肿瘤标记物的联合检测在结肠癌中的应用

目的探讨CEA、CA19-9、CA72-4、CA125和CA242联合检测在结肠癌诊断和疗效评价中的临床价值。方法检测72例结肠癌患者术前及术后1个月和50例健康体检者外周血清中肿瘤标记物CEA、CA19-9、CA72-4、CA125和CA242的水平,比较结肠癌患者血清中肿瘤标记物的变化,并计算肿瘤标记物诊断结肠癌的敏感性、特异性及准确性。结果结肠癌患者血清中各肿瘤标记物测定值明显高于对照组[CEA:(29.10±9.80)ng/ml vs.(2.35±0.73)ng/ml;CA19-9:(52.37±13.21)U/ml vs.(10.53±3.07)U/ml;CA72-4:(17.63±5.09)U/ml vs.(4.79±1.93)U/ml;CA125:(62.48±15.36)U/ml vs.(5.41±1.27)U/ml;CA242:(89.34±21.06)U/ml vs.(7.25±2.79)U/ml],阳性率亦高于对照组。术前测定的含量明显高于术后[CEA:(29.10±9.80)ng/ml vs.(18.42±8.56)ng/ml;CA19-9:(52.37±13.21)U/ml vs.(33.59±7.43)U/ml;CA72-4:(17.63±5.09)U/ml vs.(11.75±4.18)U/ml;CA125:(62.48±15.36)U/ml vs.(38.74±11.36)U/ml;CA242:(89.34±21.06)U/ml vs.(51.64±12.76)U/ml],差异有统计学意义(P均<0.05)。标记物联合检测的敏感性和诊断准确性均比单项检测高,其中单项以CEA敏感性最高。结论 CEA、CA19-9、CA72-4、CA125和CA242联合检测对结肠癌的诊断、疗效观察及复发预测是较理想的检测手段,具有重要的临床意义。     

血液灌流联合血液滤过对急性有机磷农药中毒患者的心脏保护作用研究

目的探讨血液灌流(HP)联合连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)对急性有机磷农药中毒(AOPP)患者的心脏保护作用和心功能影响。方法以81例重症AOPP并中毒性心肌炎患者为研究对象,随机分为对照组40例,给予常规内科治疗+HP;治疗组41例,给予常规内科治疗和HP+CVVH。观察两组患者治疗开始前及治疗24 h、48 h、72 h,各时间点左心室射血分数(LVEF)、B型脑钠肽(BNP)、肌钙蛋白I(cTnI)及机械通气天数和病死率的差异。结果 (1)两组患者治疗前LVEF[(47.6±9.9)%vs.(47.4±10.1)%,P>0.05]、BNP[(516.3±285.4)pg/L vs.(534.4±301.9)pg/L,P>0.05]及cTnI[(0.61±0.26)ng/ml vs.(0.58±0.23)ng/ml,P>0.05]比较均无统计学差异,组间有可比性。(2)治疗组较对照组,治疗后各时间点LVEF均增大[(52.8±7.5)%vs.(47.6±8.4)%,(55.2±5.2)%vs.(50.9±7.2)%,(60.1±6.4)%vs.(53.6±5.4)%,均P<0.05],BNP均减小[(321.7±182.8)pg/L vs.(495.9±269.9)pg/L,(254.7±117.8)pg/L vs.(382.7±167.5)pg/L,(125.4±62.7)vs.(293.8±121.1)pg/L,均P<0.05],cTnI均减小[(2.16±0.48)ng/ml vs.(2.79±0.36)ng/ml,(5.37±3.79)ng/ml vs.(8.35±4.51)ng/ml,(3.01±1.26)ng/ml vs.(8.41±5.45)ng/ml,P<0.05],差异有统计学意义。(3)治疗组治疗后各时间点与治疗前比较,LVEF均增大[(52.8±7.5)%、(55.2±5.2)%、(60.1±6.4)%vs.(47.6±9.9)%,均P<0.01],BNP均减小[(321.7±182.8)pg/L、(254.7±117.8)pg/L、(125.4±62.7)pg/L vs.(516.3±285.4)pg/L,均P<0.01],差异有统计学意义。(4)对照组治疗后24 h与治疗前比较,LVEF、BNP均无统计学差异;治疗后48 h、72 h与治疗前比较,LVEF均增大[(50.9±7.2)%、(53.6±5.4)%vs.(47.4±10.1)%,均P<0.05],BNP均减小[(382.7±167.5)pg/L、(293.8±121.1)pg/L vs.(534.4±301.9)pg/L,均P<0.01],差异有统计学意义。(5)治疗组较对照组机械通气时间缩短[(7.4±2.9)d vs.(10.7±4.1)d,P=0.001],病死率下降(12.2%vs.30.0%,P=0.048)。结论 HP联合CVVH能够减轻AOPP的心肌损伤,改善心功能,缩短机械通气时间,降低病死率,改善患者预后。     

单孔胸腔镜与两孔胸腔镜手术治疗非小细胞肺癌的手术相关指标和实验室指标比较

目的比较单孔胸腔镜与两孔胸腔镜手术治疗非小细胞肺癌的临床效果,并比较两种手术的手术相关指标和实验室指标。方法采用回顾性研究方法选取2017年1月至2019年1月广西医科大学第一临床医学院心胸外科收治的105例非小细胞肺癌(NSCLC)患者作为研究对象,根据手术方式不同将患者分为两组:观察组(n=48)和对照组(n=57)。观察组患者行单孔胸腔镜手术,对照组患者行两孔胸腔镜手术。观察并比较两组患者的手术相关指标(手术成功率、术中中转开胸率、术中淋巴结清扫数量、手术时间、术中出血量、术后拔管时间、下床活动时间、术后3 d VAS评分)、实验室指标[血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、白细胞介素-1(IL-1)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、P物质(SP)、前列腺素E2、去甲肾上腺素(NE)]和术中并发症发生情况。结果对照组与观察组患者的手术成功率(96.49%vs.97.92%)、术中中转开胸率(3.51%vs.2.08%)、术中淋巴结清扫数量[(16.02±6.54)个vs.(17.52±5.24)个]比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者的手术时间[(194.62±40.58)min vs.(157.62±33.62)min]、术中出血量[(114.65±25.94)ml vs.(89.57±22.41)ml]、术后拔管时间[(5.38±1.93)d vs.(3.47±1.07)d]、下床活动时间[(6.22±1.57)d vs.(4.99±1.72)d]、术后3 d VAS评分[(4.86±1.37)分vs.(3.04±0.57)分]显著优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者的血清癌胚抗原(CEA)[(6.24±0.75)ng/ml vs.(6.16±0.71)ng/ml]、糖类抗原125(CA125)[(31.25±4.21)U/ml vs.(30.27±4.92)U/ml]、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)[(1.25±0.42)ng/ml vs.(1.24±0.39)ng/ml]比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者的血清白细胞介素-1(IL-1)[(24.58±5.23)ng/L vs.(10.37±1.24)ng/L]、降钙素原(PCT)[(0.88±0.24)ng/ml vs.(0.41±0.12)ng/ml]、C反应蛋白(CRP)[(19.65±2.73)mg/L vs.(11.25±2.04)mg/L]显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);观察组患者的P物质(SP)[(7.63±1.29)μg/ml vs.(18.24±3.24)μg/ml]、前列腺素E2(PGE2)[(146.7±24.93)pg/ml vs.(259.37±34.62)pg/ml]、去甲肾上腺素(NE)[(154.27±32.55)ng/L vs.(268.55±40.93)ng/L]显著低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);两组患者的肺不张、肺部感染、持续液气胸、房颤发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论单孔胸腔镜与两孔胸腔镜手术治疗非小细胞肺癌的效果相似但前者对患者的创伤程度更小,疼痛应激和炎症反应更轻,更有利于患者的术后康复。     

不同血液净化技术的联合应用对维持性血液透析患者矿物质和骨异常的影响

目的通过观察不同血液净化方式的联合应用对血液透析患者血清中骨代谢指标及骨质疏松患病率的影响,来评价血液透析方式的不同组合对血液透析患者矿物质和骨异常(mineral and bone disorder,MBD)的影响。方法维持性血液透析患者90例,随机分为血液透析组(对照组或HD组)、血液透析加血液透析滤过组(HD+HDF组)、血液透析加血液灌流组(HD+HP组),每组30例,观察6个月,比较组内及组间6个月前后血钙、血磷、全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,iPTH)、成纤维生长因子23(fibroblast growth factor23,FGF-23)、β-I型胶原羧基末端肽(β-Type I collagen carboxy-terminal peptide,β-CTX)、I型前胶原氨基末端肽(Type I procollagen amino-terminal peptide,PINP)、骨质疏松患病率等指标的变化来评价不同透析方式的组合对血液透析患者MBD的影响。结果组内自身前后比较:HD组血磷[(2.21±0.55)mmol/l vs.(2.64±1.04)mmol/l,t=2.047、P=0.049]、iPTH[(427.7±44.00)pg/ml vs.(452.1±43.00)pg/ml,t=2.140,P=0.038]变化有统计学差异;HD+HDF组的iPTH下降有统计学差异[(465.3±43.02)pg/ml vs.(431.0±37.39)pg/ml,t=3.298,P=0.007];HD+HP组的iPTH[(457.4±60.01)pg/mlvs.(389.1±29.89)pg/ml,t=5.598,P=0.001)、β-CTX[(2.73±1.16)ng/ml vs.(2.13±1.51)ng/ml,t=2.142,P=0.045];PINP[(157.92±31.16)ng/mlvs.(140.76±36.13)ng/ml,t=2.106,P=0.047];FGF-23[(461.16±101.69)ng/ml vs.(397.30±63.18)ng/ml,t=2.922,P=0.011]下降均有统计学意义。组间比较6个月后,HD+HDF组PINP为(147.33±40.72)ng/ml,HD组PINP为(165.32±43.11)ng/ml,二者比较有统计学差异(t=1.969,P=0.048);HD+HDF组FGF-23(465.38±101.36)ng/ml,HD组FGF-23(403.56±96.81)ng/ml,二者比较HD+HDF组更低,有统计学差异(t=2.415,P=0.019);组间比较6个月后,HD+HP组与HD组比较,血磷[(2.02±0.81)mmol/L vs.(2.64±1.04)mmol/L,t=3.221,P=0.003]、iPTH[(389.1±29.89)pg/ml vs.(452.1±43.0)pg/ml,t=6.661,P=0.005]、β-CTX[(2.13±1.51)ng/ml vs.(2.95±1.28)ng/ml,t=2.278,P=0.031]、PINP[(140.76±36.13)ng/ml vs.(165.32±43.11)ng/ml,t=2.339,P=0.028]、FGF-23[(397.30±63.18)ng/ml vs.(465.38±101.36)ng/ml,t=3.114,P=0.003],上述指标HD+HP组较HD组更低,均有统计学意义;组间比较6个月后,HD+HP组与HD+HDF组比较iPTH分别为(389.1±29.89)ng/ml、(431.0±37.39)ng/ml,HD+HP组更低,有统计学意义(t=7.303,P=0.000)。骨质疏松患病率:对照组观察期后骨质疏松和骨量低下的病例数增加,但无统计学意义;HD+HDF组、HD+HP组骨质疏松的病例数有减少,亦无统计学意义(P0.05)。结论不同的血液透析方式的联合使用对维持性血液透析患者MBD影响不同;血液透析联合血液透析滤过或血液灌流的治疗方式较单纯血液透析有利MBD的改善;血液透析联合血液灌流在骨代谢指标的改善方面更具优势。     

老年转移性肝癌患者高强度聚焦超声热疗后Th1/Th2漂移的研究

目的了解老年转移性肝癌患者应用高强度超声聚焦热疗(HIFU)治疗后Th1/Th2细胞因子漂移状态和免疫功能变化情况.方法26例转移性肝癌患者分别行HIFU,于HIFU治疗前和治疗后4周取外周血10ml,用ELISA法分别检测治疗前和治疗后IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-10浓度(pg/ml)变化,用流式细胞仪分别检测治疗前和治疗后CD4、CD8、CD4/CD8变化.结果HIFU治疗后患者IL-2和IFN-γ水平分别是(94.4±19.5)和(118.9±22.3),高于治疗前(69.1±17.9)和(90.5±18.8)(P均＜0.05);HIFU治疗后的IL-6和IL-10水平分别是(50.3±13.1)和(49.3±16.5),明显低于治疗前(72.3±11.2)和(78.8±18.2)(P均＜0.01);HIFU治疗后的CD4 T细胞百分数和CD4/CD8比值分别是(39.5±5.7)和(1.9±0.2),高于治疗前(28.9±3.3)和(0.8±0.4)(P＜0.05和P＜0.01);HIFU治疗后的CD8 T细胞百分数是(22.1±3.2),低于治疗前(32.2±5.3)(P＜0.05).结论转移性肝癌患者经HIFU治疗后与治疗前比较:IL-2和IFN-γ水平升高,而IL-6和IL-10水平明显下降,这说明应用HIFU技术治疗转移性肝癌可以改善患者体内Th1向Th2的漂移状态;转移性肝癌患者经HIFU治疗后与治疗前比较:CD4 T细胞百分数和CD4/CD8比值升高,而CD8 T细胞百分数下降,这说明应用HIFU技术治疗转移性肝癌可以改善患者的细胞免疫功能,这对于克服肿瘤的免疫逃逸和提高患者体内细胞免疫功能具有一定的意义.     

晚期非小细胞肺癌增殖状态对细胞免疫影响的探索与分析

目的研究晚期非小细胞肺癌患者(NSCLC)肿瘤增殖状态对细胞免疫功能的影响。方法选择89例初发未治疗的Ⅲ~Ⅳ期晚期NSCLC患者,用免疫组化法测定活检组织中细胞核增殖抗原(ki-67)的表达程度;用流式细胞仪检测外周血中细胞免疫功能的水平,其中包括CD3+CD4+辅助性T细胞(Th)、CD3+CD8+细胞毒性T细胞(Tc)及CD4+CD25+调节性T细胞(Treg);用CBA法测定外周血血清中IFN-γ、IL-2和TNF-α水平。结果 ki-67阳性组较ki-67阴性组Treg水平显著增高,(7.62±1.28)%vs.(4.17±1.85)%,P<0.01,差异具有统计学意义;ki-67阳性组较ki-67阴性组Th、Tc、IFN-γ、IL-2、TNF-α水平均低,分别为(32.08±9.73)%vs.(36.94±7.66)%,P<0.05;(28.11±10.02)%vs.(33.68±11.57)%,P<0.05;(8.07±1.64)pg/ml vs.(11.41±2.60)pg/ml,P<0.01;(6.22±2.84)pg/ml vs.(8.11±4.92)pg/ml,P<0.05;(4.74±1.66)pg/ml vs.(6.17±2.53)pg/ml,P<0.01,差异均具有统计学意义;Treg、Th、Tc、IL-2、IFN-γ和TNF-α水平在不同临床特征晚期NSCLC患者中均无明显差异;在ki-67阳性组Th与Tc之间相关系数为-0.30,P<0.05,IL-2与TNF-α之间相关系数为0.75,P<0.01;在ki-67阴性组IL-2与TNF-α之间相关系数为0.93,P<0.01。结论晚期NSCLC患者肿瘤细胞增殖活跃时,细胞免疫功能明显降低;增殖活跃的肿瘤细胞通过上调Treg数量和下调Th、IFN-γ、IL-2、TNF-α水平打破正常细胞免疫平衡,细胞因子间又相互作用、相互影响,从而加速肿瘤进展。     

高能聚焦超声治疗前、后胰腺癌患者血清CEA、CA199的变化

目的探讨高能聚焦超声治疗(HIFU)对胰腺癌患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)的影响。方法采外周血用电化学发光法测定31例HIFU治疗前、后胰腺癌患者和30例健康人血清中CEA、CA199的含量。结果治疗前胰腺癌患者血清CEA、CA199含量[分别为(50．65±43．11)ng／ml,(126．08±77．21) U／ml]较健康人[(4．44±5．34)ng／ml,(37．32±19．39)U／ml]明显升高,差异有统计学意义(P<0．001)。治疗后胰腺癌患者血清CEA、CA199含量[(18．91±33．00)ng／ml,(52．92±55．61)U／ml]较治疗前明显下降,差异有统计学意义(P<0．01),其中CEA较健康人比较差异有统计学意义(P<0．05);CA199接近健康人,差异无统计学意义(P>0．05)。治疗后完全缓解及部分缓解胰腺癌患者血清中CEA和CA199的含量[(4．14±3．29)ng／ml,(23．43±18．23)U／ml]明显低于稳定及进步的胰腺癌患者[(28．24±39．63)ng／ml,(71．55±63．28)U／ml],差异有统计学意义(P<0．05),生存期≥1年的胰腺癌患者血清中CEA和CA199的含量[(6．11±7．49)ng／ml,(32．66±25．06)U／ml]明显低于生存期<1年的患者[(32．57±43．42)ng／ml,(74．54±70．60)U／ml],差异有统计学意义(P <0．05)。结论血清CEA和CA199可作为胰腺癌诊断、疗效观察和预后判断的辅助指标,HIFU能明显下调胰腺癌血清CEA和CA199水平。     

肝硬化合并肝源性糖尿病患者血清细胞因子水平分析

目的探讨伴乙型肝炎肝硬化的2型糖尿病血糖控制水平对血清细胞因子水平影响。方法 2010年12月至2011年12月我院肝病及内分泌科门诊或住院患者所收集病例中,合并肝硬化的肝源性糖尿病及单纯肝硬化患者各60例,检测血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、INF-γ、TNF-α水平。结果肝源性糖尿病组患者血清IL-2、TNF-α、INF-γ水平为(57.2±23.8)pg/ml、(48.2±35.1)ng/ml、(89.2±55.3)pg/ml,显著高于单纯肝硬化组的(48.5±22.1)pg/ml、(30.2±23.3)ng/ml、(58.3±37.4)pg/ml(P均<0.05);肝源性糖尿病组的IL-4、IL-8水平分别为(1.2±0.5)pg/ml、(34.4±16.7)pg/ml,显著低于单纯肝硬化组的(3.3±1.2)pg/ml、(57.1±20.8)pg/ml(P均<0.05);两组的血清IL-10、IL-6水平差异无统计学意义[(1.3±0.4)pg/mlvs.(1.5±0.5)pg/ml,(5.2±3.4)pg/mlvs.(5.5±2.8)pg/ml,P>0.05]。结论肝硬化合并肝源性糖尿病患者的细胞因子网络失衡,是肝硬化疾病进展的可能机制。     

急诊PCI冠状动脉内应用替罗非班对心肌再灌注和内皮功能的影响

目的探讨冠状动脉内应用替罗非班对急诊冠状动脉介入治疗(PCI)患者冠状动脉血流再灌注和内皮功能的影响。方法接受急诊PCI治疗的急性心肌梗死患者57例,采用随机数字表法分为替罗非班治疗组和试验对照组。替罗非班治疗组(29例)冠状动脉内推注替罗非班10μg/kg,继之以0.15μg·kg-1·min-1静脉泵入36 h,试验对照组(28例)未用替罗非班。两组患者的TIMI心肌灌注分级(TMPG)通过分析患者冠状动脉造影的图像获得;同时应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患者介入治疗术前及术后24 h、72 h黏附因子sICAM-1、sVCAM-1水平。结果替罗非班治疗组的TMPG 3级心肌灌注分级比例明显高于试验对照组,差异有统计学意义(79.3%vs.50.0%,P<0.01);黏附因子sICAM-1、sVCAM-1水平治疗组术后24 h、72 h较对照组显著降低[分别为sICAM-1术后24 h(24.27±2.31)ng/ml vs.(37.13±3.34)ng/ml,P<0.01;sICAM-1术后72 h(22.45±1.86)ng/ml vs.(32.4±2.59)ng/ml,P<0.01;sVCAM-1术后24 h(26.27±2.96)ng/ml vs.(43.13±3.84)ng/ml,P<0.01;sVCAM-1术后72 h(23.72±2.25)ng/ml vs.(38.92±2.61)ng/ml,P<0.01]。结论急性心肌梗死患者急诊PCI冠状动脉内注射替罗非班可显著改善靶血管心肌再灌注和血管内皮功能。     

不同糖耐量患者肠促胰素水平变化的研究

目的探讨不同糖耐量患者血清肠促胰素水平的变化.方法选择门诊年龄、性别及体重指数相匹配的进行糖耐量筛查的患者共109例,根据WHO的诊断标准分为对照组、糖耐量减低组及2型糖尿病组,检测空腹及口服葡萄糖耐量试验后各点的血糖、胰高糖素样肽-1(GLP-1)及胃抑素(GIP)的水平.结果2型糖尿病组及糖耐量减低组空腹及OGTT各点GLP-1水平与对照组相比均有显著差异[空腹:(6畅9±1畅26)ng/ml,(8畅1±3畅68) ng/ml vs.(11±2畅31) ng/ml;30 min:(9畅8±2畅12) ng/ml,(10畅4±4畅08) ng/ml vs.(15畅7±2畅74)ng/ml;60 min:(8畅7±2畅01)ng/ml,(10畅2±4畅02)ng/ml vs.(14畅3±2畅67)ng/ml;120 min:(8.2± 2.03)ng/ml,(9畅8±3畅91)ng/ml vs.(11畅5±2畅26)ng/ml(P<0畅05)].2型糖尿病组各点GLP-1水平较糖耐量减低组更低,但无统计学差异.各组空腹及OGTT各点GIP水平无显著差异.结论肠促胰素尤其是GLP-1分泌的缺陷在2型糖尿病早期甚至糖耐量减低阶段就已经存在,可能参与了2型糖尿病的发生发展.     

胰岛素-PI3K/Akt通路在高游离脂肪酸所致的胰岛β细胞分泌功能紊乱中的作用

目的探讨胰岛素-PI3K/Akt通路在高游离脂肪酸(FFA)所致的β细胞功能紊乱中的作用。方法 INS-1细胞分为对照组(NC组)、棕榈酸组(P组)及棕榈酸+NAC组(P+NAC组),分别用0.2mmol/L棕榈酸和(或)0.2mg/mlNAC进行干预,48h后分别检测以下指标:(1)行胰岛素释放试验,检测INS-1细胞胰岛素分泌功能。(2)测定细胞内硝基酪氨酸含量:评价氧化应激水平。(3)Westernblot检测胰岛素信号通路分子Akt磷酸化水平:评价胰岛素信号通路的功能状态。结果 (1)棕榈酸及NAC对INS-1细胞胰岛素分泌功能的影响:P组胰岛素释放指数(ISI)明显降低,P+NAC组ISI较P组增高(NCvs.P:2.12±0.17vs.0.84±0.12;P<0.05;Pvs.P+NAC:0.84±0.12vs.1.16±0.11,P<0.05)。(2)棕榈酸及NAC对INS-1细胞胰岛素合成的影响:棕榈酸降低INS-1细胞胰岛素mRNA及PDX-1mRNA表达(P<0.05),P+NAC组与P组无统计学差异(P>0.05)。(3)棕榈酸及NAC对INS-1细胞氧化应激水平的影响:棕榈酸干预增加细胞内硝基酪氨酸水平,P组与NC组比较,有统计学差异(P<0.05),NAC干预组细胞内硝基酪氨酸水平显著降低,P+NAC组与P组比较,有统计学差异(P<0.05)。(4)棕榈酸及NAC干预对INS-1细胞Akt磷酸化的影响:棕榈酸组较对照组Akt磷酸化表达水平明显降低(P<0.05);而加入0.2mg/mlNAC干预后,Akt磷酸化水平较单纯棕榈酸组升高(P<0.05)。结论 FFA可以引发β细胞胰岛素分泌功能障碍,机制可能与FFA诱导的β细胞氧化应激增加,进而导致胰岛素介导的PI3K/AKT通路受阻有关。     

自体外周血单个核细胞制备CIK细胞治疗恶性实体肿瘤应用价值研究

目的探讨自体外周血单个核细胞(PBMC)应用于恶性实体瘤过继性免疫治疗的有效性。方法选取恶性实体瘤患者100名,粒细胞动员后,单采PMBC并计数,分析相关因素;流式检测CIK细胞中NKG2D受体率及CIK细胞治疗前后外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+、CD3+CD56+百分率;采用LDH释放法检测PMBC及CIK细胞的杀伤活性;利用Kaplan-Meier生存曲线对比分析CIK治疗组与非治疗组的生存期差异。结果 PMBC数与采血前外周血象的WBC及MNC总数相呈正相关,相关系数r分别为0.62、0.72(P<0.05),而与采集时间及血液流速无关。对照组、实验组各组CIK的杀伤活性与PMBC杀伤活性呈正相关(r分别为0.523、0.627,P<0.05)。培养前、培养至d 7、培养至d 14时CIK细胞杀伤活性都与NKG2D受体表达率成正相关r,分别为0.413、0.5460、.657(P<0.01)。CIK回输治疗前、后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD16+CD56+、CD3+CD56数量分别为38.66±8.34及62.15±12.36(P<0.05)、30.16±10.26及38.15±9.46(P<0.05)、37.42±11.12及25.74±10.35(P<0.05)1、.15±0.12及1.89±0.12(P>0.05)、17.63±4.25及25.89±8.96(P<0.05)、0.93±0.31及5.67±1.84(P<0.05)。对照组及CIK治疗组的3年生存率平均为86.5%及79%(P<0.05)。结论实体瘤患者的自体PMBC可以用于CIK细胞的制备及治疗。     

血清降钙素原和D-二聚体检测在急诊脓毒症患者病情及预后评估中的应用价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)和D-二聚体(D-D)检测在急诊脓毒症患者病情及预后评估中的应用价值。方法选取2017年1月至2018年4月首都医科大学附属北京友谊医院收治的脓毒症患者80例,回顾性分析患者的临床资料,根据病情严重程度将患者分为脓毒症组(n=35)、严重脓毒症组(n=25)、感染性休克组(n=20)。随访1年,根据患者治疗结局分为死亡组(n=24)与存活组(n=56),比较各组患者的血清PCT、D-D水平。结果感染性休克组患者的血清PCT[(17.97±1.84) ng/ml]、D-D [(5.13±0.58)mg/L]水平及死亡率(30.00%)显著高于脓毒症组患者的血清PCT [(3.47±1.06) ng/ml]、D-D[(1.60±0.34) mg/L]水平、死亡率(2.86%),差异具有统计学意义(P<0.05)。严重脓毒症组患者的血清PCT[(10.55±1.49) ng/ml]、D-D[(3.35±0.42)mg/L]水平及死亡率(20.00%)显著高于脓毒症组患者的血清PCT、D-D水平和死亡率(2.86%)差异具有统计学意义(P <0.05)。死亡组患者的血清PCT[(6.01±1.27) ng/ml]、D-D [(2.14±0.72) mg/L]水平显著高于存活组患者的血清PCT[(19.34±2.11) ng/ml]、D-D[(5.78±1.24) mg/L]水平差异具有统计学意义(P<0.05)。脓毒症患者治疗后的简易精神状态评价量表(MMSE量表)评分显著高于严重脓毒症和感染性休克组,急性生理与慢性健康评分(APACHEII)评分、序贯器官衰竭估计评分(SOFA)均显著低于严重脓毒症和感染性休克组,三组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论检测血清PCT和D-D水平可有效评估急诊脓毒症患者的病情,并可有效预测患者的预后具有重要的临床意义。     

In vitro evidence for B cell dysfunction in patients with chronic liver disease

Patients with chronic liver disease have been reported to have multiple immunologic abnormalities. We evaluated immune function in 40 such patients. The patient group had a decreased proportion of CD3 positive cells compared to controls (54.2 +/- 13.2 vs 67.9 +/- 5.7, p less than 0.01), CD4 positive cells (38.4 +/- 10.0 vs 44.3 +/- 4.9, p less than 0.01) and CD8 positive cells (17.7 +/- 8.2 vs 26.3 +/- 3.9, p less than 0.05). B cells were increased over controls (8.3 +/- 4.0 vs 6.0 +/- 1.9, p less than 0.01). In vitro immunoglobulin synthesis studies demonstrated decreased production in both IgM (632 +/- 482 ng/ml vs 2,050 +/- 1,720 ng/ml, p less than 0.01) and IgG synthesis (726 +/- 640 ng/ml vs 1,117 +/- 1,012 ng/ml, p less than 0.05) by patients as compared to controls. Coculture of fractionated populations of lymphocytes indicated that the patients had adequate T helper cell activity and no evidence for enhanced T suppressor cell activity. B cells of patients with chronic liver disease appear to have an impaired capacity to produce immunoglobulin in vitro.     

危重病患者血中生长抑素水平检测的临床意义

目的 探讨危重病患者血中生长抑素(SST)水平与机体炎症反应和病情严重度的关系以及对预后的评估价值.方法 选择60例急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分≥8分的危重病患者,按照APACHE Ⅱ评分分为3组:轻度组(<16分)23例,中度组(16～20分)20例,重度组(>20分)17例;按预后分为死亡组(13例)与存活组(47例).另选择20例健康自愿者作为对照.用放射免疫法检测血中SST水平;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介索-6(IL-6)水平.结果 危重病组患者血中SST水平明显低于健康对照组[(18.2±17.6)ng/L比(224.8±130.2)ng/L,P<0.053;TNF-α、IL-6水平明显高于健康对照组[TNF-α:(32.4±14.2)ng/L比(14.2±5.7)ng/L,IL-6:(131.6±42.7)ng/L比(65.8±24.3)ng/L,P均<0.053;SST与TNF-α、IL-6水平均呈显著负相关(r1=-0.682,r2=-0.894,P均<0.01).重度组血中SST水平明显低于轻、中度组C(8.1±7.2)ng/L比(24.7±15.9)ng/L、(19.2±22.1)ng/L,P均<0.053;TNF-α、IL-6水平明显高于轻度组[TNF-α:(39.0±16.4)ng/L比(28.9±10.9)ng/L,IL-6:(156.05=49.6)ng/L比(111.5±32.6)ng/L,P均<0.053;SST水平与APACHE Ⅱ评分呈显著负相关(r=-0.327,P<0.05).死亡组血中SST水平明显低于存活组[(6.4±5.5)ng/L比(21.5±18.4)ng/L,P<0.053;TNF-α、lL-6水平虽高于存活组,但差异均无统计学意义.结论 危重病患者血中SST水平可以反映病情严重程度,对评估患者预后也具有临床价值.     

Identification and functional analysis of ligands for natural killer cell activating receptors in colon carcinoma

Natural killer (NK) cells play important roles in the immune defense against tumor cells. The function of NK cells is determined by a balance between activating and inhibitory signals. DNAX accessory molecule-1 (DNAM-1) and NK group 2 member D (NKG2D) are major NK cell activating receptors, which transduce activating signals after binding their ligands CD155, CD112 and major histocompatibility complex class I-related chains A and B (MICA/B). However, the expression and functions of these ligands in colon carcinoma are still elusive. Here, we show the higher expression of CD155, CD112 and MICA/B in colon carcinoma tissues, although no correlations between the ligands expression and patient clinicopathological parameters were found. The subsequent cytotoxicity assay indicated that NK cells effectively kill colon carcinoma cells. Functional blocking of these ligands and/or receptors with antibodies led to significant inhibition of NK cell cytotoxicity. Importantly, expression of DNAM-1 and NKG2D was reduced in NK cells of colon cancer patients, and this reduction could directly suppress the activation of NK cells. Moreover, colon cancer patients have higher serum concentrations of sCD155 and sMICA/B (soluble ligands, secreted or shed from cells) than those in healthy donors (sCD155, 127.82 ± 44.12 vs. 63.67 ± 22.30 ng/ml; sMICA, 331.51 ± 65.23 vs. 246.74 ± 20.76 pg/ml; and sMICB, 349.42 ± 81.69 vs. 52.61 ± 17.56 pg/ml). The up-regulation of these soluble ligands may down-regulate DNAM-1 and NKG2D on NK cells, ultimately leading to the inhibition of NK cytotoxicity. Colon cancer might be a promising target for NK cell-based adoptive immunotherapy.     

树突细胞及其Toll样受体4在特发性血小板减少性紫癜发病中的作用

目的 研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者树突细胞(DC)免疫表型及其Toll样受体4(TLR4)的表达,探讨其在ITP发病机制中的作用.方法 取ITP完全缓解患者及未达完全缓解患者治疗前后及正常人外周血,分离单个核细胞,加入细胞因子rhGM-CSF及rhIL-4诱导DC,用流式细胞术检测DC表型;酶联免疫吸附法检测DC培养上清液中IL-12p70.应用RT-PCR检测DC的TLR4表达.结果 21例ITP完全缓解患者治疗前DC的CD80和CD86阳性表达率分别为(51.60±13.47)%和(61.50±15.93)%,15例未达完全缓解者CD80和CD86分别为(53.29±19.49)%和(62.91±18.43)%,均高于正常对照的(36.03±15.43)%和(40.28±11.49)%(P＜0.01).治疗后ITP缓解患者组CD80和CD86表达率分别降为(36.48±15.19)%和(44.05±17.70)%,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.01),与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);未完全缓解组CD80和CD86分别降为(52.30±20.98)%和(49.79±20.28)%,但与治疗前相比差异均无统计学意义(P＞0.05),CD80仍高于正常对照组(P＜0.05),而CD86与对照组比较差异亦无统计学意义(P＞0.05).地塞米松(DXM)治疗缓解组患者治疗前DC培养上清IL-12p70为(67.52±14.43)pg/ml,明显高于正常对照的(39.78±10.03)pg/ml(P＜0.01),治疗后IL-12 p70的表达降至(43.90±8.49)pg/ml,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.01),与正常对照组相比无明显差异;而未缓解组患者DC培养上清IL-12p70则由治疗前的(65.35±12.52)pg/ml降至(48.45±9.68)pg/ml(P＜0.01),但仍高于正常对照(P＜0.05).治疗缓解组ITP患者DC的TLR4 mRNA相对表达水平为0.69±0.17,明显高于正常对照组的0.31±0.09(P＜0.01),治疗后ITP患者DC的TLR4 mRNA相对表达水平降为0.35±0.11(P＜0.01),与正常对照组相比无明显差别;未缓解组DC的TLR4 mRNA相对表达水平由治疗前的0.65±0.09降至治疗后的0.52±0.21(P＜0.01),但后者仍高于正常对照组(P＜0.01).结论 DC可能通过其Toll样受体及细胞因子的分泌在ITP发病中起重要作用.     

脓毒症患者辅助性T细胞17和CD4+CD25+调节性T细胞表达及血必净注射液的干预作用

目的 观察脓毒症患者外周血辅助性T细胞17(Th17)及CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的水平,并探讨其意义及血必净注射液的干预作用.方法 ①将64例重症监护病房(ICU)脓毒症患者按疾病严重程度分为脓毒症组(26例)、严重脓毒症组(21例)、脓毒性休克组(17例),同时选取18例健康体检者作为对照组.观察不同严重程度脓毒症患者外周血Th17和CD4+CD25+Treg的表达及其与病情严重程度的关系.②按随机原则将64例患者分为常规治疗组(25例,给予常规集束化治疗)和血必净治疗组(39例,在常规治疗基础上加用血必净注射液50 ml静脉滴注,每日2次),两组均以7 d为1个疗程.入ICU当日和治疗7 d用流式细胞术检测外周血Th17及CD4+CD25+Treg表达,观察血必净注射液的干预作用.结果 ①健康对照组Th17表达率为(0.84±0.29)%,CD4+CD25+Treg表达率为(0.43±0.20)%;脓毒症患者细胞表达均较健康对照组明显升高(均P<0.05),其中Th17表达以严重脓毒症组最高[(3.18±0.84)%],CD4+CD25+Treg 表达以脓毒性休克组最高[(3.28±0.76)%].脓毒症患者CD4+CD25+Treg与急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅰ(APACHE Ⅰ)评分和血乳酸均呈正相关(r1=0.519,r2=0.451,均P=0.01).②与常规治疗组比较,血必净注射液能更有效降低脓毒症患者Th17和CD4+CD25+Treg的异常表达[Th17:(1.72±0.69)%比(2.35±0.81)%,CD4+CD25+Treg:(1.78±1.00)%比(2.30±0.85)%,均P<0.05],纠正免疫平衡紊乱,缩短住ICU时间[(4.7±2.6)d比(7.5±4.3)d,P=0.0023,使脓毒症患者28 d病死率有降低趋势(20.5%比28.0%,P>0.05).结论 脓毒症患者外周血Th17和CD4+CD25+Treg表达增加,且与病情严重程度呈正相关,提示Th17和CD4+CD25+Treg在脓毒症发生发展的免疫机制中可能起着重要作用.血必净注射液能有效降低脓毒症患者Th17和CD4+CD25+Treg的异常表达,有降低脓毒症患者病死率的趋势.

Abstract：

Objective To study the level and significance of T helper 17(Th17)and CD4+CD25+regulatory T cells(Treg)in peripheral blood of patients with sepsis and to evaluate the effects of Xuebijing of Anhui Provincial Hospital were divided into three groups:sepsis group(n=26),severe sepsis group (n=21),and septic shock group(n=17).Eighteen healthy individuals served as controls.The comparison in the expression of Th17 and CD4+CD25+Treg within groups and the correlation between their levels and group(n=25,received routine bundle treatment)and Xuebijing treatment group(n=39,received bundle treatment+Xuebijing treatment).Patients in Xuebijing treated group were given 50 ml Xuebijing injection two times per day in addition to routine bundle treatment.Seven days constituted one course of treatment.The expressions of Th17 and CD4+CD25+Treg of 64 patients on the 1 day and 7 days after treatment were detected by flow cytometry.The effects of Xuebijing injection on the patients were evaluated.Results in control group,and they were lower than that of patients with sepsis(P<0.05).The expression rate of Th17 was higher in severe sepsis group [(3.18±0.84)%]than that of other two groups(P<0.05).Moreover,The expression rate of CD4+CD25+Treg was highest [(3.28±0.76)%]in septic shock group (P<0.05),and it was positive correlated with acute physiology and chronic health evaluation Ⅰ(APACHE routine group,our study indicated that Xuebijing injection could reduce the abnormal expression of Th17[(1.72±0.69)%vs.(2.35±0.81)%,P<0.05] and CD4+CD25+Treg[(1.78±1.00)% vs.(2.30±0.85)%,P<0.05] and decrease length of stay in ICU[(4.7±2.6)days vs.(7.5±4.3)days,P=0.002].It also lowered 28-day mortality of patients with sepsis,but the difference between two groups was not significant(20.5%vs.28.0%,P>0.05).Conclusion The expression of Th17 and CD4+CD25+Treg was increased in sepsis patients and was positively correlated with severity of sepsis,suggesting that they may play an important role in pathogenesis of sepsis.Xuebijing injection could decrease the abnormal expression of Th17 and CD4+CD25+Treg and tend to decrease the fatality rate of sepsis.     

High-intensity focused ultrasound for localized prostate cancer

High-intensity focused ultrasound (HIFU) is a noninvasive treatment that induces complete coagulative necrosis of a tumor at depth through the intact skin. We evaluated a biochemical disease-free rate, safety and morbidity for localized prostate cancer treated with HIFU. A total of 132 consecutive patients with stage T1c-2N0M0 localized prostate cancer underwent HIFU using Sonablate-500 (Focus Surgery, Indianapolis, USA). The 5-year biochemical disease-free rate in all patients was 67%. The 5-year biochemical disease-free rates for patients with a pretreatment PSA less than 10 ng/ml, 10.01 to 20.0 ng/ml, 20.01-30.0 ng/ml and more than 30.01 ng/ml were 88%, 67%, 34% and 13% (log rank test, p < 0.0001), respectively. HIFU therapy appears to be a safe, efficacious and minimally invasive therapy for patients with localized prostate cancer.