并采用液质联用鉴定活性洗脱部位的化学成分。方法采用TNBS诱导大鼠UC模型,不同洗脱部均按生药量2.1 g·kg-1连续灌胃给药7 d,进行体质量测定,疾病活动指数(DAI)评分,结肠组织病理评分,比较各组大鼠结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平。采用液质联用鉴定药效较好部位的化学成分。结果与模型组相比,35%洗脱部位组体质量下降明显改善,DAI和组织病理评分降低,组织中MPO、NO、MDA、TNF-α、IL-6及IL-1β含量均降低,SOD含量升高(P <0.01)。液质联用共鉴定出19个化学成分,其中11个为环烯醚萜类成分。结论栀子35%洗脱部位对UC大鼠有明显治疗作用,环烯醚萜类成分可能是其发挥作用的物质基础。